血液五分类检测系统性能验证方案

血液五分类检测系统性能验证方案

检验科依据CNAS-CL02：《医学实验室质量和能力认可准则》（ISO 15189：2007）对医学实验室检测系统性能评价的相关要求，对Mindray BC-6800、BECKMAN LH750、Sysmex XN-1000全自动血液检测系统进行性能评价，主要从以下几个方面进行：精确度、携带污染率、线性范围、临床可报告范围、准确性、参考范围和正确度等。具体实施方案如下:

1 目的

对泉州市第一医院检验科血液组所有全自动血液检测系统性能进行评价，结果与CLIA’88规定的标准比较，判断仪器的性能是否符合要求。若无CLIA’88规定的标准标准则与EQA比较，判断仪器的性能是否符合要求。

2 原理

2.1精密度评价

采用厂家提供的低、中、高三个水平的新鲜血，连续重复测定10次；批间取高值和低值两个水平的质控品，每天测定1次、连续检测20天；计算项目批内精密度和批间精密度。并与CLIA’88规定的标准批内精密度及批间精密度进行比较，核实是否与符合要求。

2.2 携带污染率评价

含有高浓度分析物的检测系统再测量含有较低浓度分析物时,对较低浓度分析物的影响。

2.3 线性范围评价

参考CLSI EP6-A《定量检测系统线性评价》方案，采用未经过任何处理的病人检验标本，确定某项目检测上限的同时验证其检测上下限范围是否呈线性关系。

2.4 临床可报告范围评价

根据检验项目的最大稀释度，结合分析灵敏度及线性范围上限，可以确定本实验室该检验项目的可报告范围：可报告范围下限即分析灵敏度；可报告范围上限即线性范围上限*最大稀释倍数。

2.5 准确性验证

使用定值全血样本混匀后连续进行5次测定，计算其平均值与靶值相比较。

2.6参考范围验证

选取20例以上体检标本，考虑性别和年龄比例，同批分别检测各项目测定，并参照NCCLS C28文件，检验正态性，计算均值、SD及结果落在正常参考范围的例数与总标本数的比例，即R值，要求95％的检测值在参考范围内为合格;r≥0.9为合格;同时根据实验数据建立实验室自己的参考范围。

2.7正确度验证

评价仪器测量结果与真值的一致程度。使用参加ABC省临检中心的室间质评项目回报结果进行计算。与ABC省医疗机构临床实验室质量管理基本内容和要求(全血细胞计数室间质评评判标准)进行比较，核实是否符合要求。未参加室间质评的仪器采用与参加质控仪器进行比对的方式，要求偏倚在ABC省临检中心的允许误差之内。

3 检测方法

Mindray BC-6800白细胞计数检测方法采用激光散射法，红细胞计数、红细胞比容、血小板计数采用鞘流阻抗法，血红蛋白采用比色法；BECKMAN LH750白细胞计数、红细胞计数、红细胞比容、血小板计数采用检测方法为电阻抗法,血红蛋白采用HiCN 血红蛋白检测法；Sysmex XN1000 白细胞计数检测方法采用流式细胞计数法，红细胞计数、血小板计数采用鞘流DC 检测方法，红细胞比容采用RBC 累积脉冲高度检测法；血红蛋白采用SLS 血红蛋白检测法；平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度三台仪器均采用计算法。 4 方案

4.1精密度评价方案

4.1.1批内精密度：取低、中、高三个水平的新鲜血，连续重复测定10次，收集并保存原始数据。应进行正常的室内质量控制，在控后方可进行检测。所检测所有数据超出3SD 的数据不能超过2个，否则应分析失控原因纠正后重新进行试验，统计数据，计算批内精密度。与判定标准比较，判断验证是否通过。

4.1.2批间精密度：采用ABC 省临检中心提供两个水平的质控品，每天测定1次，连续检测20天，一共收集20个数据。每天应进行正常的室内质量控制，在控后方可进行检测。所检测所有数据超出3SD 的数据不能超过2个否则应分析失控原因纠正后重新进行试验，计算批间精密度，与判定标准比较，判断验证是否通过。 4.1.3判定标准： 4.1.3.1批内精密度

4.1.3.2批间CV(%)≤1/2CLIA ’88临床允许误差。

CLIA ’88中没有的项目，可将δ批内、δ总或批内CV(%)、总CV(%)与EQA 精密度值（以标准差表示；以CV%表示）比较，若试验的精密度小于等于厂商声称精密度值，则验证通过。

4.2携带污染率评价方案

采用高浓度病人标本，连续检测3次，结果记录为H1、H2、H3，再取稀释液检测3次，结果记录为L1、L2、L3。按下式计算携带污染率（%） 携带污染率=

%1003

33

1⨯--L H L L

判断标准：

携带污染率≤1%判定为符合要求。如果超出允许范围，需要对管道进行清洗，如再次测定仍然超出允许范围，需要通知仪器工程师解决。 4.3线性范围评价方案

参照CLSI EP6 文件的要求，选取一份接近预期上限的高值全血样本（H ），分别按100%、80%、60%、40%、20%、10%、0%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定3次，计算均值。将实测值与理论

值作比较（偏离应小于10%），采用线性回归分析，以预期值为X，以按比例稀释的实测均值为Y，得线性方程Y=aX+b，得到a、b及R2值。X和Y分别为自变量和应变量，a为斜率，b为Y轴截距，R2为相关系数的平方，判断其是否线性。

判定标准：

若a在0.95-1.05范围内，R2>0.975，作b与0有无显著性差异的t检验，若P 值>0.05，直线回归方程可接受，可直接判断线性范围在实验已涉及浓度；若a不在0.95-1.05 范围内，a 较大，舍去高值或低值组数据，另作回归统计。直至缩小的分析范围其回归方程中a 和b 的判断符合要求，该范围为线性范围。

4.4临床可报告范围评价方案

取一份高浓度的病人样本（接近最高线性范围）样品，用空白液或厂商推荐的稀释液进行系列稀释，稀释倍数包含厂家推荐最大稀释倍数（或根据临床需要），每个浓度重复测定3次，统计分析各稀释浓度的线性关系，确定最高稀释倍数。

判断标准：

以样品原倍结果作为预期值，将样品进行稀释后得出的结果为检测值,计算各稀释倍数的实测偏倚，实测偏倚应在0.9～1.1范围内（个别项目0.8～1.2为合格）。计算恒定误差（SDr）和比例误差（CVr），一般要求CVr小于1/4CLIA'88规定的最大允许误差。计算平均稀释回收率，平均稀释回收率应在90～110%范围内（个别项目80-120%为合格）。符合该条件的最大稀释度为该项目的最大稀释倍数。

4.5准确性验证

使用定值全血样本混匀后连续进行5次测定，计算其平均值与靶值相比较，要求平均值要求在下表靶值范围内。

判定标准：

表1（Mindray BC-6800、BECKMAN LH750、Sysmex XN-1000)

4.6参考范围验证

选取20例以上体检标本，考虑性别和年龄比例，同批分别检测各项目测定，并参照NCCLS C28文件，检验正态性，计算均值、SD及结果落在正常参考范围的例数与总标本数的比例，即R值，要求95％的检测值在参考范围内为合格。r≥0.9为合格。

4.7正确度验证

本组参加ABC省临检中心室间质评项目，用回报结果计算平均偏倚，从而评价和验证实验室检测结果的正确度。判定依据，当年ABC省医疗机构临床实验室质量管理基本内容和要求(全血细胞计数室间质评评判标准)的临床允许误差。