实验八水中菌落综述的测定及常见微生物的观察(精)

2 稀释度的选择
（l）首先选择平均菌落数在30～300者进行计算，当只有一个稀
释度的平均菌落数符合此范围时，即可用它作为平均值乘其 稀释倍数。 （2）若有两个稀释度的平均菌落数都在30～300之间，则应按 两者的比值来决定。若其比值小于2，应报告两者的平均数； 若大于2则报告其中较小的菌落数。 （3）如果所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度 最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
实验八
水中菌落总数的测定
及常见微生物观察
一．目的要求 二．实验原理 三．实验材料 四．实验步骤 五．菌落计数 六．作 业
一、目的要求
掌握水样中细菌菌落总数的测定方法； 了解检测水样朱总细菌总数方法的原理及其应用中的优 缺点 了解水质与细菌菌落数之间的相关性以及水质评价的微
生物学卫生标准，明白其应用的重要性；
染的程度成下相关，因此细菌总数常作为评价水体污染程度
的一个重要指标。细菌总数越大，说明水体被污染得越严重。
三、实验试剂与器材
① 污水样品（2种样品） ② 牛肉膏蛋白胨培养基； ③ 无菌试管、无菌三角瓶、无菌玻 璃涂棒、无菌吸管、接种环、无 菌培养皿等； ④ 酒精灯、超净工作台、培养箱等。
四、实验步骤
1 采集水样：已经准备好2种污水水样。 2 细菌总数的测定：
（1）水样稀释：按无菌操作法，将水样作10倍系列稀释。
（2）选取10-1、10-2、10-3三个连续稀释度。稀释度的选择 是本试验精确度的关键，选择适宜者，平皿上菌落总数 介于30和300之间。 （3）吸取由高倍至低倍的稀释液，每个稀释液分别注入两
进一步巩固微生物倒平板、稀释涂布平板分离法和无菌
操作等技术和方法
二、实验原理
菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后
所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。细菌种类很多，
有各自的生理特性，必须用适合它们生长的培养基才能将它 们培养出来。然而，在实际工作中不易做到，所以通常用一 种适合大多数细菌生长的培养基培养腐生性细菌，以它的菌 落总数表明有机物污染程度。水中细菌总数与水体受有机污
五、菌落计数Biblioteka Baidu
1 平板菌落数的选择 （1）进行平皿菌落计数时，记下同一浓度的3个平板（或2个） 的菌落总数，计算平均值，再乘以稀释倍数即为1ml水样中 的细菌总数。 （2）计数时应选择菌落数在30~300/皿之间的稀释倍数进行计 数，若同—个稀释度中一个平皿有较大片状菌落生长时，则 不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿计数该稀释度的平 均菌落数。若片状菌落少于平皿的一半时，而另—半中菌落 分布又均匀，则可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。在记 下各平皿菌落数后，应算出同一稀释度的平均菌数，供下— 步计算时用。
六、作 业
1、测定水中细菌菌落总数有什么实际意义？ 2、根据我国饮用水水质标准，讨论你这次的检验结果。 3、本实验中哪些步骤属无菌操作？为什么？
（4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度
最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之
（5）如果全部稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则 以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 （6）菌落计数的报告，菌落在100以内时按实有数报告；大 于100时，采用二位有效数字；在二位有效数字后面的数 值，以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数,也可 用10的指数来表示，在所需报告的菌落数多至无法计算时， 应注明水样的稀释倍数。
个培养皿，每皿1mL。
（4）注入彻底融化，然后冷却到45℃的营养琼脂培养基， 立即旋摇培养皿，充分混匀。方法是握住平皿，先往一个 方向画圆，再朝相反方向回转；或一面画圆，一面适当倾
斜。小心勿使这个混合液体溅到培养皿的边缘。让平皿基
于水平位置放置至固化。 （5）接种水样的培养皿，倒置于37℃培养箱中培养48 h。