化学残留物测定法

化学残留物测定法

3201 苯酚（石炭酸）残留量测定法

1 对照品溶液的制备

取苯酚（精制品，见附注4）适量，精密称定加水制成每1.0ml 含0.1mg 的溶液，即得。

2 供试品溶液的制备

取供试品1.0ml ，置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 3 测定法

分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各5.0ml ，置100ml 量瓶中，加水30ml ，分别加醋酸钠试液 2.0ml ，对硝基苯铵、亚硝酸钠混合试液 1.0ml ，混合，再加碳酸钠试液2.0ml ，加水至刻度，充分摇匀，放置10分钟后，按紫外-可见分光光度法（《中国兽药典》一部附录）在550nm 的波长处测定吸光度，计算即得。

苯酚含量%（g/ml ）=0.005×

对照品溶液的吸收度

供试品溶液的吸收度×100% 附注：

1 碳酸钠试液的配制 取碳酸钠10.5g ，加水100ml ，使溶解。

2 对硝基苯胺、亚硝酸钠混合试液的配制

2.1 取对硝基苯胺1.5g ，加盐酸40ml ，加水至500ml ，加热使溶解。

2.2 取亚硝酸钠10.0g ，加水100ml ，使溶解。

使用时，取2.1中溶液25ml ，加2.2中溶液0.75ml 混合。

3 醋酸钠试液的配制 取醋酸钠25.0g ，加水溶解成100ml ，即得。

4 苯酚精制品的制备及其含量标定

4.1 制备 取苯酚，直火蒸馏，弃去初馏液，接收181~182℃的馏分。

4.2 含量标定 取本品约0.5g ，精密称定，置500ml 量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml ，置碘瓶中，精密加溴滴定液（0.1mol/L ）25ml ，再加盐酸

5.0ml ，立即密塞，振摇30分钟，静置15分钟后，注意微开瓶

塞，加碘化钾试液 6.0ml，立即密塞，充分振摇后，加氯仿 1.0ml，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正，即得。每1.0ml溴滴定液（0.1mol/L）相当于1.569mg的苯酚。

3202 汞类防腐剂残留量测定法

1 对照品溶液的制备

取置硫酸干燥器中干燥至恒重的二氧化汞0.1354g，精密称定置100ml量瓶中，加0.5mol/L硫酸液使溶解并稀释至刻度，摇匀，即为对照汞贮备液。

临用前精密量取标准汞贮备液5.0ml置100ml量瓶中，用0.5mol/L硫酸液稀释至刻度，摇匀，即得为1.0ml相当于50 μg汞的对照汞溶液。

2 测定法

2.1 油乳剂疫苗消化用经标定的1.0ml注射器（附15cm长针头）正确量取摇匀的被检品1.0ml，置25ml凯氏烧瓶（瓶口加小漏斗）底，加硫酸

3.0ml、硝酸溶液（1→2）0.5ml，小心加热，待泡沸停止，稍冷，加硝酸溶液（1→2）0.5~1.0ml，再加热消化，如此反复加硝酸溶液（1→2）0.5~1.0ml消化，加热达白炽化，继续加热15分钟后，溶液与上次加热后的颜色无改变为止，置冷（溶液应无色），加水20ml，置冷至室温，即得。

2.2 其他疫苗消化精密量取摇匀的被检品（约相当于汞25~50 μg）置25ml 凯氏烧瓶（瓶口加小漏斗）中，加硫酸2.0ml、硝酸溶液（1→2）0.5ml，加热沸腾15分钟，如果溶液颜色变深，再加硝酸溶液（1→2）0.5ml~1.0ml，加热沸腾15分钟，置冷，加水20ml，置冷至室温，即得。

2.3 滴定将上述消化液由凯氏烧瓶转移置125ml分液漏斗中，用水分多次洗涤凯氏烧瓶，使总体积为80ml，加20%盐酸羟胺试液5.0ml，摇匀，用0.001 25%双硫腙滴定液滴定，开始时每次滴加

3.0ml左右，以后逐渐减少，至每次0.5ml，最后可减少至0.2ml，每次加入滴定液后，强烈振摇10秒，静置分层，弃去四氯化碳层，继续滴定，直至双硫腙的绿色不变，即为终点。

2.4 对照品滴定精密量取对照品溶液1.0ml（含汞50 μg），置125ml分液

漏斗中，加硫酸2.0ml 、水80ml 、20%盐酸羟胺溶液5.0ml ，用双硫腙滴定液滴定，操作同2.3。

2.5 计算

汞类含量%（g/ml ）=对照品滴定毫升数供试品滴定毫升数×供试品毫升数

000101.0×100% 以上计算公式用于非油乳剂疫苗，油乳剂疫苗应为上述公式结果再除以0.6。

附注：溶液的配制

1 0.05%双硫腙浓溶液 取双硫腙50mg ，加氯仿100ml 使溶解，即得。本品应置棕色瓶内，再冷暗处保存。

2 0.00125%双硫腙滴定液 取0.05%双硫腙浓溶液2.5ml ，用四氯化碳稀释至100ml ，即得。本液应临用前配制。

3 20%盐酸羟胺试液 取盐酸羟胺1.0g ，加水5.0ml 使溶解，即得。