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生物大分子的分离与制备(共89张PPT)

生物大分子的分离与制备(共89张PPT)
2022/9/24
2022/9/24 7
生物分子的结构与功能分析:
1. 蛋白质结构分析
2. 酶活力检测
3. 蛋白质组学分析
4. DNA序列分析
5. 聚合酶链反应(PCR)6. 分子杂交
7. 基因克隆8. 基因组构建9. cDNA构建
10. 筛选11. 报告基因检测12. 基因芯片
13. 基因敲除
➢ 核酸是遗传信息的携带者,在生物体中指导各种蛋 白质的合成。
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生物化学分离方法与一般的化学分离方法相比,有下列
几个特点: • 生物材料组成非常复杂。其中包括数百种甚至数千种化
合物,并且在分离过程中,这些化合物仍在发生代谢 变化,如蛋白质和核酸的水解。
有些化合物的含量极微,如激素等。 许多具有生物活性的物质一旦离开活体,很易变 变性破坏,因此常选用比较温和的条件进行制备。
• 功能或分子生物化学阶段(1950 年至今)。研究生命的本质和奥秘: 运动、神经、内分泌、生长、发育、繁殖等的分子机理 。
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生物化学研究技术方法
❖ 生物化学研究的方法:
– 观察:生命现象
– 分离:未知蛋白组分,新基因片段,新的次生代谢物。 (抽提、过 滤、离心、色谱)
立了一系列研究核酸及蛋白质相互作用的技 确定要制备的生物大分子的目的和要求,是进行科研、开发还是要发现新的物质。
盐析的发生在于盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子之 间相互聚集并从溶液中析出。 其他化学性质:如对各种蛋白酶、水解酶的稳定性和对各种化学试剂的稳定性。
脂溶性的有机溶剂(丙酮,乙醚)中脱脂;采用快速加热 (50℃左右),快速冷却的方法,使溶化的油滴冷却后 凝聚成油块而被除去。

《生物大分子分离纯》PPT课件

《生物大分子分离纯》PPT课件

(2)物理法: 1) 反复冻融法:将待破碎的细胞冷至-15℃到-20℃,然后放于室温(或40℃) 迅速融化,如此反复冻融屡次,由于细胞内形成冰粒使剩余胞液的盐浓度增高 而引起细胞溶胀破碎。 2) 超声波处理法:此法是借助超声波的振动力破碎细胞壁和细胞器。破碎微生 物细菌和酵母菌时,时间要长一些。 3) 压榨法:这是一种温和的、彻底破碎细胞的方法。在1000×105Pa~ 2000×105Pa 的高压下使细胞悬液通过一个小孔突然释放至常压,细胞将彻 底破碎。 4) 冷热交替法:从细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可用此法。在90℃左右 维持数分钟,立即放入冰浴中使之冷却,如此反复屡次,绝大局部细胞可以被 破碎。
⑴ 水溶液提取:蛋白质和酶的提取一般以水 溶液为主。稀盐溶液和缓冲液对蛋白质的稳 定性好,溶解度大,是提取蛋白质和酶最常 用的溶剂。 ⑵ 有机溶剂提取:一些和脂类结合比较结实 或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶难溶 于水、稀盐、稀酸、或稀碱中,常用不同比 例的有机溶剂提取。
别离纯化
• 刚提取得到的大分子物质,往往是粗制品, 含有许多杂质,必须进一步别离纯化。别 离提纯各种生物大分子,主要根据各种物 质的分子大小、溶解度、带电性、亲和力 大小等差异,选用有机溶剂沉淀,等电点 沉淀,盐析,层析,电泳,超离心,吸附, 结晶等方法
《生物大分子分离纯》 PPT课件
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一、生物大分子的别离与纯化技 术
二、肝酶提取
• ⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境 时就极易失活,因此别离过程中如何防止其失活, 就是生物大分子提取制备最困难之处。

高三生物一轮复习:细胞中的生物大分子一ppt课件

高三生物一轮复习:细胞中的生物大分子一ppt课件

糖类、脂质的种类和作用 1.糖类的两大分类标准 (1)按化学性质分:
还原性糖:葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等。 非还原性糖:多糖、蔗糖。
(2)按功能分:
①参与构成细胞的 重要组成成分
纤维素:植物细胞壁的主要成分。 脱氧核糖:DNA的组成成分之一。 核糖:RNA的组成成分之一。
②细胞生命活动的主要能源物质:葡萄糖。
斐林试剂 双缩脲试剂 苏丹Ⅲ/Ⅳ染液 丙酮、层析液
作用 检测、鉴定淀粉 检测、鉴定还原性糖 检测、鉴定蛋白质 检测、鉴定脂肪 提取、分离色素
现象 淀粉遇碘变蓝
砖红色沉淀 紫色
橘黄色/红色 形成四条色素带
实验常用的试剂或指标物 Ca(OH)2溶液
作用 检测、鉴定CO2
现象
CO2使Ca(OH)2溶液 变浑浊
1.淀粉是植物体内的一种储能物质,构成淀粉的基本单位与下
列哪种物质的基本单位不同( )
A.纤维素
B.肝糖原
C.肌糖原
D.核糖
【解析】选D。淀粉的基本单位是葡萄糖;纤维素与糖原的基
本单位也是葡萄糖;而核糖是一种单糖。
2.(2012·海安模拟)纤维素和性激素的化学本质分别是( )
A.糖类和脂质
B.糖类和蛋白质
C.蛋白质和脂质
D.脂质和蛋白质
【解析】选A。纤维素是多糖属于糖类;性激素是固醇类物质属
于脂质。
3.下列叙述与选项中糖类对应正确的是( ) ①存在于DNA而不存在于RNA中的糖类 ②植物细胞主要的能源物质 ③存在于叶绿体而不存在于线粒体内的糖类 ④存在于植物细胞而不存在于肝脏细胞中的糖类 A.核糖、纤维素、葡萄糖、糖原 B.脱氧核糖、葡萄糖、葡萄糖、纤维素 C.核糖、葡萄糖、脱氧核糖、糖原 D.脱氧核糖、纤维素、葡萄糖、蔗糖

生物大分子结构与功能ppt课件

生物大分子结构与功能ppt课件
氨基酸部分 ➢ 多肽主链(main chain):由肽键连接各氨基酸残基形成的
长链骨架 ➢ 多肽侧链(side chain):蛋白质多肽链中的各氨基酸侧链基团
肽的书写格式
NH2-甘-丙-谷-……-组-蛋-COOH NH2-Gly-Ala-Glu-……His-MetCOOH NH2-GAE……HM-COOH GAE……HM
子量(MW)30,000-45,000 ➢ 一个含有100个氨基酸组成的蛋白质可存在20100
种不同的形式 ➢ E. coli约含有3,000种蛋白质,人体约含有100,000种
蛋白质的基本组成单位——氨基酸
➢编码氨基酸:20 种 , 除Gly外,均为L-氨基酸, Pro为 环状亚氨酸 ➢非编码氨基酸:胱氨酸、碘代酪氨酸、羟脯氨酸与 羟赖氨酸等
Trp
光 密 度
Tyr Phe
0 240 250 260 270 280 290 300 310 波 长 ( nm )
芳香族氨基酸的紫外吸收
化学性质
亚硝酸反应:测定产生的N2可计算氨基酸的含量, 为Van Slyke定 氮法的基础。
甲醛反应: 氨基酸与甲醛反应生成二羟甲基氨基酸, 为中和法测 定氨基酸含量的依据, 称甲醛滴定法, 两性氨基酸在与 甲醛反应后使氨基封闭而酸性增强, 可用强碱滴定。
➢ 寡肽(oligopeptide): 十个以下氨基酸缩合成的肽统称为寡肽
➢ 多肽链(polypeptide chain) : 十个以上氨基酸形成的肽,
典型的多肽MW<104 ➢ 蛋白质: 由一条或几条多肽链组成的生物大分子 ➢ 氨基酸残基(amino acid residues):蛋白质肽链中的每个
(2) R为羟基和硫: Ser、Thr含羟基,Ser有极性可形成氢键, 大多数酶的活性中心有

生物大分子的分离纯化技术(共34张PPT)

生物大分子的分离纯化技术(共34张PPT)
范围. 以1×10-13s 为一个单位,称为斯韦德贝格单位(Svedberg) ,用S(大写)表示.
离心(3)
最大速度方法:
移动界面(Moving Boundary)超 速离心法
移动区带(Moving Zone)超速离心法
等密度方法(Isodensity):
样品的类型、采集与保存 酶样品的准备
亲和色谱
琼脂糖的溴化氰活化法
6-氨基己酸-琼脂糖和,1,6-己二胺-琼脂糖
层析柱短 配基-与大分子间以氢键离子键或疏水相互作用结合
透析 微过滤 盐析 冷冻干燥 离心
透析
透析膜:
材料: 火棉胶(Collodion), 玻璃纸(Cellophane), 纤维素 (Cellulose)
纤维透析管的处理: 1%乙酸水溶液 1h, 碱性EDTA (1% Na2CO3, 1 mM EDTA) 煮1h, 纯水清洗,保存.
透析液:
离心(2)
(Relative centrifugal force):
F=mω2r;
Fcf=(1.119×10-5)(rpm)2r
F摩擦=fv
F净=(Mp-Ms)ω2r-fv
沉淀速度与离心力的比率(单位离心场中颗粒的沉降速度 ), 蛋白质\核酸\病毒等的沉降系数介于1×10-13到200×10-13秒的
紫外-可见吸收法 荧光检测法
电化学检测法
质谱法
高效毛细管电泳
电泳淌度 电渗流
淌度和迁移时间 分离效率 分离度
高效毛细管电泳分离模式
毛细管区带电泳
以1×10-13s 为一个单位,称为斯韦德贝格单位(Svedberg),用S(大写)表示.
(Capillary Zone Electrophoresis, CZE) 纤维透析管的处理: 1%乙酸水溶液 1h, 碱性EDTA (1% Na2CO3, 1 mM EDTA) 煮1h, 纯水清洗,保存.

细胞中的生物大分子——蛋白质ppt

细胞中的生物大分子——蛋白质ppt

n条肽 链
a
m
m-n
ma- 至少 m-n 18(m-n)
n个
至少 n个
蛋白质的功能
多种多样的蛋白质执行各种特定的生理功能
细胞膜
蛋白质的空间结构和多样性
蛋白质的空 间结构
由于组成蛋白 质多肽链的氨基酸 在种类、数目、排 列顺序上的不同, 以及构成蛋白质的 多肽链在数目和空 间结构上的不同, 因此,细胞中的蛋 白质具有多样性。
D]
COOH
思考:氨基酸与氨基酸之间是如何反应 的呢?
R1 H R2 H2N C C OH H N C COOH H H O H2O 肽键 脱水缩合
R1 H2N C C H O
H R2 N C COOH H 二肽
二肽 多肽 肽链 H2O H2O
例1:在一条由100个氨基酸分子形成的多肽链 中,应含有的肽键数目是----------[ C ] A.101 B.100 C.99 D.98 例2:血红蛋白含有四条多肽链,共由574个氨基 酸分子构成,那么,该分子中含有的肽键数 目应是--------------------------[ B ] A.574 B.570 C.578 D.573
(4)一条肽链中至少含有氨基和羧基的数目为 1、1 ;x条肽链组成的蛋白质分子中,至 • 少含有氨基和羧基的数目为 x、x 。
总结
AA 相对 分子 质量 1条肽 链
AA 个数
肽键 个数
脱去 水分 子个 数
多肽 相对 分子 质量
氨基 数目羧基 数目a Nhomakorabeam
m-1
ma- m-1 18(m-1) 至少
1个
至少 1个
蛋白质知识点小结
约20种 元素组成 C、 H、 O、 N 类 种 氨基酸 R I

02章生物大分子

02章生物大分子
核酸。
在生物体系中,除了蛋白质和核酸外, 碳水化合物、脂等生物大分子也含有可与 金属发生作用的含氧基团,但是,到目前 为止,有关它们与金属离子相互作用的了 解还很少。
第一节 蛋白质及其组成与结构 第二节 核酸与其他生物分子
第一节 蛋白质及其组成与结构
蛋白质是生命体系中最重要的一类生 物大分子,是生命活动的主要承载者以 及生命现象的主要物质基础。据统计, 到目前为止所发现的蛋白质中大约有三 分之一为金属蛋白。
第二章 生物大分子 的结构及性质
生物无机化学的主体部分由金属元素的 配位化合物所构成。在生命体系中,金属中 心常常被给电子的各种配体所“包围”。
生物体系中的配体可分为两类: 1、简单的无机小分子或阴离子,如H2O、
S2-、O2-、OH-、PO43-、Cl-、HCO3-等; 2、生物大分子,如蛋白质(或多肽)和
鸟嘌呤、腺嘌呤的N7位置电负性最低, 是金属离子结合的主要位点。
二、其他生物分子
1、三磷酸腺苷 三磷酸腺苷(ATP)是生物体内广泛
存在的辅酶,是体内组织细胞所需能量的 主要来源。蛋白质、脂肪、糖和核苷酸的 合成都需要ATP的参与。
三磷酸腺苷中磷脂基可以和一系列金 属离子,尤其是硬金属离子结合。具估计, 细胞内大约超过90%的ATP与Mg2+结合, Mg2+-ATP是许多酶的底物或辅因子。
酶的催化特性:
1、高效性; 2、高度专一性; 3、反应条件温和;
第二节 核酸与其他生物分子
一、核酸
核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核
糖核酸(RNA)两种。 磷酸
核酸 核苷酸
核苷
戊糖 碱基
脱氧核糖核酸(DNA)是染色体的主 要成分,真核生物的线粒体和叶绿体中也 含有DNA,原核生物的质粒全由DNA构成。 除了RNA病毒和噬菌体外,DNA是所有生 物的遗传物质基础。生物体的遗传信息都 储存在DNA分子中。

人教版高中化学《生物大分子》完整版PPT1

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题点(一) 糖的性质
1.(2021年1月新高考8省联考·江苏卷)葡萄糖的银镜反应实验如下:
步骤1:向试管中加入1 mL 2% AgNO3溶液,边振荡边滴加2%氨水,观察 到有白色沉淀产生并迅速转化为灰褐色。
步骤2:向试管中继续滴加2%氨水,观察到沉淀完全溶解。 ②图乙是我国自行研制的氢动力概念跑车.氢气作为最清洁燃料的原因是
解析:(1)制镜工业和热水瓶胆镀银都利用了葡萄糖中含有醛基,与银氨溶液反 应还原出单质银,所以反应为反应④。
△ 答案:(1)④ (2)CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2――→CH2OH(CHOH)4COOH +Cu2O↓+2H2O (3)C6H12O6+6O2―→6CO2+6H2O
[题点全盘查]
D.Cr2O72-可将葡萄糖氧化而不能共存,故D错误;
D.
工业炼铁、从海水中提取镁、制玻璃、水泥过程中都需要用到石灰石
(2) 淀 粉 和 纤 维 素 的 分 子 式 可 以 表 示 为 (C H O ) , 也 可 以 表 示 为 D.离子方程式不一定表示的是一类反应,如2CH3COOH+CaCO3═2CH3COO﹣+Ca2++H2O+CO2↑,该反应只表示醋酸和碳酸钙的反应,故D错误;
实验步骤
实验现象
试管壁上有 银镜出现
②与新制氢氧化铜溶液反应
实验步骤
实验现象
试管中出现 红色沉淀
③实验结论:
葡萄糖对银氨溶液、氢氧化铜等弱氧化剂表现出还原性,属于还原糖。
(5)应用 ①葡萄糖在食品和医药工业中有广泛应用。
②葡萄糖易于被人体吸收,经酶的催化发生氧化反应,放出热量,提供了维持生
命活动所需要的能量。反应形式表示如下: C6H12O6+6O2―― 酶→6CO2+6H2O。 葡萄糖

第二节 细胞中的生物大分子.ppt

第二节 细胞中的生物大分子.ppt

核糖核酸(RNA) 碱基:A、U、G、C。
分布:细 胞质中。
增强对食物的了解, 让我们做一个优秀的 营养师吧!
单糖是指不能水解的糖,即糖类的最小单位。
葡萄糖、果糖、半乳糖。 (C6H1206) 核糖、 脱氧核糖。 (C5H1005)(C5H1004) 五碳糖 六碳糖
单 糖
分子式(C12H22O11)
2、二糖
二糖是指水解后能生成两个单糖的糖。
二糖必须水解成单糖才能被生物体吸收。
二 糖
麦芽糖 蔗糖 乳糖

葡萄糖 + 葡萄糖 果 糖 + 葡萄糖 半乳糖 + 半乳糖

分子式(C6H10O5)n
3、多糖
多糖是指水解后能生成多个单糖的糖。
多糖必须水解成单糖才能被生物体吸收。
多 糖
淀 粉:植物细胞内。 纤维素:植物细胞壁的成分之一。 糖 元:分肝糖元和肌糖元。
4、糖类鉴定
还原性糖 + 斐林试剂

砖红色 沉淀
还原性糖:单糖、麦芽糖、乳糖;
非还原性糖:淀粉、蔗糖。
概念
学习目标: 概述糖类、蛋白质的种类和功能; 举例说出脂质的种类和功能; 简述核酸的结构和功能。
一、生物大分子的基本骨架
—O
播放
—H
C
C原子
—S
—N
碳链
你知道什么叫做营养均衡吗? 我们所吃的食物中含有哪些物质?
水稻、甘蔗主要含( 糖类 ),
大豆、油菜主要含( 脂质 ),
蛋、奶主要含( 蛋白质 )。
肥胖影响健康
2、类脂
磷脂是构成细胞 膜和多种细胞器 膜的重要成分。
存在于:人和动物 的脑、卵细胞、肝 脏以及大豆的种子 中。磷脂分子3固醇胆固醇固醇

【高中生物】生物大分子ppt

【高中生物】生物大分子ppt

(一)、生物小分子和生物大分子的关系
小分子 大分子 单体
多聚体
单糖 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 多 糖 氨基酸 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 蛋白 质 (由小分子到大分子 ) 核苷酸 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 核酸
第三节
生物大分子
一· 生物大分子的碳链骨架 二· 贮存遗传信息的大分子——核酸 三· 体现生命活动的大分子——蛋白质 四· 贮存能量的大分子———脂质 五· 提供能量的大分子——糖类
一、生物大分子以碳链为骨架
生物大分子: 指的是作为生物体内 主要活性成分的各种分子量达到上万 或更多的有机分子。
常见的生物大分子包括: 蛋白质、核酸、脂质、糖类。
另外12种氨基酸是人体细胞能够合成的, 叫做非必需氨基酸。
我们应该注意及时补充必需氨基酸!
H NH2 C
O
C OH NH2
H C
O
C OH
H
H NH2 C
甘氨酸
O
C OH NH2
CH
缬氨酸
CH3 CH3 H C CH3 O C OH
CH2 亮氨酸
CH CH3 CH3
丙氨酸
试一试,能不能推导出氨基酸的结构通 式?
H
H C
N
H
C R2
||
O
_ OH
缩合
H
N
H
C R3
COOH
2H2O+
以此类推,三个氨基酸分子缩合而成的化 合物叫做三肽;四个氨基酸分子缩合而成 的化合物叫做四肽……。由三个或者三个 以上的氨基酸分子缩合而成的含有多个肽 键的化合物通称为多肽。 氨基酸
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刮下结晶,蘸取少量接种到待结晶溶液,搅拌
(三)晶体的生长
晶体生长:在过饱和溶液中已有晶核形成或加 入晶种后,以过饱和度为推动力,晶核或晶种 将长大,这种现象称为晶体生长。
晶体生长速度也会影响晶体产品粒度大小。
晶核形成后立即开始生长成晶体,同时新的晶 核还在继续形成
晶核形成速度 > 晶体生长速度:细小晶体,甚至无定形 晶核形成速度 < 晶体生长速度:粗大而均匀晶体
溶液浓度
浓度高:结晶收率高 浓度过高:分子在溶液中析出
的速度太快,超过形成晶核的 速率,得不到晶体,只获得无 定形固体颗粒;杂质浓度增大, 易生成纯度差的粉末结晶。
样品纯度 纯度越高,越容易结晶
溶剂 溶剂不能和结晶物质发生化学反应
晶体形成
pH
等的一般方法
盐析法
主要用于大分子如蛋白质、酶、多肽等的结晶 原因:不耐热, 对pH变化及有机溶剂十分敏感 用中性盐作为沉淀剂, 操作安全简单
金属配合物法原理:
利用不同多糖能与金属离子形成配合物而沉淀下 来,使用多种配位剂沉淀多糖。
结晶 最先析出的微小颗粒是以后结晶的中心,称 为晶核。
只有达到一定的过饱和度时晶核才存在。
晶核形成并不是结晶的完成,还需要继续扩散 成长为晶体。
结晶
过饱和溶液的形成 晶核的形成 晶体的生长
(一)过饱和溶液的形成 结晶的首要条件是溶液的过饱和。
理论曲线
成 核 速 度
实际曲线
过饱和度
晶体生长速度和所需晶体大小
(2)温度
成 核 速 度
温度
温度
成核速度 过饱和度
温度与过饱和度 相互消长速度
(3)溶质种类
无机盐类: 阳离子或阴离子的化合价越低,越不容易成核 相同化合价下,含结晶水越多,越不容易成核
有机物质: 结构越复杂,相对分子质量越大,成核速度越慢
设计实验报告
*生物大分子分离
纯化及肝酶提取
*⑴ 乃至生几物千材种料化的合组物成。极其复杂,常常包含有数百种 *分离⑵纯许化多的生步物骤大繁分多子,在流生程物长材。料中的含量极微, * ⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境
时 就就 是生极物易大失分活子,提因取此制分备离最过困程难中之如处何。防止其失活,
制备如下:
脱脂→去杂→浓缩→再次去杂→脱色 →浓缩 →冷却 →结晶 (→进一步纯化)
*
多糖原料可从动植物器官、菌类及微生物发酵产物中得到。 一般多糖的分离纯化工艺: 一、分离提取方法 (extraction) (1)脱脂 由于多糖被脂质包围,通常用醇或醚回流脱脂。
(2)提取
①稀碱提取法:适合用此方法的多糖主要是不溶性胶类,用冷水浸 润0.5mol/L NaOH提取,提取液用酸中和后浓缩,再加乙醇沉淀 即得到多糖。甘露聚糖、半乳糖等利用此法可得到相当纯的物质。
制备
蒸发法 冷却法 化学反应结晶法 盐析结晶法 等电点法 复合法
(二)晶核的形成
晶核:过饱和溶液中最先析出的微小颗粒,是 以后结晶的中心。
成核速度:单位时间内在单位体积溶液中生成 的新晶核数目。是决定晶体产品粒度分布的首 要因素。
1.成核速度的影响因素:
溶液的过饱和度、温度、溶质种类
(1)过饱和度
*的 各种,⑷组温生成度物的、大综p分H合值子影、的响离制,子备很强几难度乎准等都确各是估种在计参溶和数液判对中断溶进。液行中
*
*
*前期准备
初级提取分离
生物材料的选择 及预处理
组织与细胞破碎
精细分离纯化
纯度鉴定
产物处理
糖类制品的分离及纯化 Isolation and depuration of sugar
盐析法原理:
利用不同多糖与金属离子成盐后在水溶液中的特 异性沉淀作用,用硫酸铵、乙酸钾、氯化钾等盐 析剂,将不同的多糖逐步析出。
季铵盐沉淀法原理:
长链季铵盐是碱性表面活性剂,酸性多糖在溶液 中以聚阴离子形式存在,它就与季铵盐或其碱形 成不溶性配合物沉淀,又由于多糖分子酸性越强、 相对分子质量越大越易沉淀出来,这样控制 季铵 盐浓度即可以分离出不同的酸性多糖。
影响晶体生长的因素: 杂质、搅拌、温度和过饱和度 ① 杂质:制止、促进、改变外形 ② 搅拌:促进扩散,加速晶体生长、晶核形成。 以试验为基础,确定适宜的搅拌速度 ③ 温度:升高有利于扩散,使结晶速度增快 ④ 过饱和度: 增高—使结晶速度增大 增高—引起黏度增加,结晶速度受阻
影响结晶析出的主要条件
2. 晶核的诱导 加晶种能诱导结晶 晶种可以是同种物质或相同晶形的物质,有时惰 性的无定形物质也可作为结晶的中心,如尘埃。
添加晶种诱导晶核形成的方法: (1)有现成晶体:取少量研碎,加溶剂,离心去 除大颗粒,稀释,悬浮液中有小晶核,倒入待结晶 溶液,搅拌,放置一段时间
(2)无现成晶体: ① 取1-2滴待结晶溶液置于表面玻璃皿上,缓慢 蒸发除去溶液,可得少量晶体 ② 取少量溶液置于试管中,旋转试管,使溶液 在管壁上形成薄膜,溶剂蒸发,冷却试管,管壁 上可形成一层结晶。
二、纯化方法( depuration) 由因于此提需取要液进还一含步有纯多化种。组其分方的法多有糖:混合物,
➢(1)沉淀法(常用乙醇沉淀法) ➢(2)盐析法 ➢(3)季铵盐沉淀法 ➢(4)纤维素柱层析法 ➢(5)离子交换层析法 ➢(6)金属配合物法
沉淀法原理:
由于不同相对分子质量的多糖在不同浓度的低级 醇或低级酮中溶解性不同,可以逐步提高溶液中 醇或酮的浓度以使不同组分的多糖依相对分子质 量由大到小的顺序沉淀,最终达到分离的目的。
纤维素柱沉淀法原理:
它利用的是不同多糖浓度乙醇中溶解性不同,先 用4倍V的乙醇将多糖混合液沉淀在惰性的多孔纤 维素柱上,再用不同浓度的乙醇洗脱,使不同多 糖分离开来。
离子交换层析法原理: 多糖分子带有电荷,可以 与离子交换剂中的
离子或基团结合,亲和力随多糖结构与电离性 的不同而不同,一般随分子中酸性基团的增加 而增强,然后用不同浓度的盐溶液进行洗脱。
②温水提取法:对于易溶于温水、难溶于冷水和乙醇的多糖采用这 种方法。材料需要先用冷水浸过,再用热水提取,必要时可加热 至80~90℃,搅拌提取,提取液用正丁醇与氯仿混合液除去杂蛋 白,离心除去杂蛋白的清液,透析后用乙醇沉淀即得到多糖。
*
除杂
Seveg法 三氟三氯乙烷法 三氯乙酸法 酶法 等电点沉淀法
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