总磷

化验室化验指导

一、总磷

一、总磷标准曲线的绘制

1、仪器：UV紫外风光光度计

2、试剂：

（1）（1+1）硫酸：用量筒量取200ml的蒸馏水导入大烧杯，再取200ml的浓硫酸缓缓的加入此蒸馏水中，并不断用用玻璃棒搅拌。放凉后存入试剂瓶中。

注意：硫酸遇水放热，小心烫伤，试剂放量要有专人看管或用封口膜封住杯口，并加以标注试剂名称。如果大量溅到皮肤上要迅速用抹布擦掉硫酸，再用大量的肥皂水冲洗。

（2）10%的抗坏血酸：溶解10g抗坏血酸于水中，并用容量瓶稀释至100ml。贮存在棕色试剂瓶中。

注意：试剂要存放在4℃的冰箱里。，若发现颜色变黄，则弃之重配。

（3）钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵于100ml水中。溶解0.35g酒石酸锑氧钾于100ml水中。在不断搅拌下将钼酸铵溶液徐徐加到300ml(1+1)硫酸中，加酒石酸锑氧钾溶液并且混合均匀。储存在棕色的试剂瓶中。

注意：试剂要存放在4℃的冰箱里。

（4）磷酸盐储备液：将优级纯磷酸二氢钾于110℃干燥2h，在干燥器中放冷，称取0.2197g溶于水中，移入1000ml的容量瓶中。加（1+1）的浓硫酸5ml，用水稀释至标线。此溶液每ml含50ug磷。

（5）磷酸盐标准液：吸取10 ml磷酸盐贮备液于250ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含2ug磷，临用时现配。

3、校准标准曲线

取7支50ml具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、0.5、1、3、5、10、15ml，加水至50ml。其浓度分别为0、2、6、10、20、30ug。

①显色：向比色管中加入1ml10%抗坏血酸溶液，混匀。30s后加入2ml 钼酸盐溶液充分摇匀，放置15ml。

②测量：用10ml比色皿，于700nm波长处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度。

③绘制标准曲线。

二、总磷的测定

（一）原理

在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生成磷钼杂多酸，被还原剂抗坏血酸还原，则变成蓝色络合物，通常称磷钼蓝。

（二）步骤

1、吸取混匀水样2ml 于50ml 比色管中，加水至50ml 刻度线。

2、向比色管中加入1ml10%抗坏血酸溶液，混匀。30s 后加入2ml 钼酸盐溶液充分摇匀，放置15min 。

3、用10mm 比色皿，于700nm 波长处，以零浓度 溶液为参比，测量吸光度。

（三）计算：

磷酸盐（P ，mg/L ）v

m

式中：m----由标准曲线查的磷量（ug ）

V-----水样体积（ml ） 三、总磷的注意事项：

1、总磷的标准曲线最好做到0.999以上；

2、如果判定所测出水浓度过低导致化验不出数据的话，可以适当的增加取样体积，例如，出水，取水4ml 。但是一定要记住在计算结果的时候，体积也要除以4.

3、操作玻璃器皿可用（1+5）盐酸浸泡2h ，或用不含磷的洗涤剂刷洗。

4、比色皿用过之后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附的鉬蓝有色物。