酸水解法测定食品中脂肪含量与索氏抽提法的比较
脂肪的测定方法
脂肪的测定方法
脂肪的测定方法主要包括索氏提取法、酸水解法和碱水解法等。
索氏提取法适用于各类食品中脂肪含量的测定，操作简便，准确度高，但提取时间长。
酸水解法适用于食品中游离态脂肪及结合态脂肪总量的测定，而碱水解法适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品中脂肪的测定。
此外，盖勃法也适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品中脂肪的测定。
在索氏提取法中，需要将粉碎或经处理而分散的试样放入圆筒滤纸内，利用乙醚在水浴中加热回流，提取试样中的脂类于接受烧瓶中，经蒸发去除乙醚，再称出烧瓶中残留物的质量，即可计算出试样中脂肪的含量。
具体操作步骤包括滤纸筒的制备、样品制备、索氏抽提器的准备、抽提和回收溶剂等。
请注意，每种方法都有其适用范围和局限性，应根据具体的食品种类和脂肪类型选择合适的测定方法。
《食品分析》练习题及答案解析
《食品分析》练习题及答案解析食品分析绪论作业1.食品分析的学科性质与主要内容是什么?答：性质:专门研究各种食物组成成分的检测方法及有关理论，进而评定食品品质的一门技术性学科;主要内容:1.食品营养成分的分析;2.食品(添加剂与有毒有害物质)安全性检测;3.食品品质分析和感官检测。
2.简单阐述食品分析方法要考虑的因素?答：食品分析方法的选择通常是要考虑到样品的分析目的，分析方法本身的特点如专一性，准确度，精密度，分析速度，设备条件，成本费用，操作要求等以及方法的有效性和适用性。
样品的采集与处作业1、采样的定义及要求答：定义：在大量产品抽取有一定代表性的样品，供分析化验用，这项工作叫采样。
要求：(1)采集的样品应具有代表性。
以使对所取样品的测定能代表样本总体的特性。
(2)采样方法应与检测目的保持一致。
(3)采样量应满足检测精度要求，能足够供分析、复查或确证、留样用。
(4)采样过程中，应及时、准确记录采样相关信息。
(5)样品采集、运输、制备过程中应防止待测定组分发生化学变化、损失，避免样品受到污染。
水分及水分活度的测定作业1、试比较直接干燥法，减压干燥法，蒸馏法，卡尔费休法的特点及在食品中水分含量测定的适用范围。
答：直接干燥法：特点：适用范围最广泛，利用食品中水的性质，且设备简单，成本较低。
适用范围：适用于101~105℃下，不含或含其他挥发性物质甚微的食品。
减压干燥法：特点：测定水分快速，简便，但其精密度较差，当样品份数较多时，效率反而降低。
适用范围：适用于糖、味精等易分解食品的干燥，不适用于添加了其他原料的糖果的测定。
蒸馏法：特点：此法为一种高效的换热方法，水分可以被迅速的移去，加热温度比直接干燥法低。
另外是在密闭的容器中进行的，设备简单，操作方便。
适用范围：广泛用于各类果蔬、油类等多种样品的水分的测定。
特别是香料，此法是唯一公认的水分含量的标准分析方法。
卡尔费休法：特点：费休法广泛地应用于各种液体固体、及一些气体样品中水分含量的测定，也常作为水分痕量级标准分析方法，也可用于此法校定其他的测定方法。
酸水解法与索氏抽提法测定火腿肠中脂肪含量的比较研究
酸水解法与索氏抽提法测定火腿肠中脂肪含量的比较研究魏永义;张亚乐;张芳【摘要】采用酸水解法和索氏抽提法测定火腿肠中的脂肪含量,结果表明,酸水解法和索氏抽提法检测样品中脂肪的含量分别为12.05g/100g、11.91g/100g,通过t 值检验得知,两种方法无明显差异,但由于索氏抽提法的相对误差和变异系数比酸水解法的值小,因此,索氏抽提法的准确度和精确度较高.【期刊名称】《肉类工业》【年(卷),期】2016(000)002【总页数】2页(P39-40)【关键词】酸水解法;索氏抽提法;火腿肠;脂肪;测定【作者】魏永义;张亚乐;张芳【作者单位】漯河医学高等专科学校河南漯河 462002;漯河医学高等专科学校河南漯河 462002;河南双汇投资发展股份有限公司技术中心河南漯河 462000【正文语种】中文脂肪是火腿肠中重要的组成成分，也是火腿肠质量控制的一项重要指标，脂肪含量对于火腿肠产品的口感、组织结构、外观等都有一定影响[1]，因此，测定脂肪含量对于火腿肠的质量管理与评价具有重要的意义。
目前，食品中脂肪的测定方法有罗紫哥特里法、自动脂肪测定仪法、酸水解法、索氏抽提法等[2～5]，而测定火腿肠中脂肪含量的方法主要是酸水解法和索氏抽提法，酸水解法适合于游离脂肪含量少、结合态脂肪含量多的食品，而索氏抽提法适合于结合态脂肪含量少的食品，为了比较两种方法在测定火腿肠中脂肪含量有无差异，所以本文采用酸水解法和索氏抽提法比较研究火腿肠中脂肪的含量，以期为测定火腿肠中脂肪含量寻找一种更合适的方法。
1 材料与方法1.1 原料火腿肠：市售。
1.2 试剂盐酸，95%乙醇，无水乙醚，石油醚。
1.3 仪器索氏提取器、干燥箱、干燥器、恒温水浴锅等。
1.4 方法酸水解法、索氏抽提法采用中华人民共和国国家标准：GB5009.6—2003食品中脂肪的测定方法检测火腿肠中的脂肪。
1.5 t值检验法设分别为两种测定方法各次测定值的算术平均值；n1、n2分别为两种方法的测定次数，计算t值。
用“酸水解法”测脂肪的注意点
如何判断电子秤传感器的故障
电子 秤具 有称 量快速 、显示直 观 、不 易磨损 等 优 点 ，已逐 渐取代 机械 秤 。电子 秤主要 有承 重传 力系 统 、 称重传 感器 和显示 仪表 组成 。 目前 在 国内的 电子 秤传 感 器大 多采用 电阻 应变式 称重 传感 器 ，其应 用也越 来 越 普遍 。常用 的 电阻应 变式称 重传 感器 的工作 原理 是 弹性 体在 外力 的作用 下产 生弹性 变形 ，使 粘贴 在它 表 面 的电阻应 变片 也随 同发生 变形 ，电阻 应变片 变形 后 ， 它的 阻值发 生变 化 ，由于应 变片 是连 接成平 衡 电桥式 的 ，应 变片 电阻值 的变化 会 引起 电桥 的不 平衡 ，从 而输 出信号 ，这 样就完成 了将 外力变 换为信 号的过程 。
处理后的样品取2g加入蒸馏水8ml起溶散作用体积在10ml左右再加入10ml浓盐酸对样品进行酸化分解再放入70c80c水浴内保温酸化40钟50分钟每隔15分钟振摇一次使其样品酸化分解彻底取出后用10ml乙醇冲洗管壁上附着物混匀后冷却用一定量的乙醚石油醚两次加入两次振摇每次1分钟然后静止提取时间一定要在规定时会有少量糖粉析出使测定结果增高提取的脂肪经挥发干燥后颜色较深有四个样品比对数据如下
６）
定结果 （，
（％） （％）
１９４０ １８３７ １３３ｌ ｌ５３ｌ
１９３５ １８６８ １３７５ １５２８
１９３８ １８７０ １３７３ １ ３０
０ ２６ ０２７
∞ ２０
２１ ２０ ２０２Ｓ ｌＳ３６ ｌ７０．篮 ｌ５ ３８ ｌ７ ０３
０ ２８ ０．３ｏ ０３３ ０ ２３
从 表 中可 以看 出 ，同一时 １司提 取 的脂肪 结 果 ，平 行 试验都 没有超 出 国标 规定 的范 围 ，相对相 差也在规 定范 围 的 ５％之 内 ，但 从 两个 浸提 时 间 的结 果 平 均 值 看 ， １＂１．７９％ 、２＂１ ５２％ 、３＂１ ６５％、４＂１．７３％，误 差 太 大 ，基 本在
《食品检测技术》试卷.doc
《食品检测技术》试卷A出卷人： 敬思群 校对人：孙来华 考试时间： 120分钟一、填空题（10分）1、有机物破坏法，根据具体操作方法不同，可分为_________和 两大类。
2、在研究一个分析方法时，通常用 、 和灵敏度这三项指标评价。
3、食品中水分测定的方法有许多种，通常可分为两大类： 、 。
4、灰分是标示食品中 总量的一项指标。
5、水蒸汽蒸馏法适用于各类饮料、果蔬及其制品中 含量的测定。
6、碱性酒石酸铜甲、乙液应分别配制分别 ，不能事先 。
7、食品中的酸度，可分为 、 和 。
8、样品中含有大量挥发性物质时，用 测定误差较大，而用 结果较准确。
9、玻璃的化学成分主要是 、 、 、 。
10、密度计是根据 原理所制成。
二、名词解释（15分） 1、 采样姓名： 班级： 考号：2、比旋光度3、溶剂萃取法4、ppm5、总酸度6、恒重三、判断题（10分）1、食品的质量特性包括食用特性。
（）2、采样用具具有保护样品的功能。
（）3、分析结果的精密度，可以用单次测定结果的平均偏差表示。
（）4、醋酸镁、硝酸镁可做为助灰化剂。
（）5、可用直接干燥法测定淀粉糖浆中的水分。
（）6、索氏提取法适用于脂类含量高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结块的样品的测定。
（）7、凯氏定氮法中，硫酸铜可以提高溶液的沸点而加快有机物分解。
（）8、费林氏试液宜用标准还原糖液加以标定。
（）9、只要是优级纯试剂都可作基准物。
（）10、液体物质的密度是指在规定温度下单位体积物质的质量。
（）四、简答题（48分）1、对采样的基本要求是什么？2、干法灰化的原理及方法特点是什么？3、什么是蒸馏法？在进行样品制备时，有哪几种蒸馏方式？4、在进行总酸度测定时，为什么样品浸渍、稀释用蒸馏水中不能含有CO2？如何去除CO2？5、在氨基酸态氮测定中，为什么要加入甲醛？6、测定脂肪时，索氏抽提法与酸水解法的区别是什么？7、炼乳、鲜鱼必须分别采取哪种方法测定其脂肪含量？如何进行样品预处理？8、在食品检验中，什么是平行实验？如何报出结果？五、计算题（17分）测定某食品试样中蛋白质含量，进行7次平行测定，经校正系统误差后，其数据为19.58、19.45、19.47、19.50、19.62、19.38、19.80，用Q检验法确定19.80是否应舍去（n=7时，Q0.90=0.51），并分别计算：x、d 。
营养食品中脂肪测定方法研究
营养食品中脂肪测定方法研究
孙学文 程雪荣 山东越品检验检测有限公司
食 品中脂肪含量是常见食品如芝麻、核桃 及乳制品中营养的重要衡量指标之一。 当前我国的食品安全国家标准中关于脂肪含量 的测定方法主要有索氏抽提法、酸水解法和碱 水解法。其中索氏抽提法是测定脂肪的一种经 典方法, 可对食品中的游离态脂肪含量进行测 定；酸水解法是将待测样品在酸性条件下水解 , 使其中的结合态脂肪转变成游离态, 再和样品 中原来的游离态脂肪和少量脂溶性成分一同被 醚萃取, 测定样品中的脂肪总量。
82·FOOD INDUSTRY
6.22% 6.78% 8.08% 9.06% 7.11% 6.15%
其中，索氏抽提法的数据明显低于其它两 法。索氏抽提法测定的是游离态脂肪, 而其他 两者测定的是总脂肪，这是一个原因。另外， 由于营养食品成分复杂,且经过多道工艺加工处 理, 索氏抽提法的抽提效率还不能很好满足测 定的要求。酸水解法与碱水解法的测定结果相 近且无显著差异。
讨论
通过试验结论比较酸水解法与碱水解法发 现：两种方法均能较完全得提取待测样品中的 脂肪，精密度满足要求。碱水解法更为简便。 当待测样品中含有色素等非营养物质时, 用碱 水解法测定, 色素会留在溶液下层, 不干扰测定 的有效性。用酸水解法进行测定时，待测样品 中的色素会同时提取到有机溶剂中，测定的脂 肪为粗脂肪，因此有时测定结果会比减水解法 高。
材料及方法
试验仪器及材料：索氏抽提器、恒温水 浴锅、干燥箱、干燥器（带干燥剂）、电热 板（满足200℃的高温）、离心机、滤纸筒、 锥形瓶、蒸发皿、抽脂瓶、分析天平（感量 0.001g、0.0001g）、脱脂棉、中速滤纸
试验试剂：三级纯水、石油醚（沸程为 30℃～60℃）、无水乙醚、乙醇、碘、碘化 钾、氨水、盐酸
饲料中粗脂肪两种测定方法的比较探讨
饲料中粗脂肪两种测定方法的比较探讨邱代飞【摘要】粗脂肪是饲料中的一个重要组成部分，虽然各种动物对它的需要量不大，但是它在动物营养中起着很重要的作用。
目前饲料中粗脂肪测定的国标方法GB／T6433—2006中提及有直接索氏抽提法和盐酸水解法，为了验证这两种方法检测结果之间的差异性，本文通过运用这两种方法分析多种饲料原料的粗脂肪含量，对这两种方法的特点进行比较探讨，得出盐酸水解法是适用有效的方法，其检测结果能更真实的反映饲料中的粗脂肪含量，对于饲料配方设计和降低饲料成本具有非常重要的指导意义。
【期刊名称】《广东饲料》【年(卷),期】2012(000)009【总页数】3页(P40-42)【关键词】饲料;粗脂肪;测定方法【作者】邱代飞【作者单位】广东海大集团检测中心,广州510545【正文语种】中文【中图分类】S816.17脂肪是广泛存在于动植物体内的一类有机化合物。
根据其结构的不同，可分为真脂肪和类脂两大类。
真脂肪即中性脂肪，它是1分子甘油和3分子脂肪酸构成的甘油三酯。
类脂肪指含磷或含糖或含其它含氮物的脂肪，它虽不属于真脂肪，但它在结构上或性质上却与真脂肪相接近，主要包括磷脂、糖脂、固醇及蜡。
脂肪是脂溶性维生素的溶剂，是动物热能来源和构成动物体组织的重要原料，脂肪还可为幼小动物提供必需脂肪酸等等。
目前饲料中粗脂肪测定的国标方法为GB／T 6433-2006(1)，该标准介绍了直接索氏抽提法和盐酸水解法两种测定方法，测得的脂肪还含有有机酸、色素、脂溶性维生素、叶绿素等物质，故称为粗脂肪。
本文分别用这两种方法测定几种常用饲料原料的粗脂肪含量，并对两种测定方法进行了比较探讨，现将结果报告如下。
1 材料与方法1.1 试验样品市场抽取的不同厂家的14份鱼粉、4份肉粉、4份鸡肉粉、10份花生仁饼、11份啤酒糟、以及11份DDGS样品。
1.2 仪器设备分析天平（分度值0.0001）：BSA224S，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；高速万能粉碎机：FW100，天津市泰斯特仪器有限公司；电热恒温鼓风干燥箱：DHG-9123A型，上海一恒科学仪器有限公司；电热恒温水浴锅：HWS12型，上海一恒科学仪器有限公司；索氏脂肪抽提仪：WE1Y。
食品分析简答题
简答题汇总1.采样的原则：答：（1）采集的样品必须具有代表性（2）采样方法必须与分析目的保持一致（3）采样及样品制品过程中设法保持原有的理化指标，避免预测组分发生化学变化或丢失要防止和避免预测组分的玷污（4）样品的处理过程尽可能简单易行，所用样品处理装置尺寸应当与处理的样品量相适应。
2.为什么要进行样品预处理，样品预处理的要求？答：为了使试样中的待测组分处于适当的状态，以适应分析测定方法的需求，必须对食品试样进行预处理。
样品预备处理的要求：（1）消除干扰因素（2）完整保留被测组分（3）使被测组分浓缩3.简述有机物破坏法所用的两种方法，以及两种方法之间的优缺点？（1）干法灰化：样品在坩埚中，先小火炭化，然后再高温灼烧（500-600℃），有机物被灼烧分解，最后只剩下无机物（无机灰分）的方法。
干法灰化：优点是①有机物破坏彻底，②操作简便，③使用试剂少缺点是①耗时长，②温度高，不适合在高温下易挥发金属元素的测定。
（2）湿法消化：样品在强酸、强氧化剂或强碱并加热的条件下，有机物被分解，其中的C、H、O等元素以CO2、H2O等形式挥发逸出，无机盐和金属离子则留在溶液中的方法。
湿法消化：优点是①加热温度较干法低，减少了金属挥发逸散的损失。
②耗时短缺点是①在消化过程中，产生大量有毒气体，操作需在通风柜中进行。
②在消化初期，产生大量泡沫易冲出瓶颈，造成损失，故需操作人员随时照管，操作中还应控制火力注意防爆。
③耗用试剂较多，在做样品消化同时，必需做空白试验。
4.简述烘箱法水分测定的误差来源。
（已考过）5.简述蒸馏法水分测定的原理及误差来源。
答：原理：将食品中水分与水互不相溶的高沸点有机溶剂（如甲苯、二甲苯）共同蒸出，收集馏出液于接收管内，从所得的水分的容量求出样品中的水分含量。
误差来源：（1）样品中水分没有完全蒸发出来（2）水分附集在冷凝器和连接管内壁（3）水分溶解在有机溶剂中，生成了乳浊液（4）馏出了水溶性的成分6.用直接滴定法测定还原糖时，怎样提高测定结果的准确度？答：（1）用哪种还原糖表示结果就用相应的已知浓度的还原糖标定碱性酒石酸铜溶液。
6脂类的测定解析
MgO2等
ZnO2、
⑤ 提取时水浴温度不行过高，以冷凝管滴下80 滴／min左右，回流6—12次/h为宜，提取过程 应留意防火。
⑥在抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙枯 燥管，这样，可防止空气中水分进入，也可避 开乙醚挥发在空气中，如无此装置可塞一团枯 燥的脱脂棉球。
样品质量计)，g。
(五) 留意及说明
① 样品应枯燥后研细，样品含水分会影 响溶剂提取效果，而且溶剂会吸取样品中 的水分造成非脂成分溶出。装样品的滤纸 筒肯定要严密，不能往外漏样品，也但不 要包得太紧影响溶剂渗透。放入滤纸筒时 高度不要超过回流弯管，否则超过弯管的 样品中的脂肪不能提尽，造成误差。
② 对含多量糖及糊精的样品，要先以冷水 使糖及糊精溶解，经过滤除去，将残渣连 同滤纸一起烘干，再一起放入抽提管中。
③ 抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、 无过氧化物，挥发残渣含量低。因水和醇 可导致水溶性物质溶解，如水溶性盐类、 糖类等，使得测定结果偏高。过氧化物会 导致脂肪氧化，在烘干时也有引起爆炸的 危急。
④乙醚中过氧化物的检查方法：
• 取6ml 乙醚，加2ml 10%的碘化钾溶液，用力 振摇，放置1分钟，假设消失黄色，则证明有 过氧化物存在。
《食品养分标签治理标准》2023 年5月1日强制实行
• 脂肪和脂肪酸 (fat and fatty acid) • 由于检测方法的不同，脂肪有粗脂肪〔crude fat〕或
总脂肪〔total fat〕之分，在养分标签上均可标示为 “脂肪”。
• 粗脂肪〔crude fat〕 食品中一大类不溶于水而溶于有 机溶剂〔乙醚或石油醚〕的化合物的总称。除了甘油 三酯外，还包括磷脂、固醇、色素等。可通过索氏抽 提法或罗高氏法等方法测定。
国标规定脂肪的测定方法有哪几种
国标规定脂肪的测定方法有哪几种索氏提取法，又名连续提取法、索氏抽提法，是从固体物质中萃取化合物的一种方法。
索氏提取法，用于粗脂肪含量的测定。
脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。
酸水解法，适用于各类食品中总脂肪含量的测定，但对含磷脂较多的一类食品，如鱼类、蛋类及其制品，在盐酸溶液中加热时，磷脂几乎完全分解为脂肪酸和碱，使测定结果偏低，多糖类遇强酸易炭化，影响测定结果。
测定时间短，在一定程度上可防止之类物质的氧化。
碱水解法，利用各种碱性化合物与氯化木素反应。
促进废液中aox降低的方法，由于碱性化合物的不同或不同的组合。
盖勃氏法，测定乳与乳制品中脂肪含量的容量测定法，是一种与美国巴布科克试验相对应的欧洲使用的方法分川盖勃生乳乳脂计定和用盖勃稀奶油乳脂计测定两种。
索氏提取法，又名连续提取法、索氏抽提法，是从固体物质中萃取化合物的一种方法。
索氏提取法，用于粗脂肪含量的测定。
脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。
酸水解法，适用于各类食品中总脂肪含量的测定，但对含磷脂较多的一类食品，如鱼类、蛋类及其制品，在盐酸溶液中加热时，磷脂几乎完全分解为脂肪酸和碱，使测定结果偏低，多糖类遇强酸易炭化，影响测定结果。
测定时间短，在一定程度上可防止之类物质的氧化。
碱水解法，利用各种碱性化合物与氯化木素反应。
促进废液中aox降低的方法，由于碱性化合物的不同或不同的组合。
盖勃氏法，测定乳与乳制品中脂肪含量的容量测定法，是一种与美国巴布科克试验相对应的欧洲使用的方法分川盖勃生乳乳脂计定和用盖勃稀奶油乳脂计测定两种。
食品脂肪含量的测定(样品比较、方法比较)
【任务相关参考资料的查阅（请按参考文献的标准方法记录）】
必需查阅的相关文献 GB/T 14772-2008 食品中粗脂肪的测定[S]
本标准适用于肉制品、豆制品、坚果制品、谷物油炸作品、糕点等食品中粗脂肪的测定。 取有代表性的样品至少 200g，捣碎，剪碎等使颗粒大小适中，混合均匀，置于密封玻璃容器中。
主要通过对照实验, 得出糕点中含水分时对脂肪测定值的影响 1.糕点未经干燥处理测得脂肪含量比经干燥处理测得脂肪含量值要高) 即糕点含水分越高直接称样 测定脂肪值越大。主要原因是, 在含水状态下, 糕点中各种物质, 各种分子之间吸附力降低, 特别是 脂肪类物质, 如甘油三酸醋, 游离脂肪酸等, 还有各种蜡状物、磷脂、各种色素, 香精油, 硫化物, 醛和酮等许多杂质, 在用乙醚或石油醚萃取时, 都溶解在有机溶剂中而一同被抽提出来。, 故抽提的 是“粗脂肪” , 其值偏高。因此, 试样如果含有水分, 将增大脂肪测定中杂质含量, 也使脂肪测定 值偏高。 2 、糕点未经干燥处理测定脂肪含量比经于燥处理测定脂肪含量数值要高。糕点脂肪的测定一定要采 用测定水分后的样品, 或将食品在 1 0 0 士 5 摄氏度的烘箱中干燥 2 小时, 这样测得的数值才能准 确、可靠。
以使脂肪完全洗脱。 (3) 残余法浸泡时间可利用晚上时间,由于不加热回流,不必守护,不占用工作日。回流时间进行调整。 外加的脂肪如方便面等油炸食品,虽然含量高,但脂肪容易浸出,浸泡后回流 2～3 h，即可提取完全。 注意事项： 实验过程中应注意称量的重要性,天平室的环境条件除满足一般要求外,相对湿度应控制在 45 %以下 在此条件下滤纸包烘 2 h 即达到恒重要求,不必复烘。铝杯在整个抽提过程一直处于 135 ℃的环境中， 只需烘 30 min 即达到恒重要求。与国标法相比节约了恒重所需的大量时间,简化了实验操作。
豆浆粉中脂肪含量测定方法分析比较
醚，３０ｍＬ石油醚，混合，静置过夜；吸出上 清液于已恒重的锤形瓶中，将锤形瓶置于水浴 上蒸干，再于１０５℃烘箱干燥至恒重。
结果与分析
（１）索氏提取、酸水解、碱水解法对豆 粉脂肪含量测定的影响
提取方法
脂肪含量 (%)
相对标准偏差(%)
样品1 样品2 样品3 样品1 样品2 样品3
索氏提取
2.37 2.49 2.58 1.79 1.99 2.19
酸水解(水解时间30min)
8.34 8.60 8.65 1.70 1.32 1.47
碱水解法(水解时间15min) 10.00 10.11 10.20 0.68 0.54 0.51
分别采用索氏提取法、酸水解法（水解 时间３０ｍｉｎ）、碱水解法（水解时间１５ｍｉｎ） 对三个品种豆浆粉脂肪含量进行测定，结果表 明：索氏提取的脂肪含量测定结果最小，分别 为：２．３７％、２．４９％、２．５８％；酸水解法（水 解时间３０ｍｉｎ）测定的脂肪含量其次，分别 为：８．３４％、８．６０％、８．６５％；碱水解法（水 解时间１５ｍｉｎ）测定的脂肪含量最大，分别为 １０．００％、１０．１１％、１０．２０％。这是由于豆浆 粉的脂肪大都以结合态的脂肪形式存在，而索 氏提取法主要适用于游离态脂肪含量的测定； 豆浆粉中含有部分的的磷脂，磷脂在酸水解的 过程中几乎完全分解为脂肪酸和碱，故酸水解 法测定的脂肪含量叫碱水解法偏低。
10min 15min 20min 30min 40min 50min
9.93
10.02 10.00
1.03
0.96
1.50
10.00 10.11 10.20
0.68
0.54
0.51
9.90
9.97
10.13
测定食品脂类的几种常用方法
74 食品安全导刊 2013年4月刊TECHNOlOGy THESIS 科技文苑脂类主要是指食品中包含的脂肪（甘油三酸酯）及一些类脂化合物，如脂肪酸、磷脂、糖脂、甾醇、蜡、固醇、脂溶性维生素等。
鉴于类脂的脂溶性，类脂常看成为油脂的伴随物质。
大多数动物性食品及某些植物食品（如种子、果仁、果实）都含有天然脂肪或类脂化合物。
食品中脂肪的存在形式有游离态的，如动物性脂肪及植物性的油脂，也有结合态的，如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白中的脂肪及某些加工食品（如焙烤食品及麦乳精等）。
游离态的脂肪是主要的，结合态脂肪含量较少。
脂肪是食品中重要的营养成份之一，是食品中具有最高能量的营养素，提供的能量比碳水化合物或蛋白质要多一倍以上，能提供必需的脂肪酸，是脂溶性维生素的含有者和传递者，脂肪与蛋白质结合生成的脂蛋白，在调节人体机能和完成体内生化反应方面都起者十分重要的作用，但过量摄入脂肪对人体健康是不利的。
在食品生产过程中，脂类含量对于产品风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。
故在含脂肪的食品中，其含量都有一定的规定，是食品质量测定食品脂类的几种常用方法□ 陆翠珍 江苏省张家港市产品质量监督检验所 李 英 不二制油（张家港）有限公司江苏摘 要：本文简要介绍了测定食品脂类含量的几种常用方法，对索氏抽提法（索克列特抽提法）、酸水解法、罗紫－哥特里法（碱性乙醚法）和氯仿－甲醇提取法四种方法的操作注意事项进行了说明。
指出在实际食品检验工作中，应根据不同的样品特点选择适当、合理的检验方法，提高油脂含量的检测精度。
关键词：食品 脂类 检测方法管理中的一项重要指标。
测定食品中的脂肪含量，可以用来评价食品的品质，衡量食品的营养价值，而且对实行工艺监督、生产过程中的质量管理、研究食品的贮藏方式是否恰当等方面都有重要意义。
测定食品中脂肪的含量，可以作为鉴别食品品质，评定营养标签成份的一个重要指标。
脂肪含量的测定有很多方法，如索氏抽提法（索克列特抽提法）、酸水解法、罗紫－哥特里法（碱性乙醚法）、氯仿－甲醇提取法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等，它们各有特点，在实际生产应用中主要还是以前4种居多。
脂肪测定的四种方法,索氏提取法、酸水解法、巴布科克法、盖勃氏法
脂肪的测定方法第—法索氏抽提法1原理样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。
因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。
抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。
2 试剂2.1无水乙醚或石油醚。
2.2 海砂:同GB 5009.3-85《食品中水分的测定方法》2.3。
3仪器索氏提取器。
4操作方法4.1样品处理4.1.1固体样品：精密称取2～5g(可取测定水分后的样品)，必要时拌以海砂，全部移入滤纸筒内。
4.1.2 液体或半固体样品：称取5.0～10.0g，置于蒸发皿中，加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后，再于95～105℃干燥，研细，全部移入滤纸筒内。
蒸发皿及附有样品的玻棒，均用沾有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内。
4.2抽提将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒量的接受瓶，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2／3处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流提取，一般抽取6～12h。
4.3 称量取下接受瓶，回收乙醚或石油醚，待接受瓶内乙醚剩1～2mL时在水浴上蒸干，再于，95～105℃干燥2h，放干燥器内冷却0.5h后称量。
4.4计算m1-m0X = ─────── × 100m2式中，X——样品中脂肪的含量，％；m1——接受瓶和脂肪的质量，g;m0——接受瓶的质量，g;m2——样品的质量(如是测定水分后的样品，按测定水分前的质量计)，g。
第二法酸水解法5原理样品经酸水解后用乙醚提取，除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。
6试剂6.1盐酸6.2 95%乙醇。
6.3 乙醚。
6.4 石油醚。
7仪器100mL具塞刻度量筒。
8操作方法8.1样品处理8.1.1固体样品：精密称取约2g，置于50mL大试管内，加8mL水，混匀后再加10mL盐酸。
8.1.2 液体样品：称取10.0g，置于50mL大试管内，加10mL盐酸。
8.2将试管放入70～80℃水浴中，每隔5～10min以玻璃棒搅拌一次，至样品消化完全为止，约40～50min。
酸水解法与自动索氏抽提法测定人造奶油脂肪含量的差异研究和方法改进
酸水解法与自动索氏抽提法测定人造奶油脂肪含量的差异研究和方法改进张俊浩;冯会敏;温雅婷;杜高发【摘要】Fat contents in six kinds of margarine were determined by acid hydrolysis and automatic Soxhlet extraction,and the automatic Soxhlet extraction was improved.The results of different methods were comparatively analyzed and researched.The results showed that the experimental result of acid hydrolysis was lower.There was a significant difference between acid hydrolysis and automatic Soxhlet extraction in the determination of fat content in margarine.So the automatic Soxhlet extraction was more appropriate.In the same time,the automatic Soxhlet extraction was improved,and the experimental result had high accuracy with the standard deviation 0.12 and the standard error of mean0.03,showing that the reproducibility was good.The improvement method had a significant impact on the experiment.Moreover,the extraction paper tube could be recycled for twelve times,which reduced the cost of experiment by the improvement method.%采用酸水解法和自动索氏抽提法测定6种不同人造奶油试样的脂肪含量,并对自动索氏抽提法进行改进,对不同方法的结果差异进行分析和研究.结果表明:酸水解法的实验结果偏低;且酸水解法和自动索氏抽提法对人造奶油脂肪含量的测定存在显著差异,采用自动索氏抽提法更合适.同时,对自动索氏抽提法进行改进,实验结果准确度高,其标准差为0.12,均值标准误差为0.03,说明改进自动索氏抽提法重现性好;且改进法对实验具有显著的影响.采用改进自动索氏抽提法,抽提纸筒可循环使用12次,有效降低了实验成本.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2017(042)005【总页数】4页(P136-139)【关键词】人造奶油;酸水解法;自动索氏抽提法;改进;t检验【作者】张俊浩;冯会敏;温雅婷;杜高发【作者单位】广州质量监督检测研究院国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州511447;广州质量监督检测研究院国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州511447;广州质量监督检测研究院国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州511447;广州质量监督检测研究院国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州511447【正文语种】中文【中图分类】TS225.23;TS207人造奶油是利用植物油和添加部分动物油、水、调味料等经调配加工而成的，具有可塑性的油脂制品，常被用于替代从牛奶等乳制品中取得的天然奶油，已广泛用于糕点、饼干类等食品的生产中[1-2]。
【食品分离技术】---食品中常用的两种脂肪的提取方法
食品中常用的两种脂肪的提取方法摘要：脂肪是食品中重要的营养成分之一。
可供给能量和必需脂肪酸，可作为脂溶性维生素载体，也是一种富含热能营养素，是人体热能的主要来源[1]。
食品中脂肪的提取方法较多，本文主要介绍索氏提取法，酸水解法。
关键词：脂肪；索氏提取；酸水解脂类的结构比较复杂，目前没有一种溶剂能将纯脂肪萃取出来，也就是说提取出来的都是粗脂肪。
脂类不溶于水，易溶于有机溶剂，提取脂类大多采用低沸点的有机溶剂，因为提取温度不能超过溶剂沸点，却又要接近此沸点，这样提取效果才好，但高温又会使低级脂肪酸挥发损失，从而影响结果。
常用的溶剂有乙醚、石油醚、氯仿-甲醇混合溶剂，其中乙醚沸点最低，溶解脂肪的能力强，应用最广泛[1]。
1 索式提取法此法是经典方法，适用于脂类含量较高、含结合态脂肪较少、能烘干磨细、不易吸潮结块的样品的测定。
1.1原理将经前处理而分散且干燥的样品用无水乙醚或石油醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（或粗脂肪）。
一般食品用有机溶剂浸提，挥干有机溶剂后得到的重量主要是游离脂肪，此外，还含有磷脂、色素、树脂、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以用索氏提取法测得的脂肪，也称粗脂肪。
索氏提取法测得的只是游离态脂肪，而结合态脂肪测不出来（因该法使用的无水乙醚或石油醚等有机溶剂只能提取样品中的游离脂肪）。
1.2 仪器①索氏提取器，回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成，抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥，提脂烧瓶需烘干并称至恒量。
②电热恒温水浴锅（50~80℃）。
③电热恒温烘箱（80~120℃）。
1.3 试剂无水乙醚或石油醚、海砂。
1.4 测定方法滤纸筒的制备→样品制备→索氏提取器的准备→抽提→回收溶剂①纸筒的制备将滤纸裁成8cm×15cm大小，以直径为2.0cm的大试管为模型，将滤纸紧靠试管壁卷成圆筒型，把底端封口，内放一小片脱脂棉，用白细线扎好定型，在100~1050C烘箱中烘至恒量（准确至0.0002g）。
酸水解法测定脂肪
酸水解法测定脂肪内容摘要：酸水解法适用于各类食品中脂肪的测定，对固体、半固体、黏稠液体或液体食品，特别是加工后的混合食品，容易吸湿、结块，不易烘干的食品，不能采用索氏提取法时，用此法效果较好。
1．酸水解法原理强酸与样品一同加热进行水解，结合或包藏在组织里的脂肪可游离出来，然后用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，除去溶剂后即为脂肪含量。
2．仪器①100 mL具塞刻度量筒。
②烘箱。
3．试剂①95％乙醇。
②乙醚(不含过氧化物)。
③石油醚(30~60℃沸程)。
④浓盐酸。
4．测定步骤①样品处理a．固体样品：准确称取约2．0 g，置于50 mL试管中，加8 mL水，混匀后再加10 mL浓盐酸。
b．液体样品：准确称取10.0 g置于50mL试管中，加10 mL，浓盐酸。
②水解：将试管放入70~80℃水浴中，每隔5～10 min用玻璃棒搅拌一次，至样品脂肪游离消化完全为止，时间约需40~50 rain。
水解过程中，如水分蒸发，应适当补加水，保持溶液总体积不变，以避免酸浓度升高。
③提取：取出试管，加入10 mL乙醇，混合。
冷却后将混合物移人100 mL具塞量筒中，用25 mL乙醚分次洗试管，洗液一并倒人量筒中。
加塞振摇1 rain，小心开塞放出气体，再塞好，静置12 min，小心开塞，用石油醚一乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。
静置10~20min，待上部液体澄清，吸出上清液于已恒重的烧瓶内，再加5 mL石油醚一乙醚等量混合液于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放人原烧瓶内。
④回收溶剂、烘干、称重：回收烧瓶内乙醚后，将烧瓶于水浴上蒸干后，置100~105℃烘箱中干燥2 h，取出放进干燥器内，冷却30 min后称重，反复干燥冷却操作至恒重。
5.说明①测定的样品需充分磨细，液体样品需充分混合均匀，以使消化完全。
②水解后加的乙醇可使蛋白质沉淀，促进脂肪球聚合，同时溶解一些碳水化合物、有机酸等。
后面用乙醚提取，因乙醇可溶于乙醚，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物残留在水层，并使分层清晰。
食品分析简答题
简答题汇总1.采样的原则：答：（1）采集的样品必须具有代表性（2）采样方法必须与分析目的保持一致（3）采样及样品制品过程中设法保持原有的理化指标，避免预测组分发生化学变化或丢失要防止和避免预测组分的玷污（4）样品的处理过程尽可能简单易行，所用样品处理装置尺寸应当与处理的样品量相适应。
2■为什么要进行样品预处理，样品预处理的要求？答：为了使试样中的待测组分处于适当的状态，以适应分析测定方法的需求，必须对食品试样进行预处理。
样品预备处理的要求：（1）消除干扰因素（2）完整保留被测组分（3）使被测组分浓缩3■简述有机物破坏法所用的两种方法，以及两种方法之间的优缺点？（1）干法灰化：样品在坩埚中，先小火炭化，然后再高温灼烧（500-600C），有机物被灼烧分解，最后只剩下无机物（无机灰分）的方法。
干法灰化：优点是①有机物破坏彻底，②操作简便，③使用试剂少缺点是①耗时长，②温度高，不适合在高温下易挥发金属元素的测定。
（2）湿法消化：样品在强酸、强氧化剂或强碱并加热的条件下，有机物被分解，其中的C、H、O等元素以CO2、H2O等形式挥发逸出，无机盐和金属离子则留在溶液中的方法。
湿法消化：优点是①加热温度较干法低，减少了金属挥发逸散的损失。
②耗时短缺点是①在消化过程中，产生大量有毒气体，操作需在通风柜中进行。
②在消化初期，产生大量泡沫易冲出瓶颈，造成损失，故需操作人员随时照管，操作中还应控制火力注意防爆。
③耗用试剂较多，在做样品消化同时，必需做空白试验。
4■简述烘箱法水分测定的误差来源。
（已考过）5■简述蒸馏法水分测定的原理及误差来源。
答：原理：将食品中水分与水互不相溶的高沸点有机溶剂（如甲苯、二甲苯）共同蒸出，收集馏出液于接收管内，从所得的水分的容量求出样品中的水分含量。
误差来源：（1）样品中水分没有完全蒸发出来（2）水分附集在冷凝器和连接管内壁（3）水分溶解在有机溶剂中，生成了乳浊液（4）馏出了水溶性的成分6■用直接滴定法测定还原糖时，怎样提高测定结果的准确度？答：（1 ）用哪种还原糖表示结果就用相应的已知浓度的还原糖标定碱性酒石酸铜溶液。
食品中脂肪测定方法的研究进展
食品中脂肪测定方法的研究进展作者：劳扬来源：《消费导刊》2018年第06期摘要：脂肪是食品检测中常见的项目。
大多作为营养指标。
在特殊食品中也作为限制指标。
因此。
掌握脂肪的分析测定方法对于食品检测尤为重要。
通过总结比较目前常用的几种脂肪测定方法的原理和特点。
并对其改进措施进行探讨。
为不同食品中脂肪的检测应用和发展提供一定参考。
关键词：食品脂肪检测一、主要测定方法及其原理（一）索氏提取法脂肪是丙三醇（甘油）和脂肪酸结合成的脂类化合物，能溶于脂溶性有机溶剂。
将经前处理而分散且干燥的样品用无水乙醚或石油醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（或粗脂肪）。
一般食品用有机溶剂提取，挥干有机溶剂后称得的重量主要是游离脂肪，此外，还含有磷脂、色素、树脂、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以用此法测得的脂肪，也称粗脂肪。
粗脂肪含量是粮食、油料、饲料等产品标准中重要的质量指标，是评价产品品质，组织生产的重要依据之一。
国内外测定粗脂肪含量的方法有十余种之多，索氏抽提法是目前应用最广泛的测定方法，是公认的脂肪含量测定的经典方法。
（二）酸水解法在对食品脂肪的检验方法中，酸水解法是用得较多的方法，原因是它操作简单，对操作环境的污染较小。
其原理是：将试样与盐酸溶液一同加热进行水解，使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来，再用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，干燥后称量，提取物的重量即为脂肪含量。
本方法对固体、半固态、粘稠体或液体食品，特别是加工后的混合食品，容易吸湿、结块，不易烘干的食品，不能采用索氏抽提法时，用此法效果较好。
但不宜测定含有大量磷脂和含糖量高的食品，因为磷脂遇酸加热时会分解为脂肪酸和碱，而糖类遇强酸易碳化而影响测定结果。
（三）哥特里-罗紫法原理：利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中，而脂肪游离出来，再用乙醚-石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即为乳脂肪。
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酸水解法测定食品中脂肪含量与索氏抽提法的比较山西医科大学学报（J Shanxi Med Univ） 1999, 30 （ 4） 383 酸水解法测定食品中脂肪含量与索氏抽提法的比较李秀花（山酋医科大学营养与食品卫生学教研室太原030001）摘要木文采用酸水解法和索氏抽提法同时测定了豆乳粉，乳粉等样品中脂肪含量，对两法测定结果进行比较发现：酸水解法具有提出脂肪率高，快速，不受特殊器材限制等优点，可适用于各类食品的脂肪测定，而且是豆乳粉，乳粉等喷雾加工制品脂肪测定的首选方法。
关键词中图号食品分析T S201. 2 2+酸水解法R151. 3索氏抽提法膳食脂肪类食物中脂肪含量的测定方法很多，一般多采用经典的索氏抽提法[1, 2],其优点是准确率较高，方法稳定性好。
但在多年的工作实践中发现有些经加工的食品应用索氏法测脂含量远远低于实际值，易造成测定结果的误差。
因而针对不同食物选择适当的分析测定方法成为科研和食物成分分析的首要问题。
本文旨在比较两种测脂方法对不同样品测定结果的差别，并试图找寻影响索氏法对某些样品测定值偏低的原因所在，为今后的科研工作提供准确可靠的测定方法。
1材料与方法1. 1仪器与试剂（略）1. 2样品（研制产品）；豆乳粉（研制产品）；管饲营养液市售奶粉（含糖）山西省山阴奶粉厂1. 4操作步骤：1. 4. 1索氏抽提法[1] 1. 4. 2酸水解法消化：称取样品约2克
（含脂肪0. 3~ 0. 6克）置于150 ml锥形瓶中，加入95%乙醇4 ml,使样品全部浸于乙醇中，加浓HC1 10 ml,充分混匀，置锥形瓶于80水浴中50 min,每隔10 min摆动锥形瓶一次，待全部样品消化后，取出锥形瓶，流水冷却，用95%乙醇10 ml分次将混合物全部洗入100 ml具塞置筒中。
提取用移液管准确加入乙瞇20 m 1,加塞振摇1 m in,（注意放气）,静置5 m in,再准确加入石油瞇20 ml,加塞振摇1 min, 静置30 min,待分层后，用移液管准确吸取上层瞇液20 ml于己称重的提脂瓶中（可用锥形瓶代替），水浴中回收讎液，等瞇液蒸干，置提脂瓶于105恒温干燥箱中烘至恒重。
2 100 W G:剩余物重量（g） ; W:称样品重量（g）;注：瞇液共加入40 ml,为省时间取上层醛液20 ml计算脂肪（g/ 100 g）=测定，故计算时需乘2 o
2结果与讨论G产品；市售豆粉（含糖熟）黑龙江豆品加工厂产品；市售豆粉（不含糖熟）山东荣城市腾家食品厂；普通豆粉（生）。
1. 3原理利用强酸破坏食物的特殊组织结构，使蛋白质和淀粉水解，纤维素分解，细胞壁破坏，游离出脂肪，再用乙瞇提取，经石油瞇处理抽提液，除去瞇液即得游离及结合脂肪含量。
表1两法测定脂肪含量比较（g/ 100 g）样品n豆乳粉营养
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液乳粉豆粉（熟，含糖）豆粉（熟）豆粉（生）10 6 4 3 3 10 酸水解x 21. 87 2. 60 21. 67 法s 1. 92 0. 03 0. 33 索n 10 4 3 3 10 氏x 法sP< 0.
01 < 0. 01 > 0. 05 包装说明20~ 25% 20、25% 10% 以上10%11. 93 0. 51 3. 84 0. 14 1.
95 9. 47 18. 66 0. 4612. 68 8. 95 19. 04 0. 502. 1 应用酸水解法与索氏法同时测定6种样品中脂肪含量（表1）,发现普通生豆粉用两法测定结果
384近似，(P > 0. 05),不加糖熟豆粉两法测定结果差异不大，而加糖豆粉，豆乳粉及乳粉用两法测定结果都有明显差别, 豆乳粉，乳粉经t
检验两法测定结果有显著性差异(P & It; 0. 01),从产品包装说明看，酸水解法测得值更接近实际值。
2号样品为液体，只能采用酸水解法测定，结果也符合配方值。
提示：不同的样品对测脂方法具有选择性，酸水解法适用于上述各类样品的脂肪测定。
2. 2为寻找两种方法对同一样品产生不同测定结果的原因，我们首先考虑样品中糖分是否对测定结果产生影响，表2中结果可见：在生豆粉中加入10%蔗糖或20%蔗糖后，两法测脂结果无明显差另I」，提示样品中的糖分不是造成测定误差的直接原因。
2. 3索氏法测定值偏低的样品如豆乳粉乳粉含表2生豆粉中加蔗糖后测定脂肪含量比较(g/ 100g )豆粉+ 20%蔗糖n x s酸水解法索氏法10 10 16. 16 0. 19 16. 67 0. 34豆粉+ 10%蔗糖nx s 10 17. 65 10 17. 22 0. 36 0. 274 山西医科大学学报(J Shanxi M ed U niv) 1999, 30 ( 4)糖豆粉均为经喷雾加工的产品，是否由于这些食品在喷雾干燥过程中其中的脂肪与非脂成分(蛋白质、碳水化物)成为结合状态存在，而使脂肪不易被提取岀来，造成索氏法测定误差有待作进一步研究。
总之，索氏抽提法虽为经典的、国标方法中第一法，但对某些
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特殊加工产品如乳粉、豆乳粉测定值偏低，故使用范围有一定局限性。
而酸水解法的优势在于其操作简便、快速、准确，不受特殊器材限制，
且适用于各种类型样品的测定，应用范围更为广泛。
参考文献1 2 3中华人民共和国国家标准食品卫生检验方法理化部分.北京：中国标准岀版社,1985. 22~ 23中华人民共和国卫生部•食品卫生检验方法理化部分.北京：技术标准出版社，1979. 10于守洋，刘志诚.营养与食品卫生监督检验方法指南.北京：人民卫生出版社，1989. 62~ 63上海商检局. 食品化学分析.上海：上海科技出版社，1979. 14 ~ 15 [ 1999- 07- 09收稿]。