细胞凝集反应

细胞生物学实验报告

题目：细胞凝集反应

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一、实验目的：

了解细胞膜的表面结构，掌握细胞凝集的原理。

二、实验原理：

细胞膜双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

三、实验用品：

1．土豆块茎。

2．显微镜、粗天平、双凹载玻片、滴管2支、离心管2支、离心机。

3．PHS缓冲液

称取NaCl7.2g、Na

2HPO

4

1.48g、KH

2

PO

4

0.43g、加蒸馏水，定容至1000mL调

pH值到7.2。

4．1%的红细胞

以无菌方法抽取兔子静脉血液（加抗凝剂）1mL，加生理盐水3mL，在1000r/min 的条件下离心5min，重复离心3次，最后按照压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞悬液。

四、实验步骤：

1．称取土豆去皮块茎2g，加10mL PBS 缓冲液，浸泡2h，浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

2．用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞各一滴，置载玻片上，充分混匀，静置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。

3．以PBS液加1%血细胞液作对照实验。

五、实验结果：

1．加入土豆凝集素的红细胞发生凝集，未加入土豆凝集素的红细胞未发生凝集。2．实验图片：

图1 加入土豆凝集素的红细胞（10×4）图2 未加土豆凝集素的红细胞（10×4）

加入土豆凝集素未加土豆凝集素

图3 加土豆凝集素与未加土豆凝集素的红细胞凝集情况对照（肉眼观察）

六、实验分析：

1.实验过程中出现了凝集现象不明显，肉眼不可辨别的问题。经分析，原因

是所用红细胞的离心效果不理想，红细胞浓度较低，导致实验效果不理想。

经过对离心过程的优化，成功得到了较明显的实验结果。

2.要讲土豆凝集素和红细胞充分混匀，以加快反应，使现象明显。