纸层析
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流动相和固定相的选择
1. 流动相溶剂对分离物质有适当的溶解度
(1)溶解度太大：待分离物质会随流动相跑到滤纸的最前沿 (2)溶解度太小：待分离物质留在固定相附近,分离效果不好
２.一般来说，能溶于水的待分离物质，选择水做固定相 (吸附在滤纸上)，以与水不混溶的有机溶剂做流动相
知识预备
纸层析法原理
样品溶液点在滤纸（惰性支撑物）上，做为展开剂 的有机溶剂自下而上移动（流动相），样品混合物中 各组分在水（固定相）或有机溶剂中的溶解能力各不
问题与解决
下列关于纸层析法实验的说法正确的是( c )
A.滤纸作为固定相,滤纸上吸附的水作为流动相 B.滤纸作为惰性支持物,滤纸上吸附的水作为流动相 C.滤纸上吸附的水作为固定相,不溶于水的有机溶剂 作为流动相 D.滤纸上吸附的水作为流动相,不溶于水的有机溶剂 作为固定相
2.纸层析分离的基本原理是：亲脂性强的成份在流 动相中分配的多一些， 随流动相移动的速度就快 一些；亲水性强的成份在固定相中分配的多一些， 随流动相移动的速度就慢一些。请你根据上述实
Cu 2+ +2NH3 .H2O
Cu（OH）2 +2 NH4 +
Cu（OH）2 + 4NH3 . H2O
蓝色沉淀
[Cu(NH3) 4]2+ +2OH—+4H2O
深蓝色溶液
4、实验注意事项
（1）、为防止水解，饱和FeCl3和CuSO4可加少量 HCl或H2SO4酸化，不影响实验效果。 （2）、氨熏需在通风实验室内进行。 （3）、层析速度开始较快，后逐渐减慢，大约 10分钟即可分离完全。
纸层析法
柱层析法
薄层色谱法
柱层析法
二、操作方法
1、配制试样溶液
2、裁纸
1.5cm×20cm
3、画原点 离滤纸末端约2cm处用铅笔
4、点样
用毛细管取样品溶液，轻轻点样 于原点上，晾干，重复3～5次。 斑点直径需<0.5cm
5、取展开剂 不能粘到试管壁上
6、展开 滤纸不可触及试管的内壁，纸
条末端浸入展开剂约0.5cm,不
毛细现象
P8 检索咨询
具有细微缝隙的物质或直径很小的
细管(称毛细管)与液体接触时，液体沿 细缝或毛细管上升的现象称毛细现象。
毛细现象是物质分子间作用力的结
果，常见的纸张或毛巾吸水都是毛细现
象。
色谱分析法
色谱分析法是一种常用的物质分离分析方 法，常用于分离结构相近、物理性质和化学性 质相似物质。
色谱法体系中：
流动相：丙酮
2、实验操作要点
（1）裁纸
1.5cm×20cm
离滤纸条一端2 cm处
（2）点样 重复点样3～5次后晾干
（3）展开 滤纸不可触及试管的内壁
滤纸条下端浸入展开剂中约0.5cm
（4）显色
为使观察效果更明显， 采用氨熏显色。
3、实验现象
（1）层析过程中的实验现象
用小烧杯代替大 试管。用铁丝横穿过 滤纸，架在烧杯上方 （如图）。调节完滤 纸高度后，盖上培养 皿形成气室。
氯化铁层，颜色较深 硫酸铜层，颜色稍浅
（2）氨熏后的实验现象
上端出现红棕色， 下方出现蓝色
红棕色：Fe3++3NH3·H2O=Fe(OH)3↓+3NH4+
蓝色：ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
氢氧化铜与足量氨水反应后溶
NH3
2+
解是因为生成了[Cu(NH3) 4]2+ ， H3N Cu NH3
其结构简式为：
NH3
试写出实验中发生的两个反应的离子方程式？
（4）、滤纸吸水性很强，点样操作要求迅速。 等到滤纸完全干燥以后才能再次点样。
拓展课题1－2 菠菜的叶绿体中色素的提取和分离
操作步骤： 研磨、取液、点样、层析
用圆滤纸改进实验的实验现象
菠 菜
5分钟
青 菜
5分钟
15分钟 20分钟
拓展课题1－3 用粉笔进行层析分离
实验操作要点及主要实验现象
实验操作要点 （1）配制混合液 （2）点样 （3）层析
观察与交流: 如何分析下列溶液的成分？
方法
CuSO4溶液
FeCl3溶液
溶液颜色
蓝色
棕黄色
加氢氧化钠
显色反应
蓝色沉淀
与过量氨水生成 深蓝色溶液
红褐色沉淀
与氨水生成红褐色沉淀 与KSCN生成血红色溶液
如何分离CuCl2与FeCl3混合溶液？
知识预备 纸层析法
原理：利用待分离混合物中各组分在某一物质（固定相） 中的亲和性的差异（吸附性差异、溶解性差异），让混 合物溶液（流动相）流经固定相，使混合物在流动相和 固定相之间进行反复吸附和分配等作用，从而使混合物 中各组分分离
验现象，描述Fe3+和Cu2+得到分离的原因。
相同，各组分会在水与有机溶剂两相中发生溶解分配， 并随有机溶剂的移动而展开，达到分离的目的。
性质不同的组 分分离在滤纸的 不同位置上
亲脂性强的成份在流动相中分配的多一些，
随流动相移动的速度就快一些。
亲水性强的成份在固定相中分配的多一些，
随流动相移动的速度就慢一些。
性质不同的组分分 离在滤纸的不同位 置上
一个相是固定不动的，称为固定相； 另一相是移动的，称为流动相;
滤纸或其它载体作为惰性支撑物； 两相在惰性支撑物上作相对运动。
色谱分析法
• 按流动相和固定相的不同一般分为：
气相色谱法和液相色谱法；
气相色谱仪
液相色谱仪
气相色谱法的流动相是气体， 液相色谱法的流动相是液体
色谱分析法
按吸附剂及其使用形式可分为：
能让试样点浸入展开剂
试 样
点
如果试样接触展开剂，样点里要分离的离子
或者色素就会进入展开剂，导致实验失败。 约2cm
7、显色
三、纸层析法分离铁离子和铜离子 1、实验原理
含有Cu2＋和Fe3＋的溶液涂在滤纸一端，丙酮 作展开剂，在滤纸的毛细作用下，展开剂携带 Cu2＋和Fe3＋沿滤纸纤维向上移动的速度不同， 一段时间后，Cu2＋和Fe3＋距起点的距离会不同， 从而达到分离的目的。
1. 流动相溶剂对分离物质有适当的溶解度
(1)溶解度太大：待分离物质会随流动相跑到滤纸的最前沿 (2)溶解度太小：待分离物质留在固定相附近,分离效果不好
２.一般来说，能溶于水的待分离物质，选择水做固定相 (吸附在滤纸上)，以与水不混溶的有机溶剂做流动相
知识预备
纸层析法原理
样品溶液点在滤纸（惰性支撑物）上，做为展开剂 的有机溶剂自下而上移动（流动相），样品混合物中 各组分在水（固定相）或有机溶剂中的溶解能力各不
问题与解决
下列关于纸层析法实验的说法正确的是( c )
A.滤纸作为固定相,滤纸上吸附的水作为流动相 B.滤纸作为惰性支持物,滤纸上吸附的水作为流动相 C.滤纸上吸附的水作为固定相,不溶于水的有机溶剂 作为流动相 D.滤纸上吸附的水作为流动相,不溶于水的有机溶剂 作为固定相
2.纸层析分离的基本原理是：亲脂性强的成份在流 动相中分配的多一些， 随流动相移动的速度就快 一些；亲水性强的成份在固定相中分配的多一些， 随流动相移动的速度就慢一些。请你根据上述实
Cu 2+ +2NH3 .H2O
Cu（OH）2 +2 NH4 +
Cu（OH）2 + 4NH3 . H2O
蓝色沉淀
[Cu(NH3) 4]2+ +2OH—+4H2O
深蓝色溶液
4、实验注意事项
（1）、为防止水解，饱和FeCl3和CuSO4可加少量 HCl或H2SO4酸化，不影响实验效果。 （2）、氨熏需在通风实验室内进行。 （3）、层析速度开始较快，后逐渐减慢，大约 10分钟即可分离完全。
纸层析法
柱层析法
薄层色谱法
柱层析法
二、操作方法
1、配制试样溶液
2、裁纸
1.5cm×20cm
3、画原点 离滤纸末端约2cm处用铅笔
4、点样
用毛细管取样品溶液，轻轻点样 于原点上，晾干，重复3～5次。 斑点直径需<0.5cm
5、取展开剂 不能粘到试管壁上
6、展开 滤纸不可触及试管的内壁，纸
条末端浸入展开剂约0.5cm,不
毛细现象
P8 检索咨询
具有细微缝隙的物质或直径很小的
细管(称毛细管)与液体接触时，液体沿 细缝或毛细管上升的现象称毛细现象。
毛细现象是物质分子间作用力的结
果，常见的纸张或毛巾吸水都是毛细现
象。
色谱分析法
色谱分析法是一种常用的物质分离分析方 法，常用于分离结构相近、物理性质和化学性 质相似物质。
色谱法体系中：
流动相：丙酮
2、实验操作要点
（1）裁纸
1.5cm×20cm
离滤纸条一端2 cm处
（2）点样 重复点样3～5次后晾干
（3）展开 滤纸不可触及试管的内壁
滤纸条下端浸入展开剂中约0.5cm
（4）显色
为使观察效果更明显， 采用氨熏显色。
3、实验现象
（1）层析过程中的实验现象
用小烧杯代替大 试管。用铁丝横穿过 滤纸，架在烧杯上方 （如图）。调节完滤 纸高度后，盖上培养 皿形成气室。
氯化铁层，颜色较深 硫酸铜层，颜色稍浅
（2）氨熏后的实验现象
上端出现红棕色， 下方出现蓝色
红棕色：Fe3++3NH3·H2O=Fe(OH)3↓+3NH4+
蓝色：ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
氢氧化铜与足量氨水反应后溶
NH3
2+
解是因为生成了[Cu(NH3) 4]2+ ， H3N Cu NH3
其结构简式为：
NH3
试写出实验中发生的两个反应的离子方程式？
（4）、滤纸吸水性很强，点样操作要求迅速。 等到滤纸完全干燥以后才能再次点样。
拓展课题1－2 菠菜的叶绿体中色素的提取和分离
操作步骤： 研磨、取液、点样、层析
用圆滤纸改进实验的实验现象
菠 菜
5分钟
青 菜
5分钟
15分钟 20分钟
拓展课题1－3 用粉笔进行层析分离
实验操作要点及主要实验现象
实验操作要点 （1）配制混合液 （2）点样 （3）层析
观察与交流: 如何分析下列溶液的成分？
方法
CuSO4溶液
FeCl3溶液
溶液颜色
蓝色
棕黄色
加氢氧化钠
显色反应
蓝色沉淀
与过量氨水生成 深蓝色溶液
红褐色沉淀
与氨水生成红褐色沉淀 与KSCN生成血红色溶液
如何分离CuCl2与FeCl3混合溶液？
知识预备 纸层析法
原理：利用待分离混合物中各组分在某一物质（固定相） 中的亲和性的差异（吸附性差异、溶解性差异），让混 合物溶液（流动相）流经固定相，使混合物在流动相和 固定相之间进行反复吸附和分配等作用，从而使混合物 中各组分分离
验现象，描述Fe3+和Cu2+得到分离的原因。
相同，各组分会在水与有机溶剂两相中发生溶解分配， 并随有机溶剂的移动而展开，达到分离的目的。
性质不同的组 分分离在滤纸的 不同位置上
亲脂性强的成份在流动相中分配的多一些，
随流动相移动的速度就快一些。
亲水性强的成份在固定相中分配的多一些，
随流动相移动的速度就慢一些。
性质不同的组分分 离在滤纸的不同位 置上
一个相是固定不动的，称为固定相； 另一相是移动的，称为流动相;
滤纸或其它载体作为惰性支撑物； 两相在惰性支撑物上作相对运动。
色谱分析法
• 按流动相和固定相的不同一般分为：
气相色谱法和液相色谱法；
气相色谱仪
液相色谱仪
气相色谱法的流动相是气体， 液相色谱法的流动相是液体
色谱分析法
按吸附剂及其使用形式可分为：
能让试样点浸入展开剂
试 样
点
如果试样接触展开剂，样点里要分离的离子
或者色素就会进入展开剂，导致实验失败。 约2cm
7、显色
三、纸层析法分离铁离子和铜离子 1、实验原理
含有Cu2＋和Fe3＋的溶液涂在滤纸一端，丙酮 作展开剂，在滤纸的毛细作用下，展开剂携带 Cu2＋和Fe3＋沿滤纸纤维向上移动的速度不同， 一段时间后，Cu2＋和Fe3＋距起点的距离会不同， 从而达到分离的目的。