细胞遗传学在血液病中的应用
分子细胞遗传学技术在血液病中的应用
１ 分 子 细 胞 遗 传 学 技 术 在 骨 髓 增 生 异 常
综合征和急性髓 系白血病 中的应 用
急性髓 系 白血 病 （ ＭＬ） 成 人 白血 病 中最 Ａ 是 常 见的类型 ， ＷＨＯ分 型将其 分成 四大类 型 ， 各类 型 中又含各 种亚 型 ， 分亚 型根 据核 型分类 ， 型 部 核 检 测对 Ａ ＭＬ分 类有 着 重 要 意 义 。ｔ１ ；７ 是 急 （５ １ ） 性 早幼 粒 细 胞 白血 病 （ Ｐ ） 征 性 的染 色 体 异 Ａ Ｌ特 常， 形成 Ｐ － Ａ 融 合 基 因 ， 反式 维 甲酸 可 ＭＬＲ Ｒａ 全 诱导 ＡＰ Ｌ细 胞 分 化 ， 剂 在 低 浓 度 时 诱 导 其 分 砷 化 ， 浓度 时 诱 导 白血 病 细 胞 凋 亡 ，２者 均 是针 高
杂 交（ ＩＨ） 比较 基 因组杂 交 （ Ｇ 和 多 色荧 光 ＦＳ 、 Ｃ Ｈ）
检测均 发 现 了 ｉｖ １ ） ｎ （ ６ ，阳性 细胞 率 为 ９ ． ５ ３ ４ ％ （６ ６ ～９ ． ％） ８ ．％ ８ ７ 。我 们 采 用 Ｆ Ｓ 检 测 ７ ＩＨ ４例
Ｍ４ 者 ， 现 ２ 患 发 ３例 有 ｉ （６ 。为 探 讨 三 体 ２ ｎ １） ｖ ２ （ ２ 在诊 断 ｉｖ １ ） ＋２ ） ｎ （６ 急性 髓 细 胞 白血 病 （ ＭＩ Ａ ） 中 的意 义 ， 采用 红 、 荧 光直 接标 记 的双色 断裂点 绿
陈丽娟 李建 勇 ， ， 潘金 兰 薛永权 ，
（ ．南京医科 大学第一附属医院 血液科 ，江苏 南 京 ， １０ ９ １ ２０２ ； ２ ．苏州大学附属第一 医院、 江苏省血液研 究所 ， 苏 苏州 ， １０ ６ 江 ２５０ ）
关键词：荧光原位杂交 ；比较基 因组杂交 ；光谱核型分析 ；骨髓增生异常综合征 ；急性 白血病 ； 慢性 白血病
慢性髓细胞白血病的临床和细胞遗传学分析
导致 的髓 系增殖 性 疾 病 。早 在 １ ６ ９ ０年 Ｃ Ｌ患者 中 Ｇ
就发 现 Ｐ ｈ染色体 ，并证 明是 由 ９号 染色 体 和 ２ ２号
染色 体 相互 异 位形 成 的 ，５ ９ ％以上 的 Ｃ Ｌ患 者 出现 Ｇ 标志性 Ｐ ｈ染 色体 。病 程 可分 慢性 期 、 加速 期及 急 变 期， 中位 生 存期 一 般 ３ ５年 。染 色 体 核 型分 析 具 有 ～ 重要 价 值 。我 们 对 ２ ０ ０ ０年 １ ～ ０ ８年 １月 间 ４ 月 ２０ ２
Ｒ ３． ７３ ７ 文 献 标识 码 Ｂ
中 图分 类号
慢性髓细胞 白血病 （ｈｏ ｉ ｇａ ｕｏ ｙ ｃｌ ｋ ｍ ． ｃ ｒｎｃ ｒｎ ｌ ｔ ｕ ｅ ｉ ｃｉ ｅ
ａＣ Ｌ ， Ｇ ）是 一 种 由于多 能 造血 干 细胞 克 隆 性扩 增 所
位３ ６例 （５７ 。ｈ染 色体 阳性 细胞 为 １０ ３ ８ ．％） Ｐ ０％ ４例 （０９ 。 ８ ．％） ５例 Ｐ ｈ染 色体 阳性 细胞 为 ３．％一 ２０ ０２ ７ ． ％。
・
４８卜
慢性髓细胞 白血病 的临床 和细胞 遗传 学分 析
刘 地 发
（ 南通 大 学 附属 海 安 医 院血 液 科 ， 苏 ２ ６ ０ ） 江 ２ ６０
摘
要 目的 ： 研究慢性髓细胞 白血病（Ｇ ） Ｃ Ｌ 的细胞遗传学特征与预后的关系。方法 ： 采用 骨髓 细胞 直接法和
（ 不 加 植 物 血 凝 素 （ Ｈ 的 ２ ｈ体 外 细 胞 培 养 法 制 备 骨 髓 染 色 体 ， 应 用 热 变 性 姬 姆 萨 显 带 技 术 对 ４ 或） Ｐ Ａ） ４ 并 ２例 Ｃ Ｌ Ｇ 患 者 的 骨 髓 细胞 进行 染 色 体核 型分 析 。 结 果 ：２例 Ｃ Ｌ中 ， 现 ３ ４ Ｇ 发 ９例 （２ ％） 典 型 的 Ｐ 染 色 体 ，ｈ染 色 体 阴 ９． 有 ９ ｈ Ｐ 性 ３ （．％） 例 ７１ 。其 中 ６例 核 型 呈 嵌 合 状 态 ， 除 Ｐ ３例 ｈ阳 性 外 ， 出 现 附 加 染 色 体 改 变 ， 别 为 ＋ ｈ ＋ 。３ 经 干 扰 还 分 Ｐ 、８ ６例 素 、 基脲等治疗后其 Ｐ 羟 ｈ阳 性 率 不 变 。结 论 ： 色 体 核 型 分 析 不 但 有 助 于 Ｃ Ｌ的 诊 断 和 鉴别 诊 断 ， 指 导 临 床 治 染 Ｇ 并 疗 和判 断 预后 ， 有 助 于 细 胞 遗 传 学 分 型 。 且 关键词 慢 性 髓 细 胞 白血 病 ；ｈ染 色 体 ； Ｐ 细胞 遗 传 学
细胞遗传学、分子遗传学血液病
细胞遗传学、分子遗传学血液病细胞遗传学和分子遗传学是研究遗传信息传递的两个重要分支学科。
它们在血液病研究中发挥着重要的作用。
血液病是指一类由于遗传突变或其他原因导致造血系统异常的疾病，包括白血病、贫血和血小板减少等。
本文将从细胞遗传学和分子遗传学的角度，介绍血液病的发病机制、诊断和治疗等方面的研究进展。
血液病的发病机制与细胞遗传学密切相关。
细胞遗传学主要研究染色体异常与疾病之间的关系。
在某些血液病患者中，可以观察到染色体的结构异常或数目异常。
例如，染色体易位、染色体缺失或数目增加等异常都与某些血液病的发生有关。
通过细胞遗传学的研究，我们可以了解到这些染色体异常如何导致血液病的发生，并且可以帮助医生进行准确的诊断。
与细胞遗传学相比，分子遗传学更加关注血液病的基因突变和表达异常。
分子遗传学研究了基因和DNA的结构、功能以及遗传信息传递的机制。
在血液病中，一些特定的基因突变会导致造血系统的发育异常或功能障碍，从而引发疾病的发生。
例如，在白血病中，常见的突变包括BCR-ABL融合基因的产生以及FLT3、NPM1等基因的突变。
这些基因突变可以通过分子遗传学的方法进行检测，并且可以作为诊断和预后评估的依据。
血液病的诊断和治疗也受到细胞遗传学和分子遗传学的指导。
通过细胞遗传学的分析，医生可以观察到血液中细胞的染色体异常，从而帮助确定疾病的类型和严重程度。
在分子遗传学方面，通过检测特定基因的突变，可以帮助医生制定个体化的治疗方案。
例如，在白血病中，BCR-ABL融合基因阳性的患者可以使用针对该基因的靶向治疗药物，如伊马替尼。
而对于某些贫血病患者，如果发现了特定基因的突变，可以进行造血干细胞移植等治疗手段。
细胞遗传学和分子遗传学在血液病研究中的应用不仅帮助我们理解了血液病的发生机制，也为临床诊断和治疗提供了重要的依据。
随着技术的不断进步，细胞遗传学和分子遗传学在血液病领域的应用也将更加广泛和深入。
未来，我们可以期待更多的血液病相关基因的发现，以及更精准的诊断和治疗方法的开发，为血液病患者带来更好的生活质量和治疗效果。
慢性髓系白血病细胞遗传学检查的临床意义分析
慢性髓系白血病细胞遗传学检查的临床意义分析宋兰林;刘晓力;杜庆锋;周淑芸【期刊名称】《中国优生与遗传杂志》【年(卷),期】2003(11)6【摘要】目的探讨慢性髓系白血病 (CML)患者细胞遗传学改变与疾病的诊断、分期、分险率分组之间的关系。
材料与方法 15 5例CML患者按《血液病诊断及疗效标准》及Sokal危险指数进行分期分组 ,骨髓短期培训常规G显带后进行核型分析。
结果 15 5例CML患者中 ,14 8例Ph(+) ,占 95 5 % ,Ph(- )患者 7例(4 5 % ) ,其中 4例Ph(- ) /bcr -abl(+) ,3例Ph(- ) /bcr-abl(- )。
慢性期患者中 2 1例 (15 6 % )发生附加染色体畸变 ,主要有 +8(5例 ) ,+Ph(4例 ) ,+19(2例 ) ,-Y(2例 ) ,1q - (2例 )等 ;附加染色体畸变率高危组 >中危组 >低危组。
加速期和急变期患者中 14例 (70 % )有附加染色体数量和 /或结构异常。
结论慢性期CML 是一组高度异质性疾病 ,附加染色体畸变频率与疾病的风险度正相关 ,是判断疾病预后的有用参数。
加速期、急变期CML多伴有非随机的附加染色体异常 ,这些染色体的出现可作为预后评估的指标。
【总页数】3页(P54-55)【关键词】慢性髓系白血病;细胞遗传学;染色体畸变频率;染色体异常;诊断【作者】宋兰林;刘晓力;杜庆锋;周淑芸【作者单位】第一军医大学南方医院【正文语种】中文【中图分类】R733.72【相关文献】1.细胞遗传学检测在慢性髓性白血病中的临床意义 [J], 潘成云;许娜;何柏林;曹睿;廖立斌;阴常欣;蓝扬清;陆紫媛;黄继贤2.细胞遗传学完全缓解的慢性髓系白血病进展为Ph-急性淋巴细胞白血病一例 [J], 张新伟;季林祥;秦铁军;于明华;刘世和;孙秀娟;尚静雅;季素芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
怀疑血液病该做哪些检查
怀疑血液病该做哪些检查血液病是一种由于骨髓中血细胞发生异常而导致血液系统疾病，一旦患上血液病，往往伴随着血小板减少，贫血和免疫力低下等一系列症状，其严重程度需要根据患者症状进行评估，同时也需要进行相关的检查，以便了解病情，为确诊和治疗提供帮助。
本文将为您介绍怀疑血液病该做哪些检查。
1. 血常规检查血常规检查是用于检测血液成分、各种细胞系数量及比例的一种检查方法，也是最基础的血液检查之一，应首先做出来。
其对于检查与血液相关疾病十分敏感，包括了红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及白细胞分类等指标。
通过血常规检查能够判断出患者是否存在贫血、白细胞减少或增加及血小板减少等症状，这些都是血液病的常见症状之一，因此血常规检查非常重要。
2. 骨髓穿刺检查骨髓穿刺是通过骨髓组织一次性采集的方式，对患者进行检查。
通过骨髓穿刺可以获得关于骨髓中血细胞的数量、形态和功能方面的重要信息，同时可以为患者进行确诊提供重要的依据。
对于检测血液病的类型和严重程度，了解患者的预后和治疗方案的制定等方面都具有重要的应用价值。
此项检查需要由经验丰富的医生进行，可出现一定程度的疼痛，但通常在15分钟内即可完成。
骨髓活检是通过旋转针头将骨髓组织取出并进行组织学检查的一种检查方法。
与骨髓穿刺检查不同，骨髓活检的检查过程需要在局部麻醉下进行，采集的组织较多，可以更全面地了解骨髓病理情况，充分了解诊断，为患者进行治疗提供重要依据。
但由于骨髓活检是有一定的创伤的，在操作过程中会有一定的疼痛感，且在骨髓穿刺的基础上，可增加某些风险，因此需要进行详细的血液相关评估，并在专业人员的指导下进行。
4. 细胞遗传学检查细胞遗传学检查是一种通过检查细胞核特定的染色体变化或染色体数目的变化对血液疾病进行诊断的一种检查方法。
通过这种检查，医生可以确定出细胞的基因异常，判断出细胞是否异常增殖并定位各种异常细胞的分布范围。
此项检查对于多种血液系统恶性肿瘤、LGL（大颗粒淋巴细胞白血病）等的诊断有较好效果，可进一步判断病情、预后及治疗方案的选择。
细胞遗传学
细胞遗传学
二 细胞遗传学的基础理论
3染色体的基础知识 （5） 正常及异常核型描述
46, XY 46, XXX 46, XX 47, XYY 45, X 45, XX, 1647, XXY 45, XX, E-
46, XX, t(9;22)(q34;q11) 46, XX, t(9;22)(9pter 9q34::22q11 22qter ; 22pter 22q11::9q34 9qter)
细胞遗传学
三．细胞遗传学检验技术
1 2 3 4 5 6 7 外周血淋巴细胞培养及染色体分析 骨髓细胞培养及染色体分析 羊水培养及染色体分析 早孕绒毛及羊水的性染色质检验 胸腹水及实体瘤细胞的染色体分析 荧光原位杂交 (FISH) 技术 X、Y小体检验技术
细胞遗传学
染色体标本制作的基本程序
阴道、 阴道、口腔上皮细胞细胞 X、Y小体分析 外周血 骨髓 胸,腹水 性腺活检标本 早孕绒毛 实体瘤 羊水 皮肤,肝,肾标本 皮肤, 体外悬浮培养 不经培养 秋水仙素处理 、 体 带 分 析 带 分 析 带 分 析 带 分 析 单 姐 体 妹 互 染 换 色 实 验 染 迟 色 复 体 制 技 术 X 检 染 测 色 技 体 术 脆 性 部 位 体 技 术 高 分 辨 染 色 杂 交 技 术 荧 光 原 位 体外贴壁培养
46, XY, inv(1)(p32q12)pat 46, XY, inv(1)(pter p32::q12 p32::q12 qter)pat
46, XX, - 4, -12，+der(4) t(4 ;12)(q35:q12),+i(12p) 46, XX, - 4, -12, +der(4)t(4:12)(4pter 4q35::12q12 (12pter 12ter), +i(12p) cen 12qter)
分子诊断在血液病中的应用
分子诊断在血液病中的应用
吕萌;黄晓军
【期刊名称】《临床血液学杂志》
【年(卷),期】2011(24)5
【摘要】分子诊断是利用分子生物学和分子遗传学方法检测疾病相关基因和蛋白,并与临床诊断密切结合的一种诊断技术。
经过分子杂交、PCR定量和芯片技术3个阶段的发展,分子诊断已经广泛应用于肿瘤和遗传性疾病等相关领域,尤其在严重危害人类健康的恶性血液病领域取得了长足进步.
【总页数】3页(P505-507)
【关键词】分子诊断;血液病
【作者】吕萌;黄晓军
【作者单位】北京大学人民医院;北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病研究北京市重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R446
【相关文献】
1.分子细胞遗传学技术在血液病中的应用 [J], 陈丽娟;李建勇;潘金兰;薛永权
2.分子细胞遗传学技术在血液病中的应用 [J], 陈丽娟; 李建勇; 潘金兰; 薛永权
3.在血液疾病中应用骨髓细胞和血小板参数联合检测的临床诊断价值 [J], 王娅娟; 杨雅梅
4.在血液疾病中应用骨髓细胞和血小板参数联合检测的临床诊断价值 [J], 王娅娟; 杨雅梅
5.骨髓涂片、印片与切片检查在基层医院诊断血液疾病中的应用 [J], 丁静;黄世霜;胡延生
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血液病细胞分子遗传学检测中国专家共识2013年版
ＫＣｌ进行低渗处理（骨髓细胞３。最后加入新鲜配制的固定液（甲 醇：冰醋酸＝３：１）进行预固定及固定，收获的染色体标本悬液 于２～８℃保存备用。 ４．染色体标本显带：将染色体标本悬液用新鲜配制的固 定液重新固定、吹打混匀，采用气干法或火焰烧灼法滴片。 将制备的玻片置于ｐＨ ６．５—６．８的Ｅａｒｌｅ’Ｓ溶液恒温水浴加热
用２ ｅｅＬ的无菌肝素钠抗凝剂０．２ ｍＩ湿润内壁（注意不能超 量，较多肝素反而会导致白细胞聚集）。将取出的骨髓迅速 转移至含ＲＰＭＩ １６４０完全培养液［培养液含２０％胎牛血清或 新生牛血清、少量肝素钠和青霉素、链霉素］的无菌培养瓶内 送检。 ４．标本标记和申请单：装标本的容器应标记患者姓名、 床号及其他必要信息。染色体显带核型分析及ＦＩＳＨ检查申 请单至少应包含以下信息：患者基本信息及联系方式；住院 号或门诊号、送检日期；送检医生、送检单位及联系方式；患 者主诉、病史、体检、治疗相关重要信息；重要的实验室检测 结果以及检测要求（如ＦＩＳＨ检测靶点或探针名称、丝裂霉素 断裂试验等）；提供患者的初步诊断，以便实验室技术人员在 进一步的标本处理中根据患者可能的诊断给予合适的培养 条件。 ５．标本运输：取出的新鲜标本应于室温条件下尽快（２４ ｈ内）送至实验室进行处理，夏季和冬季应采取措施防止运 输过程中标本温度过低或过高，标本不能与冰块或冰袋直接 接触。如果无条件将标本放在含ＲＰＭＩ １６４０完全培养液容 器中送检，而是置于肝素抗凝管或注射器内送检，建议最迟
Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｏｒａｎｇｅ／Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ
贫血患者外周血标本在加入ＰＨＡ的同时需要加入丝裂霉素 共同孵育；ＣＬＬ患者外周血标本在培养时加入未甲基化胞嘧 啶鸟嘌呤二核苷酸寡脱氧核苷酸（ＣｐＧ—ＯＤＮ）和美洲商陆素 （ＰＷＭ）等刺激培养７２ ｈ可提高异常核型检出率；淋巴结活 检标本应于无菌条件下剪碎研磨、过滤成单个细胞后进行培 养；多发性骨髓瘤患者的骨髓标本可用ＣＤｌ３８磁珠分选联 合间期ＦＩＳＨ（Ｉ．ＦＩＳＨ）或胞质轻链免疫荧光结合ＦＩＳＨ（ｃｌｇ— ＦＩＳＨ）技术提高染色体异常检出率；浆膜腔积液需离心、弃 上清，调整细胞密度为（１～２）Ｘ１０６／ｍｌ进行培养。 ３．收获染色体标本：细胞培养结束前，加入秋水仙胺处 理１ ｈ，以增加中期分裂象（ＣＬＬ患者及检测体细胞染色体异 常的患者，秋水仙胺处理时间可延长至３．５ ｈ）。随即以
血液病资料-细胞遗传学
恶性血液病的细胞遗传学中国医学科学院中国协和医学大学血液学研究所血液病医院刘世和一、背景染色体开展历史染色体检查在恶性血液病中的应用价值国内外开展动态染色体分析开展历史1960-1971：非显带时期1971-1980：显带、高分辨1980-至今：与分子生物学相结合时期，分子细胞遗传学〔FISH〕意义诊断与分型疗效判断验证移植成功与否或确定白血病的复发及其来源。
预后分析与指导治疗查找新的致病基因，讨论发病机制国内外开展动态国外：广泛开展，白血病与淋巴瘤必查工程国内：相对薄弱原因技术劳动强度大价格患者经济开展染色体检查要素技术合理的价格规模化：降低本钱，进步效率，缩短报告时间二、人类细胞遗传学命名根据1995版人类细胞遗传学国际命名体制，正常核型男：46，XY；女：46，XX。
异常核型包括体质性和获得性：体质性异常；获得性异常表1 核型命名常用的缩写符号染色体倒位〔inv〕指同一染色体上的两个断点之间的片段发生180º旋转，如发生于单一臂内称为臂内倒位，发生于两臂称臂间倒位。
染色体重复〔dup)在一个染色体的某一位点上重复一段染色体片段。
插入〔ins〕* 包括2个染色体之间的插入和一个染色体内的插入。
2个染色体之间的插入为插入易位，承受插入片段的染色体总是列于前面，而提供易位片段的染色体列于次。
* 一个染色体内的染色体插入可分为正向插入与反向插入。
等臂染色体〔iso)指一条染色体含有完全一样的臂。
易位〔t〕：至少2个染色体之间发生的遗传物质的互换。
平衡易位和不平衡易位两条染色体之间的易位描绘方式为按染色体由小到大的排列顺序易位：3个染色体以上罗伯逊易位〔rob)发生于D组或/和G组端着丝粒染色体易位，为两个长臂对接。
Rob(14;21)缺失〔del〕在某一个染色体上丧失部分遗传物质；分为中间缺失和末端缺失，如5q-增加〔add)表示在某一染色体上获得来源不明的遗传物质，通常代表在染色体的末端增加。
血液病的分子遗传学研究
血液病的分子遗传学研究血液病是临床上常见的一类疾病，包括白血病、淋巴瘤、骨髓增生异常综合征等多种类型。
这些疾病的发病机制涉及到多个因素，其中分子遗传学在其中扮演了重要的角色。
分子遗传学是研究生物分子（如DNA、RNA、蛋白质等）参与遗传信息传递的基础研究学科。
在血液病的研究中，分子遗传学的方法可以用来研究疾病相关基因的突变、基因表达水平的变化、染色体异常等。
这些研究可以为疾病的诊断、治疗和预后评估提供重要依据。
以白血病为例，许多研究表明，白血病的发病机制涉及到某些基因表达失调、细胞凋亡被抑制等因素。
其中最为重要的是基因突变。
如乳突状瘤病毒（HTLV-1）感染与急性T淋巴细胞白血病，BCR/ABL融合基因与慢性粒细胞白血病、Philadelphia染色体和肿瘤抑制基因TP53突变与急性髓母细胞白血病等。
分子遗传学的方法可以用来检测这些基因的突变情况，从而为临床治疗提供指导。
除了基因突变外，分子遗传学的方法还可以用来研究基因表达水平的变化。
例如，一些研究表明，MiRNA在白血病中发挥了重要的调控作用。
MiRNA是一类长度约为22个核苷酸的小分子RNA，在细胞中调控基因表达，从而影响基因的功能。
许多MiRNA在白血病细胞中的表达水平明显不同于正常细胞，这些MiRNA参与了白血病细胞的增殖和分化等过程，因此成为白血病分子研究中一个热点领域。
此外，分子遗传学的方法还可以用来研究血液病患者的染色体异常。
染色体异常是血液病中常见的一种遗传变异形式。
例如，滋养细胞瘤患者的染色体14和18部分缺失；Burkitt淋巴瘤患者的染色体8和14易位等。
分子遗传学的方法可以用来检测这些染色体异常，为临床诊断和治疗提供重要的信息。
总的来说，分子遗传学的研究方法为血液病的分子机制研究提供了有力的支持。
透过分子遗传学探究血液病，我们可以更深入了解疾病的发生、发展过程，为疾病的防治提供科学依据。
细胞遗传学在血液病中的应用
高通量测序
对血液病相关基因进行深度测序，发 现基因突变和遗传变异，为精准诊断 提供依据。
常见的血液病相关染色体异常
急性髓系白血病（AML）
急性淋巴细胞白血病（ALL）
染色体易位、缺失、重复等异常，如8号染 色体三体、16号染色体单体等。
染色体易位、缺失、扩增等异常，如9号染 色体缺失、12号染色体扩增等。
骨髓增生异常综合征（MDS）
慢性粒细胞白血病（CML）
染色体异常如-5/5q、-7/7q、+8、20q等 。
费城染色体（Ph染色体）异常，即9号染色 体与22号染色体易位。
诊断中的挑战与前景
挑战
血液病的染色体异常复杂多样，部分异常尚无明确临床意义，需要进一步研究。
前景
随着技术进步，高通量测序等新技术的应用将提高诊断的敏感性和特异性，有助 于发现更多血液病相关基因变异和染色体异常。
05 未来展望与研究方向
新兴的细胞遗传学技术
基因组编辑技术
人工智能与大数据分析
利用CRISPR-Cas9等基因编辑工具， 对血液病相关基因进行精确编辑，为 疾病治疗和预防提供新途径。
结合人工智能和大数据技术，对海量 细胞遗传学数据进行高效处理和挖掘， 发现潜在的疾病标记物和治疗靶点。
单细胞测序技术
逐渐成为一门独立的学科。
细胞遗传学的发展
随着分子生物学和基因组学技术 的不断进步，细胞遗传学的研究 范围和应用领域不断扩大，为血 液病等复杂疾病的诊断和治疗提
供了有力支持。
02 血液病的概述
血液病的定义和分类
定义
血液病是指发生在血液及造血系统中 的疾病，包括红细胞疾病、白细胞疾 病和出血性疾病等。
细胞遗传学在医学领域中具有重要意 义，尤其是在血液病的诊断、治疗和 预后评估方面。
血液病的分子遗传学研究进展
血液病的分子遗传学研究进展血液病是指由于造血系统的恶性克隆性增殖而导致骨髓生产进一步生长的异常白血病细胞或红细胞的一类疾病，是细胞信号传导和转录因子异常表达的结果。
近年来，随着廉价、高效测序技术的广泛应用，分子遗传学研究进展迅速，为血液病的诊断和治疗提供了新的思路和方法。
一、表观遗传学研究进展在血液病的发生和发展中，基因表观遗传变化的作用越来越受到重视。
表观遗传学是指染色质的化学修饰、非编码RNA的表达和DNA的甲基化等遗传物质本身的改变，而不是基因序列的改变。
非编码RNA突发性干扰片段（siRNAs）的作用已经得到广泛的研究。
它们能够降低某一基因的表达水平，从而达到疾病治疗的效果。
表观遗传学障碍会在血液病中造成白细胞、红细胞和血小板的形成障碍，包括染色质的组装、核小体结构的改变、DNA和组蛋白表观遗传标志的改变等。
目前，针对表观遗传学异常的治疗方法也已经开始出现。
但是，目前仅有一种药物（5-氮杂胞呋喃nucleotide analogue）已被批准用于血液病的治疗。
二、基因突变研究进展在血液病的分子遗传学研究中,基因突变发挥着重要的作用。
其中最为突出的是白血病，它是由于白细胞生长受到基因突变和表观遗传学改变的影响而引起的。
近年来，多项研究发现，白血病细胞中包括迅速增长的核因子乙型（c-Myc）和磷酸酰化酶（PTEN）等多种基因在不同程度上突变。
目前，大量研究表明，基因突变是血液病发生和发展最主要的原因之一。
通过新型高通量测序技术的应用，已有大量基因突变被鉴定，如JAK2V617F、BCR-ABL、CRLF2、TEL-JAK2等。
这为血液病的诊断和治疗提供了新的机会，也为前沿药物的开发提供了新的思路。
三、蛋白质组学研究进展蛋白质是基因翻译成生物学功能的重要分子，蛋白质异质性和调控是复杂性疾病发生和发展的重要因素之一。
血液病也不例外。
近年来，蛋白质组学的研究进展为血液病的识别和治疗提供了新的思路。
新一代细胞遗传学技术在白血病基因组结构变异分析中的应用
白血病•淋巴瘤202丨年4 J j 第 30 卷第 4 期Journal of Le丨丨kemia & Lvm丨)homa，A丨)ril 202丨，\〇丨.30，No. 4•197.新一代细胞遗传学技术在白血病基因组 结构变异分析中的应用张阳1王彤1王芳，刘红星：1河北燕达陆道培医院检验医学科，廊坊065201北京陆道培血液病研究院 100176 通信作者：刘红星，Email:starliu@ •专题综论•扫码阅读电子版【摘要】基因组结构变异（SV)是血液肿瘤中一组重要的遗传学异常形式目前常用的细胞遗传 学和基因检测技术在SV检测方面具有显著的局限性基因组光学图谱技术提供了超长片段、高分辨 率、自动化、高通量和全基因组范围分析SV的能力，又被称为新一代细胞遗传学(NG C)技术。
近年来已 有将N G C技术用于白血病基因组SV分析的研究报道现结合第62届美国血液学会年会的报道对相关 研究进展进行介绍。
【关键词】内血病；基因组结构变异；细胞遗传学D O I：10.3760/rm a.j.rnl 15356-20201215-00306Application of the new generation cytogenetics technology in structural variation of leukemia genome Zhang Yang. Wang Tong1, Wang Fang1, Liu Hongxing2'Department of Uiboratory, Hebei Yanda Lu Daopei Hospital, Langfang 065201, China; :Beijing Lu Daopei Institute o f Hematology, Beijiing 100176. ChinaCorresponding author: Liu Hongxing，Email:***************.cn【Abstract】Structural variation (SV) of the genome is a group of critical genetic abnorm alities in hematological tumors. The currently com m only-used cytogenetics and gene testing techniques have significant lim itations in the detection of SV. Genome optical mapping technology provides a powerful tool for analyzing SV with ultra-long fragm ents, high resolution, automation, high throughput and genom e-w ide range. It is also known as the nexl-generalion cytogenetics (NGC) technology. In recent years, there have been research reports on ihe use of NGC for the analysis of SV of leukem ia genome. The related research progress is now introduced in conjunction with the reports at the 62nd Am erican Society of Hematology Annual Meeting.【Keywords】Leukemia: Genomic structural variationi; CytogeneticsD O I：10.3760/rm a.j.rnl 15356-20201215-00306基因组结构变异（s v)是血液肿瘤中一组重要的 遗传学异常形式，包括染色体易位、倒位、微缺失、基因拷贝数变异（CNV)以及染色体碎裂等。
各种血液病细胞遗传学异常(潘金兰)
各种血液病中细胞/分子遗传学异常简介苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所潘金兰染色体基本概念•染色体(chromosome):可染色的小体。
1988年Waldeyer 提出。
•基本结构：DNA+组蛋白高度螺旋化。
间期：染色质(DNA解螺旋成细丝，不易着色）。
中期：染色体(DNA高度螺旋化，易着色)。
•染色体：遗传物质-基因载体(基因直线排列于染色体上)。
•染色体研究是临床遗传学研究的基础(染色体改变导致基因改变)。
19501960197019801990细胞遗传学发展简史确定染色体46条(1956)应用于血液学(1958) CML发现Ph染色体非显带时期G、R等各种显带技术，肿瘤和遗传学疾病核型异常FISH中期间期多色FISH显带时期CGH高通量芯片技术：aCGH, aSNP20001960s/染色体+医学核型命名(基本)•核型按照人类细胞遗传学国际命名体制《AnInternational System for Human CytogeneticNormenclature ISCN 2013》描述.•核型描述可分简式和繁式。
常用简式。
46，XY：一个染色体数目为46的正常男性核型；47，XY，+8：一个染色体数目为47的超二倍体男性核型，增加了一条8号染色体；46，XY，t(9;22)(q34;q11)：染色体数目为46的假二倍体男性核型，其中有一个涉及9和22号染色体的相互易位。
•常用缩写符号：p短臂、q长臂、t易位、del缺失、inv倒位、ins插入、der衍生染色体、dup重复、mar标记染色体、r环状染色体、i等臂染色体。
FISH的定义•该技术是20世纪80年代初期在细胞遗传学、分子生物学和免疫学相结合的基础上发展起来的一种荧光原位杂交技术，是一门分子细胞遗传学技术。
FISH为细胞遗传学和分子生物学的结合。
•为细胞遗传学和分子生物学之间架起了桥梁。
•使基因异常在显微镜下就能被看到，因而极大地提高了染色体分析的敏感性、准确性和可靠性，成为细胞遗传学的重要补充。
分子生物学技术在血液病研究中的应用研究
分子生物学技术在血液病研究中的应用研究引言血液病是由于血液系统中某些细胞发生异常增生、功能障碍或癌变而引发的一种疾病。
血液病种类繁多，其中包括白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等，对人类的健康和生命都带来了极大的威胁。
在早期，传统的检测手段对血液病的诊断和治疗有很大的限制。
随着分子生物学技术的不断发展，越来越多的研究表明，这些技术在血液病的研究中具有重要的应用价值。
第一章分子生物学技术在血液病诊断中的应用1. 流式细胞术流式细胞术是一种常用的细胞分析技术，可以实现对不同类型细胞的分类和计数，并分析细胞表面、内部蛋白质和DNA等方面的特性。
这种技术在血液病的诊断和治疗中有着广泛的应用。
例如，利用流式细胞术可以对白血病患者的免疫表型进行分析，通过分析细胞表面的不同标志物，可以实现对白血病细胞和正常细胞的区分，这对于判断病情和治疗效果具有重要意义。
2. 分子遗传学检测技术分子遗传学检测技术是利用DNA或RNA等分子作为研究对象，通过特定的实验操作和方法，对其结构、功能等特性进行分析和研究的技术。
这种技术在血液病的研究中有着广泛的应用。
例如，通过PCR扩增、Sanger测序等技术可以检测常见的血液病相关基因突变，例如BCR-ABL、JAK2 V617F等，这对于血液病的诊断、治疗和预后评估具有重要意义。
第二章分子生物学技术在血液病治疗中的应用1. 基因治疗基因治疗是利用基因工程技术，将外源性基因投入人体细胞中，从而改变细胞的功能、代谢等生理特性的一种治疗手段。
在血液病的治疗中，基因治疗可以实现对肿瘤细胞的杀伤和生长的抑制，从而达到治疗的目的。
例如，目前已经开发出一种针对白血病的基因免疫治疗，将CAR-T细胞注入人体，通过识别并攻击白血病细胞，从而达到治疗的效果。
2. 细胞治疗细胞治疗是将病人自己体内的干细胞或造血干细胞经过培养、扩增等技术处理后，再经过输注等方式，达到治疗的目的的一种方法。
在血液病治疗中，细胞治疗也是一种有效的治疗手段。
骨髓细胞形态学在诊断血液病中的应用价值及新进展
骨髓细胞形态学在诊断血液病中的应用价值及新进展骨髓细胞形态学检查是一门具有百年悠久历史的血液病诊断技术，一百多年来一直都是使用瑞氏及其先驱者发明的涂片染色法，它是血液病理学重要的诊断工具。
因为其制片的过程容易简单，能快速的对样品做出初步检查，即使在血液病检测手段与日俱进的今天，传统的骨髓细胞形态学检查仍然具有独一无二的魅力，它为现代血液病理诊断的发展奠定了基础。
本文通过骨髓细胞形态学检查对其本身的不断完善进步，并结合其他现代血液病诊断技术，在MICM方法上对各种白血病的发病机理的研究现状作一综述。
一、血细胞的生成，发育规律及正常形态学特征×109/L；④血小板减少，多在×109/L。
【骨髓象】慢性型再障的骨髓中可出现一些局灶性代偿性造血灶，故不同部位骨髓穿刺的结果可有一定的差异。
①骨髓增生程度多为增生减低；②巨核细胞、粒细胞、红细胞三系细胞均不同程度减少。
巨核细胞减少常早期就出现，治疗有效时恢复也最慢，故在诊断上的意义较大。
③淋巴细胞相对增多。
如穿刺部位为代偿性造血灶，则骨髓象呈增生活跃，粒系百分率可呈正常或减低，红系细胞百分率增高，但巨核细胞仍显示减少或明显减少。
×109/L之间，也有白血病计数在正常范围或减少。
白细胞分类计数可见一定数量的白血病性原始或幼稚细胞，所占百分率不定。
×109/L,多数在×109/L。
分类计数粒细胞比例增高，可见各阶段粒细胞，尤以中性晚幼粒细胞为多见，原粒细胞和早幼粒细胞<10%。
嗜碱性粒细胞增高为慢性的特征之一；③血小板早期增多或正常，疾病加速期及急变期，血小板可进行性下降。
【骨髓象】①骨髓增生极度活跃；②粒细胞系显著增生，原粒和早幼粒细胞<10%，嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞也增多；③幼红细胞增生受抑制；④巨核细胞早期增多，晚期减少。
3、急性骨髓纤维化急性骨髓纤维化临床进展迅速，脏器浸润轻，外周血常呈全血细胞减少，无泪滴状红细胞，但伴少量原始细胞；骨髓穿刺常呈干抽，骨髓象增生低下，可伴少量原始细胞。
常见血液病的实验室检查及应用
骨髓检查的临床应用首都医科大学北京安贞医院左大鹏骨髓细胞学检查是一种特殊的临床检验，是血液细胞形态学研究和血液病诊断的主要方法，其重点是发现血液细胞量和质的异常，并结合临床和血象等资料所分析的结果，作出明确的诊断。
骨髓细胞学检查主要用于（适应证）：1 、诊断造血系统疾病；2 、诊断某些感染性疾患；3 、协助诊断恶性肿瘤骨髓转移；4 、协助诊断某些代谢障碍性疾病，如 Niemann-Pick 病（可在骨髓中找到其特殊细胞）。
一、血细胞发育过程中形态演变的一般规律所有血细胞均起源于骨髓中的多能造血干细胞，在骨髓微环境和各种造血因子作用下发育成不同类型的细胞。
血细胞在骨髓中的发育成熟一般要经过原始、幼稚和成熟三个阶段。
红细胞系统、粒细胞系统又可人为地分为原始细胞、早幼细胞、中幼细胞和晚幼细胞四个具体阶段。
淋巴细胞和单核细胞只分为原始、幼稚和成熟三个阶段。
巨核细胞在发育中的阶段命名为原始巨核、幼稚巨核、颗粒巨核和产板巨核。
PPT4 显示的是血细胞发育示意图，可以看出造血功能干细胞最后发育成红细胞、粒细胞（包括中性、嗜酸、嗜碱）、单核细胞、血小板、淋巴细胞。
PPT5 用图表显示骨髓血细胞的发育规律（从原始 - 幼稚 - 成熟过程）。
PPT7 显示的是红细胞发育中各阶段形态变化规律示意图。
可以看到从原红到早幼红到中幼红到晚幼红、网织红到成熟红细胞，细胞体的变化，核的变化，核仁及染色体的变化。
二、血细胞的正常形态学特点（一）红细胞系统各阶段细胞形态学特点1 、原始红细胞直径 15- 20um ，多为圆形或微椭圆形边缘常有瘤状突起，胞核多呈圆形，约占细胞直径的 4/5 ，位于中央或稍偏于一侧，染色质为粗颗粒状，核仁 1-2 个，胞浆量少呈油墨蓝色，胞浆中不含颗粒。
PPT8 的图片显示的是原始红细胞。
2 、早幼红细胞直径 10—18um ，细胞形态与原红相同，胞核变小，核染色质开始聚集，常出现部分的浓染区域，核仁模糊或消失，胞浆量增多，呈深蓝色，局部可有少量血红蛋白产生。
血液病进行血液形态学检验、骨髓活检、免疫分型和细胞遗传学联合
是指将骨髓液抽 吸出 ， 涂成 薄片染 色 （ 过 氧化 物酶染 色 、 特 异
性脂酶染色 、 非特 异性 脂酶 染色 、 糖 原染 色 、 铁染 色 等 ） ， 之 后 在显微镜下进行细胞分类 和形态观察 ， 进而对疾病进行进一步 诊断 。对 血液病中的贫血 、 淋 巴系统 白血病 、 骨髓 增生异 常
现报道如下。
１ 临 床 资 料
综合征 、 骨髓纤维化应用骨髓活检诊断率较高 ， 达３ ３ ． ０ ％。 ３ ． ３ 免疫 分型 正常血细胞从多能干细胞分化 、 发育 、 成熟 为
功能细胞过程中 ， 细胞膜 、 细胞浆或胞核抗原 出现 、 表 达增 多与 减少 ， 甚至消失 ， 与血细胞分化发育阶段密切相关 ， 且表现 出与 细胞 系列及其分化程度相关 的特异 性 Ｊ 。白血病是 造血 系统
血液病是原发于造血 系统 的疾病 ， 或影响造血系统伴发血 液异常改变 ， 以贫血 、 出血 、 发热 为特 征… 。引起 血液 病 的 因
等 Ｊ ， 尤其对再生障碍性贫血 、 骨髓异常增生症等血液病诊 断意 义重大。形态学检验和骨髓活检联合应用可有效提高血液疾病 的诊断率 ， 同样对部分疾病 治疗 方案的选择和预后评 估有重要
・
１ ６ ８・
临床 合 理 用 药 ２ ０ １ ６年 １ １月第 ９卷 第 １ １期 中
Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｊ ｏ ｆ Ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ Ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｄ ｒ ｕ ｇ Ｕ ｓ ｅ ， Ｎ ｏ ｖ ｅ ｍ ｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ６， Ｖ ｏ １ ． ９ Ｎ ｏ ． １ １ Ｂ
的指导作用。本研究结果显示 ， 再生障碍性贫 血、 骨髓增生 异常
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1
白血病染色体改变基本特征
• 获得性 • 克隆性 异常克隆：至 少两个细胞有同样的染
色体增加或结构重排，或者至少三个细胞有同 一染色体丢失
• 原发性 见于病程早期；和发病相关；常为单
一异常
• 继发性 见于病程中；与疾病恶化有关；多为
复杂异常
• 平衡型 染色体结构重排（易位或倒位） • 不平衡型 染色体整条或部分的增加或丢失
❖ 原发性核型异常分两大类 ➢ 和FAB亚型相关，特异性染色体重排 ➢ 和FAB亚型 不相关，大多为数目异常
❖ 初诊时核型异常CR时消失，复发时再现 ❖ 部分病例由于核型演化产生继发性异常
9
AML的WHO分型
伴再现性遗传学异常的AML 伴多系发育异常的AML 治疗相关性白血病 不另做分型的AML
18
畸变类型 t(16;21) (p11;q22)
频率 <1%
FAB M4 或M5
伴随的主要特征
病情进展快，CR 率低，复发率高， 分子水平上有 FUS/ERG融合基因
FAB
伴随的主要特征
M3(90100%)
异常早幼粒细胞增生， Auer小体柴捆状，DIC， 分子水平上PML/RAR融 合基因，ATRA有效
PLZF/RAR ATRA无效
NuMA/ RAR
NPM/ RAR
STAT5b/RAR
14
AML-M3 t(15;17) 15
畸变类型
inv(16)(p13q22) t(16;16)(p13;q22) del(16)(q22) ins(16)(q22p13.1 p13.3) 额外异常:+8, +22
+18（5%）
B细胞慢淋
14q+ 25%染色体异常CLL
t(11;14)(q13;q32)
t(14;19)(q32;q13)
结构异常
del(13q) 20%染色体异常CLL
i(17q)
6q-
T细胞慢淋 inv(14)(q11q32)
8
（三）急非淋白血病的染色体改变
❖ 染色体异常检出率50%-80%，最高达93%，检出率高低主 要与方法学有关，其次与地理环境及种族的差异有关
频率 FAB
伴随的主要特征
8%
ANLL(2 5%M4)
M4Eo( 100%)
骨髓嗜酸细胞异常，数目增加 （>5%)或形态异常（嗜酸细胞中混 杂有大而不规则颗粒，PAS和NCE均 强阳性，CR率接近100%，MS>5年， 治疗不强时可发生脑白,分子水平上 有CBFB/MYH11融合基因
16
畸变类型
t/del(11q23)
t(6;11)(q27;q23) t(9;11)(p22;q23) t(10;11)(p12;q23) t(11;17)(q23;q21) t(11;19)(q23;p13.1)
频率 FAB
6%成 M5 人AML (M4)
伴随的主要特征
特殊的年龄分布：儿童AL50%， 婴儿AL70%
高白细胞计数、髓外浸润（肝 脾肿大）和皮肤受累多见，预 后不良
色颗粒; 4.白细胞胞浆中有空泡 5.骨髓嗜酸细胞增多; 6.CD34、HLA-DR、CD13、CD33、 CD19和CD56阳性；7.CR率90%， MS 52个月。
12
AML-M2 t(8;21)(q22;q22),-Y 13
畸变类型
频率
t(15;17)(q22;q21) 10%
t(11;17)(q23;q21) t(11;17)(q13;q21) t(5;17)(q32;q21) t(17;17)(q11;q21) 额外异常 +8最常见
分子水平上MLL基因和来自伙 伴染色体的基因融合如t(9;11) 形成MLL/AF9融合基因
17
畸变类型
t(7;11)(p15;p15)
频率 FAB
伴随的主要特征
<1% M2(M 4、 M5)
Auer小体易见，NAP， CR率72.7%,MS 13个月， 主要见于东方人种
分子水平上有 NUP98/HOXA9融合基因
2
四、各型白血病的核型异常
（一）CML （二）CLL （三）AML （四）ALL
其他
3
（一）慢性粒细胞白血病的染色体改变
1. Ph染色体的发现及其性质
• 1960年 Nowell在美国Philadelphia所发现 • 1973年 Rowley用Q/G带证实t(9;22)(q34;q11) • 1984年 Prakash用高分辩定在9q34.1和
22q11.21
• 分子学研究发现该易位导致bcr/abl融合 →
8.5Kb bcr/abl融合mRNA→ P210
• Ph染色体系获得性畸变 • Ph染色体见于粒、红、巨核系细胞以及B细胞，
提示CML为起源于多能干细胞的克隆性疾病。
4
CML t(9;22)(q34;q11)
5
慢粒慢性期的染色体改变
30%
t(9;22), -Y;+8;+Ph
46,t(9;22)
70%
6
慢粒急变期的染色体改变及其意义
20%保持46,t(9;22)不变 80%除t(9;22)外出现额外异常，依次为2Ph、+8、i(17q)、
+19、+21等 少数病例Ph染色体ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ和t(8;21)、t(15;17)、inv(16)或inv(3)
同时存在 额外异常比临床血液学急变征象早出现2-4个月 无额外异常组 80%对治疗有反应，MS 5.7个月
部分细胞有额外异常组 50%对治疗有反应，MS 4.9个月 全部细胞有额外异常组成 30%对治疗有反应,MS 2.5个月
7
（二）慢淋的染色体变化
+12 1/3染色体异常CLL
数目异常
+3（6%）
10
伴再现性遗传学异常的AML
（见于30％的AML）
伴t(8;21)(q22;q22)(AML1/ETO)的AML 伴t(15;17)(q22;q21)(PML/RAR)的APL 伴inv(16)(p13q22)(CBF /MYH11)和骨髓嗜
酸粒细胞异常的AML 伴11q23(MLL)重排的AML
11
一、ANLL和FAB亚型相关的特异性染色体重排
畸变类型 t(8;21)(q22;q22)
频率 15%
额外异常:性染色体 丢失(73%), 9q(11%), 7q-或易位
(10%), +8 (7.5%) 分子水平上有AML/ ETO融合基因
FAB M2 (M4, M1)
伴随的主要特征
1.MPO强阳性; 2.显著Auer小体; 3.成熟粒细胞胞浆中有橙红