亚硝酸盐的测定

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------

亚硝酸盐的测定

盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐的含量1 亚硝酸盐的测定(盐酸萘乙二胺法) 1.1 原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸(H2N—C6H4-SO3H)重氮化，产生重氮盐，此重氮盐再与偶合试剂(盐酸萘乙二胺) 偶合形成紫红色染料，其最大吸收波长为 550nm，测定其吸光度后，可与标准比较定量。 2HCl+ NaNO2 + H 2N--SO3H重氮化盐酸萘乙二胺2HCl .H 2 NH 2 CH 2 CHN紫红色-N - N --2HCl .H 2 NH 2 CH 2 CHN--Cl- --SO3H + NaCl + 2H 2O+ Cl- NN-SO3H偶合-SO3H + HCl1.2 仪器和试剂 1.2.1 仪器①小型粉碎机。

②分光光度计。

③25ml 具塞比色管。

1.2.2 试剂①氯化铵缓冲溶液： 1 000ml 容量瓶中加人 500ml 水，在然后准确加入 20.0ml 盐酸，振荡混匀后，再准确加入 50ml 氢氧化铵，用水稀释至刻度。

必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试 pH 至 9.6～9.7。

②硫酸锌溶液(0.42mol/L)：称取 120g 硫酸锌(ZnSO4·7H2O)，用水溶解，并稀释至 1000ml。

1

1/ 10

③氢氧化钠溶液(20g/L)：称取 20g 氢氧化钠用水溶解，稀释至 1 000ml。

④对氨基苯磺酸溶液：称取 10g 对氨基苯磺酸，溶于 700ml 水和 300ml 冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。

⑤盐酸萘乙二胺溶液(1g/L)：称职 0.1g 盐酸萘乙二胺，加 60%乙酸溶解并稀释至 100ml，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，1 周内稳定。

⑥显色剂：临用前，将盐酸萘乙二胺溶液(1g/L)和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。

仅供 1 次使用。

⑦亚硝酸钠标准储备液：准确称取 250.0mg 于硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠，用水溶解后移入 500ml 容量瓶中，加 100ml 氯化铵缓冲溶液，用水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存。

此溶液每毫升相当于500μ g 的亚硝酸钠。

⑧亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准储备液

1.00ml，置于 100ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。

此溶液每毫升相当于5.0μ g 的亚硝酸钠。

1.3 操作步骤 1.3.1 样品的处理称取约 10.00g(粮食称取5.00g)经绞碎混匀的样品，置于 250ml 烧杯中，加。

70ml 水和 12ml 氢氧化钠溶液(20g/L)，混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品 pH 至 8，定量转移至 200ml 容量瓶中，加 l0ml 硫酸锌溶液，混匀。

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 如不产生白色沉淀，可再补加 2～5ml 氢氧化钠溶液，搅拌混匀。

置 60℃水浴中加热 10min，取出后冷至室温，加水至刻度，混匀。

放置 0.5h，用滤纸过滤，弃去初滤液 20ml，收集滤液备用。

1.3.2 亚硝酸盐标准曲线的绘制吸取 0.0、0.5、1.0、

2.0、

3.0、

4.0、

5.0ml 亚硝酸钠标准使用液(相当于 0.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μ g 的亚硝酸钠)，分别置于 25ml 具塞比色管中。

分别加入 4.5ml 氯化铵缓冲溶液，2.5ml60％的乙酸，然后立即加入 5.0ml 显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置 25min，用 1cm 比色杯(灵敏度低时可换 2cm 比色杯)，以零管调节零点，于波长550nm 处测吸光度，绘制标准曲线。

1.3.3 样品的测定2

3/ 10

吸取 10.0ml 样品滤液于 25ml 具塞比色管中，按标准曲线制备程序，自“分别加入 4.5ml 氯化铵缓冲液”起依法操作。

同时做试剂空白。

1.4 结果计算式中： X—样品中亚硝酸盐的含量，mg/kg； m1—样品的质量，g； m2—测定用样液中亚硝酸盐的质量，μ g； V1—样品处理液的总体积，ml； V2—测定用样液体积，ml。

结果以算术平均值的二位有效数字表述。

1.5 说明及注意事项3

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 硫酸锌溶液作为蛋白质沉淀剂使用，也可用亚铁氰化钾和乙酸锌的混合溶液，利用产生的亚铁氰化锌与蛋白质共沉淀；实验中使用重蒸水可以减少试验误差。

2 硝酸盐的测定 2.1 原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，将样品提取液通过镉柱，使其中的硝酸根离子还原成亚硝酸根离子。

在酸性条件下，亚硝酸根与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成红色染料，经比色测得亚硝酸盐总量，从还原前后亚硝酸盐量即可求得硝酸盐的含量。

2.2 仪器和试剂 2.2.1 仪器（1）镉柱 a.海绵状镉粉的制备：投入足够的锌皮或锌棒于 500ml200g/L 的硫酸镉溶液中，经 3～4h，当溶液中的镉全部被锌置换后，用玻璃棒轻轻刮下，取出残余锌皮，使镉沉底，倾去上层清液，以蒸馏水用倾斜法洗涤，然后移入组织捣碎机中，加 500ml 水。

捣碎约 2s，用水将金属细粒洗至标准筛上，取 20～40 目之间的部分。

置试剂瓶中，用水封盖保存，备用。

b.镉柱装填：如图 8—3 所示。

用蒸馏水装满镉柱玻璃管，并装入 2cm 高的玻璃棉作垫。

将玻璃棉压向柱底，并将其中所包含的空气全部排出，在轻轻敲击下加入海绵状镉至 8～10cm 高，上面用 1cm 高的玻璃棉覆盖，上置一个储液漏斗，末端穿过橡皮塞与镉柱玻璃管紧密连接。

5/ 10