病毒感染诊断与防治立克次氏体和衣原体
病毒、支原体、衣原体、立克次体、细菌、真菌、原虫的联系和区别
病毒、支原体、衣原体、立克次体、细菌、真菌、原虫的联系和区别病毒(没有细胞结构,不能繁殖,只能在细胞中复制)支原体(原核细胞,无细胞壁,对青霉素等效用于细胞壁的抗生素不灵活,肺炎支原体和解脲脲原体)衣原体(有细胞壁,细胞内寄生,可经过议定除菌滤器,沙眼衣原体和肺炎衣原体,包涵体,抗生素有效)立克次体(立克次体的酶系统不美满,是以不能自力糊口生涯,必须在活细胞内寄生滋生)细菌(有细胞器的。
可以繁殖。
分裂增生是依靠自己的细胞结构以二分裂的方式进行无性繁殖)放线菌:真菌(真核细胞型微生物)螺旋体(原核细胞型微生物)原虫(单细胞原生动物、单细胞真核动物)蠕虫病毒和细菌的区别1、细菌:原核生物的一种,主要特点是没有核膜,其遗传物质分散在细胞质内一个相对固定的区域内,称为核区。
细菌的外边包裹着一层细胞壁,一般为多糖聚合而成。
细菌是单细胞生物他是有细胞器的分裂增生是依靠自己的细胞结构抗生素通常是毁坏细菌的细胞结构来杀死细菌的2、病毒:无完整细胞结构,含单一核酸(DNA或RNA)型;构造很简单,外面是一层蛋白质,称为病毒外壳。
蛋白质外壳内部包裹着病毒的遗传物质,可以是DNA,也可以是RNA。
病毒自己不能完成新陈代谢,也不能完成繁殖,需要寄生在其它细胞内完成。
病毒寄生在活细胞中,掠夺别人的营养生存,危害大,如爱滋病毒,生存在人体免疫细胞,破坏人体自身保护。
而病毒没有细胞结构,所以很难被抗生素杀死。
小结:细菌是单细胞生物,病毒不具有完整的细胞结构!细菌可以繁殖,而病毒不能繁殖,只能通过细胞复制抗生素主要作用于细菌的细胞壁,脂多糖等,病毒没有这些结构的。
只能杀灭细菌。
比方说青霉素,能破坏细菌细胞壁上的多糖,使细菌的表面暴露,失去了应有的保护作用,细菌也就不能生存了。
病毒外部是蛋白质,抗生素对它们是没有作用的。
干扰素可以干扰病毒DNA或RNA的复制,使病毒的数量不再增加,然后依靠人体自身的免疫系统清除剩下的病毒。
细菌和真菌、病毒的区别细菌:是属于原核型细胞的一种单胞生物,形体微小,结构简单,无成形细胞核、也无核仁和核膜,除核蛋白体外无其他细胞器;广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹,只存在称作拟核区(nuclear region)(或拟核)的裸露DNA的原始单细胞生物,细菌是微小的单细胞植物,在高倍显微镜或电子显微镜下才能够观察清楚。
螺旋体、支原体、立克次体、衣原体
第十章螺旋体螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运动的原核单细胞微生物。
基本结构与细菌类似,有细胞壁、核质,以二分裂繁殖,广义上属于细菌。
革兰氏阴性,但大多数不易着色。
多数需厌氧培养,营养要求较高,有些不能用人工培养基培养。
有些可通过细菌滤器或滤膜。
疏螺旋体属、密螺旋体属、蛇形螺旋体属、钩端螺旋体属微生物学检查:1.直接镜检:以病猪的清新粪便粘液,或病变结肠粘膜刮取物制成薄涂片,染色镜检多用姬姆萨氏法染色法。
也可用印度墨汁作负染或镀银染色法染色镜检。
相差或暗视野显微镜活体检查,若每个高倍视野中见有2-3个或更多个蛇样运动的较大螺旋体即可确诊。
2)分离培养过滤培养法:将样品作5-10倍稀释,轻度离心,上清用0.8μm和0.45μm滤膜依次过滤。
取滤液直接涂布接种于鲜血琼脂平板上,厌氧培养37-38℃培养3-6d,每隔2d检查1次,当看见到平板上浮上β溶血现象时,即可挑取可疑菌落,作成悬滴或压滴标本,用暗视野显微镜检查。
6. 微生物学检查直接镜检标本离心集菌后做暗视野检查或用Fontana镀银法染色镜检分离与鉴定接种至Korthof 培养基,置28℃孵育。
阳性标本在2周内可见培养液呈轻度混浊→暗视野显微镜检查→有→则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。
阴性标本:分离培养应延续看见4个月,仍无生长者。
动物接种是分离钩体的敏感主意。
尤其相宜检查有杂菌污染的标本。
常用幼龄豚鼠和地鼠。
分子生物学主意核酸探针或PCR技术血清学诊断血清学诊断病初和发病后第3~4周各采血清一次。
有脑膜刺激,症状者采取脑脊液显微镜凝集实验补体结合实验间接凝集实验疫水检查第十一章支原体/霉形体霉形体(Mycoplasma)霉形体又译作支原体,是一类无细胞壁的细菌,是目前已知能在无生命的培养基中繁殖的最小微生物。
概述是一类无细胞壁的原核单细胞微生物;多形性,能通过细菌滤器,是目前所知的能够在无生命人工培养基中生长繁殖的最小微生物。
四体
四体螺旋体spirochaetes 枝原体mycoplasma 立克次氏体rickettsia 衣原体chlamydia螺旋体定义:一类形体细长,单细胞,螺旋状,原核细胞型微生物广泛存在于自然界中,是运动活泼的原核型微生物,位于细菌和原虫之间,以而分体的形式繁殖,对抗生素敏感致病性螺旋体:1.钩端螺旋体属:多个细密规则螺纹----钩体病2.密螺旋体属:8~14个细密规则螺纹---梅毒和雅司病3.包柔螺旋体属:5~10个稀疏不规则螺纹---回归热和莱姆病钩端螺旋体和苍白密螺旋体的比较钩端螺旋体病(钩体病)是人畜共患病1.鼠类和家猪是传染源,多成带菌状态(消灭传染源)2.动物尿液污染水源和土壤(切断传播途径)3.人接触疫水和疫土,钩体经皮肤或者粘膜进入人体致病(对易感人群接种死疫苗)4.流感伤寒型,黄疸出血型,肺出血型(青霉素治疗病人)5.对同型钩体有较持久的免疫力Treponema pallidum1. 引起梅毒syphilis(STD之一)2. 人是惟一传染源,在人与人之间有效传播水平传播(性接触、血液),垂直传播(母婴传播)3. 感染后不治疗可在人体内长期存在,但不马上致死4. 表现为传染性免疫5. 疫苗研制困难,无法用疫苗预防6. 足量青霉素治疗,没有耐药性问题先天性梅毒可致流产,早产、死胎和先天畸形(锯齿形牙、兼执行角膜炎,神经性耳聋,马鞍鼻等)后天梅毒:一期硬下疳(无痛性硬结及溃疡)感染后~3周二期梅毒疹:硬下疳愈合后~3个月→早期梅毒传染性强,破坏性小三期树胶肿,内脏梅毒,梅毒疹消退后~3年→晚期梅毒传染性弱,破坏性大梅毒螺旋体微生物学检查方法:1.直接镜检2.血清学实验:非特异性试验—梅毒血清反应素试验(VDRL,USR&RPR法)特异性试验:梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)3.PCR检测病原体基因→快速血浆反应素试验(RPR test)初筛梅毒梅毒螺旋体的脂类抗原,破损的细胞释放的脂类和牛心肌的心脂质抗原有类似抗原后者+梅毒病人血清(反应素reagin)→非特异性凝集反应---梅毒的辅助诊断要注意假阳性的问题!!!防治原则---尚无疫苗!!1.加强卫生宣传和社会管理2.避免性接触感染3.病人早诊断&彻底治疗4治疗.多用青霉素&剂量足枝原体mycoplasma概念:是一类无细胞壁,形态呈多样性,可通过除菌滤器,能在无生命的培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物生物学特点:1.无细胞壁,呈多形性, 可通过除菌滤器。
支原体、衣原体、立克次体、螺旋体
支原体
概 述:
支原体( mycoplasma )是一类无细胞壁的原核 细胞型微生物,呈多形性,可通过除菌滤器,能 在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型 微生物。
分类:
1.无胆甾原体科 2.螺原体科 3.支原体科:
与人类感染有关的是 支原体属 脲原体属
生物学性状:
1. 形态染色: G-,Giemsa淡紫色; 无细胞壁,多形性(球 形、 短杆形、分枝丝状),0.2~0.3μm
蚤粪中立克次体 破损皮肤 口、鼻 眼结膜 体内
3.恙虫病立克次体:
⑴.传染源: 带病原体的野鼠和家鼠; ⑵.传播媒介:恙螨; ⑶.所致疾病:恙虫病 带菌鼠
恙螨幼虫 人体 叮咬
局部红色丘疹
全身淋巴结肿大, 肺、肝、脾、脑等 损害
水疱,中央溃疡 形成黑色焦痂
4.贝纳柯克斯体(Q热柯克斯体):
概述
对人类致病的立克次体包括:
立克次体属 斑疹伤寒群 斑点热群 柯克斯体属 东方体属 恙虫病 埃立克体属 巴通体属
生物学性状:
1.形态与染色:呈多形性,主要为球杆状 革兰染色:G-,但不易着色 Giemsa染色:紫/蓝色
立克次体在感染的细胞内密集成团块状分布: 普氏立克次体:胞浆内分散存在; 恙虫病立克次体:胞浆内近核附近成堆排列; 斑点热立克次体:胞浆内,核内生长; 贝纳柯克斯体:胞浆空泡(吞噬溶酶体)内繁殖; 五日热巴通体:粘附于细胞外表面生长繁殖;
钩端螺旋体
生物学性状: 1.形态染色: 6~12μm 暗视野显微镜下: (活钩体)运动活 泼,使菌体呈C、 S、8字型; 镀银染色法: 棕褐色
2.培养:
为唯一能人工培养的致病性螺旋体
Korthof培养基,28℃,5-7d 半透明云雾状生长(液面1cm 的部位最丰富)
支原体、衣原体、立克次体、放线菌
Located at cytoplasma or nucleus
2、含有两种核酸(DNA和RNA),酶系统不 完善且缺乏细胞器,须在活细胞内生长,以 二分裂法生长繁殖。
3、外膜抗原与变形杆菌的OX19、OXk、OX2有 共同抗原决定簇,可作外斐反应(Well-Felix reaction) 定量检测其抗体,效价≥1:160有意义,群特异。 种特异性抗原为蛋白质。
其他支原体
1. 溶脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体: 菌落微小,称T 株。引起非淋球菌性尿道炎(NGU) 和不孕症),为性传播疾病(STD)的病原体。 2. 穿透支原体: 为条件致病菌,多与HIV感染有关,可促进HIV的复 制。形态为杆或烧瓶状,可在RBC、CD4T细胞等细 胞内繁殖。
衣原体
(chlamydia) p. 169 衣原体是一类能通过细菌滤器、有独特发育周 期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。有 以下特点: 1、比病毒大( 0.2-0.4 m ),LM下可见;
4、培养主要用6-8日龄鸡胚或鸭胚卵黄囊接种; McCoy、HeLa-299等细胞培养。
5、衣原体能产生内毒素破坏细胞,抗原致敏也可 引起超敏反应。
6、对人类致病的主要有沙眼衣原体(沙眼生物亚 种、性病淋巴肉芽肿亚种和鼠亚种)和肺炎衣 原体,部分沙眼衣原体为性传播疾病的病原体。
沙眼衣原体(Chlamydiae trachomatis)
三、微生物学检查 1. 查找硫磺颗粒 2. 培养:血平板或沙保培养基
四、防治原则 注意口腔卫生,治疗牙病及牙周病。 抗生素首选青霉素,也可用SMZ、红霉素等。
诺卡菌属 Nocardia 1、属外源性感染:多经呼吸道或外伤引起 2、常见菌:星形诺卡菌(N. asteriodes)
支原体、衣原体、立克次体、螺旋体
支原体的基因组是环状的DNA 分子,大小通常在500kb到 700kb之间。
支原体的分类
01
支原体可以分为两种类型:解脲 支原体(Ureaplasma urealyticum)和人型支原体( Mycoplasma hominis)。
02
解脲支原体主要引起人类泌尿生 殖系统感染,而人型支原体则主 要引起人类呼吸系统和消化系统 感染。
立克次体的感染治疗方法主要包括使用抗生素,如四环素类药物、大环 内酯类药物等,但必须在Байду номын сангаас生指导下使用。对于严重病例,可能需要住
院治疗。
预防立克次体的感染主要通过避免接触感染源、注意个人卫生和环境卫 生等方式。
04 螺旋体
螺旋体的定义
螺旋体是一种细长、柔软、有动 力的微生物,具有多个旋转的细 胞壁结构。它们通常呈螺旋状,
支原体的感染症状及治疗方法
支原体感染的症状可以因人而异,但通常包括尿道疼痛、尿频尿急尿不尽、尿道 口分泌物增多等。
对于支原体感染的治疗,通常使用抗生素,如大环内酯类抗生素、四环素类抗生 素等。但需要注意的是,对于孕妇和儿童来说,有些抗生素是不适用的,需要在 医生的指导下进行治疗。
02 衣原体
衣原体的定义
立克次体的分类
立克次体可分为两个属:立克次体属和柯克斯体属。
立克次体属包括多种病原体,如普氏立克次体、莫氏立克次体和贝纳柯克斯体等, 它们分别引起流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒和恙虫病等。
柯克斯体属包括柯克斯体和查菲柯克斯体等,它们主要引起人或其他动物的恙虫病 。
立克次体的感染症状及治疗方法
立克次体的感染症状因病原体不同而异,但通常包括发热、头痛、皮疹 、淋巴结肿大等。
螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体知识点整理
螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体知识点一、螺旋体1.概念1)⼀类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、利用细胞壁和细胞膜间的轴丝运动活泼的原核细胞型微⼀物2)基本结构与细菌相似,有细胞壁、原始核质,以二分裂方式繁殖;对抗生素等药物敏感2.螺旋体的科和属3.钩端螺旋体1)钩端螺旋体属⼀属钩端螺旋体科,简称钩体。
2)常⼀的有问号钩端螺旋体、双曲钩端螺旋体、亚历⼀⼀钩端螺旋体及其他13个新种。
3)代表菌种为问号钩端螺旋体4)形态结构a)螺旋盘绕细致⼀规则,形似细⼀珍珠排列的细链。
⼀端或两端呈钩状。
b)电镜下钩端螺旋体为圆柱状结构,由外向内依次为鞘膜、胞壁和浆膜。
鞘膜由脂多糖和蛋⼀质组成。
胞壁与浆膜之间有⼀根由两条轴丝扭成的中轴,位于菌体⼀侧。
钩端螺旋体是以整个圆柱形菌体缠绕中轴而成c)运动活泼,常呈C、S或8字型d)Fontana镀银染色法背景为淡棕色,钩端螺旋体染成棕褐色e)其胞壁成分与革兰阴性杆菌相似,革兰染色为阴性5)培养&抵抗力a)营养要求复杂,常用Korthof培养基b)适宜生长温度28~30°Cc)人工培养基生长缓慢,液体培养基中呈半透明云雾状生长。
d)水或湿土中可存活数周至数月。
e)对干燥、热、日光直射的抵抗力较弱,56 °C10min或60°C1min死亡6)抗原a)与分型有关的抗原存在于螺旋体表⼀的表⼀抗原(P抗原),为蛋⼀质多糖的复合物,具有型特异性,是钩端螺旋体分型的依据。
b)存在于螺旋体内部的内部抗原(S抗原),是类脂多糖复合物,具有属特异性,为钩端螺旋体分群的依据7)致病性a)致病物质●类似细菌内毒素与外毒素、内毒素样物质(ELS)或脂多糖样物质(LLS)●溶血素细胞毒性因子(CTF)●细胞致病作用(CPE)物质b)疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力,细胞免疫为主c)人兽共患:传播途径经破损⼀肤或粘膜进⼀d)进⼀⼀液⼀量繁殖,引起钩体败⼀症,随后钩体侵⼀肝、脾、肾、肺、⼀、淋巴结和中枢神经系统等组织器官,引起相关脏器和组织的损害和体征e)临床上常⼀流感伤寒型、⼀疸出⼀型、肺出⼀型。
立克次体和衣原体
内毒素,磷脂酶 内毒素 磷脂酶A 磷脂酶
3.致病过程 致病过程
体虱, 体虱 蚤叮咬 立克次体 鼠蚤叮咬 恙螨叮咬等 人体 局部淋巴结 小血管内皮细胞 生长繁殖 血 临 皮 床 症 状 血管 大量 繁殖 全身小血管内 血 皮细胞
4.与节肢动物关系密切,或为寄生宿主,或为 与节肢动物关系密切,或为寄生宿主, 与节肢动物关系密切 储存宿主, 储存宿主,或同时为传播媒介 5.大多为人兽共患病的病原体 大多为人兽共患病的病原体 6.对多种抗生素敏感 对多种抗生素敏感
二.致病性与免疫性
1.致病物质 致病物质 2.致病机制 致病机制
分离培养: 分离培养 动物腹腔接种
血清学实验
外斐反应
用普通变形杆菌的菌体抗原代替立克次体抗原检测患者 血清中有无立克次体抗体的凝集试验, 用以诊断立克次体感染 血清中有无立克次体抗体的凝集试验 主要立克次体与变形杆菌抗原交叉现象 立克次体 OX19
普氏立克次体 斑疹伤寒立克次体 恙虫病立克次体 Q热柯克斯体 热柯克斯体 五日热巴通体 +++ +++ ----
立克次体
Rickettsia
概念: 立克次体是一类严格细胞内寄生的 立克次体是一类严格细胞内寄生 细胞内寄生的
原核细胞型微生物 原核细胞型微生物. 微生物.
分类:
对人致病的有五个属 可分为二个亚群(根据16S rRNA 可分为二个亚群(根据16S 16
序列分析) 序列分析)
一.共同特点
1.专性细胞内寄生 以二分裂方式繁殖 专性细胞内寄生, 专性细胞内寄生 2.属原核细胞性微生物 含DNA 和RNA两类核 属原核细胞性微生物,含 属原核细胞性微生物 两类核 酸 3.多形态 主要为球杆状 ,革兰染色阴性 多形态, 革兰染色阴性(Giemsa 多形态 革兰染色阴性 染色呈蓝紫色), 大小介于细菌与病毒之间(光镜 染色呈蓝紫色 大小介于细菌与病毒之间 光镜 下可见) 下可见
支原体、衣原体、立克次体、螺旋体
螺旋体1、形体细长,单细胞,螺旋运动活泼的原核细胞型微生物,大小介于细菌核原虫之间,以而分裂方式繁殖,对抗生素敏感。
【致病性螺旋体:钩端螺旋体属,(钩体病)】【密螺旋体属:8~14个细密规则的螺纹,梅毒和雅司病】【包柔螺旋体属:5~10个不规则螺纹:回归热和莱姆病】2、钩端螺旋体和苍白密螺旋体的对比:3、钩体病:是人畜共患病。
鼠类和家猪是传染源,多呈带菌状态(消灭传染源)→动物尿液污染水源和土壤(切断传播途径)→人接触疫水和疫土,钩体经皮肤或者粘膜钻入人体致病(对易感人群接种死疫苗→流感伤寒型、黄疸出血型、肺出血型(青霉素治疗病人)→对同型钩体有较持久的免疫力。
4、梅毒密螺旋体(treponema pallidum):◆引起梅毒(是人类性传播疾病(STD)之一,危害较严重)◆人是唯一的传染源,在人与人之间有效传播,水平传播(性接触、血液)、垂直传播(母婴传播)◆感染后不治疗可在人体内长期存在,不致死。
◆表现为传染性免疫。
◆无疫苗预防◆足量青霉素治疗,无耐药性问题。
◆【先天梅毒可致流产、死胎、先天畸形如锯齿形牙、神经性耳聋等。
】◆【后天梅毒:一期(硬下疳,无痛性硬节及溃疡)→二期梅毒疹(硬下疳愈后~3个月)→三期(树胶肿、内脏梅毒,梅毒疹消退后~三年)◆早期梅毒传染性大,危害性小,晚期梅毒危害性大,传染性小。
5、梅毒螺旋体镜检方法:◆直接镜检◆血清学试验:非特异性试验——梅毒血清反应素试验;特异性试验:梅毒螺旋体血凝试验,荧光密螺旋体抗体吸收试验;PCR检测病原体基因。
◆快速血浆反应素试验【RPR test】初筛梅毒:牛心肌的心脂质抗原(梅毒螺旋体的脂类抗原{由破损细胞释放出来的脂类},它们有类似的抗原)+梅毒病人血清→非特异性凝集反应【梅毒的辅助诊断,但要注意假阳性的问题】6、防治原则:避免经性接触而感染,治疗多用青霉素且剂量要足。
目前尚无疫苗。
支原体(mycoplasma)1、支原体是一类无细胞壁、形态呈多样性、可通过除菌滤器、能在无生命的培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。
支原体、衣原体、立克次氏体、细菌、病毒比较
生殖为二分分裂式繁殖。在寄主细胞内寄生或互惠共 生。人类感染的一些立克氏体病害,通常通过昆虫叮刺传染, 致病性很强,斑疹热病和洛矶山斑疹伤害是两种主要的立克 次体病害。大多数立克次体适存在于某些动物体内,特别是 啮齿动物,并在节肢动物如虱蚤、蜱和螨的体内生长并繁殖, 但对这些宿主通常不致病,并且可能借卵传递给后代。
支原体广泛分布在土壤、污水、昆虫、脊椎动物及人 体中,除可引起胸膜肺炎病外,尚可引起猪喘气病、鸡呼 吸首慢性病,现已发现人、畜、禽、植物的支原体多种, 大多数为致病性,少数为腐生性。
二、 立克次氏体(Rickettsia)
Ricketts于1909年研究落基山斑疹热首先发现这个病害 的病原菌。次年他不幸感染斑疹伤寒(typhus fever)而丧 命。为纪念他,把这类病原体命名为立克次氏体,把与其 相关的微生物归纳在立克次氏体内。
光显勉强 可见
光学显微镜
光显勉强可 见
电镜
能过滤 阴性 缺
不能过滤 能过滤
能过滤
阴性 与细菌相似
阴性
与细菌相似
无细胞结 构
特征 细菌 支原体 立克次体 衣原体 病毒
繁殖方式 二均分裂 二均分裂 二均分裂 二均分裂 复制
培养方式 人工培养基 人工培养基 宿主细胞 宿主细胞 宿主细胞
核酸种类 RNA和DNA RNA和DNA RNA和DNA RNA和 DNA RNA或DNA
应用微生物与免疫学
支原体、衣原体、立克次氏体
细菌、支原体、立克次体、衣原体、病毒的比较
支原体、立克次氏体和衣原体
2)个体很小,能通过细菌过滤器,曾被认为是最小
的可独立生活的细胞型生物。
球状体: 3)可进行人工培养,但营养要求苛刻,菌落微小, 0.2-0.25 mm,最小达0.1 mm;丝状体最长可达 150 呈典型的 mm,因细胞柔软且具扭曲性,致使细胞能通过孔 “油煎荷包蛋”形状; 径比自身小得多的过滤器。
0.5-0.2 光学显微镜 不能过滤 阳性或阴性
<0.25 电子显微镜 能过滤 无
支原体、立克次氏体、衣原体与细菌、病毒的比较 有坚韧的细胞壁 缺 与细菌相似 与细菌相似 无细胞结构
二均分裂 人工培养基 DNA 和 RNA 有 有 有 保持 二均分裂 人工培养基 DNA 和 RNA 有 有 有 保持 二均分裂 宿主细胞 DNA 和 RNA 有 进行 有 保持 二均分裂 宿主细胞 DNA 和 RNA 有 进行 无 保持 复制 宿主细胞 DNA 或 RNA 无 只利用宿主机器 无 失去
质,但也决定了它们一旦离开宿主细胞则易死亡
大小介于病毒与一般细菌之间,其中伯氏立克次氏体
(Rickettsia burneti)能通过细菌过滤器
一般个体:球状体:0.2-0.5 mm; 杆状体:0.3-0.5 x 0.3-2 mm;
(2)从一种宿主传物
(虱、蜱、螨等)
类立克次氏体细菌(RLB):侵染植物的立克次氏体
H.T.Ricketts 1909年,
首次发现洛杉矶斑疹伤
寒的病原体,并因研究
此病而牺牲,1916年人
们以他的名字命名这类
病原体作为纪念。
2. 特 性
(1)某些性质与病毒相近
专性活细胞寄生物,除五日热(战壕热)立克 次氏体(Rickettsia wolhynica)外均不能在人工培养 基上生长繁殖。 体内酶系不完全,一些必需的养料需从宿主细胞获得; 细胞膜比一般细菌的膜疏松; 可透性膜,使它们有可能容易从宿主细胞获得大分子物
微生物致病菌有哪些?如何检测
微生物致病菌有哪些?如何检测微生物致病菌是引起人类和动物疾病的微生物。
它们可以通过不同的途径传播并引发感染,从而对人类和动物的健康造成威胁。
为了及时发现和控制微生物致病菌的传播,科学家们开发了各种检测方法来确定其存在。
这些方法包括培养法、分子生物学技术、显微镜观察和血液检测等。
通过这些检测方法,我们能够更好地了解微生物致病菌的类型和数量,从而采取相应的预防和治疗措施,保护人类和动物的健康。
下面将详细介绍微生物致病菌的类型以及常用的检测方法。
一、微生物致病菌都有哪些(一)细菌:细菌是一类微小的单细胞生物,它们是微生物中最常见的致病菌之一。
许多细菌可以引起人类和动物的感染和疾病。
常见的细菌致病菌包括大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌等。
这些细菌通过不同的途径传播,如食物、水、空气、接触等。
它们可以引起各种感染,包括呼吸道感染、尿路感染、皮肤感染、食物中毒等。
(二)病毒:病毒是一类非细胞的微生物,它们依赖于寄生在其他细胞内进行复制和感染。
病毒可以感染人类、动物和植物,引起各种疾病。
常见的病毒致病菌包括流感病毒、乙肝病毒、艾滋病毒、登革热病毒等。
这些病毒通过空气飞沫、血液、性接触等途径传播。
它们可以引起呼吸道感染、肝炎、免疫系统损伤、出血热等。
(三)真菌:真菌是一类生物体,它们属于真核生物,与细菌和病毒有所不同。
真菌可以包括单细胞的酵母菌和多细胞的霉菌。
虽然大部分真菌是无害的,但某些真菌可以成为致病菌并引起感染。
常见的真菌致病菌包括白色念珠菌、曲霉菌、皮肤癣菌等。
这些真菌可以通过接触受感染的物体或者吸入感染源而传播。
真菌感染通常发生在免疫系统较弱的人群中,例如长期使用抗生素、免疫系统功能低下的人,或者局部皮肤受损的情况下。
(四)放线菌:放线菌是一类革兰氏阳性细菌,它们具有特殊的形态和生物学特征。
放线菌通常在土壤和水体中存在,并且在许多环境中都可以被发现。
尽管大多数放线菌对人类无害,但某些放线菌可以产生有毒物质并引起感染。
支原体,衣原体,立克次体
支原体、立克次氏体、衣原体它们同属于G—、代谢能力差,主要营细胞内寄生的小型原核生物。
三者寄生性逐渐增强。
它们是介于细菌和病毒之间的一类原核生物。
1.支原体是一类无细胞壁、介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小型原核生物。
许多种类是人和动物致病菌,如牛胸膜肺炎症等。
植物支原体称为“类支原体”或“植原体”。
特点是①很小,直径150~300nm,光镜下勉强能看到。
②细胞膜含甾醇比其他原核生物膜更坚韧。
③因无细胞壁,呈G—,形态易变,对渗透压敏感,对抑制细胞壁合成的青霉素不敏感。
④菌落小,直径0.1~1.0mm,在固体培养基表面呈“油煎蛋”形。
⑤以二分裂和出芽等方式繁殖。
⑥能在含血清、酵母膏和甾醇等营养丰富的基质上生长。
⑦多数以糖做能源,能在有氧或无氧下产能代谢。
⑧对抑制蛋白质合成的抗生素(如四环素、红霉素等)和破坏含甾醇的细胞膜结构的抗生素(如两性霉素、制霉菌素等)很敏感。
2.立克次氏体1909年美国医生H.T.Ricketts(1871~1910)首次发现落基山斑疹伤寒的独特病原体并被夺去生命,故名。
立克次氏体是一类专性寄生于真核细胞内的G—原核生物。
它与支原体区别在于有细胞壁、不能独立生活,与衣原体区别在于细胞较大、无滤过性和存在不完整产能代谢系统。
是人类斑疹伤寒、恙虫热和Q热等严重传染病的病原体。
3.衣原体是一类在真核细胞内营专性能量寄生的小型G—原核生物。
曾长期被误为是“大型病毒”。
直至1956年我国著名微生物学家汤飞凡等从沙眼中首次分离到病原体后才证实它是一种独特的原核生物。
特点是:①有细胞构造。
②细胞内同时含有RNA和DNA两种核酸。
③有细胞壁,但缺肽聚糖。
④有核糖体。
⑤缺乏产生能量酶系,有“能量寄生物”之称。
⑥以二分裂方式繁殖。
⑦对抑制细菌的抗生素和药物敏感。
⑧只能用鸡胚卵黄囊膜、小白鼠腹腔等活体培养。
具感染力的细胞称为原体,呈小球状,直径小于0.4μm,细胞厚壁。
致密,不运动,不生长,抗干旱,有传染性。
2.11立克次氏体、衣原体、支原体
立克次氏体衣原体支原体H.T.Ricketts1909年,首次发现洛杉矶斑疹伤寒的病原体,并因研究此病而牺牲,1916年人们以他的名字命名这类病原体作为纪念。
立克次氏体是大小介于病毒与一般细菌之间,在许多方面类似普通细菌,是专性活细胞内寄生物。
伯杰氏系统细菌学手册(第二版)把立克次氏体归为α-变形杆菌纲。
1)细胞形态为球状、杆状、丝状,革兰氏阴性菌,没有鞭毛,不能运动;2)细胞大小介于病毒和普通细菌之间,一般不能通过细菌过滤器;一般个体球状体:0.2-0.5 μm;杆状体:0.3-0.5 x 0.3-2 μm;3)是脊椎动物,一般是哺乳动物的活细胞专性寄生物,不能在人工培养基上生长,引起人和动物的各种疾病,如斑疹伤寒,战壕热和Q热病;4)具有转主寄生的特点,其原始宿主为吸血节肢动物,如虱、蜱、螨等;主要以节肢动物(虱、蜱、螨等)为媒介,寄生在它们的消化道表皮细胞中,然后通过节肢动物叮咬和排泄物传播给人和其他动物。
是一种能通过细菌过滤器、G-、不运动,一般为球状,仅能在脊椎动物细胞质内繁殖并致病、具特殊生长周期的原核微生物。
其特点:1.衣原体在形态、构造、大小、染色等方面都与立克次氏体相似,寄生于脊椎动物的细胞内,离开寄主细胞就不能繁殖。
2.不经过节肢动物,而是在脊椎动物间直接传染,引起疾病。
如沙眼衣原体、淋病肉芽肿衣原体等;在动物体内还可引起肺炎、多发性关节炎、胎盘炎、肠炎等疾病。
二、衣原体(Chlamydia)3.在宿主细胞内生长繁殖具有独特的生活周期,即由细小、细胞壁坚韧的具传染性的原体,变成较大的胞壁薄的非传染型始体,然后再形成致密的具传染性的原体。
原体(elementory body):具有感染力的细胞经空气传播,一旦遇合适的新宿主,就可通过吞噬作用进入细胞,在其中生长,转化成始体(initial body)or 网状体(reticulate body):无感染力的细胞①原体攻击宿主细胞②原体借吞噬侵入⑥细胞裂解后释放原体⑤始体转变成原体④始体繁殖③原体转变成始体三、支原体(Mycoplasma)支原体又称类菌质体,是一类无细胞壁、介于细菌和立克次氏体之间的G-原核微生物,是已知的能独立生活的最小生物,多数为致病菌。
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(2)鉴定
用免疫荧光法鉴定感染动物脏器、鸡胚卵 黄囊、细胞培养物中的特异性抗原以已知 抗原测定动物恢复期血清中的相应抗体。 必要时用补体结合试验、微量凝集试验等, 作群和种的鉴定。
检测IgM抗体对早期诊断有价值。 立克次体抗原吸附于载体。泛影葡胺梯度离心纯化
抗原为优,检出血清的抗体效价高,纸上ELISA测 定抗体,方法简便。将感染卵黄囊悬液加于玻片 (经氯仿·甲醇洗净)上,凉干、固定,加稀释血清 于抗原点上,每张玻片上包括阳性和阴性对照,加 酶标兔抗人IgM/G于抗原·血清点作用后,将浸透新 鲜配制的底物无灰滤纸覆盖在玻片上约4-6min,可 见滤纸条上阳性对照点位置显紫棕色,取下滤纸条 (即终止反应),观察是否显色,与对照比较判定结 果。此法简便,并可保存实验记录。
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2.标本直接检查
(1)免疫荧光检测 用于脏器检查。制备标本片 薄而均匀,组织结构清晰,固定后用荧光抗 体染色, 常见脾、肺及心瓣膜中有立克次体, 也可在肝、肾及皮疹活检组织中检出。
(2)核酸检测 PCR敏感性高,所需样品量只需 ELISA实验的1/5。以编码17kD蛋白的基因 和编码普氏和莫氏立克次体169kD蛋白的基因 作为扩增靶区。
普氏和莫氏立克次体所致的斑疹伤寒症状相 似,以高热、头痛、全身皮疹为主要特征。 伴有神经系统、心血管系统等症状和实质性 器官损伤。
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(二)微生物特性
1. 比细菌小,呈多形态性,在感染细胞内聚 集成团,分布在胞质内, Gimenez法染色后 呈红色,外表含有微荚膜结构。
2. 必须在真核细胞内才能生长繁殖,培养时 需要C02。通常采用5-9日龄鸡胚作卵黄囊 接种,于32℃-35℃孵育4~13d内死亡,鸡 胚死亡时间与接种剂量大小呈直接相关。普 氏和莫氏立克次体能在多种单层细胞上生长 繁殖。豚鼠可作立克次体的初代分离。
(2)IFA试验
为现在诊断立克次体病常用的方法。用已知 立克次体抗原(感染鸡胚卵黄囊或细胞培养 悬液)制片,以低稀释度的病人血清初筛, 有呈典型立克次体形态的明亮荧光颗粒者, 判为阳性。再将病程早期及晚期血清分别作 双倍或4倍稀释以测效价,如呈4—8倍增长 者可明确诊断。
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(3)ELISA
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一、斑疹伤寒立克次体
(一)临床意义
1.普氏立克次体是流行性斑疹伤寒(又称虱传 斑疹伤寒)的病原体。 病人是惟一的传染源,体虱是主要传播媒介, 而非储存宿主。 传播方式为虱-人-虱,体虱仅是传染媒介。
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莫氏立克次体
地方性斑疹伤寒(又称鼠型斑疹伤寒)的病原 体。啮齿类动物是主§宿主,传播媒介是鼠 蚤或鼠虱。
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(3)分离株繁殖及保存
①鸡胚卵黄囊培养 收获卵黄囊,经涂片染 色镜检, 含立克次体较多而又未发现细菌 的卵黄囊膜,或将其作成适当浓度的悬 液置-70℃冰箱保存,或冰冻干燥保藏;
②细胞培养:选鸡胚、成纤维、人羊膜、 HeLa等细胞,接种培养、鉴定后将立克 次体大量繁殖的感染细胞置-70℃储存。
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引物R17-1、-2在65℃条件下能扩增普氏和莫 氏立克次体 DNA。在琼脂凝胶上产生一条 340bp的核酸带;
引物R169-1、-2仅能扩增普氏立克次体DNA, 产生一条432bp的核酸带。两种引物同时使 用,扩增后普氏可产生340bp和432bp两条带, 而莫氏只产生340bp一条带。
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4.抗体检测
立克次体病常用的血清学诊断方法除外斐 反应、间接免疫荧光(IFA )试验、酶联免 疫吸附试验(ELISA)外,还有补体结合(CF) 试验、微量凝集(MA)试验、间接血凝(IHA) 试验、胶乳凝集(LA)试验等 。
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(1)外斐反应
除Q热、立克次体痘及罗沙利马体感染为阴性 外,其他为阳性。 患者OX凝集素上升较晚,在病程2周左右方出 现阳性,病程中双份血清试验,若效价有4倍 增长,方有诊断意义。
流行性斑疹伤寒 ++++
+
地方性斑疹伤寒 ++++
+
斑点热
++++/+ +/+ +++
恙虫病
-
-
腺热
-
-
变形杆菌 OXk ++++ ++
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(三)微生物检验
1.标本采集 (1)病人血液标本:发热期均有立克次体血症,
在急性期较易检出立克次体。争取在用抗生 素前采血,立即床侧接种。 (2)活检或尸检材料:肺、肝、脾、淋巴结、心 瓣膜等标本。
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3.有群特异性和种特异性两种抗原。大部分 立克次体与普通变形杆菌X菌株的菌体耐 热多糖抗原有共同的抗原性,故可用这些 菌株代替立克次体抗原进行凝集反应去检 测抗体,这种交叉凝集试验被称为外斐反 应,可供辅助诊断。
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外斐反应
立克次体病
变形杆菌 变形杆菌
OX19
OX2
共同特点
①大多是人畜共患病原体,引起人类发热和出 疹性疾病;
②以节肢动物为传播媒介或为储存宿主; ③大小介于细菌与病毒之间,光镜下呈多形态
性,主要为微,杆状或球杆状,革兰阴性; ④除了少数外全是专性活细胞内寄生; ⑤菌体内同时含有DNA和 RNA两类核酸; ⑥以二分裂方式进行繁殖; ⑦对抗生素敏感。
该法敏感性可达0.05ngDNA水平,重复性 好,操作方便,对两型立克次体早期、鉴别 诊断以及自然生态宿主调查研究具有较大价 值。
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3.分离培养
(1)动物接种
选用健康雄性豚鼠接种以便观察阴囊肿胀现 象。每日测体温,至40℃发热时采血或脏器 悬液、接种鸡胚卵黄囊或细胞培养以分离立 克次体;
鼠蚤叮咬人体时,常排粪于皮肤上,斑疹伤 寒立克次体从抓破的伤口进入人体。若有人 虱寄生,可通过人虱为传播媒介,继发性地 在人群中传播。
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致病物质
有两种,其一是内毒素,主要成分为脂多糖 (LPS);其二为磷脂酶A,能损伤宿主细胞膜 及溶解胞内吞噬体膜,以利于病原体穿入宿 主细胞并在其中生长。
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有些病例在病程中效价不见上升,约15%的 经疫苗接种后感染斑疹伤寒的病例。有些 轻症斑疹伤寒或某些发病严重者,其他血 清学试验阳性,但外斐反应可为阴性。
斑点热病人外斐反应效价通常为OX19高于 OX2,但也有OX2较高者。若仅出现OX2 阳性,则对诊断斑点热有特殊意义。
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