恩诺沙星残留检测方法标准(试行)牛可食性组织中恩诺沙星残留量检测液相色谱-串联质谱法(试行)2020版
超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽肉中27种磺胺及喹诺酮类药物的残留
华 孝成 杨 飞 萍 邵 歆 虞 贺 新 金 叶 舟
（ 温 州市农 产 品检 验、 ？ 贝 ４ 试 中心 ，温 州 ３ ２ ５ ０ １ ４ ）
摘 要 ：本 文建 立 了 超 高 效 液 相 色 谱 一 串联 质 谱 仪 同时 分 析 畜 禽 肉 中磺 胺 及 喹 诺 酮 类 共 ２ ７种 抗 菌 素 残 留 的 检 测 方 法
用 乙腈 提 取 样 品 中待 测 组 分 ，经 旋 转 蒸 发 浓缩 至 干 ，用 ｌ ｍ Ｌ１ ０ ％ 乙腈 一 ０ ． １ ％ 甲酸 水 溶 解 ，正 己烷 冷冻 离 心脱 脂 ．应 用Ｕ Ｐ Ｌ Ｃ— ＭＳ ／ Ｍ Ｓ采 用 梯 度 洗 脱 进 行 色 谱 分 离及 多 反 应 监 测 质 谱 分 析 模 式 １ ０ ａｉ ｒ ｎ内 同 时 对 畜 禽 肉 中 ２ ７种 磺 胺 及 喹 诺 酮 用 外 标 法 进 行 定 性 和 定 量 测 定 。 分 别 对 鸡 肉 空 白基 质 进 行 ３个 水 平 （ ２ ． ０￣ ｇ ／ ｋ ｇ ，１ ０ ． ０￣ ｇ ／ ｋ ｇ ，２ ０ ． ０￣ ｇ ／ ｋ ｇ ） 的加 标 回收 试 验 ，其 回 收 率 为 ７ ０ ． Ｏ ％～１ ２ ２ ． ７ ％。３ 个 浓 度 的 添 加 回收 方 法 的相 对 标 准 偏 差 低 于 １ ７ ％ 。２ ７种 待 测组 分 以 最 低 统 计 检 出 限均 为 ０ ． ２ ｇ ／ ｋ ｇ ，定 量 限为 ０ ． ５￣ ｇ ／ ｋ ｇ 。该 方 法 样 品前 处 理 简 单 、快 速 、准 确 性 、重 复 性 好 。可 用 于 畜 禽 肉 中 ｌ ６种 磺 胺 及 ｌ １ 种 喹 诺 酮 类 药 物 残 留 的 日常 分 析测 定 关 键 词 ：超 高效 液 相 串联 质 谱 ；冷 冻 除 脂 ；磺 胺 ；喹 诺 酮 ；残 留
牛羊组织中β-受体激动剂残留检测 超高效液相色谱-串联质谱法
DB 21/3004—2013
3.2.15 标准储备液（100 μg/mL）：准确称取适量的特布他林、西马特罗、沙丁胺醇、非诺特罗、氯 丙那林、莱克多巴胺、克伦特罗、妥布特罗和喷布特罗对照品，用甲醇分别配制成 100 μg/mL 的标准 储备液，2~8 ℃冰箱中保存，有效期为 3 个月。 3.2.16 混合标准中间液（1 μg/mL）：分别准确吸取 1.0 mL 的特布他林、西马特罗、沙丁胺醇、非 诺特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克伦特罗、妥布特罗和喷布特罗标准储备液至 100 mL 容量瓶中， 用甲醇稀释至刻度，2~8 ℃冰箱中保存，有效期为 1 个月。 3.2.17 同位素内标储备液（100 μg/mL）：分别取三种同位素内标，各自用甲醇配成浓度约为 100 μg/mL 的储备液，2~8 ℃冰箱中保存，有效期为 3 个月。 3.2.18 混合同位素内标工作液（100 μg/L）：将上述三种同位素内标储备液，用 0.2%甲酸水溶液稀 释成约 100 μg/L 的混合工作液，2~8 ℃冰箱中保存，有效期为 1 个月。 3.2.19 混合标准及内标工作液（10 μg/L）：准确吸取 1.0 mL 的混合标准中间液（3.2.16）和 10.0 mL 混合同位素内标工作液（3.2.18）至 100 mL 容量瓶中，用 0.2%甲酸水溶液稀释至刻度，2~8 ℃冰箱中 保存，有效期为 1 周。 3.3 仪器和设备 3.3.1 超高效液相色谱-串联质谱仪（配电喷雾离子源）。 3.3.2 涡旋混合器。 3.3.3 冷冻离心机。 3.3.4 恒温定时振荡器。 3.3.5 旋转蒸发仪。 3.3.6 固相萃取装置。 3.3.7 MCX 固相萃取柱(CNW ，for β-agonists)：60 mg/3 mL。 3.3.8 氮吹仪。 3.4 测定步骤 3.4.1 样品处理
恩诺沙星质量标准+恩诺沙星检验操作规程
恩诺沙星质量标准文件类别 SMP起 草： 年 月 日 审 核： 年 月 日 批 准： 年 月 日 执行日期： 年 月 日文件名称 恩诺沙星质量标准 文件编码SMP-QMP20202目的：制定恩诺沙星的质量标准。
适用范围：恩诺沙星的检验责任人：化验员、化验室主任、质量部长。
标准依据：《中国兽药典》2010年版一部 内容：本品为1－环丙基－6-氟－4－氧代－1，4－二氢－7－（4－乙基－1－哌嗪基）－3－喹啉羧酸。
按干燥品计算，含C 19H 22FN 3O 3不得少于99.0%。
【性状】 本品为微黄色或淡橙黄色结晶性粉末；无臭，味微苦；遇光色渐变为橙红色。
本品在氯仿中易溶，在二甲基甲酰胺中略溶，在水中极微溶解；在氢氧化钠试液中易溶。
熔点 本品的熔点 为221～226℃。
熔融时同时分解。
【鉴别】(1)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。
【检查】氟喹啉酸 取本品，加0.1mol/L 氢氧化钠溶液溶解并制成每1ml 中约含10mg 的溶液，作为供试品溶液；另取氟喹啉酸对照品约 5.0mg ，精密称定，置50ml 量瓶中，加6mol/L氨溶液0.05ml 与水适量使溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，用水稀释成每1ml 含20µg 的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色普法 试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶GF 254薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-冰醋酸-水（50：9：25：15）为展开剂，直立展开，晾干约15分钟，置紫外光灯（254nm ）下检视 。
供试品溶液如显与对照品溶液相同的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不得更深（0.2%）。
有关物质 取本品适量，加流动相制成每1ml 含0.25mg 的溶液，作为供试品溶液；另取恩诺沙星、盐酸环丙沙星对照品适量，用流动相制成每1ml 各含0.25mg 的溶液，作为系统适用性试验溶液。
DB22T 1997-2014 饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的测定液相色谱-串联质谱法.pdf
4.16 Oasis HLB 固相萃取小柱或相当者：60 mg，3 mL。 4.17 滤膜：0.22 μm。 4.18 氮气。
5 仪器
不得翻印
本 5.1 液相色谱-质谱联用仪：配有电喷雾电离源。 标 5.2 涡旋振荡器。 准 5.3 固相萃取装置。 仅供 5.4 分析天平：感量 0.1 mg。 内 5.5 粉碎机。 部 5.6 旋转蒸发仪。 使用 5.7 氮气吹干仪。
仅 水甲醇溶液洗脱，供液相色谱-串联质谱检测，外标法定量。 供内 4 试剂与材料
部使 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；除另有说明外，水为GB/T 6682规定的一级水。 用 4.1 甲醇，色谱纯。
4.2 乙腈，色谱纯。 4.3 磷酸。 4.4 甲酸，色谱纯。 4.5 磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O）。
5.8 离心机。 6 试样制备
选取代表性饲料样品至少500 g，按照GB/T 20195制备试样。
不得翻印
7 分析步骤
7.1 提取
称取试样0.5 g(精确至0.1 mg)于50 mL具塞离心管中，准确加入6 mL磷酸盐缓冲溶液(4.8)，涡旋混 匀，再加入10 mL乙腈(4.2)，于涡旋振荡器振荡提取1 min，5000 r/min离心5 min，上清液过滤到鸡心 瓶中，在残渣中加入5 mL磷酸盐缓冲溶液(4.8)，10 mL乙腈(4.2)，重复以上步骤，合并上清液，于50 ℃ 旋转蒸发，至乙腈全部蒸出。加入5 mL磷酸盐缓冲溶液(4.8)，混匀。
本标准仅供内部使用 图A.4 恩诺沙星的 MRM 色谱图 不得翻印 _________________________________
6
准仅供内部使用 method 不得翻印
2014 - 02 - 28 发布
2019年农业农村部畜禽产品兽药残留限量和检测方法
羟基地美硝唑Dimetridazole-OH 0.5
地克珠利Diclazuril
鸡/肉Chicken/Muscle
高效液相色谱法HPLC（GB 29701-2013）
地克珠利Diclazuril 50
500
氟苯尼考及其代谢物Florfenicol and its Metabolites
氟喹诺酮类Fluoroquinolones
鸡/蛋Chichen/Egg
液相色谱质谱法LC-MS-MS（GB/T 21312-2007)高效液相色谱法HPLC（781号公告-6-2006）
环丙沙星Ciprofloxacin 10
不得检出ND
恩诺沙星Enrofloxacin 10
洛美沙星Lomefloxacin 0.5
恩诺沙星Enrofloxacin：25
100
环丙沙星Ciprofloxacin：25
达氟沙星Danofloxacin：7.5
30
氟甲喹Flumequine：12.5
50
洛美沙星Lomefloxacin 0.5
不得检出ND
氧氟沙星Ofloxacin 0.5
诺氟沙星Norfloxacin 1.0
培氟沙星Pefloxacin 1.0
高效液相色谱法HPLC（GB 29696-2013）
阿维菌素Abamectin：1
不得检出
ND
多拉菌素Doramectin：1
伊维菌素Ivermectin：1
10
氟喹诺酮类Fluoroquinolones
牛/奶Cow/Milk
液相色谱质谱法LC-MS-MS（GB/T 21312-2007)高效液相色谱法HPLC（GB 29692-2013）
高效液相色谱法检测水产品中三种喹诺酮类药物残留量方法研究
高效液相色谱法检测水产品中三种喹诺酮类药物残留量方法研究作者：暂无来源：《渔业致富指南》 2018年第16期本试验改进了农业部783号公告-2-2006水产品中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星残留量的高效液相色谱法，并对样品的提取条件和色谱方法进行了优化分析，确定使用盐酸酸化乙腈提取，固相萃取小柱净化，高效液相色谱-荧光检测器检测、外标法定量的分析方法。
本方法漂移率小，对三种喹诺酮类药物标准曲线回归系数在0.999以上，线性范围1~1000μg/L，定量限1μg/kg。
对草鱼、对虾样品进行三种喹诺酮类药物加标回收率的验证实验，回收率在79.2%~105.0%之间，相对标准偏差在0.83%~9.85%之间，批次间标准偏差在 5.00%~10.57%之间，说明方法前处理提取效率和准确度满足分析要求。
1.材料与方法1.1.仪器、试剂、标准品与耗材试验材料来自历次农业部例行采集样品，品种有草鱼和对虾。
岛津LC-20AD高效液相色谱仪（配荧光检测器RF-20A），LC Solution工作站与Waterse2695高效液相色谱仪（配荧光检测器2475），Empower 3工作站；色谱柱为Thermo AcclaimC18与安捷伦ZORBAX SB-C18，规格均为4.6m m×250mm，I.D.5μm。
三种沙星标准品均为Dr.Ehrenstorfer。
其中诺氟沙星纯度为99.1%，环丙沙星纯度为95.0%，恩诺沙星纯度为99.0%。
分别称取诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星标准品各0.01g（精确至0.0001g），用色谱纯级甲醇溶解，必要的时候使用超声助融，定容到100mL棕色容量瓶中，4℃冷藏保存，有效期6个月。
试验使用试剂及其他仪器规格如下（表1-表3）：1.2.实验前处理的优化1.2.1.样品的处理方法取鱼、虾肌肉，切成小块，匀浆机打成匀浆后准确称取5.00g（±0.05g）样品，置于50mL 离心管中，加入15mL提取剂，盖紧盖子，置于振荡器上振荡5min，4500r/min离心5min，上清液倒入另外一支50mL离心管中。
牛可食性组织及牛奶中氮氨菲啶残留量的测定 液相色谱-串联质谱法(食品安全标准)
牛可食性组织中氮氨菲啶残留量的测定液相色谱-串联质谱法1 范围本标准规定了牛肌肉、脂肪、肝脏、肾脏及牛奶中氮氨菲啶残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于牛肌肉、脂肪、肝脏和肾脏及牛奶中氮氨菲啶残留量的检测。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理试料中残留的氮氨菲啶，用乙腈、甲酸铵-甲醇溶液提取，正己烷脱脂，液相色谱-串联质谱测定，外标法定量。
4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1试剂4.1.1 甲醇（CH3OH）：色谱纯。
4.1.2 乙腈（CH3CN）：色谱纯。
4.1.3 甲酸（HCOOH）：色谱纯。
4.1.4 正己烷（C6H14）。
4.1.5 无水硫酸钠（Na2SO4）。
4.1.6 甲酸铵（HCOONH4）。
4.2溶液配制4.2.1 0.25mol/L甲酸铵-甲醇溶液：取甲酸铵15.8g，用甲醇溶解并稀释至1000mL。
4.2.2 0.1%甲酸溶液：取甲酸1.0 mL，用水溶解并稀释至1000 mL。
4.2.3 80%甲醇溶液：取甲醇400mL，用水溶解并稀释至500mL。
4.2.4 提取液：取乙腈和0.25mol/L甲酸铵-甲醇溶液按1：1（体积比）混匀。
4.3 标准品盐酸氮氨菲啶（Isometamidium Chloride,C28H26ClN7,CAS号:34301-55-8），含量≥95.0%。
4.4 标准溶液的制备4.4.1 标准贮备液：取氮氨菲啶标准品10mg，精密称定，于10 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1 mg/mL的标准贮备液。
-20℃以下保存。
4.4.2 10 µg/mL氮氨菲啶标准工作液：精密量取标准贮备液100 µL，于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度为10 µg/mL的氮氨菲啶标准工作液。
高效液相色谱—串联质谱法测定饲料中恩诺沙星、环丙沙星和诺氢弹沙星
高效液相色谱—串联质谱法测定饲料中恩诺沙星、环丙沙星和诺氢弹沙星作者：王洋等来源：《吉林蔬菜》2015年第01期摘要：建立饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定方法。
试样用磷酸盐缓冲溶液提取，经固相萃取小柱净化，氮气吹干后用溶解待测。
采用LC-MS/MS测定，色谱柱为C8反相色谱柱，流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液，电喷雾正离子模式电离，多反应选择离子检测（MRM），外标法定量。
结果表明方法可用于饲料中恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星的同时测定。
关键词：饲料；液相色谱-串联质谱；恩诺沙星；环丙沙星；诺氟沙星；多反应监测【中图分类号】TS214.2 【文献标识码】AAbstract：To establish a liquid chromatography-mass spectrometry（LC-MS/MS）method was developed for determinations of enrofloxacin，ciprofloxacin and norfloxacin in Feeds.enrofloxacin，ciprofloxacin and norfloxacin were extracted by sonication with Phosphat buffer solution.By the SPE cartridge and nitrogen dry，the extracts were dissolved.The separations were performed on a C8 reversephase columnusing acetonitrile-0.1%formic acid as the mobile phase.The analysis was carried out under positive ESI MS/MS and multiple reaction monitoring mode （MRM）.The method was proved to be simpl and accurate.Key words：Feeds；Liquid chromatography-mass spectrometry；Enrofloxacin，Ciprofloxacin；Norfloxacin；Multiple reaction monitoring恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星属于喹诺酮类药物，由于其具有抗菌谱广、杀菌活性强、毒副作用小及敏感微生物的最小抑菌浓度低等优点，被广泛应用于各种动物感染性疾病的预防和治疗。
高效液相色谱法测定奶牛乳汁中恩诺沙星与环丙沙星残留量
２３ 标 准 曲线 与 线性 范 围的 测 定 ．
在 ８ 支微量离心管中各加 入 ０８ Ｌ空 白乳样 ， ．ｍ 除第一支 管外其余各管依 次加入 ８ Ｌ系列浓度 的恩诺沙星 、环丙沙 星混合标准液 （－ ０ ｇ Ｌ ， ２ ２０ ／ ）旋涡混匀 ， ｍ 使得各样品 中制得 的恩诺 沙星 和环丙沙星的浓度 都为 ００ ～ ｇ Ｌ， 一管不 ．２ ２ ／ 第 ｍ
电子分析 天平 ： Ｅ ６ Ａ １０型 ， 瑞士 Ｍｅｌ 公司 ； ｔｅ ｔｒ 台式高速 离心机 ：８ ４ Ｒ） ８ １Ｒ） ， ５ｏ （ ／ ０ （ 型 德国 Ｅ ｐ ｎ ｏ 公司 ； ５ ｐ ｅｄｒ ｆ 高效液相 色谱仪 ： ｔ ｓ６ ５和 Ｗａ ｒ２７ 荧光检测器 ，美 国 Ｗａ ｒ Ｗａ ｒ２９ ｅ ｔ ｓ４ ５ ｅ ｔｓ ｅ 公 司 ；色 谱柱 ： ｙ ｅ ｉ Ｄ ，．ｍ ５ ｒｍ， ｍ，批 号 ： Ｈ ｐ ｒｌ Ｓ４６ ｍ ｘ２０ ｓＢ ａ ５
３ 标 准 曲线 与 线性 范 围 ． ２
２１ 样 品预 处理 ．
从冰箱 中取 出乳 汁样品 ，自然解冻 ，摇 匀 ，准确吸取
０８ Ｌ乳汁于 ２ Ｌ塑料离心管 ， ． ｍ ｍ 沿管壁轻轻加入 ０ ｍ ． Ｌ乳 汁 ４ 提取液 ， 旋涡混匀 １ ｉ， ａ ｒｎ 直至无絮状 物质 出现 ，２ ０ ｒｍ离 １００ｐ 心 １ｍ ｎ后 ， ０ｉ 取上 清液于棕色进样瓶 中 ， 高效 液相色谱法 供
１ 材 料 与 仪 器
外标法 ， 分别将恩诺沙 星和环丙 沙星的色谱 面积（ 与相 应 Ａ） 药物浓度（ ） ｃ 作标准 曲线 ， 恩诺沙星和环 丙沙星 的标准曲线 、 回归方程和相关系数。
鸡和牛可食性组织中莫能菌素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法(试行)
莫能菌素残留检测方法标准（试行）鸡和牛可食性组织中莫能菌素残留量的测定液相色谱-串联质谱法（试行）1.范围本标准规定了鸡和牛可食性组织中莫能菌素残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于鸡的肌肉、肝脏、肾脏、皮+脂，牛的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪中莫能菌素残留量的检测。
2.规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3.原理试料中的莫能菌素用异辛烷-乙酸乙酯混合液提取，硅胶固相萃取柱净化后，用液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。
4.试剂和材料以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 莫能菌素、尼日利亚菌素标准品：纯度≥95%。
4.2 乙腈：色谱纯。
4.3 甲醇：色谱纯。
4.4 正己烷：色谱纯。
4.5 乙酸乙酯：色谱纯。
4.6 异辛烷：色谱纯。
4.7 甲酸：色谱纯。
4.8 碳酸氢钠。
4.9 无水硫酸钠。
4.10 中性甲醇：取1000 mL甲醇，加入1 g NaHCO3，充分混合，静置后取上清液使用，如果浑浊则用11 µm滤纸过滤后使用。
4.11 提取溶剂：取4500 mL异辛烷，加入500 mL乙酸乙酯，混匀。
4.12 硅胶固相萃取柱淋洗溶剂：取500 mL乙酸乙酯，加入500 mL正己烷，混匀。
4.13 硅胶固相萃取柱洗脱溶剂：取800 mL乙酸乙酯，加入200 mL甲醇，混匀。
4.14 0.1%甲酸水溶液：取1000 mL超纯水，加入1 mL甲酸，混匀，必要时过滤。
4.15 0.1%甲酸乙腈溶液：取5000 mL乙腈，加入5 mL甲酸，混匀，必要时过滤。
4.16 莫能菌素标准储备液（1 mg/mL）：准确称取含10 mg莫能菌素的标准品，于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度约为1 mg/mL的标准储备液。
高效液相色谱检测动物肌肉组织中7种喹诺酮类药物的残留
另一干净试管中 ;残留组织用 10 mL PB 溶液重复提取一次 ,合并上清液 ;将 HLB 固相萃取柱用 2 mL甲
醇 、2 mL 水活化 ,取 10 m l提取液上样 , 3 mL 甲醇 /水 (1∶4, V /V )洗涤 ,最后用 2 mL 甲醇洗脱 , N2 吹干 , PB 定容至 1. 0 mL ,过 0122μm 微孔滤膜 ,待测 。
标准贮备液 ,配制 7种喹诺酮类药物的混合标准工作液 (1. 0 mg /L ) 。
准确量取混合标准工作液 , N2吹干 ,用 0105 mol/L 磷酸盐溶液 ( PB , pH 7. 0)稀释 ,配制成 011、013、 1. 0、10、20、100和 200μg /L 的标准溶液 , HPLC2FLD 测定 。以各组分的色谱峰面积对浓度作线性回归 ,
不能很好的分离 ,而且低酸度对色谱系统的寿命有影响 ,故本方法采用 pH2. 8的甲酸水溶液 ( 0102% ,
V /V ) 2乙腈体系作为流动相 。另外 ,环丙沙星 、单诺沙星 、恩诺沙星 、沙拉沙星 、二氟沙星等哌嗪喹诺酮
( PQ s)和恶喹酸 、氟甲喹等酸性喹诺酮 (AQ s)具有不同的荧光光谱 , PQ s的最佳激发波长 (λex )与发射波 长 (λem )为 280 nm 和 450 nm ,而酸性喹诺酮的 λex与 λem为 320 nm 和 365 nm。
( ENR ) , sarafloxacin ( SAR ) , difloxacin (D IF) , oxoflax2 acin (OXO ) , flumequine ( FLU ) , and 30μg/L for dano2 floxacin (DAN ) )
量限为 013～1. 0μg / kg。
超高效液相色谱-串联质谱测定猪肉中16种喹诺酮药物残留量
超高效液相色谱-串联质谱测定猪肉中16种喹诺酮药物残留量张颖颖;李莹莹【摘要】建立同时测定猪肉中萘啶酸、恶喹酸、依诺沙星、氟甲喹、诺氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、二氟沙星、麻保沙星、培氟沙星、司帕沙星、奥比沙星16种喹诺酮类药物残留的超高效液相-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrophy,UPLC-MS/MS)的检测方法.样品采用乙酸-乙腈(1∶99,V/V)一次性振荡提取,用弱阴离子固相萃取柱净化,内标法定量.结果表明:16种喹诺酮药物的检出限为0.2 μg/kg,定量限为0.8 μg/kg,空白猪肉中添加2.0、5.0、10.0 μg/kg水平,16种喹诺酮的回收率在70％～120％.该方法分析速度快、样品前处理干净、杂质污染少,可用于猪肉样品中喹诺酮类的残留检测.【期刊名称】《肉类研究》【年(卷),期】2016(030)005【总页数】6页(P36-41)【关键词】喹诺酮;超高效液相色谱-串联质谱;猪肉;残留【作者】张颖颖;李莹莹【作者单位】北京食品科学研究院,中国肉类食品综合研究中心,北京 100068;北京食品科学研究院,中国肉类食品综合研究中心,北京 100068【正文语种】中文【中图分类】TS207.3喹诺酮类是一类含4-喹诺酮基本结构的抗菌药，以细菌的脱氧核糖核酸（DNA）为靶，妨碍DNA回旋酶，进一步造成细菌DNA的不可逆损害，达到抗菌效果。
主要作用于革兰阴性菌的抗菌药物，对革兰阳性菌的作用较弱。
由于该药物抗菌广，与其他药物无交叉耐药性、不良反应少，所以被广泛用于畜类、禽类、水产品及蜜蜂等养殖业。
若长期食用喹诺酮药物残留的食物，会造成胃肠道及中枢反应，并诱导耐药性的传递，不利于临床治疗[1]。
联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂专家联席委员会、欧盟都已制定了多种喹诺酮类药物在动物组织中的最高残留限量。
牛肉中三种氟喹诺酮类兽药残留的UPLC-MS／MS分析方法
Ａｂ ｔａ ｔ ｓｒ ｃ ：Ｔｈ ｔ ｏ ｆ ｉ ｕ ｔｎ ｏ ｓａ ａｙ ｉ ｏ ｐ ｏ ｌ ｘ ｃｎ，Ｅ ｒ ｆｏ ａ ｉ ｎ ａ ａｌ ｘ ｅｍｅ ｈ ｄｏ ｍ ｌａ ｅ ｕ ｎ ｌ ｓｓ ｆＣｉ ｒ ｆ ａ ｉ ｓ ｏ ｎ ｏ ｌｘ ｃｎａ ｄＳ ｒｆｏ —
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第 ２ 卷 第 ４期 ８
２０ 年 １ ０７ １月
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质 谱 学 报
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高效液相色谱法检测水产品中氟喹诺酮类药物残留量方法的优化
高效液相色谱法检测水产品中氟喹诺酮类药物残留量方法的优化李佩佩;陈雪昌;张小军;梅光明【摘要】建立了高效液相色谱-荧光检测法测定水产品中3种氟喹诺酮类药物(诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星)残留量的方法.均质后的样品用酸化乙腈提取,乙腈饱和的正己烷脱脂,旋转蒸干流动相溶解后经反相色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量.诺氟沙星、恩诺沙星的线性范围为4.0 ～400 μg/kg；环丙沙星的线性范围为0.8～80μg/kg,方法的线性关系良好,相关系数均大于0.9990.3种氟喹诺酮类药物的加标回收率为84.3％～91.0％；相对标准偏差为4.57％～8.10％；诺氟沙星、恩诺沙星的检H,限为1.0 μg/kg；环丙沙星的检出限为0.2μg/kg.本方法简便、灵敏、通用性强,适用于水产品中3种氟喹诺酮类药物的同时检测.【期刊名称】《中国渔业质量与标准》【年(卷),期】2012(002)002【总页数】5页(P84-88)【关键词】高效液相色谱;水产品;氟喹诺酮类药物;残留【作者】李佩佩;陈雪昌;张小军;梅光明【作者单位】浙江省海洋水产研究所,浙江舟山316100;浙江省海洋水产研究所,浙江舟山316100;浙江省海洋水产研究所,浙江舟山316100;浙江省海洋水产研究所,浙江舟山316100【正文语种】中文【中图分类】S94诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星均为常见的氟喹诺酮类合成抗菌剂，广泛应用于畜禽和水产养殖。
此类药物的不恰当和过量使用所导致的药物残留会危害人体健康，同时也会使致病菌产生耐药性，从而间接危害人类健康［1-2］。
我国及多个国家和地区均规定了氟喹诺酮类药物的最高残留限量［1］。
目前检测氟喹诺酮类药残的方法有微生物法［3-4］、酶联免疫法(E LISA)［5-6］、毛细管区带电泳法［7-8］、电解分析法［9］、高效液相色谱法(HPLC)［10-12］、高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)［13-16］等。
《食品安全国家标准牛可食性组织中氨丙啉残留量的测定 液相色谱-串联质谱法和高效液相色谱法》
制定
强制
谱－质谱法
食品安全国家标准 动物性食品
26 GB 31658.8-2021 中拟除虫菊酯类药物残留量的测 制定 强制
定 气相色谱－质谱法
食品安全国家标准 动物性食品
27 GB 31658.9-2021 及尿液中雌激素类药物多残留的 制定 强制 测定 液相色谱－串联质谱法
食品安全国家标准 动物性食品
液相色谱法
食品安全国家标准 动物性食品
31 GB 31658.13-2021 中氯苯胍残留量的测定 液相色 制定 强制
谱－串联质谱法
食品安全国家标准 动物性食品
32
GB 31658.14-2021
中 α－群勃龙和 β－群勃龙残留 量的测定 液相色谱－串联质谱
制定
强制
法
食品安全国家标准 动物性食品
33
标准名称
食品安全国家标准 牛可食性组 织中氨丙啉残留量的测定 液相 色谱－串联质谱法和高效液相色 谱法 食品安全国家标准 猪、鸡可食性 组织中泰万菌素和 3－乙酰泰乐 菌素残留量的测定 液相色谱－ 串联质谱法
食品安全国家标准 鸡可食性组 织中二硝托胺残留量的测定
食品安全国家标准 水产品中甲 苯咪唑及代谢物残留量的测定 高效液相色谱法 食品安全国家标准 水产品中泰 乐菌素残留量的测定 高效液相 色谱法 食品安全国家标准 水产品中诺 氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、 氧氟沙星、噁喹酸、氟甲喹残留 量的测定 高效液相色谱法 食品安全国家标准 水产品中氯 丙嗪残留量的测定 液相色谱－ 串联质谱法 食品安全国家标准 水产品中安 眠酮残留量的测定 液相色谱－ 串联质谱法 食品安全国家标准 水产品中丁 香酚残留量的测定 气相色谱－ 质谱法 食品安全国家标准 水产品中氯 硝柳胺残留量的测定 液相色谱 －串联质谱法
农业部公告2003年第236号——动物性食品中兽药残留检测方法-农业部公告2003年第236号
农业部公告2003年第236号——动物性食品中兽药残留检测方法正文：---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 农业部公告（2003年第236号）根据《兽药管理条例》规定，我部组织制定了12种动物性食品中兽药残留检测方法，现予发布，请各地遵照执行。
附件：动物性食品中兽药残留检测方法中华人民共和国农业部二00三年一月二十二日动物源性食品中兽药残留检测方法目录1、动物源食品中卡巴氧标示残留物检测方法--------------高效液相色谱法2、动物源食品中硝基咪唑类药物残留检测方法------------高效液相色谱法3、动物源食品中磺胺二甲嘧啶残留检测方法--------------高效液相色谱法4、动物源食品中拉沙洛西钠残留检测方法----------------高效液相色谱法5、动物源食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法--------高效液相色谱法6、动物源食品中恶喹酸和氟甲喹残留检测方法(鸡)--------高效液相色谱法7、动物源食品中恶喹酸和氟甲喹残留检测方法(鱼)--------高效液相色谱法8、动物源食品中苯唑西林残留检测方法(鸡)--------------高效液相色谱法9、动物源食品中青霉素素抗生素残留检测方法(鸡)--------高效液相色谱法10、动物源食品中苯唑西林残留检测方法(牛奶)-----------高效液相色谱法11、动物源食品中氯霉素残留检测方法(牛奶)-------------高效液相色谱法12、动物源食品中青霉素抗生素残留检测方法(牛奶)-------微生物法——结束——。
恩诺沙星残留检测方法标准(试行)牛可食性组织中恩诺沙星残留量检测液相色谱-串联质谱法(试行)2020版
恩诺沙星残留检测方法标准（试行）牛可食性组织中恩诺沙星残留量检测液相色谱-串联质谱法（试行）1范围本标准规定了牛可食性组织中恩诺沙星和环丙沙星残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于牛的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪中恩诺沙星和环丙沙星残留量的检测。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3原理试料中残留的恩诺沙星、环丙沙星经提取液提取，离心后取上清液，以正己烷净化，弃正己烷层，下层溶液氮气流吹干后复溶，离心，上清液以液相色谱-串联质谱仪测定恩诺沙星、环丙沙星残留量，内标法定量。
4试剂和材料以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 对照品：恩诺沙星，含量≥95%；盐酸环丙沙星，含量≥95%；盐酸恩诺沙星-d5，含量均≥95%；盐酸环丙沙星-d8，含量≥90%。
4.2 乙腈：分析纯。
4.3 乙腈：色谱纯。
4.4 甲醇：分析纯。
4.5 甲醇：色谱纯。
4.6 甲酸：分析纯。
4.7 甲酸：色谱纯。
4.8 正己烷。
4.9 1%甲酸乙腈溶液：准确量取甲酸1mL，置100mL 容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，充分混匀。
4.10 1%甲酸乙腈溶液-甲醇（95:5, V/V）溶液：准确量取甲醇5mL，置100mL容量瓶中，用1%甲酸乙腈溶液稀释至刻度，混匀。
4.11 0.1%甲酸溶液：准确量取甲酸（色谱纯）1.00mL，置1L容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，混匀。
4.12 0.1%甲酸溶液-乙腈（95:5, V/V）：准确量取乙腈（色谱纯）5mL，置100mL 容量瓶中，加入0.1%甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
4.13 乙腈饱和的正己烷：取一定量的正己烷加入适量乙腈，直至充分混匀静置后有分层为止。
QuEChERS超高效液相色谱串联质谱法同时测定畜禽肉中11种喹诺酮类兽药残留
分析检测MEAT RESEARCH CHINA MEAT RESEARCH CENTER QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽肉中11 种喹诺酮类兽药残留黄 坤，吴婉琴，罗 彤，付文雯，范小龙，马 弋，王会霞（湖北省食品质量安全监督检验研究院，湖北省食品质量安全检测工程技术研究中心，湖北 武汉 430075）摘 要：建立一种超高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽肉中恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星、沙拉沙星、双氟沙星、司帕沙星、氟罗沙星和达氟沙星共11 种喹诺酮类兽药残留的检测方法。
畜禽肉样品经2%甲酸-乙腈均质提取，离心沉淀后上清液经QuEChERS净化剂净化后，经快速溶剂蒸发系统浓缩，采用Waters BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm）分离，以0.1%甲酸-水和0.1%甲酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱，电喷雾离子源电离，多反应监测模式采集信号，内标法定量。
结果表明：11 种喹诺酮类兽药在2～80 ng/mL 质量浓度范围内线性关系良好（R2＞0.99），方法的检出限和定量限分别为0.5～2.0 μg/kg和1.5～6.0 μg/kg；空白样品加标量为10、25、50 μg/kg 3 个水平时，11 种喹诺酮类兽药的平均加标回收率为74.52%～106.83%，相对标准偏差为1.8%～8.7%（n=6）。
该方法检测过程简单快捷、准确度好、灵敏度高，适用于畜禽肉中喹诺酮类兽药残留的检测。
关键词：QuEChERS；超高效液相色谱-串联质谱法；畜禽肉；喹诺酮类兽药残留Simultaneous Determination of 11 Quinolone Residues in Livestock and Poultry Meat by QuEChERS and Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryHUANG Kun, WU Wanqin, LUO Tong, FU Wenwen, FAN Xiaolong, MA Yi, WANG Huixia (Hubei Provincial Engineering and Technology Research Center for Food Quality and Safety Test, Hubei Provincial Institute for Food Supervision and Test, Wuhan 430075, China)Abstract: A method for simultaneous determination of enrofloxacin, ciprofloxacin, ofloxacin, pefloxacin, norfloxacin, lomefloxacin, sarafloxacin, difloxacin, sparfloxacin, flerofloxacin and danofloxacin residues in livestock and poultry meat by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) was established. Samples were homogenized and extracted with 2% formic acid-acetonitrile. After centrifugation, the supernatant was purified by column the QuEChERS procedure, concentrated by a rapid solvent evaporation system, separated on a Waters BEH C18(2.1 mm × 50 mm, 1.7 μm) with a mobile phase consisting of 0.1% formic acid-water and 0.1% formic acid-acetonitrile by gradient elution, detected in the multiple reaction monitoring (MRM) mode using an electrospray ionization source (ESI+) and quantified by an internal standard method. The results showed that good linearity was observed for all analytes in the concentration range of 2.0–80.0 ng/mL with correlation coefficients greater than 0.99 and the detection and quantitation limits were respectively 0.5–2.0 and 1.5–6.0 μg/kg. The average recoveries of blank samples spiked at 10, 25 and 50 μg/kg were 74.52%–106.83%, with relative standard deviation (RSD) values of 1.8%–8.7%(n = 6). This method proved to be simple, accurate, highly sensitive and suitable for the simultaneous determination of quinolone residues in livestock and poultry meat. Keywords: QuEChERS; ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; livestock and poultry meat; quinolone residuesDOI:10.7506/rlyj1001-8123-20190210-025中图分类号：TS251.5 文献标志码：A 文章编号：1001-8123（2019）03-0040-06引文格式：黄坤, 吴婉琴, 罗彤, 等. QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽肉中11 种喹诺酮类兽药残留[J]. 肉类研究, 2019, 33(3): 40-45. DOI:10.7506/rlyj1001-8123-20190210-025. 收稿日期：2019-02-10基金项目：“十三五”国家重点研发计划重点专项（2018YFC1604000）第一作者简介：黄坤（1985—）（ORCID: 0000-0003-2870-1362），男，工程师，硕士，研究方向为食品安全分析与检测。
畜禽产品兽药残留检测方法和标准
100
硝基咪唑类 Nitiomidazoles
鸡/肝 Chicken/Liver
动物源食品中甲硝唑、地美硝唑及其代谢物 羟基甲硝唑 Metronidazole-OH 0.5 残留检测 地美硝唑 Dimetridazole 0.5 液相色谱-串联质谱法（见附录3） 羟基地美硝唑 Dimetridazole-OH 0.5
附件4 2019年度动物及动物产品兽药残留检测方法及残留限量
化合物 Compound 动物/组织 Species/ Matrix 推荐检测方法 Recommended Methods 检测限(或定量限) Detection or Quantification Limit (μ g/kg orμ g/L） 环丙沙星 恩诺沙星 洛美沙星 氧氟沙星 诺氟沙星 培氟沙星 Ciprofloxacin 10 Enrofloxacin 10 Lomefloxacin 0.5 Ofloxacin 0.5 Norfloxacin 1.0 Pefloxacin 1.0 残留限量 MRL（μ g/kg）
地克珠利 Diclazuril 50
500
氟苯尼考胺 Florfenicol amine 3 达氟沙星 Danofloxacin 20
100 200 100
鸡/肉 Chichen/Muscle
恩诺沙星 Enrofloxacin 20 环丙沙星 Ciprofloxacin 20
磺胺二甲基嘧啶 Sulfamethazine 0.5-20 磺胺间二甲氧嘧啶Sulfadimethoxine 0.5-20 磺胺嘧啶 Sulfadiazine 0.5-20 磺胺喹噁啉Sulfaquinoxaline 0.5-20 磺胺间甲氧嘧啶 Sulfamonomethoxine 0.5-20 磺胺甲氧嗪 Sulfamethoxypyridazine 0.5-20 磺胺甲噁唑 Sulfamethoxazole 0.5-20 高效液相色谱法HPLC（农牧发[2001]38号） 磺胺醋酰Sulfacetamide 0.5-5 高效液相色谱法HPLC（GB 29694-2013） 磺胺吡啶Sulfapyridine 0.5-5 鸡/肉Chichen/Muscle 液相色谱质谱法LC-MS-MS（1025号公告-23- 磺胺甲基嘧啶Sulfamerazine 0.5-5 2008） 磺胺噁唑Sulfamoxol 0.5-5 磺胺异噁唑Sulfisoxazole 0.5-5 苯甲酰磺胺Sulfabenzamide 0.5-5 磺胺氯哒嗪 Sulfachloropyridazine 0.5-5 磺胺苯吡唑Sulfaphenazole 0.5-5 磺胺甲噻二唑Sulfamethizole 0.5 磺胺邻二甲氧嘧啶 Sulfadoxine 0.5 磺胺噻唑 Sulfathiazole 0.5 金刚烷胺 Amantadine 鸡/肉 Chicken/Muscle 动物性食品中金刚烷胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（见附录1） 金刚烷胺 Amantadine 1 不得检出 ND 100
动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法--高效液相色谱法
动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法--高效液相色
谱法
农业部畜牧兽医局
【期刊名称】《中国兽药杂志》
【年(卷),期】2003(037)008
【摘要】@@ 农业部于2003年1月22日发布第236号公告,发布12个动物性食品中兽药残留检测方法.方法之五:动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法--高效液相色谱法.
【总页数】3页(P11-13)
【作者】农业部畜牧兽医局
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S859.84
【相关文献】
1.动物性食品中氯霉素残留检测方法--高效液相色谱法 [J], 农业部畜牧兽医局
2.动物性食品中硝基咪唑类药物残留检测方法 --高效液相色谱法 [J], 农业部畜牧兽医局
3.动物性食品中磺胺二甲嘧啶残留检测方法--高效液相色谱法 [J], 农业部畜牧兽医局
4.动物性食品中拉沙洛西钠的残留检测方法--高效液相色谱法 [J], 农业部畜牧兽医局
5.动物性食品中噁喹酸和氟甲喹残留检测方法(鸡)--高效液相色谱法 [J], 农业部畜牧兽医局
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恩诺沙星残留检测方法标准（试行）牛可食性组织中恩诺沙星残留量检测液相色谱-串联质谱法（试行）
1范围
本标准规定了牛可食性组织中恩诺沙星和环丙沙星残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于牛的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪中恩诺沙星和环丙沙星残留量的检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试料中残留的恩诺沙星、环丙沙星经提取液提取，离心后取上清液，以正己烷净化，弃正己烷层，下层溶液氮气流吹干后复溶，离心，上清液以液相色谱-串联质谱仪测定恩诺沙星、环丙沙星残留量，内标法定量。
4试剂和材料
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 对照品：恩诺沙星，含量≥95%；盐酸环丙沙星，含量≥95%；盐酸恩诺沙星-d5，含量均≥95%；盐酸环丙沙星-d8，含量≥90%。
4.2 乙腈：分析纯。
4.3 乙腈：色谱纯。
4.4 甲醇：分析纯。
4.5 甲醇：色谱纯。
4.6 甲酸：分析纯。
4.7 甲酸：色谱纯。
4.8 正己烷。
4.9 1%甲酸乙腈溶液：准确量取甲酸1mL，置100mL 容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，充分混匀。
4.10 1%甲酸乙腈溶液-甲醇（95:5, V/V）溶液：准确量取甲醇5mL，置100mL容量瓶中，用1%甲酸乙腈溶液稀释至刻度，混匀。
4.11 0.1%甲酸溶液：准确量取甲酸（色谱纯）1.00mL，置1L容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，混匀。
4.12 0.1%甲酸溶液-乙腈（95:5, V/V）：准确量取乙腈（色谱纯）5mL，置100mL 容量瓶中，加入0.1%甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
4.13 乙腈饱和的正己烷：取一定量的正己烷加入适量乙腈，直至充分混匀静置后有分层为止。
4.14 标准储备液：根据各对照品的含量，精密称取各对照品适量，恩诺沙星、环丙沙星配制成浓度为200µg/mL的储备液，恩诺沙星-d5、环丙沙星-d8配制成浓度为100µg/mL的储备液。
将精密称取的单个对照品分别置于10mL 棕色容量瓶中，加入甲醇（色谱纯）约5mL，涡旋、超声使溶解，再用甲醇（色谱纯）稀释并定容至10mL。
-20℃保存，有效期3个月。
使用时将标准储备液按需要用甲醇（色谱纯）逐级稀释为标准工作溶液（10µg/mL、1µg/mL或100ng/mL），现配现用。
5仪器和设备
5.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。