饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定

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食品中苯甲酸的测定

食品中苯甲酸、山梨酸与糖精钠的测定4h）,加水溶解并定容至200mLo此溶液中糖精钠的含量为1、OOg/mLod）混合标准使用液:分别准确吸取不同体积苯中酸、山梨酸与糖精钠标准储备溶液，将其稀释成苯甲酸、山梨酸与糖精钠含量分别为0、000mg/mL、0、020mg/mL> 0、040mg/mL% 0、080mg/mL、0、160mg/mL^ 0、320mg/mL 的混合标准使用液。

2、2、10微孔滤膜:0、45 um,水相。

2、3仪器与设备2、3、1高效液相色谱仪:配有紫外检测器。

2、3、2离心机:转速不低于4000r/min2、3、3超声波水浴振荡器。

2、3、4食品粉碎机。

2、3、5旋涡混合器。

2、3、6pH计。

2、3、7天平:分度值为0、01g与0、lmgo2、4分析步骤2、4、1样品处理2、4、1、1液体样品①碳酸饮料、果酒、葡萄酒等液体样品:称取10g样品（精确至0、001g）（如含有乙醇需水浴加热除去乙醇后再用水定容至原体积）于25mL容量瓶中，用氨水（1+1）调节pH至近中性，用水定容至刻度，混匀，经微孔滤膜过滤，滤液待上机分析。

②乳饮料、植物蛋口饮料等含蛋口质较多的样品:称取10g样品（精确至O.OOlg）于25mL容量瓶中，加入2mL亚铁氛化钾溶液，摇匀，再加入2mL乙酸锌溶液摇匀，以沉淀蛋白质，加水定容至刻度,4000r/min离心10min,取上清液,经微孔滤膜过滤，滤液待上机分析。

2、4、1、2半固体样品①含有胶基的果冻样品:称取0、5g〜lg样品（精确至0、001g）,加水适量，转移至25mL容量瓶中，再加水至约20mL,置60°C〜70°C水浴中加热片刻，加塞，剧烈振摇使其分散均匀后,加氨水（1+1）调节pH至近中性，加塞，剧烈振摇，使样品在水中分散均匀，置60°C〜70°C水浴锅中加热30min,取出后趁热超声5min,冷却后用水定容至刻度，用微孔滤膜过滤，滤液待上机分析。

饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定

仪器关机
测定结束后，点停止，停止泵运行。把A瓶中的滤头取出，放入超纯水中，设定水：甲醇=90：10的比例，点运行，启动泵运行 30分钟。30分钟后再设定100%甲醇运行 30分钟，后关闭软件，电脑。依次关闭各模块电源。
实验步骤1
按照下列高效液相色谱参考条件和仪器操作说明开机，设定。检测器：紫外检测器，230nm波长，色谱柱：C18 4.6×250mm, 5μm不锈钢柱流动相：甲醇：乙酸铵溶液（0.02 mol/L） =5:95（先100%甲醇运行10分钟后再设定次比例）流速：1 mL/min 进样量：10 μL
实验步骤2
样品处理每组派一个同学称取汽水10.00g，放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，加水定容至 50 mL，用水系0.22um滤膜过滤至离心每组派一个同学，从混合标准贮备液（浓度 1.0mg/mL），用移液管准确取适量（？），到25mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此混合标准溶液浓度为0.1mg/mL。后用水系0.22um滤膜过滤至离心管待用。
饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定—HPLC法
1、掌握HPLC测定饮料中糖精钠、苯甲酸钠和山梨酸钾的原理和方法。 2、了解HPLC的结构，学习HPLC的操作方法。 3、掌握HPLC的定性定量方法
糖精钠是最古老的甜味剂。糖精于1878年被美国科学家发现，很快就被食品工业界和消费者接受。糖精的甜度为蔗糖的300倍到500倍，它不被人体代谢吸收，在各种食品生产过程中都很稳定。据国外资料记载，1977年加拿大进行的一项多代大鼠喂养实验发现，摄入大量的糖精钠可以导致雄性大鼠膀胱癌。因此，美国等发达国家的法律规定，在食物中使用糖精时，必须在标签上注明“使用本产品可能对健康有害，本产品合有可以导致实验动物癌症的糖精”的警示。

教案3 食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的测定

项目五用高效液相色谱法检测物质任务一食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的测定（液相色谱法）单元一液相色谱分离原理和液相色谱仪的基本组成教学内容苯甲酸和山梨酸是我国目前最常用的食品防腐剂，广泛应用于各种果汁饮料中，以防止其变质。

但如果防腐剂的含量超过标准限度，或者长期饮用含有防腐剂的饮料，则会对人体健康造成不得影响，因此检测果汁中的苯甲酸和山梨酸含量是非常有必要的。

表GB2760-2007国家食品添加剂使用卫生标准抑制物质腐败的药剂。

即对以腐败物质为代谢底物的微生物的生长具有持续的抑制作用。

重要的是它能在不同情况下抑制最易发生的腐败作用，特别是在一般灭菌作用不充分时仍具有持续性的效果。

对纤维和木材的防腐用矿油、煤焦油、丹宁，对生物标本用甲醛、升汞、甲苯、对羟基苯甲酸丁酯、硝基糠腙衍生物或香脂类树脂。

在食品中使用防腐剂受到限制，因此多靠干燥、腌制等一些物理的方法。

特殊的防腐剂有乙酸等有机酸、以油酸脂为成分的植物油、芥子等特殊的精油成分。

对于生物体的局部（如人体表面或消化道），可以根据具体条件采用各种防腐剂（如碘仿、水杨酸苯酯、苯胺染料或吖啶类色素等）。

我国规定使用的防腐剂有苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、丙酸钙等25种。

防腐剂应具备的几个条件：1、性质较稳定：加入到食品中后在一定的时期内有效，在食品中有很好的稳定性2、低浓度下具有较强的抑菌作用3、本身不应具有刺激气味和异味4、不应阻碍消化酶的作用，不应影响肠道内有益菌的作用5、价格合理，使用较方便。

防腐剂的作用机理：1、能使微生物的蛋白质凝固或变性，从而干扰其生长和繁殖。

2、防腐剂对微生物细胞壁、细胞膜产生作用。

由于能破坏或损伤细胞壁，或能干扰细胞壁合成的机理，致使胞内物质外泄，或影响与膜有关的呼吸链电子传递系统，从而具有抗微生物的作用。

3、作用于遗传物质或遗传微粒结构，进而影响到遗传物质的复制、转录、蛋白质的翻译等。

4、作用于微生物体内的酶系，抑制酶的活性，干扰其正常代谢。

高效液相色谱法快速测定饮料中的苯甲酸_山梨酸和糖精钠

第34卷第10期辽宁化工Vol.34,No.10 2005年10月Liaoning Chemical Industry October,2005分析检测高效液相色谱法快速测定饮料中的苯甲酸、山梨酸和糖精钠刘渭萍(辽宁省产品质量监督检验院,辽宁沈阳110004)摘要:将饮料样品定量稀释后,用针筒式水膜过滤器处理后,直接进样,外标法进行液相色谱定性、定量分析。

用此方法进行了不同水平的加标回收率测试,证明方法快捷可靠,非常适用于大量的样品的快速测定。

关键词:食品添加剂;针筒式水膜过滤器;苯甲酸;山梨酸;糖精钠中图分类号:O657.7+2文献标识码:A文章编号:10040935(2005)10045403随着化学添加剂的诞生和发展,人类健康不断受到威胁。

食品添加剂对人体的毒性概括起来有致癌性、致畸性和致突变性[1,2],这些毒性要经过较长时间才能显露出来,即对人体产生潜在的毒害[3,4],这也是人们关心食品添加剂安全性的原因。

近年来我国使用的食品添加剂由20世纪70年代的几十种发展到目前卫生部颁发许可使用的1516种[5,6](截止到1997年7月),食品添加剂的绝对用量虽然只占食品的千分之几到万分之几[7,8],但是随着现代食品工业的发展,食品的种类日益增加,食品添加剂的超量和超范围使用现象十分严重,因此食品添加剂对人类产生了极大的危害,对食品添加剂的检测也越来越受到人们的重视。

1实验部分1.1仪器与试剂(1)Agilent1100液相色谱(二级管阵列检测器)。

(2)甲醇(色谱纯)。

(3)水(石英亚沸二次蒸馏水)。

(4)乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵,加石英亚沸二次蒸馏水溶解至1000mL,经滤膜(0.45L m)过滤。

(5)碳酸氢钠溶液(20g/L):称取2g碳酸氢钠(优级纯),加水至100mL,振摇溶解。

(6)苯甲酸标准储备液:准确称取0.1000g (精确至0.0001g)苯甲酸(色谱纯),加碳酸氢钠溶液(20g/L),加热溶解,移入100mL容量瓶中,加水定容至100mL,苯甲酸含量为1mg/m L。

高效液相色谱法同时检测碳酸饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量

高效液相色谱法同时检测碳酸饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量摘要: 采用高效液相色谱法同时检测饮料中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠。

样品经除乙醇（如果含有乙醇），氨水调pH至中性，定容，过水相微孔滤膜，以 C18 （6 × 250mm）色谱柱分离，用配紫外检测器的高效液相色谱仪进行检测。

结果显示安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠浓度在 1.0mg/ L ～ 100. 0mg/ L 范围内呈线性关系，回收率在87% ～ 98% 之间，相对标准偏差在 1%以下，最低检测限0.5mg/kg，适用于同时检测碳酸饮料中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量。

关键词:碳酸饮料；安赛蜜；苯甲酸; 山梨酸; 糖精钠; 高效液相色谱仪防腐剂能抑制微生物生长繁殖，在食品中应用普遍，我国到目前为止已批准了32种使用的食物防腐剂，其中最常用的有苯甲酸钠、山梨酸钾等经常用于食品防腐，苯甲酸钠价格低廉，主要用于碳酸饮料和果汁饮料。

糖精钠及安赛蜜作为甜味剂应用于食品中调整食品口味，它们属于高倍甜味剂。

这些产品的甜度都比蔗糖高，现在糖精钠的使用得越来越少，而安赛蜜普遍添加到饮料中。

但过量使用会对人体产生毒副作用，甚至引发癌症。

因而对各类食品进行安全质量控制尤为重要。

现有的国家标准方法中，只有同时测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠的方法。

由于碳酸饮料中一般添加安赛蜜比较普遍，很少添加糖精钠，在日常工作中，为节约时间提高分析效率，就要求检测人员研究出适合食品中普遍存在的多种添加剂同时测定的检测方法。

1 材料与方法1. 1 仪器（1）赛默飞世尔高效液相色谱仪U3000带紫外检测器；（2）C18 ( 4.6× 250mm) 色谱柱；(3)万分之一电子天平；（4）无油真空抽滤装置 (5)水浴锅（6）刻度吸管10mL,移液管5mL,容量瓶50mL(7)0.22μm水相微孔滤膜1.2 试剂：（1）盐酸（优级纯）；（2）氨水 ( 优级纯) ; （3）甲醇 ( 色谱纯 ) ;（4）醋酸铵(20mmol/L)：称取1.54g优级纯醋酸铵，加入少量水溶解后，转入1000mL的容量瓶中，加水定容到刻度，经0.22μm水相微孔滤膜用真空抽滤装置抽滤后备用。

检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解

检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解(转自仪器信息网色谱论坛)苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-1996，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-1996，即可开展实验。

苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。

笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。

2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-1996和GB/T5009.29-1996 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。

食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。

这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。

GB/T5009.29-1996使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。

如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。

具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1m ol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。

高效液相色谱法同时测定饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠

添加剂同时分析方面有其十分有利的条件，丽珍＿、刘２Ｊ彭巨成［黄方取［曾做过这方面的报道。本文采用引、】液相色谱同时测定饮料中苯甲酸、梨酸和糖精山钠＿，立了一种快速分析方法。６建】
１前言
瓶中，水定容至１０ｍ。由此制得２、Ｏ６、Ｏ和加０Ｌ０４、０８１０ｔ／Ｌ苯甲酸、０ｇｍｔ山梨酸和糖精钠混合标准溶液。
２２实验方法．２２１实验原理．．试样加温除去二氧化碳和乙醇，ｐ至近中性，调Ｈ
谱技术有限公司）Ｃ８色谱柱（ｉｒｓｈｒ４６× １０，１Ｌｃｏｐｅ，．ｈ５ｍ）微量进样器（０）超声波清洗器（Ｂ２０，ｍ，５，Ｓ２０）电子
天平（Ｎ０４）Ｍｌｏｅ纯水机（ＩＩ￣Ｒ）Ｆ２０Ｎ，ｉｐｒ超ｉＭＬＸＥ。
２１２试剂．．
拌除去二氧化碳，氨水（＋Ｉ调ｐ约为７加水定容用Ｉ）Ｈ．
至适当的体积，０４ｍ滤膜过滤。经．５ｔｉ
果汁类：称取５０～１．，氨水调Ｐ．０００ｇ用０Ｈ约为７，
２１１仪器．．
汽水：取５０称．０～ｌ．０ｇ放人小烧杯中，温搅Ｏ０，微
５５液相色谱泵（国Ｗａｒ公司）２８外检测１美ｔｓｅ，４７紫器（国Ｗａｒ公司）液相色谱仪工作站（岛盛瀚色美ｔｓｅ，青

高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的方法验证

066苯甲酸、山梨酸、糖精钠是常用的食品添加剂，也是衡量食品卫生质量的重要指标。

苯甲酸、山梨酸具有防腐保鲜的作用，糖精钠是合成甜味剂，甜度比蔗糖甜300－500倍。

GB2760－2016《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对这三者的添加范围和限量都有明确的规定，超范围或者超限量使用都是违法的。

GB5009.28－2016《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》对其检测方法做了规定，有高效液相色谱法和高效气相色谱法，其中高效液相色谱法为第一法仲裁法被广泛应用。

国标方法在使用前要进行方法验证，核查实验室能否满足检测方法的要求。

本研究针对高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的适用性、线性、检出限、定量限、加标回收率等进行了一一验证，均能够满足检测方法的要求。

一、仪器与试剂1.仪器。

高效液相色谱仪（紫外检测器，Y001），岛津LC－20AT；电子分析天平（Y033），BSA623S－CW，d ＝0.001g。

2.试剂。

苯甲酸钠标准品（唯一性标识3422003，纯度100.0％），北京坛墨质检科技有限公司；山梨酸标准品（唯一性标识3192003，纯度99.9％），北京坛墨质检科技有限公司；糖精钠标准品（唯一性标识3212005，纯度99.5％），北京坛墨质检科技有限公司；甲醇（色谱级），Aigma－Aldrich；乙酸铵（色谱级），aladdin；亚铁氰化钾、乙酸锌（分析纯），天津市天力化学试剂有限公司；实验室用水为自制超纯水。

二、实验与方法1.色谱条件。

（1）色谱柱：Diamonsil Plus 5um C 18，250×4.6mm；检测波长230nm；进样量10uL。

（2）流动相：甲醇＋乙酸铵溶液（0.02mol/L）＝5＋95；流速1mL/min。

高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的方法验证2.样品前处理。

准确称取约2g（精确到0.001g）试样于50mL具塞离心管中，加水约25mL，涡旋混匀，于50℃水浴超声20min。

食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定

食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本方法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定。

2 依据GB/T 23495-2009《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定高效液相色谱法》。

3 原理不同样品经提取后，将提取液过滤，经反相高效液相色谱分离测定，根据保留时间定性，外标峰面积定量。

.4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682要求。

甲醇，乙酸铵等。

苯甲酸标准储备液：称取0.0638g 苯甲酸，用少量乙醇溶解并用水定容至100mL 。

山梨酸标准储备液：称取0.0766g 山梨酸，用少量乙醇溶解并用水定容至100mL 。

糖精钠标准储备液：称取0.0766g 糖精钠，用水溶解并定容至100mL 。

混合标准使用液：分别吸取不同体积苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准储备溶液，将其稀释成适当浓度，见附后标准曲线图谱。

5 分析步骤 5.1 样品处理称取适量样品（雪菜）于小烧杯中，用50mL 水分数次将样品移入100mL 容量瓶中，80℃水浴提取30min ，冷却后定容、过滤，滤液待上机分析。

5.2 色谱条件a) Agilent 高效液相色谱仪；b) 色谱柱：C 18柱，250mm ×4.6mm ，5μm ；c) 流动相：0.02mol/L 乙酸铵溶液+甲醇（90+10）； d) 流速：1mL/min ； e) 检测波长：230nm ； f) 进样量：20μL ； g) 柱温：25℃。

5.3 测定取处理液和混合标准使用液各20μL 注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据定性，以其峰面积求出样液中被测物质含量。

6 结果计算样品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量按下式计算： X =式中：X ——样品中待测组分含量，g/kg ；c ×Vm ×1000c ——由标准曲线得出的样液中待测物的浓度，μg /mL ； V ——样品定容体积，mL ； m ——样品质量，g 。

高效液相色谱法测定果汁饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量

分析检测高效液相色谱法测定果汁饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量辛明彦（浮山县综合检验检测中心，山西临汾 042600）摘要：目的：建立高效液相色谱-紫外检测器测定果汁饮料中苯甲酸、山梨酸及糖精钠3种食品添加剂的分析方法。

方法：果汁饮料试样用纯水提取，经Acclaim TM 120 C18色谱柱分离，用紫外检测器测定。

结果：苯甲酸、山梨酸及糖精钠在1.00～50.00 mg/L线性良好，相关系数均大于0.999，3种添加剂的检出限均为0.005 g/kg，定量限均为0.015 g/kg，加标回收率为91.7%～109.0%，RSD为1.29%～3.36%。

结论：该方法前处理简便、分析速度快、准确度高及精密度好，可用于上述3种添加剂的定性、定量检测。

关键词：高效液相色谱；果汁饮料；食品添加剂Determination of Benzoic Acid, Sorbic Acid and Saccharin Sodium in Fruit Juice Drinks by HPLCXIN Mingyan(Fushan County General Inspection and Testing Center, Linfen 042600, China) Abstract: Objective: The method for the determination of benzoic acid, sorbic acid and saccharin sodium in fruit juice drinks by HPLC with UV detector was established. Method: Pear juice beverage samples were extracted with pure water, separated by Acclaim TM120 C18 chromatographic column and determined by UV detector. Result: The linearity of benzoic acid, sorbic acid and saccharin sodium is good at 1.00～50.00 mg/L, the correlation coefficient is greater than 0.999, the detection limit of the three additives is 0.005 g/kg, the quantitative limit is 0.015 g/kg, the recovery is 91.7%～109.0%, and the RSD is 1.29%～3.36%. Conclusion: The method has the advantages of simple pretreatment, fast analysis speed, high accuracy and good precision. It can be used for the qualitative and quantitative detection of the above three additives.Keywords: high performance liquid chromatography; fruit juice beverage; food additives随着我国社会经济发展与食品工业水平的提升，人们对饮料类食品的消费需求日益增长，果汁类饮料以其口味佳、富含维生素与矿物质等优势深受广大消费者喜爱[1-3]。

高效液相色谱法测定饮料中的苯甲酸、糖精钠、山梨酸

苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准物质：纯度均＞柱，各峰能达到有效分离（离度均大干１５，分．）
２、仪器与设备
ＬＣ～１ＡＶＰ高效液相色谱仪，电子天平（多的影响，同样长度的色谱柱，３ｂｍ粒径的填料分０赛ｔ
检测波长：２０ｍ；３ｎ
进样量：１．。０ｔｌＪ
４、标准溶液的配置
用超纯水分别将３种标准物质配置成约１／ｍｇｍｌ
禁、滥用以及超范围、超标准使用添加剂，都会给的标准储备溶液（容时可加入１２无水乙醇消定 — 滴食品质量、安全卫生以及消费者的健康带来巨大的泡），使用时用超纯水稀释成适宜浓度的混合损害。食品添加剂的种类和数量越来越多，对人们健康的影响也就越来越大。随着研究的不断改进和
前关于食品中防腐剂与甜味剂的检测方法有很多，
［１１２１３
￣
主要涉及的检测方法有薄层色谱法…、气相色谱法棒小心将样品转移至２ｍｌ５容量瓶中，并用少量水清液相色谱法等。本文在液相色谱方法基础洗烧杯内壁，清洗液一并转移至容量瓶中，并加水 “
测。
上对色谱条件进一步优化，同时检测饮料中三种食定容至刻度，摇匀，经０４ｍ水系滤膜过滤，待．５品添加剂，使其检测效果更佳、可操作性更强。

液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖

液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/，糖精钠的检测参照GB/T，即可开展实验。

2样品前处理的注意事项GB/和GB/在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。

食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。

这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。

GB/使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。

如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。

具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L) ml，加入%亚铁氰化钾溶液，20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物,初滤液过μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL 测定。

用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。

3检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比气相色谱仪要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。

原因如下：液相色谱法所用的样品处理方法远比气相色谱法简单，且不需使用有机试剂。

食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法

食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的液相色谱法是一种常用的分析方法，由于其操作简便、分离效果好以及分析结果准确可靠而得到广泛应用。

下面将详细介绍该方法的原理、仪器设备、操作步骤以及常见问题及解决方法。

一、方法原理：该方法采用液相色谱法进行分析，根据待测样品中的目标化合物与色谱柱之间的相互作用来实现物质的分离和定量。

主要包括样品的预处理、色谱分离、定量检测和数据分析等步骤。

二、仪器设备：液相色谱仪是该方法的主要仪器设备，其中包括色谱柱、检测器和数据处理系统等，常用的色谱柱有C18反相色谱柱、正相色谱柱等。

常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器等。

三、操作步骤：1. 样品的预处理：将待测食品样品取适量加入提取溶剂中，超声或搅拌混合，静置一段时间使目标化合物溶解。

然后通过滤膜过滤，以获取纯净的样品溶液。

2. 色谱分离：将样品溶液注入色谱柱中，通过不同组分在色谱固定相和流动相之间的相互作用来实现分离。

可以调整流动相的组成和流速等条件来优化分离效果。

3. 定量检测：分离后的组分进入检测器，根据目标化合物的特性进行定量检测。

常用的方法是通过比较待测样品和已知浓度的标准溶液的峰面积或峰高来确定目标化合物的含量。

4. 数据处理：将检测到的信号转化为对应的色谱图，并通过计算机数据处理系统进行数据分析和结果计算。

四、常见问题及解决方法：1. 色谱柱选择：根据目标化合物的特性选择合适的色谱柱，如苯甲酸和山梨酸可以选择C18反相色谱柱，糖精钠可以选择离子交换色谱柱。

2. 流动相的选择：合理选择流动相的组成和流速，以实现目标化合物的高效分离。

这需要根据不同化合物的极性和溶解度等参数进行优化。

3. 检测器的选择：根据不同化合物的特性选择合适的检测器，如苯甲酸和山梨酸可以选择紫外检测器进行检测，糖精钠可以选择荧光检测器进行检测。

4. 样品的提取：提取过程要注意样品的充分溶解和提取溶剂的选择，以获得准确的分析结果。

高效液相色谱法测定饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量

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高效液相色谱法测定饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量
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（．山西省食品质量监督检验中心１
９％、９％、９％。本法与国家标准检验方法（ＢＴ０９１０— ０３ＢＴ０９２２０、Ｇ／５０．９— ８７９Ｇ／５０．４２０、Ｇ／５０．８— ０３ＢＴ０９２２０）比较，经配对ｔ验（００）无显著性差异。０３检Ｐ＞．５

液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解-不能不看的精华

2 样品前处理的注意事项GB/和GB/ 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。

食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。

这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。

GB/使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。

如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。

具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L) ml，加入%亚铁氰化钾溶液， 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。

用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。

3 检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比气相色谱仪要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。

高效液相色谱法测定饮料中山梨甲酸,苯甲酸和糖精钠

组成:高压输液系统,进样系统,分离系统,检测系统,数据记录和处理系统辅助装置脱气装置,梯度洗脱装置,柱温箱,自动进样器,馏分收集器,在线固相萃取装置,柱后衍生装置等原理:在适宜条件下,高效液相色谱可同时分离饮料中的糖精钠,苯甲酸,山梨酸.样品超声出去二氧化碳和乙醇,调ph至近中性,过滤后进高效液相色谱仪,经反相C18液相色谱分离后,紫外检测器230nm波长处检测.以色谱峰的保留时间定性,利用色谱峰面积在一定范围内与浓度呈线性关系进行定量仪器:高效液相色谱仪,配备二极管阵列检测器,超声波清洗仪容量瓶烧杯微量进样器样品处理:吸取10.00~20.00ml汽水,放入50ml烧杯中,超声出去二氧化碳,用稀氨水调ph7.0,加水定容至50ml用微孔滤膜(0.45um)过滤,滤液备用色谱条件:色谱柱:C18,4.6mm×250mm流动相:甲醇0.02mol/L醋酸铵溶液(5:95)流速:1ml/min 检测波长:230nm取相同体积样品处理液和标准系列溶液注入高效液相色谱仪进行分离,以其标准溶液峰的保留时间为依据定性.以标准溶液的质量浓度为横坐标,相应峰面积为纵坐标,分别绘制标准曲线方程,从曲线上查出被测物质含量Ρ=C×Vo/1000m苯甲酸,糖精钠的灵敏波长为230nm,山梨酸的为254nm,在此波长测定苯甲酸和糖精钠的灵敏度较低,因此采用230nm为测定波长.出峰顺序为苯甲酸,山梨酸,糖精钠脱气:除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡对测定的影响.这些气体在输液过程中进入泵体,会妨碍柱塞及单向阀的正常工作,导致输液不准,脉动及压力波动从而影响组分保留时间和峰面积的重现性脱气方法:减压脱气,煮沸脱气,超声波震荡脱气过滤:0.45um或更小孔径滤膜目的:除去溶剂中的微小颗粒,避免堵塞色谱柱,尤其是使用无机盐配制的缓冲液。

食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定

食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定食品安全检验手册26~27页1．试剂和溶液方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为重蒸水。

（1）甲醇色谱纯（2）稀氨水（1+1）氨水加水等体积混匀。

（3） 0.02mol/L 乙酸铵溶液称取1.54g 乙酸铵，加水溶解并定容至1000mL，溶液经滤膜（0.45μm）过滤。

（4）亚铁氰化钾溶液：称取10g 亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至100 mL。

（5）硫酸锌溶液：称取15g 硫酸锌，用水溶解，并稀释至100 mL。

（6）苯甲酸标准储备溶液准确称取10.0mg 苯甲酸，加少量乙醇溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。

此溶液苯甲酸含量为1mg/mL，作为储备液。

（7）山梨酸标准储备溶液准确称取10.0mg 山梨酸，加少量乙醇溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。

此溶液山梨酸含量为1mg/mL，作为储备液。

（8）糖精钠标准储备溶液准确称取10.0mg 糖精钠，加少量水溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。

此溶液糖精钠含量为1mg/mL，作为储备液。

（9）苯甲酸、山梨酸、糖精钠混合标准使用液取苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准储备溶液各1.0mL，放入100 mL 容量瓶中，加水至刻度。

此溶液含苯甲酸、山梨酸、糖精钠各10μg/mL，将此溶液用水稀释成2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μg/mL 标准系列。

溶液通过滤膜（0.45μm）过滤后进样。

2.测定方法（1）样品处理①汽水饮料果汁类：（汽水需温搅拌除去二氧化碳）吸取2.0 mL 样品，加入已装有中性氧化铝（3.5cmⅹ1.5 cm）的小柱中，过滤，弃去初滤液，然后用流动相洗脱苯甲酸、山梨酸、糖精钠，接收于25mL 带塞量筒中，洗脱至刻度，摇匀。

此溶液通过0.45μm 微孔滤膜后进样。

②配制酒类：称取10.0g 样品，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调节pH 约7，加水定容至适当体积，经滤膜（0.45μm）过滤。

高效液相色谱法测定饮料中的苯甲酸、糖精钠、山梨酸

ａｅａｅｒｃｖｒａｅｗａｖｒｇｅｏｅｙｒｔｓ８８．９％～１．１５０８３％，ＲＳＤ％ｗａ９８％～１．５ｓ０．７２４％，ａｈｅｅｔｏｉｔｎｄｔｅｄｔｃｉｎｌｍｉ
（／ｓＮ＝３ｅｗｅ．３００２ｇ・ｇＴｅｅｐｒｅｔｈｗｄｔａｔｉｍｔｄｗｓｈｇ）ｂｔｅｎ００７～．９ｍｋ～．ｈｘｅｉｎｓｏｅｔｈｓｅｏａｉｍｈｈｈ—ｓｅｄｐｅ，
Ａｂｓｒｃ：ｔｂｉｈｄａｅｔｄｔｒｅｋｎｆｆｏｄｄｔｖｓｗｈｃｎｄｎｓｎｔａｔＥｓａｌｅｎｄｔｓｅｈｅｉｄｓｏｄａｉｅｉｈｉｒｋｓｕｉｇＨＰＬＣ．ｉｇｃｌｍｎｓｏｉｉＵｓｎｏｕ
食品添加剂是食品工业的基础原料，对食品的生产工艺、产品质量、安全卫生都起着至关重要的作
用，毕竟不是食品的基本成分，但尽管在用于食品之前已在试验室中进行多次安全性测试，但违禁、滥用
糖精钠是饮料必测项目。目前关于食品中防腐剂与
ｓｍｐｅａｄｏｅａｌｏｅｅｔｅｔｒｅｋｉｄｓｏｏｄａｄｉｖｓｉｒｎｓｉｌｎｐｒｂｅｆｒｄｔｃｉｔｈｅｎｆｆｏｄｔｅｎｄｋ．ｎｇｈｉｉ
ＫｅｒｓＨＰＣｍｅｏｙｗｏｄ：Ｌｔｄ；ｄｎｓｏｏｄｉｖｓｈｉｒｋ；ｆｄａｄｔｅｉ
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食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠的测定-标准文本(食品安全国家标准)

食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定方法。

本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定；第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。

第一法液相色谱法2原理样品经处理后，用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。

3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

3.1 试剂3.1.1氨水（NH3•H2O）。

3.1.2氢氧化钠（NaOH）。

3.1.3硫酸（H2SO4）。

3.1.4亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6•3H2O）。

3.1.5乙酸锌（Zn(CH3COO)2•2H2O）。

3.1.6氯化钠（NaCl）。

3.1.7酒石酸（C4H6O6）。

3.1.8硅酮树脂。

3.1.9磷酸二氢钠（NaH2PO4•12H2O）。

3.1.10磷酸二氢钾（KH2PO4）。

3.1.11中性氧化铝。

3.1.12甲醇（CH3OH）：色谱纯。

3.1.13乙酸铵（CH3COONH4）。

3.2 试剂配制3.2.1 氨水（1+1）：氨水与水等体积混合，经微孔滤膜过滤后备用。

3.2.2 氢氧化钠溶液（4 g/L）：称取4 g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。

3.2.3硫酸溶液（0.5 mol/L）：移取30 mL浓硫酸（约70%）边搅拌边慢慢加入至500 mL水中，冷却至室温后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。

3.2.4亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取106 g亚铁氰化钾加水至1000 mL。

3.2.5 乙酸锌溶液（183 g/L）：称取220 g乙酸锌溶于少量水中，加入30 mL冰乙酸，加水稀释至1000 mL。

3.2.6 酒石酸溶液（15%）：称取15 g酒石酸，用水定容100 mL。

3.2.7的磷酸盐缓冲液（pH 7.2）：分别称取16.72 g磷酸二氢钠和2.72 g磷酸二氢钾，用水溶解后定容至1000 mL，经微孔滤膜过滤后备用。