微生物组性能验证报告

微生物检测系统/方法的分析性能验证一．鉴定/药敏检测系统分析性能验证（一）材料1、检测系统：长沙天地人生物科技有限公司的TDR-1002细菌鉴定及药敏测试仪及耗材等。

2、评价材料（1）细菌鉴定符合率评价材料：1）菌株：大肠埃希菌A TCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853金黄色葡萄球菌A TCC29213、粪肠球菌ATCC292122）肠杆菌科生化试验：LDC、 PD、 MAU、 GLU、 INO、 RHA、 ODC、 IND、 HYS、 ADO、 MEL、 SOR、 URE、VP、 BGA、 MAN、 CEL、 SUC3）非发酵菌科生化试验：ADH、 NIT、 GEL、 DXY、 MAL、 LDC、 CIT、 BGA、 LAC、 MAN、 URE、 ESC、 GLU、SUC、 FRU。

4）微球菌科生化试验：VP 、 ADH、 LAA、 BGA、 TRE、 HIP、 ESC、 AGA、 RIB、 LAC、 AMD、ALP、 BGU、MAN、 RAF。

5）链球菌科生化试验：URE、 NIT、 BGU、 SUC、 MAL、 ADH、 VP 、 BGA、 MNE、 TRE、 NOVO、ALP、 GLU、MAN、 LAC、6）酵母样真菌生化试验：GLU、 GAL、 NAG、 MAL、 RAF、 DXY、 INO、 CEL、 SUC、 MEL、 ADO、AMG、 LAC、TRE、 DUL。

7）奈瑟/嗜血杆菌生化试验NIT、 GLU、 SUC、 ALP、 LAC、 FRU、 BGA、 MAL、 STA。

（2）药敏试验评价材料：1）菌株肠杆菌科：大肠埃希菌ATCC25922；非发酵科：铜绿假单胞菌ATCC27853、微球菌科：金黄色葡萄球菌A TCC29213、链球菌科：粪肠球菌ATCC29212酵母样真菌：近平滑念珠菌A TCC22019奈瑟/嗜血杆菌：流感嗜血杆菌ATCC492472）微球菌科药敏试验3、操作人员：临床检验中心经岗位授权的技术人员。

按照检测系统的检测程序、质量控制程序和维护保养程序等进行操作。

4、验证项目/参数：肠杆菌科鉴定、非发酵科鉴定、微球菌科鉴定、链球菌科鉴定，酵母样真菌鉴定奈瑟/嗜血杆菌鉴定；肠杆菌科药敏测试、非发酵科药敏测试、微球菌科药敏测试、链球菌科药敏测试，酵母样真菌药敏测试，奈瑟/嗜血杆菌药敏测试。

（二）方法1、验证前准备：分析操作人员先熟悉分析方法、仪器和评价方案，对仪器进行常规维护以保证仪器处于良好工作状态。

每周按室内质控要求进行标准菌株分析，要求质控检测结果在控、平稳。

2、鉴定/药敏符合性验证实验：细菌鉴定用标准菌株做为未知标本分别进行上机鉴定和药敏实验，每天检测1次，共检测一周。

验证实验结果与标准菌株的特性是否相符，反应时间是否在规定时间内。

（1）药敏试验：微球菌科的结果用标准菌株MIC进行比较。

金黄色葡萄球菌ATCC29213；链球菌科的结果用标准菌株MIC进行比较。

粪肠球菌ATCC29212；非发酵菌的结果用标准菌株MIC进行比较。

铜绿假单胞菌ATCC27853；肠杆菌科的结果用标准菌株MIC进行比较。

大肠埃希菌ATCC25922；酵母样真菌的结果用标准菌株MIC进行比较。

近平滑念珠菌ATCC22019；流感嗜血杆菌结果用标准菌株MIC进行比较。

流感嗜血杆菌ATCC49247通过仪器质控模式各做10次实验，验证仪器准确度。

（三）分析性能验证标准及判断鉴定/药敏符合率详见附表1，附表2和附表3。

若验证符合率在允许范围内，则视为验证的检测系统符合率符合要求；反之则需寻找原因，解决问题后重新进行验证。

2012年验证全部符合要求。

附表1：长沙天地人公司提供的细菌鉴定/药敏分析系统鉴定符合率验证参数附表2：细菌鉴定/药敏分析系统药敏符合率指标附表3：微生物鉴定/药敏分析系统药敏符合率指标二．A TBExpression鉴定/药敏检测系统分析性能验证（一）材料1、检测系统：法国生物梅里埃公司的ATBExpression鉴定卡及耗材等。

2、评价材料（1）细菌鉴定符合率评价材料：1）菌株：大肠埃希菌A TCC11775、金黄色葡萄球菌A TCC25923、无乳链球菌ATCC12401、多食鞘氨醇杆菌ATCC335656、光滑假丝酵母菌ATCC 646772）革兰氏阴性杆菌生化试验：RHA、NAG、RIB、INO、SAC、MAL、ITA、SUB、MNT、ACE、LAT、ALA、5KG、GL YG、mOBE、SER、MAN、GLU、SAL、MEL、FUC、SOR、ARA、PROP、CAP、V ALT、CIT、HIS、2KG、3OBU、POBE、PRO3）革兰氏阳性球菌生化试验：URE、ADH、ODC、ESC、GLU、FRU、MNE、MAL、LAC、TRE、MAN、RAF、RIB、CEL、NIT、VP、βGAL、ArgA、PAL、PyrA、NOVO、SAC、NAG、TUR、ARA、βGUR 4）肠杆菌生化试验：ODC、ADH、LDC、URE、LARL、GAT、5KG、LIP、RP、ßGLU、MAN、MAL、ADO、PLE、ßGUR、MNT、IND、ßNAG、ßGAL、GLU、SAC、LARA、DARL、αGLU、αGAL、TRE、RHA、INO、CEL、SOR、αMAL、AspA5）酵母菌同化试验：GAL、ACT、SAC、NAG、LAT、ARA、CEL、RAF、MAL、TRE、2KG、MDG、MAN、LAC、INO、SOR、XYL、RIB、GL Y、RHA、PLE、ERY、MEL6）链球菌生化试验：ADH、ßGLU、ßGAR、ßGUR、ßGAL、PAL、RIB、MAN、SOR、LAC、TRE、RAF、SAC、LARA、DARL、CDEX、VP、APPA、ßGAL、PyrA、ßNAG、GTA、HIP、GL YG、PUL、MAL、MEL、MLZ、MBDG、TAG、ßMAN、URE（2）药敏试验评价材料：1）菌株铜绿假单胞菌ATCC27853、大肠埃希菌ATCC25922、肺炎链球菌ATCC 49619、金黄色葡萄球菌ATCC29213、粪肠球菌ATCC29212、新型隐球菌2）革兰氏阴性杆菌药敏试验阿莫西林、阿莫西林+克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林+三唑巴坦、替卡西林、替卡西林+克拉维酸、头孢噻吩、头孢西丁、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、头孢呋辛、美诺培南、亚胺培南、复方新诺明、妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、奈替米星、环丙沙星3）革兰氏阳性球菌药敏试验青霉素G、苯唑西林、庆大霉素、左氧氟沙星、诺氟沙星、红霉素、克林霉素、喹奴普叮/达福普叮、米诺环素、万古霉素、四环素、利福平、呋喃妥因、复方新诺明、呋西地酸、替考拉宁4）肠球菌药敏试验青霉素G、苄青霉素、左氧氟沙星、红霉素、环丙沙星、四环素、氯霉素、喹奴普叮/达福普叮、万古霉素、替考拉宁、链霉素、高浓度庆大霉素（联合试验）、高浓度链霉素（联合试验）、利福平、呋喃妥因5）假单胞菌药和其他非发酵菌敏试验氨苄西林-舒巴坦、替卡西林、替卡西林-克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林+他唑巴坦、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、多粘菌素E、复方新诺明6）肺炎链球菌和其他链球菌药敏试验青霉素、阿莫西林、头孢噻肟、红霉素、喹奴普汀-达福普汀、克林霉素、四环素、左氟沙星、氯霉素、万古霉素、复方新诺明7）真菌药敏试验氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑3、操作人员：临床检验中心经岗位授权的技术人员。

按照检测系统的检测程序、质量控制程序和维护保养程序等进行操作。

4、验证项目/参数：ID32GN革兰氏阴性杆菌鉴定、ID32STAPH革兰氏阳性球菌鉴定、ID32C酵母菌鉴定、RAPID ID32STREP链球菌鉴定、ID32E肠杆菌科细菌鉴定、A TB G-5革兰氏阴性杆菌药敏、ATB PSE5假单胞菌和其他非发酵菌药敏、ATB STAPH5革兰氏阳性球菌药敏、ATB FUNGUS3真菌药敏试验、A TB STREP5链球菌药敏、ATB ENTEROC5肠球菌药敏。

（二）方法1、验证前准备：分析操作人员先熟悉分析方法、仪器和评价方案，对仪器进行常规维护以保证仪器处于良好工作状态。

每周按室内质控要求进行标准菌株分析，要求质控检测结果在控、平稳。

2、鉴定/药敏符合性验证实验：细菌鉴定用标准菌株做为未知标本分别进行上机鉴定和药敏实验，每天检测1次，共检测一周。

验证实验结果与标准菌株的特性是否相符，反应时间是否在规定时间内。

（1）阳性球菌药敏试验：ATB卡的结果用标准菌株进行比较。

金黄色葡萄球菌A TCC29213，肺炎链球菌ATCC 49619，粪肠球菌A TCC29212通过仪器内置质控模式各做10次实验，验证仪器正确度。

（2）阴性杆菌菌药敏试验：铜绿假单胞菌ATCC27853、大肠埃希菌ATCC25922通过仪器质控模式各做10次实验，验证仪器准确度。

（3）真菌药敏试验新型隐球菌通过仪器质控模式各做10次实验，验证仪器准确度。

（三）分析性能验证标准及判断鉴定/药敏符合率详见附表4和附表5。

若验证符合率在允许范围内，则视为验证的检测系统符合率符合要求；反之则需寻找原因，解决问题后重新进行验证。

2012年验证全部符合要求。

附表4：梅里埃制造商提供的微生物鉴定/药敏分析系统鉴定符合率验证参数附表5：微生物鉴定/药敏分析系统药敏符合率指标三）血培养仪分析性能验证（一）材料1、检测系统：美国BD公司的BacT-9050血培养仪2、检出阳性符合率评价材料：大肠埃希菌A TCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎链球菌ATCC49619、流感嗜血杆菌ATCC49247、粪肠球菌A TCC29212、白色念珠菌10231、产酸克雷伯700324、近平滑念珠菌22019.3、操作人员：临床检验中心经授权的技术人员。

按照各个检测系统的检测程序、质量控制程序和维护保养程序等进行操作。

4、验证项目：阳性报警时间及检出符合率（二）方法1、验证前准备：分析操作人员先熟悉分析方法、仪器和评价方案，对仪器进行常规维护以保证仪器处于良好状态。

2、校准：使用配备校准棒对将使用的质控孔进行校准。

3、符合性验证实验：选取标准菌株注入到血培养瓶中，放入仪器内培养，查看在规定时间内是否培养出阳性结果。

（三）分析性能验证标准及判定若仪器读出的值在制造商提供的允许范围内，则视为验证的检测系统符合率符合要求；反之则需寻找原因，解决问题后重新进行验证。