实验5 血清三酰甘油测定
不同年龄段性别间血清三酰甘油测定结果分析
志，０ ４２ （）３ ４３ ５ ２ ０ ，４７ ：９ ．９ ．
不 同年龄段 性别 间血清三酰甘油测定 结果 分析
李振 家 李 勇
（ 吉林省 四平 中心人 民医院，吉林 四平 １６ ０ ） ３０ ０
胺 为致癌物 。④改变 胃黏膜细胞 营养环境 ：胃窦切 除后的 胃泌素分泌 水 平明显 下降 ，残 胃黏膜和壁细 胞丧失大 部分 胃泌 素的营养 作用 ，造
成 胃黏膜的抗损伤机 制削弱 ，易发生癌变 。
充盈 或者 吻合 １狭窄等情 形 ，均可能提示残 胃癌 的存在。 ３ ３ 残 胃癌 患者 的组 织部位 和 发病 原 因 ３１残 胃癌患者的组织机 制 ．
的肠液 、胆 汁等 液体 倒流 至 胃 内 ，同 时也 防止 胃 内尚未 消化 完全 的
食物 进入十二 指肠 。当食 物在 胃内消化完全 后 ，幽 门开放 ，使得食 物 单 向 由胃流入 肠道 。如 此一来 ，可 以在食物在 胃肠道消化 与吸收完 善 的基 础上 ，有 利于 胃内酸性环境 的保 护 。但在进 行 胃大 部切 除手术 之
反 流有 关 ，报告此 实验 研究 。将２ ５ ６ 只Ｗｉａ鼠作 胃手术 ，分别 分为 ｓｒ ｔ Ｂｌｏ 式、ＢｌｏｈＩ ｉｒｔ Ｉ ｌｈ ｉｒｔ Ｉ ｌ 式、ＢｌｏｈＩ ＪＢａｎ ｉｒｔ 式］ ｒｕ 吻合 、ＢｌｏｈＩ ｌ Ｉ Ｉ ｉｒｔ Ｉ ｌ 式伴 Ｒ ｕ 嘣 １ 胃肠 吻合 以及单纯 胃肠 吻合五 组进行 手术 ，术 后定期 观察 ｏｘ － ｙ
幽 门的闭与 张都 是依靠 “ 幽门括 约肌 ”完成 ，即位于 胃肠交界 幽 门部 的一束 强力肌 肉。一般情况下 幽 门呈现 紧闭状态 ，以阻止肠腔 内
实验四甘油三酯测定(范玉平)
③常规方法（routine method）有足够的精密 常规方法（routine method）有足够的精密 度、准确性、特异性和适当分析范围。 用途：经方法评估和学术组织认可后推荐 为常规方法。 例如： TG 定量 决定性方法——同位素稀释/ 决定性方法——同位素稀释/质谱 ID/GC/MS） （ID/GC/MS） 参考方法——酶法 参考方法——酶法 常规方法——酶法 常规方法——酶法
误差和准确度属于不同概念，两者之 误差和准确度属于不同概念， 间不能划等号。 间不能划等号。
不准确度的数字表达是不确定度 (标准 标准 差和置信区间的半宽度表示)。 差和置信区间的半宽度表示 。 可以理解为测量结果与约定真值之差 可以理解为测量结果与约定真值之差 的范围。 的范围。
生化分析相关概念
实验方法选择原则
①实用性：速度快、标本用量少、操作简便、 安全可行。 ②可信性：精密度、准确度、敏感性、特异性 均达到要求。
实验四 血清三酰甘油测定
实验目的: 实验目的
1.掌握酶法测定血清中三酰甘油的原理 1.掌握酶法测定血清中三酰甘油的原理 掌握酶法测定血清中三酰甘油 和意义． 和意义． 2.了解三酰甘油的正常值范围. 2.了解三酰甘油的正常值范围 了解三酰甘油的正常值范围.
正确度 大量测量的均值与真值的接
近程度。用偏倚表示不正确度 。 偏倚值( 偏倚值(Bias=Xi-x),
生化分析相关概念
精密度：表示测量结果中的随机误差大小
的程度，即指在一定条件下进行多次测 定时，所得结果之间的符合程度。 常用标准差或变异系数表示。
生化分析相关概念
实验方法分类
method） ①决定性方法（definitive method） 决定性方法（ ②参考方法（reference method） 参考方法（reference method） ③常规方法（routine method） 常规方法（routine method）
《生物化学试验》实验四：血清甘油三酯含量测定
A standard
0.2
M standard = C standard× V standard
正常参考值为10-150 mg/dl。
注意事项
抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液， 吸取上层液时不能吸入下层液； 选用小试管时试管口径不能太细；
试管使用时必须要干燥；
实验完成后，试管和比色杯必须用皂粉洗干净， 不能有油污，将水甩干，倒置晾干； 枪头必须清洗干净，甩干
组成与含量 总 脂 400~700mg/dl (5 mmol/L) 甘油三酯 10~150mg/dl (0.11 ~ 1.69 mmol/L) 总 磷 脂 150~250mg/dl (48.44 ~ 80.73 mmol/L) 总胆固醇 100~250mg/dl (2.59 ~ 6.47 mmol/L) 游离脂酸 5~20mg/dl (0.195 ~ 0.805 mmol/L)
实验四
血清甘油三酯含量测定
Assay of Triglyceride content
一、目的与要求
1、了解血清(serum)甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义
2、掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原 理及主要技术方法
BACKGROUND
血浆所含脂类统称血脂， 包括：甘油三酯、磷脂、胆固醇及其酯以及游离脂酸。
PRINCIPLE
甘 FA 油 FA
FA
1、血清脂蛋白中的甘油三酯经正庚烷-异丙醇混合 溶剂抽提(isolated )后，脂蛋白变性，结合的甘 油三酯分离。
2、用氢氧化钾皂化(saponified)，使甘油三酯水解 成脂肪酸和甘油。
3、游离的甘油被过碘酸氧化(oxided)成甲醛，甲 醛与乙酰丙酮在铵离子存在下，缩合成黄色的3, 5-二乙酰-1, 4-二氧二甲基吡啶，
甘油三酯的测定的实验报告
甘油三酯的测定的实验报告实验报告：甘油三酯的测定一、实验目的1.掌握甘油三酯测定的原理和方法。
2.熟悉甘油三酯在临床诊断中的应用。
3.学习使用实验室仪器进行样品检测。
二、实验原理甘油三酯是血液中的一种脂质成分，其测定主要用于评估心血管疾病的风险。
甘油三酯的测定通常采用酶法，利用甘油三酯酶将甘油三酯水解成甘油二酯和脂肪酸，再通过甘油激酶将甘油二酯转化为甘油一酯和磷酸，最后通过磷酸脱氢酶将甘油一酯转化为甘油和磷酸盐。
通过测定反应过程中产生的磷酸盐的量，可以推算出甘油三酯的浓度。
三、实验步骤4.样品准备：采集受试者的血液样本，分离出血清，备用。
5.试剂准备：准备好甘油三酯测定试剂盒，按照说明书上的操作配制好试剂。
6.仪器准备：准备好全自动生化分析仪，调试好仪器参数。
7.样品检测：将血清样品加入试剂中，充分混匀，放入全自动生化分析仪中进行检测。
8.数据记录：记录每个样品的检测结果，包括样品编号、甘油三酯浓度等。
四、数据分析9.数据整理：将检测结果进行整理，计算出每个样品的甘油三酯浓度。
10.数据统计：计算所有样品的甘油三酯浓度的均值、标准差、最大值和最小值等统计指标。
11.数据分析：根据统计结果，对数据进行进一步分析。
例如，可以绘制柱状图或折线图来直观地展示不同性别或年龄组的甘油三酯浓度分布情况。
五、实验结论根据实验数据和分析结果，我们可以得出以下结论：12.本实验采用的酶法测定甘油三酯的方法可靠，可以用于临床诊断。
13.通过对受试者血液样本的测定，我们得到了不同性别和年龄组的甘油三酯浓度分布情况。
这些数据可以为临床医生提供参考，以评估心血管疾病的风险。
14.从数据中可以看出，不同性别和年龄组的甘油三酯浓度存在差异。
因此，在临床实践中，应该根据不同人群的特点制定相应的甘油三酯控制标准。
15.需要注意的是，甘油三酯测定结果受多种因素的影响，如饮食、运动、药物等。
因此，在解释实验结果时应该综合考虑这些因素。
临床生化检验：5-血清甘油三酯和总胆固醇的测定
生活小知识
• 将每100克食物中胆固醇含 量为100～200毫克的食物称为 中度胆固醇食物
如草鱼、鲫鱼、鲢鱼、黄 鳝、河鳗、甲鱼、蟹肉、猪排、 鸡肉等；
生活小知识
将每100克食物中胆固醇含 量为200～300毫克的食物称高 胆固醇食物
如猪肾、猪肝、猪肚、蚌 肉、蛀肉、蛋黄、蟹黄等。
吃什么可以降低胆固醇？
血清甘油三酯和总胆固醇的测定
实验目的
• 1.掌握甘油磷酸氧化酶法测定血清甘油三酯 和胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的基本 原理。
• 2.熟悉甘油磷酸氧化酶法测定血清甘油三酯 和胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇操作方 法。
• 3.了解血清甘油三酯和总胆固醇 测定的临床意义。
实验原理
甘油三酯+H2O CEH 甘油+脂肪酸 甘油+ATP 甘油激酶 甘油-3-磷酸+ADP
生活小知识
• 人体中的脂类大部分从食物中 来，所以甘油三酯高的人饮食 应有节制，主食之中应搭配部 分粗粮，副食品以鱼类、瘦肉、 豆及豆制品、各种新鲜蔬菜、 水果为主。
生活小知识
• 有助降甘油三酯的食物，如： 沙丁鱼、大马哈鱼、甜杏仁、 马齿苋，还有豆类，大蒜等。
• 还有一些利于降低血脂防治动 脉硬化的食物：海带、紫菜、 木耳、金针菇、香菇、洋葱等 可常吃。
生活小知识
• 饮牛奶宜去奶油，不加糖。蛋 类原则上每日不超过1个，烹 调食物用素油，少吃油煎食物。 少吃花生，因其中含油甚多， 但可以食用核桃肉、瓜子仁、 果仁等。
生活小知识
• 将每100克食物中胆固醇 含量低于100毫克的食物 称为低胆固醇食物
如鳗鱼、娼鱼、鲤鱼、 猪瘦肉、牛瘦肉、羊瘦肉、 鸭肉等；
甘油-3-磷酸+O2 甘油磷酸氧化酶 磷酸二羟酮+H2O2 H2O2+酚+4-氨基安替吡啉 POD 红色醌亚胺+H2O
参考测量程序测定血清三酰甘油水平的测量不确定度评定
参考测量程序测定血清三酰甘油水平的测量不确定度评定曾晓君;李景碧【摘要】目的以血清三酰甘油(TG)为例,探讨临床生化检验的不确定度评定方法 .方法建立测量血清TG水平的参考测量程序,使用\"bottom-up\"的方法对各不确定度分量的来源进行分析,并对各不确定度分量分别进行评定.通过合成标准不确定度,进一步计算获得血清TG水平的测量扩展不确定度.结果实验室测量得到朗道常规生化质控水平2 TG的平均水平为1.10 mmol/L,合成标准测量不确定度结果为0.04 mmol/L,在95％CI其水平的测量不确定度为(1.10±0.09)mmol/L,k=2;实验室测量得到朗道常规生化质控水平3 TG的平均水平为2.96 mmol/L,合成标准测量不确定度结果为0.04 mmol/L,在95％CI其水平的测量不确定度结果为(2.96±0.20)mmol/L,k=2.结论建立了血清TG的测量不确定度评定方法,为临床生化检验不确定度的评定提供了有效的参考依据;对于促进临床实验室管理标准化,提高临床生化检验质量有指导意义.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2019(016)008【总页数】3页(P1044-1046)【关键词】三酰甘油;参考测量程序;测量不确定度评定【作者】曾晓君;李景碧【作者单位】广东省中山市创艺生化工程有限公司研发中心 528400;广东省中山市中医院检验科 528400【正文语种】中文【中图分类】R446.1随着国内体外诊断技术和计量学溯源的不断发展，检验标准化在检验医学领域逐渐得到重视[1-2]。
临床检验中不确定度的影响因素一般包括：对被测量的定义不完善、抽样缺乏代表性、添加剂的干扰、离心条件、贮存条件、日间或批间不精密度、系统误差、标本缺乏特异性、校准物的赋值等[3]。
血清三酰甘油(TG)作为TG的一项重要的临床生化检验指标，对于临床诊断具有重要的指导作用[4]。
酶标仪比色法测定血清三酰甘油、总胆固醇方法探讨
酶标仪比色法测定血清三酰甘油、总胆固醇方法探讨李勇【摘要】目的尝试用酶标仪比色法测定血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平,同时用全自动生化分析仪作方法比较,探讨酶标仪比色法的可靠性.方法采用四川迈克TG GPO-PAP法试剂盒和TC COD-CE-PAP法试剂盒,用酶标仪比色测定血清中TG和TC,同时用深圳迈瑞TG和TC氧化酶法试剂盒,在迈瑞BS120全自动生化分析仪测定,比较两种方法的测定结果 .结果两种方法测定结果 :TG血清标本测定差值在0.07～0.38 mmol/L,RANDOX质控品测定差值在0.05～0.09mmol/L;TC血清标本测定差值在0.18～0.35 mmol/L,RANDOX质控品测定差在0.13～0.20 mmol/L.两种方法测定结果的差值均在CLIA′88推荐允许误差的最大误差允许范围之内,且质控品测定结果均在靶值允许的范围内.结论利用酶标仪比色法测定血清中TG和TC,其测定方法可靠,测定结果准确,且操作方法简便,检测成本低廉,可以作为TG和TC检测的替代方法 ,适合于基层实验室开展.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2010(007)016【总页数】3页(P1748-1750)【关键词】酶标仪比色;三酰甘油;总胆固醇【作者】李勇【作者单位】四川省平昌县疾病预防控制中心,636400【正文语种】中文【中图分类】R446.112目前血清中三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)测定方法较多[1-2]，有化学法、酶法和色谱法3大类，化学法操作步骤繁多、技术要求高而不适于常规工作应用;色谱法主要用作参考系统中决定性方法的建立及参考物质的制备与定值，此法费用昂贵，样品处理复杂，难以推广应用。
目前几乎所有的临床实验室都用酶法检测血清TG、TC水平，此法具有简便、快速、精密度高、特异性强的特点。
酶法中又有手工、半自动和全自动检测法，手工方法试剂消耗量大，试剂成本高，半自动、全自动需要专用的仪器，且仪器价格不菲，基层难于开展。
血清三酰甘油酯检测有何临床意义？
血清三酰甘油酯检测有何临床意义？
三酰甘油酯（TG）也称三酰甘油，是人体贮存能量的形式，主要在肝脏合成；此外，人体的小肠黏膜在类脂吸收后也合成大量的TG，TG大约占总脂的25%，为乳糜微粒和极低密度脂蛋白的主要成分，并直接参与CH和胆固醇酯的合成。
在正常情况下，人的TG水平保持在正常值范围内，伴随年龄的增长而逐渐增高。
TG升高对人体主要有以下危害。
①是诱发动脉粥样硬化的重要因素之一。
②使血液凝固性增强，并抑制纤维蛋白溶解，促进血栓形成，与冠状动脉硬化性心脏病的发生有极其密切的关系，约有80%的心肌梗死患者均有三酰甘油升高的指标。
③长期饥饿或食用高脂肪食品等也可造成TG升高。
需注意的是大量饮酒可使TG的假性升高。
TG参考范围（一点终点法）：0.56～1.70mmol/L。
（1）血清三酰甘油酯增高
①动脉硬化。
动脉粥样硬化、原发生性高脂血症、家族性高TG 血症。
②其他疾病。
胰腺炎、肝胆疾病（脂肪肝、肝脏胆汁淤积）、阻塞性黄疸、皮质醇增多症、肥胖、糖尿病、糖原累积症、严重贫血、肾病综合征、甲状腺功能减退症等疾病。
（2）血清三酰甘油酯减少甲状腺功能减退症、肾上腺皮质功能
减退、肝功能严重障碍等。
血清甘油三酯测定(一)
酶法(GPO-PAP法)；去游离甘油(两步酶)法；变常人TG水平高低受生活条件的影响，我国人低于欧美人，成年后随年龄上升。TG水平的个体差异比TC大，人群调查的数据比较分散，呈明显正偏态分布。
我国《血脂异常防治建议》提出的判断标准：
理想范围：1．7mmol／L(150mg／d1)；
升高：>1．7mmol／L(>150mg／d1)。
NCEP成人治疗组第三次报告(ATPⅢ)提出的医学决定水平：
理想范围：1．7mmol／L(150mg／d1)；
边缘增高：1．7～2．25mmoL／L(150～199mg／d1)；
增高：2．26～5．64mmol／L(200～499mg／d1)；
很高：≥5．65mmol／L(≥500mg/d1)。
关键词：血清甘油三酯测定临床意义
TG的代谢可分为外源性和内源性两条途径。外源性途径指食物中的TG在小肠内水解成脂肪酸和甘油一酯、二酯后由肠粘膜吸收入细胞，再合成TG并与其他脂质形成CM，通过淋巴系统入血。CM中的TG在脂蛋白脂肪酶（LPL）作用下水解为甘油和游离脂肪酸（FFA），被细胞利用或贮存。高脂饮食后3～6h，血液中CM相关的TG达到峰值，脂肪的吸收速度因食物中脂肪的成分及个体差异而不同。内源性代谢途径指CM水解产物—CM残粒以受体介导的形式被肝脏吸收，其衍生物和一些新组分合成VLDL。与CM水解类似，VLDL分泌到血液后被LPL水解成残粒，其中部分直接被肝吸收、分解，另一部分继续水解形成中间密度脂蛋白（IDL），最后生成LDL。VLDL的合成与水解受多种因素调节，包括底物利用率、激素状态、水解酶的活性及一些特殊载脂蛋白辅因子的活性。
血清甘油三酯测定(一)
摘要：血清甘油三酯/三酰甘油（TG）是一项重要的临床血脂常规测定指标，特别是随着对其致动脉粥样硬化（AS）作用研究的深入，TG作为冠心病的一项独立的危险因素日益受到重视1～3]。但是目前血清TG测定及其临床应用尚存在很多问题，如生物学变异、游离甘油对测定的影响、测定的标准化系统不完善等等。本文仅对TG的生物化学、测定方法与标准化、临床意义等方面的近况作一简述。
血清甘油三酯测定标准操作规程
血清甘油三酯测定标准操作规程1.检验原理（酶法）甘油三酯经脂蛋白酯酶（LPL）作用，可以水解为甘油和游离脂肪酸，甘油在ATP和甘油激酶（GK）的作用下，生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢与4-氨基安替比咻（4-AA）及和3,5-二氯-2-羟笨磺酸钠（DHBS）在过氧化物酶（PoD）作用下，生成红色酶类化合物，其显色程度与甘油三酯的浓度成正比。
甘油三酯+。
2上J甘油+游离脂肪酸甘油+ATP—二→3-磷酸甘油+ADP3-磷酸甘油+O2磷酸二羟丙酮+乩。
22”2°2+4-AA+DHBS您.>红色醒类物质+4H2O-20°C可保存1年。
样本应避免反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603∕DI-600标准操作规程）5参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用O.9%(W∕V)的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释不超过5倍。
7. 2.单位换算:mg∕dl=mmol∕L×88.58.检验方法的局限性8.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在510nm处吸光度大于0.200时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：Rl和R2均为无色透明或淡黄色液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在51Onm处，光径ICm时，空白吸光度AWO.2008.4线性区间：试剂的线性区间为[1.13-9.04]mmol∕L,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)[1.13-2.03]mmol∕L区间内，线性绝对偏差不超过0.20mmol∕L;[2.03-9.04]umol∕L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度：相对偏差应不大于±15%。
8.6分析灵敏度:在51Onm处,光径IenI时,测量已知浓度样品换算成ImmoI/L 的甘油三酯时，吸光度变化4A三ol∕L20.0058.7精密度8.7.1批内精密度：CV≤5%8.7.2批间精密度:R≤10%8.8稳定性：(2-8)C下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足1-8.7.1的要求。
血清中甘油酯的测定实验报告
血清中甘油酯的测定实验报告一、实验目的血清中甘油酯含量的测定对于评估人体脂质代谢、心血管疾病风险以及相关疾病的诊断和治疗具有重要意义。
本实验旨在掌握血清中甘油酯的测定方法，并对实验结果进行准确分析。
二、实验原理血清中的甘油酯包括甘油三酯（TG）和甘油二酯等，通常采用化学比色法进行测定。
其基本原理是利用酶促反应将甘油酯水解为甘油和脂肪酸，然后通过显色反应测定生成的甘油含量，从而间接计算出血清中甘油酯的浓度。
具体反应过程如下：甘油酯＋水→ 甘油＋脂肪酸甘油＋ATP → 甘油-3-磷酸＋ ADP甘油-3-磷酸＋氧化型辅酶Ⅱ（NADP⁺）→ 磷酸二羟丙酮＋还原型辅酶Ⅱ（NADPH）在一定波长下，通过测定 NADPH 的生成量，可计算出血清中甘油酯的含量。
三、实验材料与设备1、实验材料血清样本：采集新鲜的血清样本，置于－20℃保存备用。
试剂：甘油酯测定试剂盒（包括酶试剂、缓冲液、标准品等）。
蒸馏水。
2、实验设备分光光度计。
移液器（10μL、20μL、100μL、1000μL）。
恒温水浴箱。
离心机。
微量反应管。
四、实验步骤1、样本准备将血清样本从－20℃冰箱中取出，在室温下解冻，轻轻混匀。
以 3000 rpm 离心 10 分钟，取上清液备用。
2、试剂准备按照试剂盒说明书的要求，将酶试剂、缓冲液等试剂进行配制和混匀。
准备好标准品溶液，浓度分别为 05 mmol/L、10 mmol/L、20mmol/L、40 mmol/L。
3、测定操作在微量反应管中，分别加入标准品溶液和待测血清样本各10μL。
向每个反应管中加入100μL 酶试剂，轻轻混匀。
将反应管置于 37℃恒温水浴箱中孵育 15 分钟。
4、显色与测定孵育结束后，向每个反应管中加入100μL 显色剂，轻轻混匀。
在分光光度计上，选择波长为 340 nm，以蒸馏水调零，测定各反应管的吸光度值（A）。
5、结果计算根据标准品溶液的浓度和对应的吸光度值，绘制标准曲线。
三酰甘油(TG)测定的标准操作程序
三酰甘油（TG）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆三酰甘油浓度测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】反应式如下：LPL甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸GK甘油 + ATP 甘油-3-磷酸 + ADPGPO甘油-3-磷酸 + O2 二羟丙酮磷酸 + H2O2POD2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 4-氯酚醌亚胺 + HCl + 4H2O根据o-nitrophenol在520nm的吸光度的改变测定待测样本中的三酰甘油浓度。
【试剂】缓冲液 pH 7.5 50 mmol/L4-氯酚 4 mmol/LATP 2mmol/L镁离子 15mmol/L4-氨基安替比林 0.5mmol/L甘油激酶（GK）≥400U/L过氧化物酶（POD）≥2000U/L脂蛋白酯酶（LPL）≥2000U/L甘油-3-磷酸氧化酶（GPO）≥500 U/L2.校准品：Diasys TruCal U。
3. 质控品：Randox Assayed Multiseral Level 2 and Level 3。
【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。
【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L Dilutio LL Dilutio LLSec. OD Method: First LLast L Reaction Slope:Measuring Last L Measuring LastLinearity ANo-Lag-Time:2.试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8℃）。
血清三酰甘油酶方法测定的标准化分析
血清三酰甘油酶方法测定 的标准 化分析
朱 妍 刘悦 泽 张 雪 莹
（ １ 长春 医学高等专科学校基础 医学部 中心实验室 ，吉林 长春 １ ３ ０ ０ ３ １ ； ２吉林大学临床医学院五年制２ ０ １ ３ 级 五班 ，吉林 长春 １ ３ ０ ０ ２ １ ，３吉林省肿瘤 医院，吉林 长春 １ ３ ０ ０ １ ２ ）
问 ，针对 问题进 行集 体讨 论 。对 于在 讨论 过程 中表 现不够 积极 的成 员 ，其他成 员可 以对其提 出一些针对性 问题 ，这样就能 充分 调动所有 学生 的参与热情 ，从而让学生更 加积极 主动的参与到学习 当中。 ２ ． ４ 教师 的积极督 导 ：在 Ｐ Ｂ Ｌ 教学 过程 中，作为监督者 及引导 者 ，教 师 要对学生 的 自学活动进行严 格监督与 引导 。当发现学生在 学习及讨
＋ 通 讯作 者
３ ％。然而，真正意义上的三酰甘油不包含二酰甘油、一酰甘油以及游
离 甘油在 内，而 目前在临床上 测定得到的三酰甘 油含量通常 为三者之
和 ，即为总甘油 Ｊ 。
三酰甘 油的代谢途径 主要有两条 ，分 别为外源性 及 内源性 代谢 。
外 源性代谢主要 指来 自食物 的三酰 甘油经 由小肠 内水解为脂肪 酸、甘
血 清三酰甘油 （ Ｔ Ｇ）在 临床上 是一项重要的血脂常规测 定指标 ， 它与 动脉粥样硬化 的发生关系密切 ，随着研究 的深入 ，血清三酰甘 油
三酰甘 油又称为 中性 脂肪 ，是一 种不溶于水 的化合物 ，以脂蛋 白 的形式存在于血 液中 ，位置处 于脂蛋 白的核心 ，是机体 内能量 的主要 来 源。血液 中除了三酰甘油外 ，还存在其他种 类 ，如甘油二 醋、甘油
用来检测磷酸甘油的一种常用方法是先用磷酸甘油氧化酶来氧化磷酸甘油生成过氧化氢然后氧化物酶作用于过氧化氢促使4氨基安替比林与苯酚类或苯胺类化合物进行氧化缩合反应产生有色的醌亚胺类化合物之后用比色法测定其含量
生化试验教材实验四：血清甘油三酯含量测定
在测定血清甘油三酯含量时，应使用 新鲜血清，避免反复冻融。
实验过程中使用的仪器和玻璃器皿应 清洁干燥，以确保测量结果的准确性。
实验结果不确定度分析
不确定度是由于测量过程中随机效应和系统效应引起的测量结果的可变性。
不确定度的计算需要考虑各种因素，如仪器精度、操作人员技能、环境条件等。
通过不确定度分析，可以评估测量结果的可靠性和准确性，为后续的数据分析和解 释提供依据。
通过统计学方法，如t检验或方差分析，比较不同样本或不同处理条件下的甘油 三酯含量是否存在显著差异。
结果解读与疾病关联分析
解读正，判断实验结果 是否在正常范围内。
根据实验结果，为临床医生提供诊断 依据和治疗建议，帮助医生制定合理 的治疗方案。
疾病关联分析
根据甘油三酯含量的异常变化，结合 其他相关指标和临床表现，分析其与 相关疾病（如高血脂症、心血管疾病 等）的关联性。
根据标准曲线计算血清甘油三酯含量。
实验后处理
清洗实验器材
实验结束后，对使用的玻 璃器皿和仪器进行清洗， 确保干净整洁。
数据整理与分析
整理实验数据，进行统计 分析，得出实验结论。
实验废弃物处理
按照实验室规定，妥善处 理实验废弃物，确保实验 室环境安全。
04 结果分析
实验结果记录与处理
实验结果记录
生化试验教材实验四血清甘油三酯 含量测定
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 注意事项
01 实验目的
掌握血清甘油三酯的测定原理
血清甘油三酯的测定原理是基于酶法 ，通过特定的酶与甘油三酯反应生成 产物，再通过比色法测定产物浓度， 从而计算出血清甘油三酯的含量。
酶法测定甘油三酯的优点是灵敏度高 、特异性强，能够准确反映血清甘油 三酯的水平。
三酰甘油(TG)测定结果失真分析
三酰甘油(TG)测定结果失真分析【摘要】目的探讨全自动生化分析仪测定TG结果失真的原因以及解决的方法。
方法全自动生化分析仪D360终点法检测。
结果有一些TG测定结果偏高或偏低,经重新测定,其结果与以前相差甚远。
结论遇到结果过高而目测血清不浑浊等情况,要寻找原因,避免报告失真。
【关键词】TG全自动生化分析仪终点法;结果偏高或偏低血清三酰甘油(TG)是一项重要的临床血脂测定指标。
TG不仅对动脉粥样硬化(AS)和冠心病(CHD)的防治具有重要意义,而且已经渗透并应用于其他诸多临床相关专业疾病的研究,如高血压、糖尿病等。
测定方法为甘油磷酸氧化酶终点法。
在工作中,经常遇到目测血清很清而测得结果明显偏高及重度脂血的标本出现升高不明显的情况,经重新测定结果良好。
现选11列结果报告如下。
1 材料和方法11 标本来源来源于门诊和住院患者的标本。
12 仪器和试剂南京D360全自动生化分析仪试剂为北京科美生物技术有限公司提供的甘油磷酸氧化酶终点法液体单试剂。
13 方法做好仪器每天的维护及保养,使仪器处于最佳状态,要严格按照仪器的操作规程进行操作,作好室内质控。
对TG明显异常与目测相差很大的、反应曲线异常的标本及严重脂血(用生理盐水按照1:5的比例稀释后)再重新测定。
2 结果见表1。
3 讨论31 测定TG为甘油磷酸氧化酶终点法此法的原理是trinder反应(被测物通过酶作用产生的过氧化氢,在4氨基安替比林、过氧化物酶的存在下,可生成红色醌亚胺化合物)。
催化trinder反应的过氧化物酶对底物专一性差,维生素C、尿酸、谷胱甘肽及胆红素等还原性物质也与色原性物质竞争过氧化氢,从而使氧化过程中产生的过氧化氢被消耗,导致色素形成减少,测定结果偏低,此外,工具酶中如果夹杂有较多过氧化氢酶,也能消耗氧化产物过氧化氢,使被测物的测定值偏低,造成TG测定的负干扰。
临床上关于TG测定负干扰这方面的研究和报道不少。
我院应用D360测定TG时,时有目测血清很清但测定值偏高的现象,如上表所列。
甘油三酯测定
6.最后，打掉用过的吸液嘴，调回最大量程，仪器放置好保存。
72-1型分光光度计
工作原理
物质对光的吸收具有选择性，不同的物质都有各 自的吸收波长。在一定波长下，某物质的溶液对光的 吸收强弱（吸光度A）与溶液的浓度C和液层的厚度L 的乘积成正比，即遵循朗伯-比尔定律：
×标准液浓度（2.26 mmol/L）
【结果分析】
经过计算得到的血清中甘油三酯浓度为多 少，是否在人体的正常范围内（空腹甘油三酯 浓度为0.45～1.36mmol/L ）。
六、临床意义
TG升高：
1、随年龄增长有上升趋势，体重超标者。
2、高脂血症、糖尿病、肾病综合症、动脉粥样硬化、 甲状腺功能减退等。
A=K·C·L (K为吸收系数，对同一物质来说为一常数)
使用方法：
1.检查 ：指针位于“0”。 2.打开电源，打开比色皿暗箱盖，预热20分钟。 3.加样：夹毛面，擦干。 4.放置好比色皿，选择波长、调灵敏度。 5.反复调0、调100至稳定。 6.合盖，读数，记录，取样，清洗，关闭仪器。
（二）实验试剂
1.将吸嘴套在移液器头上轻轻转动，以保证密封。
2.使用前应先将移液器吸液和排液几次，润洗吸嘴和保持 腔内外Байду номын сангаас压一致。
3.选择量程。
4.垂直地握住移液器，将按钮按到第一停止点，然后把吸 嘴浸入到液面下2～3mm，再缓慢放松按钮，使之复位，等 待1～2秒后，从液体中取出，并避免碰撞任何物体。
5.将吸液嘴移至加样容器壁上，缓慢地把按钮按到第一停 止点，等待1～2秒，再把按钮全部按下去，排尽液体后，吸液
3、先天性脂蛋白脂酶缺陷，脂肪肝及其他肝病。
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甘油磷脂 (PL) 甘 FA
X = 胆碱
油
FA Pi O-X
乙醇胺 丝氨酸 肌醇等
胆固醇酯(CE)
胆固醇 FA
三、实验原理
O
O
CH2 O C R1
R2 C O CH
O
CH2 O P X
OH
甘油磷脂
O
O CHO2 CR1
CH2O-H R1-COOH
R2COCH O + 3H2O 脂肪酶或酸 HOCH + R2-COOH
0.6
0.6
0.6
皂化 吸取上层液体0.3-0.5ml，加入对应的3 只大试管（三管液量相等）， 再加异丙醇2ml及皂化剂0.4ml，立即摇匀，于65℃保温5min
氧化显色 各管加入氧化剂2ml充分混匀后，加入乙酰丙酮试剂2ml，摇匀，
65℃水浴15min
比色 取出试管，流水/室温冷却，测420nm的吸光度
结果计算：
标准管TG浓度：1.1mmol/L
C测=A测/A标 ×C标
血清三酰甘油 （mmol/L）
测定管光密度
＝
×1.1
标准管光密度
正常值=0.22～1.21mmol/L
五、注 意 事 项
抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液， 吸取上层液时不能吸入下层液；
选用小试管时试管可用离心试管；
试管使用时必须要干燥； 实验完成后，试管和比色杯必须用皂粉洗干净， 不能有油污，将水甩干，倒置晾干； 枪头必须清洗干净，甩干。
血清三酰甘油 的测定
生物化学与分子生物学学科
一、实验目的
血清三酰甘油的测定
1.掌握血清三酰甘油的测定的 基本原理和方法。
2.了解血清三酰甘油的测定的 临床意义。
血清三酰甘油的测定
二、器材和试剂
1.器材 试管及试管架、混匀器、恒温水浴箱、微 量加样器、吸量管、吸耳球、可见光分光光度计 、比色杯、记号笔。
CHO2 CR3
CH2O-H R3-COOH
三酰甘油 水
甘油 脂肪酸
抽提
血清三酰甘油的测定
三、实验原理
上层液0.4ml
三酰甘油 甘油磷脂
正庚烷 异丙醇-水
血清三酰甘油的测定
皂化 氧化 显色
+ KOH 65℃ 3
5 min
三酰甘油
脂肪酸钾
甘油
ห้องสมุดไป่ตู้
甘油
HIO4 2
+
OH
甲醛
甲酸
+
甲醛
乙酰丙酮
NH4+ 15 min
2.试剂 (1)新鲜血清 (2)抽提剂为正庚烷—异丙醇(2∶3.5)(V／V) (3)40mmol/L H2SO4溶液 (4)异丙醇 (5)皂化剂 (6)氧化剂 (7)乙酰丙酮 (8)1.1mmol/L三油酸甘油酯标准液
三、实验原理
血脂
甘 FA
甘油三酯(TG) 油 FA
FA
FA = Fat Acid
3,5-二乙酰-1,4二氢-2,6 二甲基吡啶 （黄色带荧光）
四、实验步骤
抽提 取3支小试管，按下表操作，边加边摇，混匀器振摇10min， 静置分层 。
试剂
空白管
标准管
测定管
血清（ml）
—
—
0.2
标准液（ml）
—
0.2
—
蒸馏水（ml）
0.2
—
—
抽提剂（ml）
2
2
2
40mmol/LH2SO4(ml)