免疫质控

室内质量控制的目的
实验室为了监测和评价本室工作质量，决定常规检 验报告能否发出所采取的一系列检查、控制手段，
旨在检测和控制本室常规工作的精密度，并检测其
准确度的改变，提高本室常规工作中批间和日间标 本检测的一致性。
室内质量控制的质量保证
提昌全程保证或全方位保证，主要因素： 人
质量体系
实验前的质量保证 实验中的质量保 实验后的质量保证
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梅毒抗体检测采用的方法：
TP（ELISA）、梅毒明胶凝集法(TPPA)、梅毒血球凝集法 （TPHA）、TRUST(非特异性)
AE200上 检测，若阳性标本应即时用TPPA复查，进一步确认后发 出报告。 TP （ELISA）CUT-OFF值=2.1N x (N-阴性对照,OD值不到0.05 按0.05算)。通常CO值为0.105 结果判断 阳性： ≥ CUT-OFF值 阴性： ＜ CUT-OFF值
（HBsAg HBsAb HBeAg） CUT-OFF值=2.1N x (N-阴性对照,OD值不到0.05按 0.05算)。通常CO值为0.105。 结果判断 阳性： ≥ CUT-OFF值 ； 阴性： ＜ CUT-OFF值
（HBeAb HBcAb） CUT-OFF值=1/2（N x +P x）（N-阴性对照,P-阳性对 照)。通常CO值为1.5-1.7。 结果判断 阳性： ＜ CUT-OFF值 ； 阴性： ≥ CUT-OFF值
质量控制血清
质控血清是已知靶值的血清，在每次的常 规检验中加入一份或数份，通过所得结果 来了解本次检验的情况。质控血清检验的 结果如能控制其误差在一定范围内，就说 明该检验没有发生不允许的误差。如果出 现超过允许误差范围的异常结果，提示该 检验不合格，应寻找原因，纠正后，重检 待测标本。因此质控血清在质控工作中起 重要作用。
随机误差
则表现测定SD的增大,主要是因为实验操作人员的操作等随机因素所 致,其出现难以完全避免和控制。
单波长与双波长
单波长 如： 405nm、450nm、490nm、630nm等 要设空白对照孔，所有孔要减空白对照值 双波长 如 ：主波长450nm，参考波长630 nm等 可不用设空白对照孔
OD值与S/CO值
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HIV-Ab（北京金豪） 筛查阳性按条例规定用另一种方 法和本法复查，3次2阳送确认，发“HIV-Ab待复查” 报 告，3次2阴发“阴性”报告。 CUT-OFF值=0.1+N x (N-阴性对照,不到0.02按0.02算),通常 为0.12 阳性： ≥0.12 阴性： ＜0.12
HCV-Ab （北京现代）阳性时应与PCR检测HCV-RNA相 比较，为防假阳性，HCV-Ab阳性时应告知PCR室作 进一步检验或做中和试验。 CUT-OFF值=0.1+N x (N-阴性对照,不到0.05按0.05算),通常为 0.15 阳性： ≥0.15 阴性： ＜0.15 -
建立各项标准化操作程序（SOP）
包括ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 仪器设备 检验项目 等
室内质量控制的基本内容包括
分析前的质控 病人准备 标本采集 标本转移 标本处理 标本储存 分析中的质控 量具与测量 试剂质量 仪器状态 反应条件 比色测定 分析后的质控 计算结果 标准曲线 质控图绘制 结果统计分析
免疫室内质控各种表格的填写
EB病毒抗体（VCA-IgA）（深圳华康）
设空白1孔，阳性对照2孔，阴性（正常）对照2孔， 无室内质控物
CUT-OFF值=0.270+正常对照x OD值
结果判断 EBV VCA-IgA阳性：待测血清或血浆OD值/CO值≥1.0
EBV VCA-IgA阴性：待测血清或血浆OD值/CO值＜ 1.0
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TORCH(IgM)(CMV、RUBE、TOXO、HSVⅠ+Ⅱ)
OD值 : S/CO值 :
酶标仪比色的吸光度
标本OD值 / 判断值（ CUT-OFF ）
统计数据时要选用S/CO
临界值（ CUT-OFF）
是ELISA方法检测的阴阳性结果的判断值。不同项目的试 剂盒CUT-OF值不同,常见有以下几种方式:
试剂盒直接提供的常数 与阴性对照相关的计算值 与阴阳性对照相关的计算值 如 HCV-IgG CO=1.5 如 HBsAg 如 HBcAb CO=2.1N CO=1/2(N+P)
校正 OD≥0.3 ；阳性/校正≥1.25 ；阴性/校正≤0.9 。符合以
上要 求方可发出报告。
时间分辨荧光定量检测乙肝两对半
设A-F6个不同浓度校准品（见说明书）和室内质控各1孔 （室内质控采用卫生部临检中心乙肝两对半定性质控物） HBsAg结果判读：标本浓度值≥0.2ng/ml的判为阳性；否则为阴性。 质量要求 ： 10000000 1000000 1.A点计数值应＜5000，F点计数值应＞100万。 100000 10000 2.相关系数r值应＞ 0.98 1000 3.典型的剂量反映曲线 0.2 1 5 25 150 HBsAg 校准品 HBsAb结果判读：标本浓度值≥10mIU/ml的判为阳性；否则为阴性。 （ng/ml） 质量要求 ： 1.A点计数值应＜5000，F点计数值应＞8万。 2.相关系数r值应＞ 0.98 5 10 40 160 640 抗－HBs校准品 3.典型的剂量反映曲线 HBeAg ：CUT-OFF值=2.1Ncounts (N-阴性对照,Ncounts值不到2250按2250算, Ncounts值高于2250，按实际计数值计算)。 结果判读：标本的counts与CUT-OFF的比值≥1.0判为阳性，否则为阴性。 质量要求 ： 1. 阳性对照counts值应≥60万。否则实验无效，全部重做。 2. 阴性对照counts值应≤8000。否则实验无效，全部重做。
临界值质控血清
质量控制血清分定值和未定值两种。如只用一 份质控血清定值，一般定在正常值与异常值交界点 上，定性测定时处于弱阳性水平，称为临界值。乙 肝标志物临界值的制定，应按临床需求，为临床提 供统一的判断弱阳性的标准。 临界值质控血清可以作为试剂盒中的阳性对照 品和阴性对照品以外的第三个对照品，它可以灵 敏地反映出试剂盒的检出水平，确保弱阳性反应 的标本不漏检。
免疫质控方法
Levey-Jennings法 (回顾性)
“即刻审核”分析
“L-J”质控方法
免疫质控目前没有统一的方法 , 最合适的质控方法 尚待研究建立中。目前由各实验室根据各自的情况制定, 但必须要满足临床的需要，本实验室引用“L-J”质控方 法，其内容基本上与临床化学测定的质控方法相同,但失 控的判断标准不同。 本室ELISA失控的判断标准暂定： 1.标本OD值≥CO值为阳性的，S/CO值＜1为失控； 标本OD值＜CO值为阳性的，S/CO值＞1为失控； 2.S/CO值≥±3S为失控。
冰箱、水浴箱温度记录表 仪器设备故障维修记录本 各种仪器设备使用记录本 各种仪器设备校准记录本 各种仪器设备保养记录本 环境温度、湿度记录表 各种原始操作记录表 尤瑞纳斯、I2000操作记录表 杂项操作记录表 自身抗体操作记录表 TORCH操作记录表 ASA、ACA操作记录表 体检项目操作记录表 HIV-Ab标本检测登记表 HIV-Ab原始记录、 原始结果记录 试剂、质控物批次更换记录 免疫室内质控失控结果记录 尤瑞纳斯室内质控即时审核记表 即刻法—室内质控原始数据记录（计算）表 HCV-Ab阳性报告记录表 HIV-A结果登记表 室内质控图月分析总结 室间质评回报结果分析总结
室间质量评价（External Quality Assessment, EQA）//能 力验证(Proficiency Testing, PT)
利用实验室间的比对确定实验室的检测能力 (能力验证)
室内质量控制
采用每天随标本测定质控血清的方法，并将结果误差控制在一定限度之内
系统误差
通常表现为质控物测定均值的漂移,是由操作者所使用的试剂、仪器设 备、标准品或校准物出现的问题而造成的,这种误差可以通过质量控制 的措施和方法加以控制,是可以排除的。
免疫质控的特点
影响ELISA检测的因素很多。检测时，阴阳性对照物、质
控物和标本同时同板进行检测。检测完成后要对空白孔、 阴阳对照孔、质控物进行即刻审核，判定是否在控，该 板结果可否发出。
即时审核规则
Uranus AE200（所有项目数据自动换算自动传输）: 设空白1孔，阴、阳性对照各2孔,室内质控1孔 （ 乙肝两对半、HIV-Ab、HCV-Ab、TP、CEA、AFP、 EB、肝吸虫抗体） 乙肝两对半（上海科华） 在控的情况下，阳性结果必须符合特有的模式方可发出报 告；对少见或不可能出现的模式必须复查。 重点注意HBsAg，复查的方法有:金标、两步法、时间分 辨、PCR、中和试验等。
质控品（临界血清）通常选用的浓度
卫生部临检中心提供：
HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb HCV-IgG HIV-Ab TP 1IU/ml 10mIU/ml 2NCU/ml 4NCU/ml 2NCU/ml 2NCU/ml 2NCU/ml 2NCU/ml
质量控制的形式
按其进行范围和评价目的：
室间质量评价
室内质量控制
室间质量评价的目的
室间质量评价的目的是相互校正各参与实验 室测定结果的准确性，要求保持在临床所能接受 的误差范围内，从而使参加活动的实验室之间结 果具有可比性，因此室间质量评价着重考察检验 操作的整体状态，由于室间质量评价活动是借助 外部力量来进行回顾性检查，而不能控制实验室 每天所发生的报告质量，故绝不能代替室内质量 控制。相反只有首先搞好室内质量控制，保证检 验结果达到一定的精密度，才能得到较好的室间 质量评价成绩，才谈得上室间结果的可比性。当 室间质量评价某一项目出现明显差异时，又要从 室内质量控制中寻找原因，重新制订改进计划。
设阴、阳对照各1孔、CO值血请两孔。
结果计算:
标本OD值≥CO x 的1.1倍为阳性，标本OD值处在
CO值±10％的范围为可疑。 质量要求: 阳性OD≥CO值的1.5倍； 阴性OD值/CO的OD值＜0.6。 符合以上要求方可发出报告。
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ELISA定量
抗精子抗体ASA 6个浓度的标准品，各单孔。操作要求高，相关系数 r > 0.96方可发出报告。 抗心磷脂抗体ACA （IgG、IgA、IgM） 单个校正品＋阴阳对照。 结果计算： 标本浓度值=OD值标本/OD值校准×CV(标于盒内标签上) 质量要求： 阳性对照OD值≥0.5 ；阴性对照OD值≤0.25；
本室质控原则：先用ELISA试剂在Uranus
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AFP、CEA定性（郑州安图）：
设空白1孔，阳性对照(高浓度)2孔，阴性对照(低浓度)2孔，不 设室内质控。 AFP高浓度：400ug/L CEA高浓度：80ug/L 低浓度：20ug/L 低浓度：10ug/L
CUT-OFF值 ≥低浓度OD值为阳性 阳性的标本审核时在“结果评价”栏注明“建议进一步做定量 检查”
人是质量保证的关键
素质： 热爱医学检验专业 具有广泛的临床医学知识和检验基础知识 具有高度的责任心 具有闲熟的检验操作技能 具有严谨的工作作风和实事求是的工作态度 设立质量监督管理员： 督促、检查、落实各项质量要求
质量管理体系
建立各种管理文件（操作规程）
包括: 分析前、中、后各个环节 相关表格的建立、填写及归档
免疫质量控制
莫炳強
检验质量的重要性
医学检验是一门综合性应用学科，是现代
医学不可缺少的组成部分，其检验质量直 接影响着医疗工作的整体水平。
免疫质量控制相关的几个概念
质量 Quality
一组固有特性满足要求的程度。
注1 注2：“固有的”（其反义词是“赋予的”）就是指存在某事或某物中本 质量控制(Quality Control, QC) 质量管理的一部分，致力于满足质量要求 质量保证(Quality Assurance, QA) 质量管理的一部分，致力于提供质量要求会得到满足的信任。
“灰区”（可疑结果的含义） 把定量分析的正常值范围引入定性分析建 立 灰区概念，即将CO 值上下的一段区域定为阳性可疑，需重复实验或换 试剂重测以确定其阴阳性，如仍落在灰区范围内则报告“+”（阳性）
定性酶免疫测定的CUT-OFF值
ELISA检测的“钩状”效应“HOOK EFFECT”
一步法和二步法均存在，只是前者出现的更早 些，大多数是高值低吸光度，很少阴性结果。