恩诺沙星残留检测方法标准(试行)牛可食性组织中恩诺沙星残留量检测液相色谱-串联质谱法(试行)2020版

恩诺沙星残留检测方法标准（试行）牛可食性组织中恩诺沙星残留量检测液相色谱-串联质谱法（试行）

1范围

本标准规定了牛可食性组织中恩诺沙星和环丙沙星残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于牛的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪中恩诺沙星和环丙沙星残留量的检测。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试料中残留的恩诺沙星、环丙沙星经提取液提取，离心后取上清液，以正己烷净化，弃正己烷层，下层溶液氮气流吹干后复溶，离心，上清液以液相色谱-串联质谱仪测定恩诺沙星、环丙沙星残留量，内标法定量。

4试剂和材料

以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。

4.1 对照品：恩诺沙星，含量≥95%；盐酸环丙沙星，含量≥95%；盐酸恩诺沙星-d5，含量均≥95%；盐酸环丙沙星-d8，含量≥90%。

4.2 乙腈：分析纯。

4.3 乙腈：色谱纯。

4.4 甲醇：分析纯。

4.5 甲醇：色谱纯。

4.6 甲酸：分析纯。

4.7 甲酸：色谱纯。

4.8 正己烷。

4.9 1%甲酸乙腈溶液：准确量取甲酸1mL，置100mL 容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，充分混匀。

4.10 1%甲酸乙腈溶液-甲醇（95:5, V/V）溶液：准确量取甲醇5mL，置100mL容量瓶中，用1%甲酸乙腈溶液稀释至刻度，混匀。

4.11 0.1%甲酸溶液：准确量取甲酸（色谱纯）1.00mL，置1L容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，混匀。

4.12 0.1%甲酸溶液-乙腈（95:5, V/V）：准确量取乙腈（色谱纯）5mL，置100mL 容量瓶中，加入0.1%甲酸溶液稀释至刻度，混匀。

4.13 乙腈饱和的正己烷：取一定量的正己烷加入适量乙腈，直至充分混匀静置后有分层为止。

4.14 标准储备液：根据各对照品的含量，精密称取各对照品适量，恩诺沙星、环丙沙星配制成浓度为200µg/mL的储备液，恩诺沙星-d5、环丙沙星-d8配制成浓度为100µg/mL的储备液。将精密称取的单个对照品分别置于10mL 棕色容量瓶中，加入甲醇（色谱纯）约5mL，涡旋、超声使溶解，再用甲醇（色谱纯）稀释并定容至10mL。-20℃保存，有效期3个月。使用时将标准储备液按需要用甲醇（色谱纯）逐级稀释为标准工作溶液（10µg/mL、1µg/mL或100ng/mL），现配现用。

5仪器和设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。