性病实验室检验与质量控制
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12
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
1、原理：检测人体感染梅毒螺旋体产生的 抗类脂抗原的抗体
2、方法： 性病研究实验室试验（VDRL） 不加热血清反应素试验（USR） 快速血浆反应素环状卡片试验（RPR） 甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）
13
RPR
定性试验 •在纸卡圆圈中加入50μL待检血清，涂满整
病原学检测 血清学检测
7
病原学检测
原理：查找梅毒螺旋体
方法：暗视野显微镜检查、镀银染色法、 直接荧光法、PCR
8
暗视野显微镜检查
制片：标本置于载玻片上，加一滴生理 盐水，盖上盖玻片，在暗视野显微镜上 油镜观察。
观察：由于光线从聚光器的边缘斜射到 涂片上的梅毒螺旋体而发出光亮。
9
梅毒螺旋体特征
3
性病实验室在性病疫情监测中的 任务
疾病准确诊断 * 梅毒 * 淋病 * 沙眼衣原体感染
专项性病患病率调查
实验室检测
淋球菌耐药监测 实验室质量控制
4
性病实验室在性病防治中的作用
临床服务 效果评价
实验室诊断
疫情监测
科学研究
5
主要常见性病实验室检测介绍
梅毒 淋病 生殖道沙眼衣原体
6
常用梅毒检测方法
50%病人血清反应仍为阳性。
20
生物学假阳性
滴度常<1:8 分为急性（6个月内消失）
慢性（持续6个月以上）
21
生物学假阳性
急性反应见于： ➢ 发热性疾病如肺炎、上呼吸道感染、疟疾、心内膜
炎、传染性单核细胞增多症等； ➢ 疫苗接种； ➢ 妊娠。
22
生物学假阳性
慢性反应见于 ➢ 自身免疫学疾病如SLE； ➢ 抗磷脂综合征； ➢ 瘤型麻风； ➢ 吸毒者； ➢ 老年人。
性病实验室检验与质量控制
一、什么是性病
性病—— 是一组传染性疾病， 通过性接触 而传播的疾病。
2
我国重点防治的八种性病
梅毒、梅毒螺旋体 淋病、淋球菌 软下疳、杜克雷嗜血杆菌 性病性淋巴肉芽肿、衣原体 生殖道沙眼衣原体感染、沙眼衣原体 尖锐湿疣、乳头瘤病毒 生殖器疱疹、生殖器疱疹病毒 艾滋病 、HIV病毒
中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明 确但很小的凝块为弱阳性（圈2和3）颗 粒均匀分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈 6）为阴性
16
非梅毒螺旋体抗原血清试验的优缺点：
优点： *敏感性特异性好 *不需要昂贵设备，简单易行 *适用于大量人群的血清筛查 *有效治疗后血清滴度可下降并阴转，故可作疗效观察、
30
淋病
31
常用淋病检测方法 直接显微镜检查 分离培养淋球菌
32
直接显微镜检查
原理：男性淋菌性尿道炎的分 泌物中，多形核白细胞内可找 到革兰染色阴性的双球菌。
33
直接显微镜检查的临床意义
男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。
23
前带现象
发生率<2％ 当抗体滴度高，原倍血清只是弱阳性甚或阴性，如 将血清稀释后再做，则见高滴度反应
24
梅毒螺旋体抗原血清学试验
原理：用梅毒螺旋体抗原检测特异性抗梅毒螺旋体抗体 方法： 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 梅毒IgM抗体检测（IgM） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
18
非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
简单、快速 硬下疳出现1周-2周可呈阳性 适用于大量人群的筛查 疗效观察、复发或再感染判断
19
非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
❖ 早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治 疗后3个月，VDRL试验抗体滴度下降2个稀释 度，6个月下降4个稀释度。
❖ 一期梅毒1年后转为阴性 ❖ 二期梅毒2年后转为阴性。 ❖ 晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约
25
梅毒螺旋体抗原血清试验
TPPA
26
27
梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初 筛阳性标本的确证试验。
梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA等梅毒螺旋 体抗体试验试验仍可阳性，故TPPA等试验阳 性不能作为疗效观察的指标。
TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染， 应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行 诊断。
28
梅毒血清学试验结果的临床意义总汇
意义：
TRUST TPPA
_
_
+
+
+
-
-
+
排除梅毒 一期梅毒的早期 现症梅毒(梅毒孕妇所生 的婴儿除外) 生物学假阳性 早期梅毒、经治疗后
29
梅毒实验室检测策略选择
根据目的选择检测方法及检测策略。 可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。 方法选择依据 敏感性、特异性（试剂评估） 操作流程（可及性） 试剂的价格、结果时间（可ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ收性）
判愈、复发。
*20分钟可获得实验结果。 *试剂及方法均已标化，各实验室间结果可比较。 *试验可被内部质控和外部质控监控进行。 缺点：
*敏感性和特异性低于螺旋体抗原试验，BFP反应和前带 现象
17
未经治疗的各期梅毒的敏感性
试验 VDRL
敏感性非梅毒
一抗期原血清试二验期的敏感潜性伏和特异晚性期
78%
100% 96% 71%
(74-87)
(88-100) (34-94)
特异性 98% (96-99)
USR
80%
100% 95% 73% 98%
(72-88)
(88-100)
(93-99)
RPR
86% (77-99)
100% 98% (95-100)
99%
TRUST 85%
100% 98%
(77-86)
(95-100)
99% (98-99)
个圆圈 •使用滴管和专用针头（60滴/mL），加1
滴抗原悬液 •旋转100rpm 8min •立即判断结果
14
RPR
定量试验 待检血清用等渗盐水在纸卡圆圈中作6个
稀释度：原血清，1:2，1:4，1:8， 1:16，1:32 按定性试验步骤操作，以出现阳性反应 的最高稀释度报告结果
15
RPR定量试验
螺旋整齐 折光性强 运动缓慢而有规律，有三种运动方式：
1.围绕其长轴旋转运动 2.伸缩其螺旋间距离移动 3.弯曲扭动如蛇形
10
病原学检查的临床意义
可以确诊为梅毒 及时治疗、预后、尽早切断传染源 注意：未找到梅毒螺旋体，不能排除患
梅毒的可能性。
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梅毒血清学检测
一、非梅毒螺旋体抗原血清学试验 二、梅毒螺旋体抗原血清学试验
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
1、原理：检测人体感染梅毒螺旋体产生的 抗类脂抗原的抗体
2、方法： 性病研究实验室试验（VDRL） 不加热血清反应素试验（USR） 快速血浆反应素环状卡片试验（RPR） 甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）
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RPR
定性试验 •在纸卡圆圈中加入50μL待检血清，涂满整
病原学检测 血清学检测
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病原学检测
原理：查找梅毒螺旋体
方法：暗视野显微镜检查、镀银染色法、 直接荧光法、PCR
8
暗视野显微镜检查
制片：标本置于载玻片上，加一滴生理 盐水，盖上盖玻片，在暗视野显微镜上 油镜观察。
观察：由于光线从聚光器的边缘斜射到 涂片上的梅毒螺旋体而发出光亮。
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梅毒螺旋体特征
3
性病实验室在性病疫情监测中的 任务
疾病准确诊断 * 梅毒 * 淋病 * 沙眼衣原体感染
专项性病患病率调查
实验室检测
淋球菌耐药监测 实验室质量控制
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性病实验室在性病防治中的作用
临床服务 效果评价
实验室诊断
疫情监测
科学研究
5
主要常见性病实验室检测介绍
梅毒 淋病 生殖道沙眼衣原体
6
常用梅毒检测方法
50%病人血清反应仍为阳性。
20
生物学假阳性
滴度常<1:8 分为急性（6个月内消失）
慢性（持续6个月以上）
21
生物学假阳性
急性反应见于： ➢ 发热性疾病如肺炎、上呼吸道感染、疟疾、心内膜
炎、传染性单核细胞增多症等； ➢ 疫苗接种； ➢ 妊娠。
22
生物学假阳性
慢性反应见于 ➢ 自身免疫学疾病如SLE； ➢ 抗磷脂综合征； ➢ 瘤型麻风； ➢ 吸毒者； ➢ 老年人。
性病实验室检验与质量控制
一、什么是性病
性病—— 是一组传染性疾病， 通过性接触 而传播的疾病。
2
我国重点防治的八种性病
梅毒、梅毒螺旋体 淋病、淋球菌 软下疳、杜克雷嗜血杆菌 性病性淋巴肉芽肿、衣原体 生殖道沙眼衣原体感染、沙眼衣原体 尖锐湿疣、乳头瘤病毒 生殖器疱疹、生殖器疱疹病毒 艾滋病 、HIV病毒
中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明 确但很小的凝块为弱阳性（圈2和3）颗 粒均匀分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈 6）为阴性
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非梅毒螺旋体抗原血清试验的优缺点：
优点： *敏感性特异性好 *不需要昂贵设备，简单易行 *适用于大量人群的血清筛查 *有效治疗后血清滴度可下降并阴转，故可作疗效观察、
30
淋病
31
常用淋病检测方法 直接显微镜检查 分离培养淋球菌
32
直接显微镜检查
原理：男性淋菌性尿道炎的分 泌物中，多形核白细胞内可找 到革兰染色阴性的双球菌。
33
直接显微镜检查的临床意义
男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。
23
前带现象
发生率<2％ 当抗体滴度高，原倍血清只是弱阳性甚或阴性，如 将血清稀释后再做，则见高滴度反应
24
梅毒螺旋体抗原血清学试验
原理：用梅毒螺旋体抗原检测特异性抗梅毒螺旋体抗体 方法： 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 梅毒IgM抗体检测（IgM） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
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非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
简单、快速 硬下疳出现1周-2周可呈阳性 适用于大量人群的筛查 疗效观察、复发或再感染判断
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非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
❖ 早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治 疗后3个月，VDRL试验抗体滴度下降2个稀释 度，6个月下降4个稀释度。
❖ 一期梅毒1年后转为阴性 ❖ 二期梅毒2年后转为阴性。 ❖ 晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约
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梅毒螺旋体抗原血清试验
TPPA
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梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初 筛阳性标本的确证试验。
梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA等梅毒螺旋 体抗体试验试验仍可阳性，故TPPA等试验阳 性不能作为疗效观察的指标。
TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染， 应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行 诊断。
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梅毒血清学试验结果的临床意义总汇
意义：
TRUST TPPA
_
_
+
+
+
-
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排除梅毒 一期梅毒的早期 现症梅毒(梅毒孕妇所生 的婴儿除外) 生物学假阳性 早期梅毒、经治疗后
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梅毒实验室检测策略选择
根据目的选择检测方法及检测策略。 可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。 方法选择依据 敏感性、特异性（试剂评估） 操作流程（可及性） 试剂的价格、结果时间（可ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ收性）
判愈、复发。
*20分钟可获得实验结果。 *试剂及方法均已标化，各实验室间结果可比较。 *试验可被内部质控和外部质控监控进行。 缺点：
*敏感性和特异性低于螺旋体抗原试验，BFP反应和前带 现象
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未经治疗的各期梅毒的敏感性
试验 VDRL
敏感性非梅毒
一抗期原血清试二验期的敏感潜性伏和特异晚性期
78%
100% 96% 71%
(74-87)
(88-100) (34-94)
特异性 98% (96-99)
USR
80%
100% 95% 73% 98%
(72-88)
(88-100)
(93-99)
RPR
86% (77-99)
100% 98% (95-100)
99%
TRUST 85%
100% 98%
(77-86)
(95-100)
99% (98-99)
个圆圈 •使用滴管和专用针头（60滴/mL），加1
滴抗原悬液 •旋转100rpm 8min •立即判断结果
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RPR
定量试验 待检血清用等渗盐水在纸卡圆圈中作6个
稀释度：原血清，1:2，1:4，1:8， 1:16，1:32 按定性试验步骤操作，以出现阳性反应 的最高稀释度报告结果
15
RPR定量试验
螺旋整齐 折光性强 运动缓慢而有规律，有三种运动方式：
1.围绕其长轴旋转运动 2.伸缩其螺旋间距离移动 3.弯曲扭动如蛇形
10
病原学检查的临床意义
可以确诊为梅毒 及时治疗、预后、尽早切断传染源 注意：未找到梅毒螺旋体，不能排除患
梅毒的可能性。
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梅毒血清学检测
一、非梅毒螺旋体抗原血清学试验 二、梅毒螺旋体抗原血清学试验