ATP生物发光检测方法
ATP荧光检测仪使用说明解析
ATP荧光检测仪使用说明解析ATP荧光检测仪是一种用于快速检测水、食品、医疗设备、医疗器械、表面清洁、消毒和环境卫生等领域中生物负载和卫生问题的仪器。
它可以通过检测和测量样品中存在的三磷酸腺苷(ATP)的浓度来判断样品的卫生状况，从而评估清洁程度和卫生质量。
ATP荧光检测仪的工作原理是基于生物发光技术。
ATP是一种生物能量分子，存在于所有活细胞中。
ATP荧光检测仪使用酶(luciferase)和底物(d-luciferin)反应，产生可见光的生物发光，其强度正比于样品中的ATP浓度。
通过荧光光谱仪检测到的荧光强度，可以对样品进行定量分析。
在使用ATP荧光检测仪之前，首先需要准备样品收集器。
样品收集器是存储待测物的载体，可以是刷子、海绵或者其他合适的材料。
收集器需要提前清洗和消毒，确保样品不受污染。
开始检测之前，需要打开ATP荧光检测仪，并将其置于一个干净的工作台上。
仪器通常配备了一个显示屏，用于显示检测结果和设置参数。
接下来，将准备好的样品收集器放入一个干净的容器中，加入适量的溶液，使样品溶解。
然后，将样品收集器插入ATP荧光检测仪的检测槽中，并关闭检测槽的盖子。
确保检测槽紧密封闭，以防止外部光线的干扰。
然后，在仪器上选择适当的测试参数和荧光信号积分时间。
一般来说，积分时间越长，检测结果的准确性越高。
设置好参数后，点击开始测试按钮，并等待一段时间，以获取稳定的荧光信号。
测试完成后，仪器将显示荧光信号的数值。
这个数值表示样品中的ATP浓度，可以根据预设的标准或者参考值对结果进行评估。
一般来说，ATP浓度越高，样品的卫生状况越差。
在使用完ATP荧光检测仪之后，要及时清洁检测槽和样品收集器，并储存起来。
清洗过程可以使用水和适量的清洁剂进行，确保仪器的可靠性和使用寿命。
总结起来，ATP荧光检测仪是一种基于生物发光技术的仪器，用于快速检测样品的卫生状况。
使用时需要准备好样品收集器，将样品收集器插入检测槽中，并设置适当的参数开始测试。
atp检测原理
atp检测原理ATP（adenosine triphosphate）是一种细胞能量的代谢物质，在生物体内广泛存在，并广泛应用于快速检测微生物和有机物残留的方法中。
ATP检测原理是基于生物发光技术的一种快速生物检测方法，主要用于检测和评估样品中的微生物污染程度和卫生状况。
一、ATP检测的基本原理ATP检测原理是依据微生物分解ATP过程中产生的光反应进行的。
ATP分解产生的光是一种有规律的化学反应，可以通过光反应仪器测量和记录。
这种检测方法具有灵敏度高、实时性强、结果准确等特点。
二、ATP检测的步骤和过程ATP检测主要包括样品采集、提取、发光反应和结果判定几个步骤。
1. 样品采集：首先，需要从被测物表面、水样、土壤或其他样品中采集一定量的样品，保证样品的代表性。
2. 提取：样品采集后，将样品与盖上发光酶的提取液充分混合并接触一定时间，使ATP分子和发光酶发生反应。
提取液中的酶能够分解样品中的细胞壁和膜，释放出其中的ATP。
3. 发光反应：将提取液中经过提取的ATP样品与发光剂混合，在一定的反应条件下，ATP和发光剂反应产生光。
光的强度与样品中ATP浓度成正比，通过发光计测量光的强度，可以得出样品中ATP含量。
4. 结果判定：根据测量结果和预先设定的阈值，判断样品中的ATP 含量是否超过了规定的标准限值。
如果超过了阈值，说明样品中存在微生物污染。
三、ATP检测的应用领域ATP检测方法在许多领域都得到广泛应用，包括食品安全、水质监测、环境卫生等。
1. 食品安全：ATP检测可以用于食品卫生检测，通过检测食品表面的ATP含量，判断食品是否卫生合格。
2. 水质监测：ATP检测可以用于水质监测，通过检测水样中的ATP 含量，评估水质是否符合标准。
3. 环境卫生：ATP检测也可以用于环境卫生监测，通过检测污染区域的表面或空气中的ATP含量，评估卫生状况和污染程度。
四、ATP检测的优势和局限性ATP检测方法具有许多优势，如操作简便、快速、高灵敏度和实时性强等。
ATP生物发光检测方法
ATP生物发光技术以生物体内的ATP作为检测 对象，不仅包括细菌（大肠杆菌，沙门氏菌， 志贺氏菌等），也包括体细胞在内的食品残 渣等食品污染物，因此适合在食品卫生检测 领域对卫生状况进行快速检测。 ATP生物发光检测方法具有检测速度快、成本 低、易于操作等特点
-
检测原理
• ATP即三磷酸腺苷，是广泛存在于生物体内的一种能量物
-
检测仪器
• 结构原理 • 主要有三部分：自动进样单元、光电转换
单元和信号采集处理及控制单元
-
• 其中，自动进样单元包括三套蠕动泵 。根据测试需要，
蠕动泵在控制单元控制下，向光电转换单元中的样品池加 入对应反应试剂。光电转换单元包括检测样品池和光电转在暗盒中。光电转换器件将反应释放荧光转化为电信号， 由信号采集处理单元采集并处理，并对测试结果进行实时 显示和存储。
-
• 图中各响应曲线400 s内的测量值进行积分，作为各浓度
样品的输出信号。输出信号与浓度的关系如图5所示。由 图可以看出，输出信号随浓度增加而增加，且有明显梯度， 两者的线性相关系数达到0.986。这一结果说明本检测系 统可以对ATP浓度进行快速检测。由于细菌细胞中所含 ATP含量基本一致，因此，本检测仪可实现对细菌总数的 现场快速检测。
放荧光强度的时间响应曲线。
• 本设计的针对细菌总数的检测仪具有检测速度快、
自动化程度高、操作简单、小型便携等特点，在 口岸、卫生监管部门、食品生产部门等对产品、 环境等的卫生状况进行现场快速检测领域具有很 好的应用前景。
-
-
• 实验选择标准ATP样品作为检测对象，浓度
范围为10-6～10-14mol／L，实验中所用荧 光素及荧光素酶购自美国普洛麦格公司。 实验采用联机测量方式，将本检测仪与计 算机通过。RS232接口相连接，仪表信号采 集单元采集荧光信号后直接上传至计算机 并将测试结果实时显示。测量结果如图4所 示。
生物学发光检测法(ATP)解析
权威机构研究了1000个以上的样品，这种只需十几秒就能完
成检测的快速检测法所得实验结果90%以上与24-48小时标 准细菌培养法/平皿法所得结果一致 使细菌检查的工作量大幅度减轻，实现卫生监控的简捷化、 效率化，但只能用于细菌的定量分析，定性分析可用常规方 法进行培养检测。 应用于HACCP的关键环节监测，方便有效。
[INSERT AND DETECT]
将检测管放入ATP荧光检 测仪中，盖上盖子，倒 计 时开始并检测。
ATP检测反应原理
D-虫荧光素 荧光素酶 O2+Mg2+
氧化荧光素 PPi+AMP
AT P
荧 光 光 度 计 测 量
光（RLU ）
植物 微生物
细胞 数量
现场ATP检测的意义
ATP检测技术实验结果准确可靠，值得信赖。美国多个专业
当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些外资、
合资企业用于自检 2002年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCP实施 指南，鼓励食品加工企业引入ATP检测技术 2005年3月卫生部新出台《卫生监督机构建设指导意 见》，要求省、市、地配置
什么是ATP
ATP——三磷酸腺苷 【adenosine triphosphate， C10H16N5P3O13】存在于所有 生物体中，在细胞内主要作用 是提供能量 通过检测ATP ，可以间接地 证明生物体的存在
生物学发光检测法（ATP）
• 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利 用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺 苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的 ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细 菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶 可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强 度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样 品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫 生状况
ATP检测方法范文
ATP检测方法范文ATP（Adenosine Triphosphate，腺苷三磷酸）是一种能量分子，在生物体内广泛存在，并代表着生物体的活动水平。
ATP的检测方法主要包括生物发光法、生物酶法和生物传感器法等。
一、生物发光法：生物发光是利用生物体内氧化还原酶系统以及氧化酶或酶反应，在氧气存在的条件下将底物发光。
ATP检测方法中，常用的底物为辅酶或荧光基团（luciferin），通过与ATP反应，生成可发光的物质。
1.生物发光法的原理：ATP酶或荧光基团与氧化剂中的氧产生氧化反应，生成Ox2-（Ox-Dioxetan），然后从氧化剂分子中获取能量，进而引发可见光或发射荧光。
2.生物发光法的操作步骤：（1）制备反应液：包括辅酶AB、荧光素、酶、酶抑制剂等。
（2）加入底物：将待检测的样品加入反应液中。
（3）测量发光值：使用光度计或荧光分光光度计测量样品在特定波长下的发光值，并与标准曲线或标准品对照得到ATP的浓度。
二、生物酶法：生物酶法是通过一些酶与ATP底物发生显色或变色反应，进而进行浓度测定的方法。
1.生物酶法的原理：ATP酶与底物发生反应，生成染色产物，如酚酞或过氧化物。
2.生物酶法的操作步骤：（1）制备反应液：包括酶、底物、辅助试剂等。
（2）加入底物：将待检测的样品加入反应液中。
（3）显色反应：根据底物与酶的反应特性，观察样品的颜色变化，并与标准品对照，得到ATP的浓度。
三、生物传感器法：生物传感器法是一种利用生物分子识别特异性和生物反应性等特点，与传感器相结合实现对ATP检测的方法。
1.生物传感器法的原理：通过将ATP与传感器的生物组分（如酶、抗体、单链DNA）结合，使传感器发生变化，如电位变化、荧光变化等。
2.生物传感器法的操作步骤：（1）构建传感器：将ATP与传感器的生物组分结合，构建传感器。
（2）传感器测定：测定传感器的电位、荧光等变化，与标准品对照，得到ATP的浓度。
综上所述，ATP的检测方法主要包括生物发光法、生物酶法和生物传感器法。
ATP微生物荧光检测参数
CQ-LBY-420 ATP生物荧光检测仪使用说明书一、操作原理CQ-LBY-420 ATP生物荧光检测仪利用生物化学发光技术将不可见的ATP浓度变为可见光输出，从而以定量的结果间接显示微生物数量，数值位于0—9999之间，以相对光单位RLUs表示。
虽然RLU并不是一个实实在在的光强度单位，但它能够为ATP生物化学发光检测提供一种真实的检测方法。
1RLU约等于1fmol的ATP。
RLU读数可以与用户设定的限值范围相比较，提供全面的结果限值，即通过（OK）、警戒（！）或不通过（－）。
二、使用准备2.1 外部结构：机身：1.上盖2.液晶显示屏 6.机器序列号3.按键 7.电池盒上盖内部结构：7.RS232接口8.拭子插口2.2 按键功能：◎开关键OK 确认键S 限值选择键T 时间键* 特殊功能键↑上升键↓下降键以下各个章节中将对按键功能进行详细介绍。
2.3 开机画面：液晶显示屏上部的数字显示具有检测和时间日期双重功能，按时间键T进行切换：限值序号和检测功能是：限值序号 88 限值序号8888↑ 检测上限值8888↓ 检测下限值检测编号888 检测编号时间和日期功能是：88：88 时间88日/18月/8888年 日期显示屏其它标志意义为：记忆记忆标识，闪烁表示存储超过95%，在查阅记忆模式中变亮。
删除？删除记忆确定标识，闪烁提示测试人员是否删除全部测试结果校准校准标识，闪烁表示需要内部校准RLU测量单位，以相对光强度表示OK结果通过！结果警戒－结果不通过系统忙标志电量电池电量不足时显示此标识，严重不足时闪烁上盖标识，闪烁提示上盖没有盖好或提示拔出拭子2.4 安装电池：本机需要两节普通AA电池。
安装电池只需要打开仪器背后的电池盒盖，插入两节电池，正极向上。
正确插入电池以后，仪器将自动开机并进入时钟设置模式。
设定时间和日期参见第四章。
注意：不要颠倒电池的正负极，这可能破坏仪器的电子系统。
提示：为了保证得到较好的结果，请使用品质较好的碱性电池；如果显示低电量请及时更换。
食品微生物快速检测常用方法-ATP生物发光法测菌落总数.
食品营养与检测专业教 学资源库
目录页
一
ATP生物发光法检测原理
二
ATP生物发光法检测过程
—
食品营养与检光法检测原理
一
食品营养与检测专业教 学资源库
ATP存在于包括微生物在内的一切活细胞内，ATP生 物发光法是利用ATP与荧光素酶系统接触时的发光现象 建立起来一种检测方法。 各生长期的微生物均有较恒定水平的ATP含量，微生 物死亡后，ATP将很快被分解掉。因此，提取细菌的 ATP，利用生物发光法测出ATP含量后，即可推算出样 品中的含菌量，ATP浓度与活细胞数密切相关。
︶
— 4—
食品营养与检测专业教 学资源库
— 2—
谢 谢
︶
食品营养与检测专业教学资源库
食品营养与检测专业教学资源库
︵
ATP 生 物 发 光 法 测 菌 落 总 数
操作步骤 指示菌ATP的提取：TCA法和加热煮沸法 ATP的检测： 先用标准ATP试剂作一条标准曲线。测 量得到样品的相对发光值。 测定样品发光值,与标准曲线对比，得到 样品中的ATP含量, ATP含量可以转化为微生 物的浓度。
食品营养与检测专业教 学资源库
试剂
食品营养与检测专业教 学资源库
过渡页
ATP生物发光法检测过程
一
1.设备和试剂
2.操作步骤
食品营养与检测专业教学资源库
︵
ATP 生 物 发 光 法 测 菌 落 总 数
• 设备和试剂 ATP荧光仪：包括样品过滤膜、ATP一生物荧 光反应器、荧光增强及数据处理系统。 试剂：荧光素-荧光酶试剂 、ATP提取液 、标 准ATP试剂
atp效果测试方法
atp效果测试方法ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，主要用于测试细胞的活力和生物分子的活性。
ATP是细胞内能量的一种重要指标，因此测试ATP效果可以反映细胞的活力和生物分子的活性。
下面将介绍ATP效果测试的方法。
一、仪器和试剂ATP效果测试需要用到一些常见的仪器和试剂。
其中，ATP酶试剂盒是必不可少的试剂之一，它可以用于ATP酶的检测。
此外，还需要用到ATP标准品、反应物和缓冲液等试剂。
仪器方面，需要使用荧光光度计或发光光度计等仪器。
二、ATP酶试剂盒的使用ATP酶试剂盒是ATP效果测试的核心试剂之一。
具体使用方法如下：1.制备样品：将待测样品制备好，如细胞、生物分子等。
2.加入试剂：取一定量的ATP酶试剂盒，加入标准品和缓冲液，制备成一定浓度的反应液。
3.加入样品：将制备好的样品加入到反应液中，并混合均匀。
4.测量荧光或发光：将反应液加入到荧光光度计或发光光度计中，测量荧光或发光。
5.计算ATP含量：根据荧光或发光的测量结果，可以计算出样品中的ATP含量。
三、其他相关试验除了ATP酶试剂盒外，还有一些其他相关的试验可以用于ATP效果测试。
例如，ATP酶活性的测定、ATP水解反应的测定等。
这些试验都可以反映出ATP效果的好坏。
四、注意事项在进行ATP效果测试时，需要注意以下几点：1.样品的制备需要严格按照试剂盒的说明书进行，避免样品的影响。
2.反应液的制备需要准确，避免浓度过高或过低。
3.荧光或发光的测量需要准确，避免干扰因素的影响。
4.ATP酶试剂盒的储存需要在-20℃下，避免试剂的失效。
5.实验过程中需要注意安全，避免试剂的误食或误触。
ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，可以用于反映细胞的活力和生物分子的活性。
在实验过程中需要注意各种细节，保证实验的准确性和可靠性。
生物学发光检测法(ATP)
目
CONTENCT
录
• 引言 • ATP发光检测法的基本原理 • ATP发光检测法在生物学研究中的
应用 • ATP发光检测法的实验方法与技术 • ATP发光检测法的数据分析与解读 • ATP发光检测法的发展趋势与挑战
01
引言
目的和背景
研究目的
通过生物学发光检测法（ATP）快速、准确地检测和评估生物样本中 的活性细胞数量及其代谢状态。
ATP纯化
通过离心、过滤或层析等方法 去除提取液中的杂质和干扰物 质，以获得纯净的ATP溶液。
ATP定量
利用标准曲线法或比色法等方 法对提取的ATP进行定量，以 确定其浓度。
发光反应条件优化与信号检测
发光反应条件
优化反应体系中各组分的浓度和比例， 如荧光素、荧光素酶和ATP等，以获 得最佳的发光效果。
• 高通量筛选
适用于高通量药物筛选和细胞毒性评价，提高研究效率。
• 临床应用
可用于评估肿瘤细胞对药物的敏感性、预测疾病预后等， 为个性化医疗提供依据。
• 环境监测
可用于检测水体、土壤等环境中的微生物活性，评估环境 质量及生态毒性。
02
ATP发光检测法的基本原理
ATP与生物发光的关系
ATP（腺苷三磷酸）是生物体内能量传递的重要分子， 广泛存在于所有活细胞中。
生物发光现象与ATP水平密切相关，ATP浓度越高， 发光强度越大。
通过测量生物体内的发光强度，可以间接反映ATP含 量，从而评估细胞的活性、微生物污染程度等。
ATP发光检测法的反应机制
ATP与荧光素酶（Luciferase） 反应，生成氧化荧光素 （Oxyluciferin）并释放能量。
释放的能量激发荧光素 （Luciferin），使其从基态跃 迁到激发态。
ATP生物发光检测方法
优点
• 目前生物荧光反应法被广泛用于食品加工
条件的快速评价和食品中微生物的快速检 测，同时在HACCP管理中也被广泛用于关 键控制点检测，与传统检测方法不同之处 在于几分钟内可获得结果，而且荧光光度 计是便携式的，使用方便，适合现场检测， 不仅可以检测微小的污染物水平，还能检 测食品加工设备及其表面的清洁程度。
-
检测仪器
• 结构原理 • 主要有三部分：自动进样单元、光电转换
单元和中，自动进样单元包括三套蠕动泵 。根据测试需要，
蠕动泵在控制单元控制下，向光电转换单元中的样品池加 入对应反应试剂。光电转换单元包括检测样品池和光电转 换器件。为消除外界光的干扰，整个光电转换单元被密封 在暗盒中。光电转换器件将反应释放荧光转化为电信号， 由信号采集处理单元采集并处理，并对测试结果进行实时 显示和存储。
放荧光强度的时间响应曲线。
• 本设计的针对细菌总数的检测仪具有检测速度快、
自动化程度高、操作简单、小型便携等特点，在 口岸、卫生监管部门、食品生产部门等对产品、 环境等的卫生状况进行现场快速检测领域具有很 好的应用前景。
-
atp生物发光检测方法具有检测速度快成本低易于操作等特点aa22检测原理检测原理atpatp即即三磷酸腺苷三磷酸腺苷是广泛存在于生物体内的一种能量物是广泛存在于生物体内的一种能量物检测检测atpatp含量的一种方法是用含量的一种方法是用荧光光度计法荧光光度计法生物发光是生物发光是活细胞在活细胞在荧光素酶荧光素酶催化下发出的荧光目前使用的荧光素催化下发出的荧光目前使用的荧光素酶来源于北美的萤火虫相对分子质量为酶来源于北美的萤火虫相对分子质量为6200062000的蛋白质的蛋白质萤火虫荧光素酶简称萤火虫荧光素酶简称虫光素酶虫光素酶是一种能将化学能转变为是一种能将化学能转变为光能的活性蛋白质即生物催化剂
生物学发光检测法(ATP)
———
———
———
使用方法----第一步
【SWAB】
1
球管 吸阀 棉拭棒
拭抹表面以获取标本,如需获 得清洗水溶液标本，则将棉拭 子浸入水中3到4秒钟。
棉拭子 检测管
———
使用方法----第二步
[SNAP AND SQUEEZE]
将拭子插入检测管，用拇 指和中指捏住球管，轻挤球管 两次，挤出球管内液体。
2
———
ATP检测技术实验结果准确可靠，值得信赖。美国多个专业 权威机构研究了1000个以上的样品，这种只需十几秒就能完 成检测的快速检测法所得实验结果90%以上与24-48小时标 准细菌培养法/平皿法所得结果一致
使细菌检查的工作量大幅度减轻，实现卫生监控的简捷化、 效率化，但只能用于细菌的定量分析，定性分析可用常规方 法进行培养检测。
通过检测ATP ，可以间接地 证明生物体的存在
———
生物学发光检测法（ATP）
• 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利 用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺 苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的 ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细 菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶 可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强 度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样 品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫 生状况
食品快速检测
生物学发光检测法（ATP）
———
ATP检测技术应用（国外）
20世纪80年代，英国首先研制出便携式ATP检测仪 随后在欧洲、美国、日本展开应用 应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业 检测内容包括微生物和食品残渣
生物学发光检测法(ATP)
生物学发光检测法（ATP）
ATP检测技术应用（国外）
20世纪80年代，英国首先研制出便携式ATP检测仪 随后在欧洲、美国、日本展开应用 应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业 检测内容包括微生物和食品残渣
检测技术应用（国内）
20世纪末，ATP检测技术被引进我国
当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些外资、
合资企业用于自检
2002年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCP实施指南， 鼓励食品加工企业引入ATP检测技术
2005年3月卫生部新出台《卫生监督机构建设指导意见》， 要求省、市、地配置
什么是ATP
ATP——三磷酸腺苷 【adenosine triphosphate， C10H16N5P3O13】存在于所有生物 体中，在细胞内主要作用是提 供能量 通过检测ATP ，可以间接地证 明生物体的存在
生物学发光检测法（ATP）
• 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利 用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺 苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的 ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细 菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶 可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强 度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样 品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫 生状况
[INSERT AND DETECT]
将检测管放入ATP荧光 检测仪中，盖上盖子，倒 计 时开始并检测。
ATP检பைடு நூலகம்反应原理
D-虫荧光素 荧光素酶 O2+Mg2+
氧化荧光素 PPi+AMP
ATP
光（RLU）
植物 微生物
生物学发光检测法(ATP)
生物学发光检测法（ATP）
ATP检测技术应用（国外）
20世纪80年代，英国首先研制出便携式ATP检测仪 随后在欧洲、美国、日本展开应用 应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业 检测内容包括微生物和食品残渣
检测技术应用（国内）
20世纪末，ATP检测技术被引进我国 当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些外资、合资企业用于自检 2002年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCP实施指南，鼓励食品加工企业引入ATP检测技术 2005年3月卫生部新出台《卫生监督机构建设指导意见》，要求省、市、地配置
什么是ATP
ATP——三磷酸腺苷【adenosine triphosphate，C10H16N5P3O13】存在于所有生物体中，在细胞内主要作用是提供能量 通过检测ATP ，可以间接地证明生物体的存在
生物学发光检测法（ATP）
原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫生状况
使用方法----第一步 【SWAB】
拭抹表面以获取标本,如需获得清洗水溶液标本，则将棉拭子浸入水中3到4秒钟。
Байду номын сангаас
1
使用方法----第二步 [SNAP AND SQUEEZE]
将拭子插入检测管，用拇指和中指捏住球管，轻挤球管两次，挤出球管内液体。
2
使用方法----第三步 [INSERT AND DETECT]
ATP荧光检测仪工作原理
ATP荧光检测仪工作原理ATP荧光检测仪是一种借助生物发光反应来检测ATP（Adenosine Triphosphate，腺苷三磷酸）含量的仪器。
ATP是所有生物体中的能量分子，检测ATP含量可以提供与生物体活动密切相关的信息。
下面将详细介绍ATP荧光检测仪的工作原理。
首先，进行样品预处理。
样品预处理包括样品收集以及样品中ATP的提取过程。
收集样品时需要注意避免ATP的降解，因为ATP很容易被各种酶降解。
提取过程通常使用离心来分离ATP。
收集到的样品经过离心后，获得沉淀物，其中含有ATP。
沉淀物可以用缓冲液溶解，以提取ATP。
接下来，进行酶促反应。
酶促反应需要用到两种酶：火鸟酶（Firefly Luciferase）和辅酶A（Coenzyme A）。
火鸟酶是一种荧光素酶，可以催化ATP与D-胆固醇荧光素（D-Luciferin）之间的反应，产生荧光。
辅酶A则是一个辅助剂，可以提供还原酶的作用。
在酶促反应中，ATP会与D-Luciferin和辅酶A反应，生成二磷酸腺苷（ADP）、Luciferyl-腺苷二磷酸（Luciferyl-ADP）和还原辅酶A。
其中，Luciferyl-ADP会进一步与火鸟酶反应，生成Luciferin和荧光。
最后，进行荧光检测。
荧光检测是通过荧光检测仪来实现的。
荧光检测仪通常是由光源、滤光片、光电倍增管和数据处理系统组成。
荧光检测仪首先会提供一个特定波长的激发光源，激发样品中的荧光素。
滤光片可以选择通过特定的波长范围，以使荧光素产生的荧光能够通过。
荧光检测仪中的光电倍增管可以将荧光转化为电信号，并通过数据处理系统进行放大和处理。
最终，可以通过荧光的强度来确定样品中ATP的含量。
总体而言，ATP荧光检测仪的工作原理就是通过酶促反应将ATP转化为荧光信号，并通过荧光检测仪来检测和定量荧光信号的强度。
这种方法可以迅速、准确地检测样品中ATP的含量，广泛应用于食品卫生、生物医学研究以及环境检测等领域。
ATP荧光检测仪的拭子操作流程
ATP荧光检测仪的拭子操作流程ATP荧光快速检测仪/细菌检测仪/大肠菌群检测仪/大肠杆菌检测仪型号:HADATP产品简介HADATP ATP荧光快速检测仪是一种经济型多功能荧光检测系统：即采用同一个仪器平台进行手记、分析和报告不同类型的检测数据，使之具有简便易用、快捷、准确等优点，ATP荧光快速检测仪可用于医疗系统物体表面及操作人员手等表面干净度快速测定的专用设备。
也可用于表面干净度测定及微生物生长掌控。
该设备采用化学反应检测ATP，使用一种用于快速定性、定量检测大肠菌群、大肠杆菌和肠杆菌的拭子。
该检测用一种全新的生物发光反应，即当有目标菌存在时，其含有的特异性酶与特异性底物反应并产生光，产生的光通过该ATP荧光检测仪进行检测可在15秒内得到检测结果。
仪器特性：灵敏度高—— 1015 mol速度快——常规培养法1824h以上，而用ATP荧光检测系统只需要十几秒钟可行性——微生物数量与微生物体内所含ATP有明确的相关性。
通过检测ATP含量，可间接得出反应中微生物数量。
可操作性——传统培养方法需要在试验室由经过培训的技术人员进行操作；而ATP荧光检测仪进行快速干净度检测操作特别简便，只需简单的培训即可由一般工作人员进行现场操作。
产品参数：1.大屏幕清楚液晶显示器2、检测精度：5×1015mol3、检测范围：0 to 9999 RLUs/099999RLUS4、检测时间：15秒5、检测干扰：5﹪或5 RLUs6、操作温度范围：5℃到40℃7、操作湿度范围：20—85%8、ATP回收率：90110%9、检出模式：RLU、大肠菌群筛查10、50个用户ID 设定11、可设定的结果限值个数：251个12、2000个记忆储存13、自动推断合格14、自动统计合格率15、内置自校光源16、开机30秒自检17、配有RS232接口，可将结果上传至PC18、使用两节标准5号电池或可充电锂电池19、备用状态（20℃）：6个月20、稳定的液体荧光素酶21、润湿的一体化手记拭子ATP荧光检测拭子操作流程（1）将冷藏条件下的拭子在室温下放置约20分钟。
三磷酸腺苷生物发光法
三磷酸腺苷生物发光法摘要：1.引言2.三磷酸腺苷生物发光法的原理3.三磷酸腺苷生物发光法在实验中的应用4.三磷酸腺苷生物发光法的优缺点5.结论正文：三磷酸腺苷（ATP）生物发光法是一种在生物学和生物化学实验中广泛应用的技术。
该方法基于ATP 与荧光素酶的反应，产生可见光，从而实现生物发光。
这种方法具有高度灵敏、快速、简便等优点，使其成为实验室中必不可少的工具。
1.引言三磷酸腺苷生物发光法是一种强大的实验技术，为生物学家和生物化学家提供了快速、准确和灵敏的手段来检测生物分子。
该方法依赖于ATP 与荧光素酶的反应，这一反应产生的可见光使实验者能够实时监测生物过程。
2.三磷酸腺苷生物发光法的原理三磷酸腺苷生物发光法的基本原理是ATP 与荧光素酶的反应。
当ATP 存在时，荧光素酶与ATP 和荧光素底物结合，形成荧光素酶-ATP 复合物。
这个复合物不稳定，会迅速分解为荧光素和磷酸。
荧光素在水中扩散，与氧气结合，产生生物发光。
3.三磷酸腺苷生物发光法在实验中的应用三磷酸腺苷生物发光法在实验中的应用非常广泛，包括细胞活力检测、药物筛选、基因表达分析等。
例如，在细胞活力检测中，通过检测细胞内ATP 水平的变化，可以快速评估细胞的活力。
在药物筛选中，该方法可用于检测药物对细胞的影响，从而确定潜在药物的作用靶点。
此外，三磷酸腺苷生物发光法还可用于基因表达分析，通过检测特定基因的表达水平，研究基因的功能。
4.三磷酸腺苷生物发光法的优缺点三磷酸腺苷生物发光法的优点包括高度灵敏、快速、简便等。
这种方法对实验条件要求较低，可以在短时间内得到可靠的结果。
然而，这种方法也存在一些缺点，如易受到外部环境因素的干扰，对实验操作的准确性要求较高。
5.结论总之，三磷酸腺苷生物发光法是一种在生物学和生物化学实验中非常有价值的工具。
它具有高度灵敏、快速、简便等优点，使其成为实验室中必不可少的检测手段。
ATP检测方法
1.电泳法：根据核苷酸分子同时携带酸碱基团，在一定条件下，利用其在电场中的迁移速度不同而实现分离。
1)纸电泳法：将电场加在浸泡过缓冲液的滤纸上，使ATP与其他杂质分离，再利用比色法测定ATP的吸收值，计算其含量。
此法是卫生部及地方采用的ATP标准检测方法。
2)凝胶电泳法：根据介质不同，可分为聚丙烯酰胺电泳法（PAGE），SDS-PAGE和琼脂糖凝胶电泳法，前两种方法常用于生物机制的研究。
琼脂糖凝胶电泳法是以琼脂糖为介质，柠檬酸为缓冲液，利用电泳将ATP与杂质分离，实现ATP含量检测。
3)毛细管电泳法：以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用各组分间淌度和分配行为上的差异，实现ATP与杂质的分离。
2.光学分析法：因其操作简单、仪器要求低，常用于科研领域的ATP含量分析。
1)分光光度法：采用ATP试剂盒，因ATP腺嘌呤碱基上存在共轭双键，在紫外下有吸收峰，可用紫外分光光度法检测ATP含量。
2)生物发光法：利用荧光素在荧光素酶的作用下，与ATP发生反应，生成荧光素-ATP复合体，该复合体被分子氧氧化后激发荧光素发光，根据发光强弱可检测ATP含量。
3.层析法：利用样品各组分之间亲和力、分配系数等化学性质的差异，实现ATP与其它杂质的分离。
1)纸层析法：是检测核苷酸含量的常用方法之一。
该方法常以异丙醇、浓氨水和水按7：1：2的混合作为展开剂。
2)薄层层析法：该方法纸层析法原理基本相同，也是检测核苷酸含量的常用方法之一，其常用的展开剂是正丁醇、丙酮、冰乙酸、氨水、水按7：5：3：3：2的比例混合而成。
3)离子交换色谱法：利用样品各组分离子交换能力或选择系数之间的差异，实现分离，常用于工业生产中ATP含量检测。
4)高效液相色谱法：此方法具有强大的分离能力，操作简单，分析时间短，灵敏度高，结果准确，是目前应用最广泛的一种ATP检测方法。
迪信泰检测平台依托HPLC和LC-MS技术，提供专业的ATP检测服务，价格合理，欢迎咨询。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
a
2
优点
• 目前生物荧光反应法被广泛用于食品加工
条件的快速评价和食品中微生物的快速检 测，同时在HACCP管理中也被广泛用于关 键控制点检测，与传统检测方法不同之处 在于几分钟内可获得结果，而且荧光光度 计是便携式的，使用方便，适合现场检测， 不仅可以检测微小的污染物水平，还能检 测食品加工设备及其表面的清洁程度。
a
8
• 。该检测仪在对现有产品进行分析的基础上，选
择H5773-02光电倍增管作为光电转换器件，其检 测波长与生物发光反应所释放荧光波长一致，可 有效提高检测灵敏度。
• 采用自动加样技术，在暗室内加入发光反应试剂，
消除了外界光的干扰，且获得了反应最初的信号。
• 将检测仪与计算机连接测量，获得了各反应所释
ATP生物发光检测方法
ATP生物发光技术以生物体内的ATP作为检测 对象，不仅包括细菌（大肠杆菌，沙门氏菌， 志贺氏菌等），也包括体细胞在内的食品残 渣等食品污染物，因此适合在食品卫生检测 领域对卫生状况进行快速检测。 ATP生物发光检测方法具有检测速度快、成本 低、易于操作等特点
a
1
检测原理
• ATP即三磷酸腺苷，是广泛存在于生物体内的一种能量物
放荧光强度的时间响应曲线。
• 本设计的针对细菌总数的检测仪具有检测速度快、
自动化程度高、操作简单、小型便携等特点，在 口岸、卫生监管部门、食品生产部门等对产品、 环境等的卫生状况进行现场快速检测领域具有很 好的应用前景。为检测对象，浓度
范围为10-6～10-14mol／L，实验中所用荧 光素及荧光素酶购自美国普洛麦格公司。 实验采用联机测量方式，将本检测仪与计 算机通过。RS232接口相连接，仪表信号采 集单元采集荧光信号后直接上传至计算机 并将测试结果实时显示。测量结果如图4所 示。
a
7
• 在反应中，加入发光反应试剂时，体系中样品浓
度相对较高，因此在短时间内即迅速反应释放大 量荧光，此时荧光光强较强，因此测量结果可能 会超出系统的测试量程。由于本仪表的最大输出 电压为2500 mV，反应初期释放的荧光可能会超 出该范围，在图中表现为前端的水平直线。随着 反应进行，体系中样品和试剂的浓度逐渐降低， 所释放荧光随之逐渐衰减。由图可见，不同样品 浓度的ATP随反应进行，进入测量量程的时间不 同，浓度越高，衰减越慢，进入测量量程的时间 越长，反之越短。
质
• 检测ATP含量的一种方法是用荧光光度计法，生物发光是
活细胞在荧光素酶催化下发出的荧光，目前使用的荧光素 酶来源于北美的萤火虫，相对分子质量为62000的蛋白质
• 萤火虫荧光素酶简称虫光素酶，是一种能将化学能转变为
光能的活性蛋白质，即生物催化剂。ATP在虫光素酶的催 化作用下，与荧光素在有氧环境及二价镁离子作用下，反 应释放出荧光。当荧光素及虫光素酶过量情况下，释放的 荧光与ATP在一定范围内成线性关系，因此可以通过测量 荧光光强检测样品中的ATP，进而检测其中的细菌总数。
a
3
检测仪器
• 结构原理 • 主要有三部分：自动进样单元、光电转换
单元和信号采集处理及控制单元
a
4
• 其中，自动进样单元包括三套蠕动泵 。根据测试需要，
蠕动泵在控制单元控制下，向光电转换单元中的样品池加 入对应反应试剂。光电转换单元包括检测样品池和光电转 换器件。为消除外界光的干扰，整个光电转换单元被密封 在暗盒中。光电转换器件将反应释放荧光转化为电信号， 由信号采集处理单元采集并处理，并对测试结果进行实时 显示和存储。
a
6
• 图中各响应曲线400 s内的测量值进行积分，作为各浓度
样品的输出信号。输出信号与浓度的关系如图5所示。由 图可以看出，输出信号随浓度增加而增加，且有明显梯度， 两者的线性相关系数达到0.986。这一结果说明本检测系 统可以对ATP浓度进行快速检测。由于细菌细胞中所含 ATP含量基本一致，因此，本检测仪可实现对细菌总数的 现场快速检测。