10探究酶的专一性
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探究酶的专一性
一、教学目标
比较唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用。
二、实验原理
含有自由醛基或酮基的单糖和双糖叫还原性糖。在碱性溶液中,还原糖能将金属离子(铜、铋、汞、银等)还原,糖本身被氧化成酸性化合物。此性质常用于检验糖的还原性,并且常称为测定还原糖含量的各种方法的依据。还原糖与碱性硫酸铜可生成砖红色沉淀物。
本尼迪特试剂内含有硫酸铜,因此淀粉水解生成的麦芽糖和蔗糖水解生成的葡萄糖、果糖等还原糖在煮沸的条件下,与本尼迪特试剂会有砖红色沉淀物产生,淀粉和蔗糖(非还原糖)无此反应。本尼迪特试剂可以用来鉴定淀粉和蔗糖溶液中是否有麦芽糖、葡萄糖及果糖,进而推测淀粉和蔗糖是否被水解。
三、教学重难点
1、教学重点:建构酶的特性知识体系,探究酶的专一性。
2、教学难点:实验设计与实施。
四、实验材料与用具
(一)实验材料
稀释200倍的新鲜唾液,质量分数为2%的蔗糖溶液,溶于质量分数为0.3%氯化钠溶液中的淀粉溶液(其中淀粉含量为1%),蔗糖酶溶液,本尼迪特试剂
(二)实验用具
试管,试管架
五、教学过程
【提问】我们已经学习过酶的相关知识,那么它具有哪些特性呢?
【学生活动】………
【讲述】酶具有专一性,但是我们还需要实验来验证它。今天的实验就是探究酶的专一性。下面我们来看具体操作步骤。
【PPT展示】
1.取2个试管,分别编为1号、2号。
2.向1号试管中加入本尼迪特试剂2mL,再加入1%的淀粉溶液3mL;2号试管中加入本尼迪特试剂2mL,再加入2%蔗糖溶液3mL。
3.将两个试管内的溶液充分混匀后,放在沸水浴中煮2~3min。观察并记录实验结果(淀粉、蔗糖不产生砖红色沉淀)。
4.再取4支试管,分别编为3号、4号、5号、6号。
5.3号、4号试管中各加入稀释200倍的新鲜唾液1mL;然后在3号试管中加入质量分数为1%的淀粉溶液3mL,在4号试管中加入质量分数为2%的蔗糖溶液3mL。充分混匀后,放在37℃恒温水浴中保温,15min后取出。两管各加本尼迪特试剂2mL,摇匀,放在沸水浴中煮2~3min。观察并记录实验结果。
6.5号、6号试管各加入蔗糖酶溶液1mL,然后在5号试管中加入质量分数为1%的淀粉溶液3mL,在6号试管中加入质量分数为2%的蔗糖溶液3mL。充分混匀后,放在37℃
恒温水浴中保温,15min后取出。两管各加本尼迪特试剂2mL,摇匀,放在沸水浴中煮2~3min。
7.观察并记录实验结果。
【注意】
新鲜唾液的稀释倍数一般为200倍。但是,由于不同人或者同一人不同时间采集的唾液内淀粉酶的活性并不相同,有时差别很大,稀释倍数可以是50~300倍,甚至超出此范围。因此,应事先确定稀释倍数。另外,取唾液时一定用清水漱口,以免食物残渣进入唾液中。要注意除去唾液里的气泡,避免稀释倍数不准确而影响实验结果,稀释好的新鲜唾液用滤纸过滤后待用。稀释200倍的新鲜唾液可用1%的淀粉酶代替。
【讲述】我们的实验结果就按照表格形式记录。
【PPT展示】
1. 你能解释步骤1~3在本实验中的作用吗?
答:步骤1~3是作为整个实验的对照,可检验淀粉、蔗糖与本尼迪特试剂能够发生特异性颜色反应,检验淀粉和蔗糖的纯度。
2. 为什么3号、4号、5号、6号试管要在37℃恒温水浴中保温?
答:因为唾液淀粉酶的最适温度是37℃。
3. 根据实验结果,你如何理解酶的专一性?
4. 如果5号试管内呈现轻度阳性反应,你认为该怎样解释?你能设计一个实验来检验自己的假设吗?