骨髓铁染色的可行性研究报告

骨髓铁染色的可行性研究报告

-----岐山县医院检验科：张翠肖张军平苏永娟郭爱霞

一、开展骨髓铁染色的必要性：

我院长期以来对缺铁性贫血的诊断，主要依据血象和骨髓象的形态学判定。骨髓象表现：幼稚红细胞呈现胞体小、胞浆少，且染色偏蓝，胞膜边缘不整齐，老核幼浆现象；血象表现：红细胞胞体较小，中心淡染区扩大，MCHC<20ng，MCV<80fl，其缺乏客观的指标，特别是对MDS中的环形铁粒幼红细胞性贫血不能有效确诊，开展此实验通过观察骨髓外铁和细胞内铁，更客观、更直接、更早期的反映患者体内的铁代谢情况，为临床提供了可靠地诊断指标。

二、开展骨髓铁染色的可行性：

骨髓铁染色取材方便、方法经典、技术成熟、操作简便，适合我院住院的贫血患者。

三、骨髓铁染色的原理和方法：

原理：骨髓小粒中的含铁血黄素称细胞外铁，其所含的三价铁经稀盐酸处理后而游离，并能与酸性亚铁氰化钾溶液发生普鲁士蓝反应，生成蓝色亚铁氰化铁沉淀，定位于含铁的部位。细胞内铁也可用此法显示，根据反应的强弱可了解骨髓中铁的含量。

1：干燥涂片用甲醇固定10min，待干。

2：玻片上滴满酸性亚铁氰化钾，37℃染色30min。

3：用蒸馏水冲洗后用核固红染液复染10～15min。

4: 流水冲洗待干镜检。

5: 结果判断：

(1) 幼红细胞核呈鲜红色，胞质呈淡黄红色，铁粒呈蓝绿色。

(2) 细胞外铁用低倍镜观察涂片，特别是涂片尾部和髓粒附近，注意翠蓝色颗粒的存在，可分五级标准。

(3) 细胞内铁用油镜计数100个中、晚幼红细胞，记录胞质中含有蓝色铁颗粒的细胞(铁粒幼细胞)的百分率。根据细胞内铁颗粒的数目、大小、染色深浅和颗粒分布的情况，将铁粒幼细胞分为四型。

细胞外铁的划分标准:

(-)：无颗粒。

(+)：有少数铁颗粒或偶见铁小珠(颗粒体积大于嗜酸性粒细胞的颗粒者称为铁小珠)。

(++)：有较多的铁颗粒或小珠。

(+++)：有很多的铁颗粒、小珠和少数小块状。

(++++)：有极多铁颗粒、小珠，并有很多的小块，密集成堆。

铁粒幼细胞划分：

Ⅰ型：幼红细胞内含1～2个小铁颗粒。

Ⅱ型：幼红细胞内含3～5个小铁颗粒。

Ⅲ型：幼红细胞内含6～10个小铁颗粒，或1-4个大铁颗粒。

Ⅳ型：幼红细胞内含10个以上小铁颗粒，或5个以上大铁颗粒。

环形铁粒幼细胞：是指幼红细胞含铁粒＞6个，绕核2/3以上者。

1、玻片需经去铁处理将新玻片用清洁液浸泡24h，取出后反复水洗浸入95%酒精中24h，晾干，再浸泡在5%盐酸中24h，用双蒸水反复浸洗玻片，取出烤干后备用。

2、骨髓取材要满意，外铁一定要有骨髓碎块或颗粒，取材不佳时，往往影响结果。

3、酸性亚铁氰化钾溶液须新鲜配制。

4、鉴别缺铁性贫血和非缺铁性贫血：IDA时骨髓细胞外铁显著减少或消失，铁粒幼红细胞明显减少，所见铁粒细小色浅，且以Ⅰ型为主，Ⅱ型极少见，Ⅲ型以上不见。经铁剂治疗后细胞外铁及内铁可迅速增多，此检查是诊断IDA及指导铁剂治疗的一种辅助方法；非IDA，如HA、MA、AA等病人的细胞外铁通常增高，内铁亦增高，以Ⅰ型、Ⅱ型为主，可以见到Ⅲ型，罕见Ⅳ型。因此，有助于鉴别IDA与非IDA。

5、用于诊断铁粒幼细胞性贫血：能找到数量不等的环形铁粒幼细胞，多见粗颗粒的Ⅲ型与Ⅳ型铁粒幼细胞。

6、用于诊断伴环形铁粒幼细胞增多的MDS：骨髓中环形铁粒幼细胞＞15%。

四、社会和经济效益的可行性：

骨髓铁染色二甲医院收费25元，全年共完成330例，完成经济指标8250元，同时也方便了我院患者，让患者少跑路、少花钱、不出本院就能享受到完善的辅助检查。取得了经济效益和社会效益的双丰收！