淋巴瘤基因克隆性重排检测 PPT
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淋巴瘤查房PPT课件
手卫生，坚持六步洗手法。 5，认真检测生命体征，必要时遵医嘱行物理降温或药物降
温。
2019/10/29
Page 17
潜在并发症：血栓
1，指导进食低盐低脂低糖高蛋白高维生素饮食，多饮水， 保持大便通畅。
2，指导患者在病情允许的情况下适当下床活动，避免久站 久坐，注意患肢保暖，防止外伤。
3，认真倾听患者的诉说，了解患者的需要，尽可能向患者 讲解DVT发生、治疗措施、预后，使患者对DVT的治疗过 程有所了解，树立战胜疾病的信心，配合治疗。
2，建议患者尽量避免食用生硬带刺的食物，并且饭后温水 漱口，防止口腔黏膜损伤。
3，指导患者卧床休息，如外出检查，散步等尽量要有医护 人员陪同搀扶，防止摔伤。
4，浴室厕所等尽量使用防滑垫，并指导患者家属陪同，同 时告知患者穿防滑鞋，防止跌倒损伤。
5，认真观察病情，并教会患者学会自我病情的监测，如发 现身体皮肤有出血点瘀斑等应告知医护人员及时正确的处 理。
体温过高：与淋巴瘤持续发热有关。 活动无耐力：与淋巴瘤发热、化疗或放疗有关。 有损伤的危险：出血，与血小板低下有关。 潜在并发症：血栓。与恶性肿瘤导致血液凝血因子活性增
高有关。
2019/10/29
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营养失调：低于机体需要量
1,向病人讲解进食的重要性，鼓励病人自主进食。 2,病情允许的情况下指导病人家属提供营养均衡全面的高蛋
体重减轻约10 余斤。目前精神尚可，食欲可，睡眠一般，大小便正常。
2019/10/29
Page 4
既往史
否认肝炎、结核、疟疾病史，否认高血压、心脏病史，否 认糖尿病、脑血管疾病、精神疾病史，否认手术、外伤、 输血史，否认食物、药物过敏史，预防接种史随社会。
温。
2019/10/29
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潜在并发症：血栓
1，指导进食低盐低脂低糖高蛋白高维生素饮食，多饮水， 保持大便通畅。
2，指导患者在病情允许的情况下适当下床活动，避免久站 久坐，注意患肢保暖，防止外伤。
3，认真倾听患者的诉说，了解患者的需要，尽可能向患者 讲解DVT发生、治疗措施、预后，使患者对DVT的治疗过 程有所了解，树立战胜疾病的信心，配合治疗。
2，建议患者尽量避免食用生硬带刺的食物，并且饭后温水 漱口，防止口腔黏膜损伤。
3，指导患者卧床休息，如外出检查，散步等尽量要有医护 人员陪同搀扶，防止摔伤。
4，浴室厕所等尽量使用防滑垫，并指导患者家属陪同，同 时告知患者穿防滑鞋，防止跌倒损伤。
5，认真观察病情，并教会患者学会自我病情的监测，如发 现身体皮肤有出血点瘀斑等应告知医护人员及时正确的处 理。
体温过高：与淋巴瘤持续发热有关。 活动无耐力：与淋巴瘤发热、化疗或放疗有关。 有损伤的危险：出血，与血小板低下有关。 潜在并发症：血栓。与恶性肿瘤导致血液凝血因子活性增
高有关。
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营养失调：低于机体需要量
1,向病人讲解进食的重要性，鼓励病人自主进食。 2,病情允许的情况下指导病人家属提供营养均衡全面的高蛋
体重减轻约10 余斤。目前精神尚可，食欲可，睡眠一般，大小便正常。
2019/10/29
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既往史
否认肝炎、结核、疟疾病史，否认高血压、心脏病史，否 认糖尿病、脑血管疾病、精神疾病史，否认手术、外伤、 输血史，否认食物、药物过敏史，预防接种史随社会。
淋巴瘤基因克隆性重排检测
专注分子诊断 精|选 引领精准医学
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基于不同方法的产品系列-Invivoscribe公司
基于PCR检测技术，简便、快 速、成本较低，所需DNA量少， 对DNA质量要求不高。灵敏度 高于10%，需配制胶，安全清 洁性较差。
基于PCR-毛细管电泳检测技术， 敏感性高，检测周期较长，结 果更加直观可靠
目前市场最被接受的检测方法。 灵敏度无法满足MRD要求，难 以定量和得到序列。
恶性淋巴瘤发生的过程
单克隆性
突出单一形式的基因重排
IGH, TRB & TRD: V, D, and J IGK, IGL, and TRG: V and J regions
专注分子诊断 精|选 引领精准医学
6
淋巴细胞克隆性基因重排检测的临床意义
5%～15%的病例表现复杂，即使做了大量的免疫标志也可能难以鉴别其良恶性，需要进一步的手段区分。 利用分子生物学手段分析Ig和TCR基因的克隆性重排被WHO公认为该疾病诊断手段的重要补充。
10
Biomed-2研究项目（IGH为例）
专注分子诊断 精|选 引领精准医学
van Dongen, J. J. M., et al. (2003). Leukemia 17: 2257.
11
Biomed-2研究项目（IGH为例）
专注分子诊断 精|选 引领精准医学
van Dongen, J. J. M., et al. (2003). Leukemia 17: 2257.
IdentiCloneTM系列产品具有精心优化的标 准化试剂组成，具有最丰富的阳性对照，涵盖 各种T\B细胞重排类型，经过了超过400例的临 床样本验证，按照临床产品的标准进行质检和 质控，反应体系稳定，结果可靠。
t细胞淋巴瘤tcrγ基因重排特征的分析及检测方法优化
Ｔ细胞淋巴瘤ＴＣＲＴ基Ｎ重排特征分析及检测方法的优化摘要研究背景与目的淋巴瘤在组织和细胞形态学方面与高度反应增生性淋巴组织的鉴别诊断十分困难，容易造成误诊。
淋巴瘤病理诊断是临床病理工作的难题之一。
目前国内主要依靠以形态学为主、免疫组化为辅的诊断手段。
随着分子生物学的发展，从基因水平研究和分析诊断疾病的技术不断出现并且日趋成熟，为淋巴瘤诊断提供了有效工具。
淋巴瘤是由单克隆淋巴细胞增生所致，而反应增生性淋巴组织则来自于多克隆淋巴细胞，这是二者的重要区别。
编码免疫球蛋白（Ｉｇ）或Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）的基因经过重排以后，不同克隆之间的重排基因互不相同，因此，基因重排对淋巴瘤的诊断具有特异性价值。
以ＰＣＲ技术为基础的方法以其简便、高效、廉价及适用面广而在淋巴瘤基因重排研究方面越来越受重视。
但不同研究文献中所采用的引物、ＰＣＲ条件、ＰＣＲ产物检测方法等都不尽相同，结果也有差异。
因此，难以找到适于常规临床病理诊断之用的标准程序。
Ｊｕｒｋａｔ细胞是Ｔ细胞淋巴瘤基因重排研究中常用的阳性对照细胞，但有关Ｊｕｒｋａｔ细胞基因重排的详细情况也未见报道。
假基因是Ｉｇ和ＴＣＲ胚系ＤＮＡ中常见的基因，有关假基因参与重排的情况以及在设计引物方面是否应将假基因包括在内也未见有关研究报道。
本实验以ＴＣＲ基因重排为研究对象，通过优化引物选择、ＰＣＲ条件及ＰＣＲ产物的检测方法等，分析Ｔ细胞淋巴瘤基因重排检测的最佳方法。
同时，分析ＴＣＲ基因重排的特点，为进一步研究ＴＣＲ基因重排提供理论和技术支持。
方法１以ＴＣＲｙ基因重排为研究对象，选用通用引物ＴＶＧ、ＶｖＩ及ＴＣＲ７家族特异性引物为工具。
用正交设计实验优化ⅥＩ引物的ＰＣＲ条件。
另选一对ＴＣＲ［ｊ通用引物作为ＴＣＲｙ引物的补充和比较。
２利用ＰＣＲ和测序研究Ｊｕｒｋａｔ细胞基因重排情况，分析ＴＣＲ基因重排的基本特点。
３ＰＣＲ产物检测方法①利用ＴＣＲ通用引物检测淋巴瘤克隆性基因重排阳性率，分别用琼脂糖电泳和ＳＳＣＰ分析ＰＣＲ产物；②将ＰＣＲ产物分别进行直接测序和克隆后测序，分析ＴＣＲ基因重排的特点及探索测序方法在基因重排检测中的应用；⑧分析ＰＣＲ产物中ＤＮＡ的克隆数与ＳＳＣＰ中条带数目的关系。
淋巴瘤分子诊断课件
IgH基因重排、转录和翻译步骤
5’
V1 V2 V3 Vn D1 D2 D3 Dn J1 J2 J3 Jn Cm Cd Cg C…
3
1. D-J 结合(不完全 DNA 重排)
5’
V1
V2
V3
Vn
D1 D2 J2
J3
Jn
Cm
Cd
Cg
C…
3’
2. V-DJ 结合(完全 DNA 重排)
5’
V1
V2
D2 J2
Igμ 重链和一个轻链组装后形成一个有界膜 的IgM，表达在不成熟的B-细胞表面。
T-细胞受体重排：
T-细胞受体(TCR)链就像上述的Ig基本相同的方式进行 有序的重组。首先在TCRβ链进行D到J重组。这个过程 不是Dβ1 基因片段与6个Jβ1片段中一个结合，就是Dβ2 基因片段与7个Jβ2 片段中一个结合。DJ重组后接着是 Vβ-到-DβJβ重排。在新形成的Vβ-Dβ-Jβ复合体中间的 所有基因被删除掉，并与恒定区基因（Vβ-Dβ-Jβ-Cβ） 结合后进行初级转录。mRNA转录拼接外面任何插入的 序列和允许翻译全长TCR Cβ链。
主要目的：（1）开发和标准化PCR实验操作和PCR引物 （2） 评价和应用该标准化方法
设计了一套完整的引物和方法用于IG和TCR 基因重排的克隆性分析，共有14管97对引物
IGH（A,B,C,D,E 5管） IGK（A，B 2管） IGL（1管） TCRB（A，B，C 3管） TCRG（A，B 2管） TCRD(1 管)
免疫球蛋白（Ig）示意图
Ig/TCR结构
• 免疫球蛋白重链含有44个可变区（V）基因加上
27个高变区（D）基因和6个结合区（J）基因。
淋巴瘤基因克隆性重排检测
淋巴瘤应用基因重排检测进行辅助/鉴别诊断的方案
注意事项
▪ 检测到克隆性重排未必一定发生恶性病变 某些良性增生也可呈克隆性重排，如CD8+T细胞淋巴增 生性病变、良性单克隆性丙种球蛋白病、皮肤淋巴瘤样 丘疹病、免疫缺陷患者严重的EB病毒感染等；
▪ 检测不到克隆性重排也不能排除恶性病变 某些明确恶性病变的免疫缺陷患者中偶尔检测不到克隆 性重排，NK/T细胞淋巴瘤中IG和TCR基因呈胚系结构， 即也无克隆性重排。
▪ 辅助诊断：少见类型淋巴瘤，如肝脾T细胞淋巴瘤 ▪ 亚类分析：明确是B淋巴恶性增殖还是T细胞恶性增殖 ▪ 区分同一患者两种淋巴细胞恶性肿瘤，包括复发与继发淋巴瘤 ▪ 微小残留病灶监测，评估治疗效果或复发风险（NGS方法） ▪ 细胞免疫治疗监测，监测回输T细胞增殖状况和淋巴组织来源肿
瘤细胞清除效果（NGS）
淋巴瘤基因克隆性重排和 IGHV体细胞超突变检测
血液肿瘤（常规肿瘤）检测方案-
MICM综合分子检测(旌准方案)
形态学
（Morphology）
分子生物学
（Molecular） • 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) • 毛细管凝胶电泳(CE) • 荧光实时定量 PCR(RTQT-PCR) • 一代测序(Sanger) • 二代测序(NGS)
胞
B-Cell Receptors (BCR) /Immunoglobulins (Ig) T-Cell Receptor (TCR)
蛋白
Ig重链 Ig轻链 Ig轻链
基因
IGH IGK IGL
染色体定 位
14q32 2p12 22q11
蛋白
TCRα TCRβ TCRγ TCRδ
基因 染色体定 位
TRA 14q11
2024版CSCO淋巴瘤诊疗指南解读PPT课件
基因突变检测与预后评估
基因突变检测有助于 精确诊断淋巴瘤亚型 ，指导个体化治疗。
基因突变检测可预测 患者对特定治疗方案 的敏感性和耐药性。
某些基因突变与淋巴 瘤的预后密切相关， 如TP53、MYC等基 因的突变。
新型标志物发现及其临床意义
新型标志物的发现为淋巴瘤的 早期诊断、预后评估和靶向治 疗提供了新思路。
疼痛管理
对于淋巴瘤患者可能出现的疼痛症状，进行 有效的疼痛管理。
营养支持
根据患者的营养状况，提供个性化的营养支 持方案。
并发症预防与处理
积极预防并处理化疗、放疗等治疗过程中可 能出现的并发症。
05
药物治疗进展及耐药问题解决 方案
化疗药物使用注意事项
化疗药物的分类与选择
根据淋巴瘤的病理类型、分期和患者身体状况，选择合适的化疗药 物。
对于有高危因素的人群，应定期进行体检和筛查，以便早期发现和治疗淋巴瘤。
临床表现及诊断方法
淋巴瘤的临床表现多种多样，包括无痛性淋巴结肿大、肝脾肿大、发热 、盗汗、消瘦和瘙痒等全身症状。
诊断方法主要包括病理学检查、影像学检查、血液学检查和分子生物学 检查等。其中，病理学检查是确诊淋巴瘤的金标准，包括淋巴结活检、 穿刺活检和骨髓活检等。
以及它们的作用机制和疗效。
靶向药物的临床应用与前景
02
探讨靶向药物在淋巴瘤治疗中的临床应用情况，以及未来的发
展方向和前景。
靶向药物的耐药性及解决方案
03
分析靶向药物产生耐药性的原因，并提出相应的解决方案。
免疫治疗在淋巴瘤中应用前景
免疫治疗的原理与种类
介绍免疫治疗的原理，以及针对淋巴瘤的免 疫治疗种类，如CAR-T细胞疗法、PD-1抑 制剂等。
lymphoma淋巴瘤 ppt课件
皮肤：肿块、皮下结节、浸润性斑块，溃疡 肝脾肿大
3. 全身症状：发热、盗汗、消瘦。
五、实验室及辅助检查
（一）淋巴结或病变组织活检
诊断淋巴瘤主要依据 详细分型, 难度大 取材
（二）实验室检查
HL 1．血液：正常→贫血 wbc正常或↑，全血细胞减少 2．骨髓：部分病人可查到R-S 细胞 3．其他：血沉快，LDH↑，
• cyclin D1
+
• CD10 (blastoid) -
CD5
• CD23
-
基因特征
• t(11;14) • BCL-1 rearranged
CD1 9
CD10
6 、 皮 肤 T 细 胞 淋 巴 瘤 ： （ Cutaneous Tcell lymphoma）蕈样肉芽肿（Mycosis fungoides）。
淋巴组织肿瘤WHO分型
霍奇金淋巴瘤
B细胞淋巴瘤
T/NK细胞淋巴瘤 组织细胞和树突细胞肿瘤
非霍奇金淋巴瘤
移植后淋巴组织增殖性疾病
(应用新技术手段如单抗，细胞遗传学和分子生 物学等，分出许多新的类型)
霍奇金淋巴瘤
结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤 经典型霍奇金淋巴瘤(95%)
富于淋巴细胞型 结节硬化型 混合细胞型 淋巴细胞消减型
4、B-慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤
形态特点
• 小淋巴细胞 • 增殖中心（区） 免疫表型
• surface IgMD weak
• CD19, 20, 79a
+
• CD5
+
• CD23
+
• CD10, CycD1
-
遗传学特征
2024年淋巴瘤课件-(带目录)
淋巴瘤课件-(带目录)淋巴瘤课件一、引言淋巴瘤，一种起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤，近年来在我国发病率逐年上升。
淋巴瘤的发病机制复杂，涉及遗传、环境、免疫等多个方面。
本课件旨在对淋巴瘤的病因、病理、临床表现、诊断和治疗等方面进行详细阐述，以提高大家对淋巴瘤的认识和防范意识。
二、淋巴瘤的病因与发病机制1.遗传因素：家族性淋巴瘤的发病率较高，遗传因素在淋巴瘤的发生中具有重要作用。
部分基因突变与淋巴瘤的发病密切相关，如BCL2、BCL6、C-MYC等基因。
2.环境因素：长期接触有害物质，如农药、染发剂、放射性物质等，可增加淋巴瘤的发病风险。
3.免疫因素：免疫系统异常是淋巴瘤发病的关键因素。
例如，HIV感染、器官移植后免疫抑制剂的使用等，均会增加淋巴瘤的发病风险。
4.感染因素：某些病原体感染，如EB病毒、幽门螺杆菌等，与特定类型的淋巴瘤发病有关。
三、淋巴瘤的病理分类1.霍奇金淋巴瘤：以Reed-Sternberg细胞为特征，约占所有淋巴瘤的10%。
可分为结节性淋巴细胞为主型和经典型两大类。
四、淋巴瘤的临床表现淋巴瘤的临床表现多样，主要表现为无痛性淋巴结肿大、发热、盗汗、体重下降等。
根据受累部位的不同，还可出现相应的症状和体征。
1.淋巴结肿大：无痛性、质地较硬，活动度差，可触及或不可触及。
2.肝脾肿大：部分患者伴有肝脾肿大，可导致腹胀、腹痛等症状。
3.结外侵犯：淋巴瘤可侵犯结外器官，如胃肠道、皮肤、骨骼等，出现相应症状。
4.全身症状：发热、盗汗、体重下降等。
五、淋巴瘤的诊断与鉴别诊断1.影像学检查：如CT、MRI等，可了解淋巴瘤受累范围及侵犯程度。
2.淋巴结活检：是确诊淋巴瘤的关键，包括细针穿刺活检和手术切除活检。
3.免疫组化：有助于明确淋巴瘤的病理类型和细胞来源。
4.骨髓穿刺：了解骨髓是否受累，评估病情严重程度。
5.鉴别诊断：需与淋巴结炎、淋巴结结核、恶性组织细胞病等疾病相鉴别。
六、淋巴瘤的治疗淋巴瘤的治疗原则为个体化、综合治疗。
淋巴瘤基因克隆性重排检测
专注分子诊断 | 引领精准医学
谢谢大家！
专注分子诊断 | 引领精准医学
IGH, IGK, TRB , TRG IGHV
专注分子诊断 | 引领精准医学
IGHV SHM的检测
结合 Leader 和 FR1 区域的引物在 5’端连接有通用的测序片段，这种设计，配合 JH 反向测序引物，能 够实现 PCR 扩增产物的双向测序。目前，欧洲慢性淋巴细胞性白血病研究机构（European Research Initiative on CLL，ERIC）的指南即使用双向测序判断 IGH V区体细胞超突变（Somatic Hypermutation， SHM）状态。
专注分子诊断 | 引领精准医学
基于不同方法的产品系列-Invivoscribe公司
基于PCR检测技术，简便、快 速、成本较低，所需DNA量少， 对DNA质量要求不高。灵敏度 高于10%，需配制胶，安全清 洁性较差。
基于PCR-毛细管电泳检测技术， 敏感性高，检测周期较长，结 果更加直观可靠
目前市场最被接受的检测方法。 灵敏度无法满足MRD要求，难 以定量和得到序列。
目前市场最被接受的检测方法。 灵敏度无法满足MRD要求，难 以定量和得到序列。
IGH, IGK, IGL, TRB ,TRD, TRG（BIOMED-2方案，唯一授权） IGHV（依据ERIC指南）
新兴技术，更高灵敏度（10-6），更 高分辨率，更高的通量，更广泛的 应用。但成本高，仪器贵，操作复 杂，时间长。
1-5年
9.2-18.9年
OS
3.2-10年
17.9-25.8年
预后
不良
良好
PFS：无进展生存期（Progression free survival） OS：总生存期（Overall survival）
抗体及基因重排PPT课件
Figure 3-3
• 木瓜蛋白酶（papain）的水解部位位于Ig铰 链区重链间二硫键近N端处，水解后可得到 2个相同的抗原结合片段（fragment of antigen binding，Fab）和1个可结晶的片段 （fragment crystallizable，Fc）。
• Fab段具有抗体活性的部分，可单价与抗原 结合；
• 白喉或破伤风抗毒素经胃蛋白酶消化后精 制的制剂，由于去除了重链的Fc段可减少超 敏反应的发生。
Figure 3-3 part 2 of 2
四、 Ig的其他结构
• 1、J链 • 连接链（joining chain，J链）是由浆细胞合
成的一条富含半胱氨酸的多肽链，可将单 体Ig连接为多聚体并使之稳定。如连接分泌 型IgA（secretory IgA，SIgA）成双体，连 接IgM成为五聚体。
四、IgE
• IgE是血清中含量最少的Ig，仅0.3μ g/ml 左右，主要由呼吸道和消化道粘膜固有层 的浆细胞产生，分布于这些部位的粘膜组 织、外分泌液中。与肥大细胞和嗜碱性粒 细胞表面的I型IgE Fc受体（Fcε RI）结合 ，与I型超敏反应的发生有关。
• IgE在抗寄生虫感染免疫中有重要功能，在 单核巨噬细胞和嗜酸性粒细胞表面有II型 IgE Fc受体（Fcε RII，CD23），可介导依 赖于IgE的抗寄生虫细胞毒效应。
• Fc段不能与抗原结合，保留了Ig重链的免疫 原性及其相应功能区的生物学活性。
Figure 3-3 part 1 of 2
胃蛋白酶水解片段
• 用胃蛋白酶（pepsin）可使Ig在重链间二硫 键近C端处断开，获得1个仍由二硫键连接 的F（ab′）2片段和若干小分子多肽碎片 pFc′。F（ab′）2是由两个Fab及铰链区 组成，可同时结合两个抗原表位。pFc′无 生物活性。
内科学淋巴瘤PPT课件
各期按全身症状分A、B两组。无症状者为A，有症状者为B。 全身症状：1.发热38℃以上，连续三天以上，且无感染原因； 2. 6个月内体重减轻10％以上；3.盗汗。
HL与NHL的比较
鉴别点 年龄 起病
结外侵犯
播散 肝脾肿大 皮肤损害
预后
HL 青年多，儿童少 60-80%以无痛性颈锁 骨上淋巴结肿大为首发 表现，其次为腋下 可有，多为病情后期，
生物治疗：单克隆抗体/干扰素/抗HP 骨髓/造血干细胞移植
最大限度杀灭肿瘤细胞，取得长期缓解及无病存活
治疗/放化疗/HL
IA，IIA期：扩大野照射 IB，IIB，III，IV期：联合化疗为主，可局部
照射 方案：MOPP（氮芥或环磷酰胺+长春新碱
+甲基苄肼）或ABVD（阿霉素+博莱霉素+ 长春碱+甲氮咪胺） HL是第一种用化疗可以治愈的恶性肿瘤
其他治疗
手术治疗
预后
预后与细胞类型及分期相关
HL：5年生存率：淋巴细胞为主型94.3%； 淋巴细胞削减型27.4%；I期与II期90%，IV 期31.9%
NHL：还与年龄，结外病变，LDH升高等有 关
PET/CT:淋巴瘤疗效和预后评估价 值几何?
正电子发射断层扫描(PET)作为常用的分 子影像技术,采用与生物体内分子类似的 放射性药物,观察活体的生物学变化。 PET/CT整合了功能分子影像与解剖结构 影像,具有高敏感性、高特异性和高对比 度的优点,从不同角度提供了病变的生物 学特征信息,已成为临床肿瘤分期和治疗 后再分期的常用方法,而且其在很多肿瘤 的疗效和预后监测方面具有重要价值。
病理分型/霍奇金淋巴瘤
组织学发现R-S细胞为特征 四种病理类型：淋巴细胞为主型、结
HL与NHL的比较
鉴别点 年龄 起病
结外侵犯
播散 肝脾肿大 皮肤损害
预后
HL 青年多，儿童少 60-80%以无痛性颈锁 骨上淋巴结肿大为首发 表现，其次为腋下 可有，多为病情后期，
生物治疗：单克隆抗体/干扰素/抗HP 骨髓/造血干细胞移植
最大限度杀灭肿瘤细胞，取得长期缓解及无病存活
治疗/放化疗/HL
IA，IIA期：扩大野照射 IB，IIB，III，IV期：联合化疗为主，可局部
照射 方案：MOPP（氮芥或环磷酰胺+长春新碱
+甲基苄肼）或ABVD（阿霉素+博莱霉素+ 长春碱+甲氮咪胺） HL是第一种用化疗可以治愈的恶性肿瘤
其他治疗
手术治疗
预后
预后与细胞类型及分期相关
HL：5年生存率：淋巴细胞为主型94.3%； 淋巴细胞削减型27.4%；I期与II期90%，IV 期31.9%
NHL：还与年龄，结外病变，LDH升高等有 关
PET/CT:淋巴瘤疗效和预后评估价 值几何?
正电子发射断层扫描(PET)作为常用的分 子影像技术,采用与生物体内分子类似的 放射性药物,观察活体的生物学变化。 PET/CT整合了功能分子影像与解剖结构 影像,具有高敏感性、高特异性和高对比 度的优点,从不同角度提供了病变的生物 学特征信息,已成为临床肿瘤分期和治疗 后再分期的常用方法,而且其在很多肿瘤 的疗效和预后监测方面具有重要价值。
病理分型/霍奇金淋巴瘤
组织学发现R-S细胞为特征 四种病理类型：淋巴细胞为主型、结
淋巴瘤讲课PPT课件
巴瘤。
血清学检查： 检测血液中肿 瘤标志物水平， 如乳酸脱氢酶 等，有助于淋 巴瘤的诊断和
病情监测。
病理学检查： 通过淋巴结活 检或组织穿刺 进行病理学检 查，是淋巴瘤 诊断的金标准。
诊断标准和分期
诊断标准：根据病理学检查 结果，结合临床表现和影像 学检查进行诊断。
分期：根据病情的严重程度 和扩散范围，淋巴瘤可分为 早期、中期和晚期。
影像学诊断
X线检查：观察 淋巴瘤是否侵
犯骨骼
CT检查：确定 淋巴瘤的大小、
位置和范围
MRI检查：评 估淋巴瘤对软 组织的侵犯程
度
PET-CT检查： 了解淋巴瘤的 全身扩散情况
实验室诊断
血常规检查： 淋巴瘤患者可 能出现白细胞 计数升高或降 低，贫血，血 小板计数降低
等症状。
骨髓检查：骨 髓涂片可发现 淋巴瘤细胞， 有助于确诊淋
未来展望
新的治疗方法的研发和应用
淋巴瘤的个体化治疗和精准医疗 的探索
淋巴瘤的预防和早期诊断技术的 研究进展
国际合作和临床试验的开展
研究热点和挑战
免疫治疗：利用免疫系统攻击肿瘤细胞的方法是目前研究的热点。 基因编辑技术：CRISPR-Cas9等基因编辑技术为淋巴瘤的治疗提供了新的可能。 新型药物研发：针对淋巴瘤的特异性靶点，研发新型药物是未来的重要研究方向。 个体化治疗：根据患者的基因组、分子特征等因素，制定个体化的治疗方案是当前面临的挑战。
心理支持
淋巴瘤患者心 理压力大，需 要关注心理健
康
家庭和社会支 持是淋巴瘤患 者康复的重要
因素
提供专业心理 辅导，帮助淋 巴瘤患者调整
心态
定期开展淋巴 瘤患者交流活 动，增强信心
和勇气
血清学检查： 检测血液中肿 瘤标志物水平， 如乳酸脱氢酶 等，有助于淋 巴瘤的诊断和
病情监测。
病理学检查： 通过淋巴结活 检或组织穿刺 进行病理学检 查，是淋巴瘤 诊断的金标准。
诊断标准和分期
诊断标准：根据病理学检查 结果，结合临床表现和影像 学检查进行诊断。
分期：根据病情的严重程度 和扩散范围，淋巴瘤可分为 早期、中期和晚期。
影像学诊断
X线检查：观察 淋巴瘤是否侵
犯骨骼
CT检查：确定 淋巴瘤的大小、
位置和范围
MRI检查：评 估淋巴瘤对软 组织的侵犯程
度
PET-CT检查： 了解淋巴瘤的 全身扩散情况
实验室诊断
血常规检查： 淋巴瘤患者可 能出现白细胞 计数升高或降 低，贫血，血 小板计数降低
等症状。
骨髓检查：骨 髓涂片可发现 淋巴瘤细胞， 有助于确诊淋
未来展望
新的治疗方法的研发和应用
淋巴瘤的个体化治疗和精准医疗 的探索
淋巴瘤的预防和早期诊断技术的 研究进展
国际合作和临床试验的开展
研究热点和挑战
免疫治疗：利用免疫系统攻击肿瘤细胞的方法是目前研究的热点。 基因编辑技术：CRISPR-Cas9等基因编辑技术为淋巴瘤的治疗提供了新的可能。 新型药物研发：针对淋巴瘤的特异性靶点，研发新型药物是未来的重要研究方向。 个体化治疗：根据患者的基因组、分子特征等因素，制定个体化的治疗方案是当前面临的挑战。
心理支持
淋巴瘤患者心 理压力大，需 要关注心理健
康
家庭和社会支 持是淋巴瘤患 者康复的重要
因素
提供专业心理 辅导，帮助淋 巴瘤患者调整
心态
定期开展淋巴 瘤患者交流活 动，增强信心
和勇气
(2024年)最新淋巴瘤ppt课件
基因敲入技术
通过基因敲入技术将具有治疗作用的基因导入淋巴 瘤细胞，从而改变其生物学行为或增强其对药物的 敏感性。
单细胞测序技术
结合单细胞测序技术，深入了解淋巴瘤细胞 的基因表达谱和异质性，为个性化治疗提供 精准依据。
2024/3/26
26
THANKS
2024/3/26
27
2024/3/26
02
小分子靶向药物
针对淋巴瘤细胞特定的信号通路或蛋白，设计小分子药物进行干预和治
疗。
03
免疫检查点抑制剂
通过阻断免疫检查点蛋白，激活患者自身的免疫系统来攻击淋巴瘤细胞
。
24
免疫治疗在淋巴瘤中的应用
2024/3/26
CAR-T细胞疗法
通过基因工程改造T细胞，使其表达能够识别并攻击淋巴瘤细胞的嵌合抗原受体（CAR） 。
12
影像学检查
01
02
03
超声检查
对于浅表淋巴结和腹部淋 巴结的肿大具有较高的敏 感性和特异性，可辅助判 断淋巴结的性质。
2024/3/26
CT检查
能够清晰地显示淋巴结的 大小、形态和内部结构， 有助于发现深部淋巴结肿 大及评估淋巴瘤的分期。
MRI检查
对于中枢神经系统淋巴瘤 的诊断具有重要价值，可 发现脑膜、脊髓等部位的 病变。
最新淋巴瘤ppt课件
2024/3/26
1
目录
2024/3/26
• 淋巴瘤概述 • 淋巴瘤的病理生理学 • 淋巴瘤的检查与诊断 • 淋巴瘤的治疗与预后 • 患者教育与心理支持 • 最新研究进展与未来展望
2
01
淋巴瘤概述
2024/3/26
3
定义与分类
2024/3/26
淋巴瘤基因克隆性重排检测ppt课件
▪ 无扩增产物：PCR扩增后电泳未见产物 送检组织中的细胞，抗原受体基因无重排（NK，非淋巴细胞）或DNA质量过差。
marker P M H2O S1 S1 S2 S2
500bp400bp-
300bp250bp-
200bp175bp-
150bp-
IGH B(250-295bp)
Products are heterodulex-treated followed by PAGE on 6%
基于不同方法的产品系列-Invivoscribe
基于PCR检测技术，简便、快 速、成本较低，所需DNA量少， 对DNA质量要求不高。灵敏度 高于10%，需配制胶，安全清 洁性较差。
基于PCR-毛细管电泳检测技术， 敏感性高，检测周期较长，结 果更加直观可靠
目前市场最被接受的检测方法。 灵敏度无法满足MRD要求，难 以定量和得到序列。
（IGH, IGK,）（IGL）（TRB ,TRD,）（ TRG）BIOMED-2方 案，唯一授权）
IGHV（依据ERIC指南）
淋巴瘤基因克隆性重排检测
新兴技术，更高灵敏度（10-6），更 高分辨率，更高的通量，更广泛的 应用。但成本高，仪器贵，操作复 杂，时间长。
IGH, IGK, TRB , TRG IGHV
淋巴瘤基因克隆性重排检测
淋巴瘤51基因突变NGS检测
基于NGS技术一次性分析51基因
鉴别诊断
DLBCL基因分型
预后分层
靶向治疗
淋巴瘤基因克隆性重排检测
淋巴瘤51基因突变NGS检测
淋巴瘤基因克隆性重排检测
产品特点
A
C
B D
淋巴瘤基因克隆性重排检测
谢谢大家！
淋巴瘤基因克隆性重排检测
克隆性基因重排检测的原理及结果判读
正常淋巴组织/反应性增生 不同淋巴细胞、不同重排形式——多克隆性 ——免疫功能的多样性
淋巴瘤 不同淋巴细胞、相同重排形式——克隆性重排
——淋巴瘤诊断和鉴别诊断的分子指标
克隆性重排的检测方法
Southern 杂交 PCR法
Southern 杂交检测的原理
➢原理： 克隆性重排后DNA限制性内切酶位点改变 并产生相同重排
IGK-B
阴性对照
78F, 胃窦、胃底活检组织， 组织较小， CD20+、CD79+、bcl6+、κ+、 Ki67 95%等
结合形态、IHC 和基因重排检测诊断为DLBCL
5种T细胞淋巴瘤类型中克隆性重排
TCRG-A TCRG-B TCRB-A TCRB-B TCRB-C TCRD
阴性病例
31F 皮肤病变， CD20+， CD3+， CD4-， CD8-，Ki67（80-90%），CD56-， TIA-1+，EBER+等。
5种B细胞淋巴瘤类型中克隆性重排
克隆性检出与B细胞淋巴瘤起源有关
FL中 IGH重排：57% IGK重排：80% IGH+IGK： 96% IGH+IGK+IGL：100%
对于生发中心起源的淋巴瘤选用IGK的必要性
BJC 2011；155；84-92
IGH-A IGH-B IGH-C IGK-A
优点： ➢步骤相对简单 ➢DNA需求量小 ➢价格相对便宜
缺点： ➢根据大小而不是序列 ➢不典型时判断困难 ➢敏感性低
二代测序检测克隆性重排
结果判断
判断依据： ➢每个VJ区使用比例 ➢显示重排的序列
优点： ➢更敏感 ➢判断更客观
应用 ➢检测克隆 ➢确定复发还是原发 ➢外周血MRD
淋巴瘤 不同淋巴细胞、相同重排形式——克隆性重排
——淋巴瘤诊断和鉴别诊断的分子指标
克隆性重排的检测方法
Southern 杂交 PCR法
Southern 杂交检测的原理
➢原理： 克隆性重排后DNA限制性内切酶位点改变 并产生相同重排
IGK-B
阴性对照
78F, 胃窦、胃底活检组织， 组织较小， CD20+、CD79+、bcl6+、κ+、 Ki67 95%等
结合形态、IHC 和基因重排检测诊断为DLBCL
5种T细胞淋巴瘤类型中克隆性重排
TCRG-A TCRG-B TCRB-A TCRB-B TCRB-C TCRD
阴性病例
31F 皮肤病变， CD20+， CD3+， CD4-， CD8-，Ki67（80-90%），CD56-， TIA-1+，EBER+等。
5种B细胞淋巴瘤类型中克隆性重排
克隆性检出与B细胞淋巴瘤起源有关
FL中 IGH重排：57% IGK重排：80% IGH+IGK： 96% IGH+IGK+IGL：100%
对于生发中心起源的淋巴瘤选用IGK的必要性
BJC 2011；155；84-92
IGH-A IGH-B IGH-C IGK-A
优点： ➢步骤相对简单 ➢DNA需求量小 ➢价格相对便宜
缺点： ➢根据大小而不是序列 ➢不典型时判断困难 ➢敏感性低
二代测序检测克隆性重排
结果判断
判断依据： ➢每个VJ区使用比例 ➢显示重排的序列
优点： ➢更敏感 ➢判断更客观
应用 ➢检测克隆 ➢确定复发还是原发 ➢外周血MRD
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分子检测 检测基因
方法
IG/TCR 基因重排
IGH，IGK， • GEL (PAGE) IGL，TRB， • ABI (CE) TRD，TRG • NGS
• GEL (PAGE)
IGHV超突变
IGH
• ABI (CE)
• NGS
基因突变
EZH2, DNMT3A, IDH2…
• Sanger • NGS
（IGH, IGK,）（IGL）（TRB ,TRD,）（ TRG）BIOMED-2方 案，唯一授权）
IGHV（依据ERIC指南）
新兴技术，更高灵敏度（10-6），更 高分辨率，更高的通量，更广泛的 应用。但成本高，仪器贵，操作复 杂，时间长。
IGH, IGK, TRB , TRG IGHV
大家应该也有点累了，稍作休息
▪ 多克隆性：扩增产物电泳呈弥散涂抹状(smear)或阶梯状(高斯分布） 送检组织中，淋巴细胞抗原受体基因的重排方式为多样性。表明组织中不存在单克隆性增生的细胞群。
▪ 无扩增产物：PCR扩增后电泳未见产物 送检组织中的细胞，抗原受体基因无重排（NK，非淋巴细胞）或DNA质量过差。
marker P M H2O S1 S1 S2 S2
IdentiCloneTM系列产品具有精心优化的标 准化试剂组成，具有最丰富的阳性对照，涵盖 各种T\B细胞重排类型，经过了超过400例的临 床样本验证，按照临床产品的标准进行质检和 质控，反应体系稳定，结果可靠。
Biomed-2研究项目
Biomed-2研究项目（IGH为例）
van Dongen, J. J. M., et al. (2003). Leukemia 17: 2257.
Biomed-2研究项目（IGH为例）
van Dongen, J. J. M., et al. (2003). Leukemia 17: 2257.
结果分析
▪ （单）克隆性：扩增产物电泳在预期大小范围内一或双条带（峰） 送检组织中，淋巴细胞抗原受体基因的重排方式为单一性。表明组织中存在单克隆性增生的细胞群。
50000bp175bp-
150bp-
IGH B(250-295bp)
Products are heterodulex-treated followed by PAGE on 6% gel
淋巴瘤应用基因重排检测进行辅助/鉴别诊断的方案
注意事项
▪ 检测到克隆性重排未必一定发生恶性病变 某些良性增生也可呈克隆性重排，如CD8+T细胞淋巴增生性病变、良性单克隆性丙种球蛋白病、皮肤淋
巴瘤样丘疹病、免疫缺陷患者严重的EB病毒感染等；
▪ 检测不到克隆性重排也不能排除恶性病变 某些明确恶性病变的免疫缺陷患者中偶尔检测不到克隆性重排，NK/T细胞淋巴瘤中IG和TCR基因呈胚系
结构，即也无克隆性重排。
▪ IG或TCR基因的重排不一定是谱系的标志 特别是大多数前驱淋巴细胞性肿瘤中存在谱系交叉，如血管免疫母细胞学淋巴瘤（AITL）。单一发生可
基于不同方法的产品系列-Invivoscribe公司
基于PCR检测技术，简便、快 速、成本较低，所需DNA量少， 对DNA质量要求不高。灵敏度 高于10%，需配制胶，安全清 洁性较差。
基于PCR-毛细管电泳检测技术， 敏感性高，检测周期较长，结 果更加直观可靠
目前市场最被接受的检测方法。 灵敏度无法满足MRD要求，难 以定量和得到序列。
淋巴细胞克隆性基因重排检测的临床意义
5%～15%的病例表现复杂，即使做了大量的免疫标志也可能难以鉴别其良恶性，需要进一步的手段区分。 利用分子生物学手段分析Ig和TCR基因的克隆性重排被WHO公认为该疾病诊断手段的重要补充。
▪ 鉴别诊断：明确是淋巴组织反应性还是淋巴细胞恶性增殖 ▪ 辅助诊断：少见类型淋巴瘤，如肝脾T细胞淋巴瘤 ▪ 亚类分析：明确是B淋巴恶性增殖还是T细胞恶性增殖 ▪ 区分同一患者两种淋巴细胞恶性肿瘤，包括复发与继发淋巴瘤 ▪ 微小残留病灶监测，评估治疗效果或复发风险（NGS方法） ▪ 细胞免疫治疗监测，监测回输T细胞增殖状况和淋巴组织来源肿瘤细胞清除效果（NGS）
淋巴细胞克隆性基因重排检测产品特点
1
BIOMED-2唯 一授权的商品
化试剂
2
3
4
5
全面涵盖各种 T\B细胞重排类
型
超过400例的临床样本验 证，反应体系稳定，结
果可靠
可疑淋巴组织增 生性疾病克隆性 分析的“金标准”
最丰富的阳性 对照
淋巴细胞克隆性基因重排检测的目标分子Ig和TCR--单一 基因重排，即恶性淋巴细胞
淋巴瘤基因克隆性重排检测
血液肿瘤（常规肿瘤）检测方案-MICM综合分子检测 (旌准方案)
形态学
（Morphology）
分子生物学 （Molecular）
• 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) • 毛细管凝胶电泳(CE) • 荧光实时定量PCR(RTQT-PCR) • 一代测序(Sanger) • 二代测序(NGS)
血液 肿瘤
免疫学 （Immunology）
• 免疫组化（IHC） • 流式细胞术（FCM）
细胞遗传学（Cytogenetics）
• 荧光原位杂交（FISH）
辅助诊断
预后分析 指导用药 MRD检测
分子检测-淋巴瘤
Moffitt, A. B. and S. S. Dave (2017). J Clin Oncol 35(9): 955-962.
B-Cell Receptors (BCR) /Immunoglobulins (Ig)
T-Cell Receptor (TCR)
多样性与克隆性
正常淋巴细胞成熟过程/良性病变 多克隆性
多种形式的基因重排
恶性淋巴瘤发生的过程
单克隆性
突出单一形式的基因重排
IGH, TRB & TRD: V, D, and J IGK, IGL, and TRG: V and J regions
大家有疑问的，可以询问和交流
从Biomed-2到Invivoscribe-唯一授权
Invivoscribe 公 司 的 IdentiCloneTM 系 列 产 品是基于PCR的克隆性检测产品，是BIOMED2唯一授权的商品化试剂，获得CE认证，以其 高度的灵敏性和特异性，成为可疑淋巴组织增 生性疾病克隆性分析的“金标准”。