维生素E测定方法
维生素e的测定方法
维生素e的测定方法
维生素E是一种重要的营养素，具有抗氧化作用，能够保护细胞膜不受自由基的伤害。
因此，测定维生素E的含量对于保持人体健康至关重要。
目前，测定维生素E的方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、荧光法、紫外分光光度法、电化学法等。
其中，高效液相色谱法和气相色谱法具有测定精度高、灵敏度高、分析速度快等优点，已经成为测定维生素E含量的主要方法。
在测定维生素E含量时，需要注意样品的制备和处理，以及仪器的校准和标准品的选取。
同时，还需要控制实验条件，避免干扰因素对测定结果的影响。
总之，维生素E的测定方法在保护人类健康方面具有重要作用，需要不断完善和提高。
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维生素e的四种鉴别方法
维生素E的四种鉴别方法如下：
与硝酸反应：取本品内容物适量(约相当于维生素E 10mg)，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在70℃加热15分钟，溶液显橙红色。
该鉴别方法主要利用维生素E的硝化反应进行鉴别。
与三氯化铁反应：取“与硝酸反应”项下的溶液，冷却后加过量氨试液，摇匀，加三氯化铁试液1ml，摇匀，溶液显黄绿色。
该鉴别方法主要利用维生素E与三氯化铁的反应进行鉴别。
检查生育酚：照气相色谱法测定，检查生育酚的含量。
该鉴别方法主要利用气相色谱法进行鉴别。
紫外光谱法：取本品内容物适量(约相当于维生素E 10mg)，加无水乙醇10ml溶解后，溶液在284nm与291nm的波长处有最大吸收。
该鉴别方法主要利用紫外光谱法进行鉴别。
另外，比色法、光谱法、电化学法也可用于鉴别维生素E。
其中，光谱法可分为紫外光谱法、红外光谱法和荧光法。
紫外光谱法只适用于高纯度、成分单一、干扰少的样品中维生素E 的测定；红外及近红外光谱法主要适用于植物油中部分生育酚的测定，具有一定的限制性；荧光法只能测定样品中总生育酚的含量，不适用于各异构体含量的分析。
以上信息仅供参考，如需了解更多信息，请查阅有关维生素E鉴别方法的文献或咨询相关专家。
维生素E含量测定方法
维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。
含量测定方法名称：维生素E的测定—气相色谱法。
应用范围：该方法采用气相法测定维生素E的含量。
该方法适用维生素E。
方法原理：供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离并检测维生素E和内标正三十二烷的吸收值，计算出其含量。
试剂：正己烷仪器设备：仪器气相色谱仪色谱柱：以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%，或以HP-1毛细管柱（100%二甲基聚硅氧烷）为分析柱；理论塔板数按维生素E峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
色谱柱和典型色谱条件：柱长30 m，柱内径0.53 mm 或0.32 mm，固定液为100%甲基聚硅氧烷柱温：265℃检测器：氢火焰离子化检测器，温度300℃进样口：温度290℃；分流进样，分流比1：20；进样量1μL载气：氮气，流速5 mL/min试样制备：1、称取供试品精密称取该品20mg，放置在棕色具有塞子的瓶中。
2、对照品溶液的制备精密称取维生素E对照品和维生素E对照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加异辛烷80mL，避免加热，超声处理1分钟使完全溶解，并加异辛烷至刻度，摇匀，冲氮密塞，避光，0℃以下保存。
3、内标溶液的制备4、供试品溶液的制备该供试品精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，即得供试品溶液。
5、校正因子的测定另取维生素E对照品20mg，精密称定，置棕色具塞中，精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取1~3μL注入气相色谱仪，计算校正因子。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。
“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：分别精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液1~3μL 注入气相色谱仪测定、计算，即得。
维生素E含量测定方法
高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定色谱条件色谱柱：采用C18柱(长150 mm，内径4.6mm，粒径4-5μm)流动相：甲醇(色谱醇)+水(去离子水) 比例：(98 + 2 )流速：1.2 ml/min检测波长:285 nm柱温: 25±2 ℃进样量：20 μL溶液制备标准溶液的制备：本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约0.1g(准确至0.0002),置50mL棕色量瓶中,加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。
绘制标准曲线把制成2.008 mg/mL的溶液作为贮备液。
分别准确移取0.5、1.25、2.5、3.75、5mL 至10mL 的棕色量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀；得到浓度分别为0.1004、0.251、0.502、0.753、1.004mg/ml的五种溶液，分别经0.45μm 滤膜滤过,滤液作为标准溶液。
用100μL的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60μL溶液，注意不能带有气泡，注入液相色谱仪,按色谱条件操作,从0.1004——1.004mg/ml依次进样，记色谱峰面积以标准品溶液浓度(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。
样品溶液的制备：维生素E粉样品溶液的制备制备步骤为：研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤1.研磨把试样E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。
2.称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸上，称取维生素E 粉约1g(约相当于维生素E 0.5g，准确至0.0002g),置50mL棕色量瓶中。
3.水浴溶解加甲醇适量,置超声波水浴器中助溶20 min。
4.移取定容冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL到10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀;再从制备好的10mL容量瓶中的溶液中移取2.5mL放置到10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。
饲料中维生素E的测定 高效液相色谱法-最新国标
饲料中维生素E的测定高效液相色谱法1范围本文件描述了饲料中维生素E的高效液相色谱测定方法。
本文件中“第一法皂化提取法”适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、复合预混合饲料和维生素预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚）的测定，“第二法直接提取法”适用于维生素预混合饲料、复合预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚乙酸酯）的测定。
本文件“第一法皂化提取法”的定量限为1mg/kg，“第二法直接提取法”的定量限为20mg/kg。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。
4第一法皂化提取法注意：使用的器皿不含有氧化性物质；分液漏斗活塞玻璃表面不涂油，处理过程在避光下操作；提取过程在通风柜中操作。
4.1原理试样用碱溶液皂化后，经液液萃取或固相萃取净化后，用高效液相色谱仪分离测定，外标法定量。
4.2试剂或材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。
4.2.1水：GB/T6682，一级。
4.2.2无水乙醇：色谱纯。
4.2.3无水乙醇。
4.2.4石油醚（沸程30℃-60℃）。
4.2.5甲醇：色谱纯。
4.2.6乙腈：色谱纯。
4.2.7甲酸。
4.2.8L-抗坏血酸。
4.2.9二丁基羟基甲苯（BHT）。
4.2.10无水硫酸钠。
4.2.11氢氧化钾溶液（500g/L）：称取500g氢氧化钾，加水溶解，冷却后用水定容至1000mL，混匀。
4.2.1270%乙醇溶液：取无水乙醇70mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。
4.2.1310%甲醇溶液：取甲醇10mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。
4.2.140.1%甲酸溶液：取甲酸1mL，用水稀释，定容至1000mL，混匀。
简述铈量法测定维生素e的原理
简述铈量法测定维生素e的原理摘要：1.铈量法测定维生素E的原理简介2.维生素E测定方法的背景和重要性3.铈量法的实验步骤和操作流程4.铈量法测定维生素E的优点和局限性5.维生素E测定在营养学和医学领域的应用正文：铈量法测定维生素E的原理：维生素E是一种脂溶性维生素，对人体健康具有重要作用。
铈量法是一种灵敏、准确地测定维生素E含量的方法。
本文将简要介绍铈量法测定维生素E的原理、实验步骤、优点及局限性，并在最后探讨维生素E测定在营养学和医学领域的应用。
维生素E测定方法的背景和重要性：维生素E在食品、饲料和制药等领域具有广泛应用。
然而，天然维生素E易受热、光和氧的影响，使其含量测定具有一定难度。
为保证产品质量和安全，研究维生素E的准确测定方法具有重要意义。
铈量法作为一种高效、可靠的维生素E测定方法，得到了广泛关注。
铈量法测定维生素E的原理：铈量法是基于维生素E还原性强、能与铈离子发生氧化还原反应的特性而设计的。
在铈量法中，维生素E与铈离子在酸性条件下反应，生成维生素E醇和铈醇。
通过测定反应前后铈离子的浓度变化，即可计算出维生素E的含量。
铈量法的实验步骤和操作流程：首先，将样品处理成均匀的溶液，然后加入适量的铈离子溶液，并调节溶液酸度。
接下来，将混合溶液在一定温度下反应一段时间。
反应完成后，用标准溶液滴定过量的铈离子，根据铈离子消耗量计算维生素E含量。
铈量法测定维生素E的优点和局限性：铈量法具有较高的灵敏度和准确度，能测定不同来源的维生素E含量。
此外，该方法操作简便、成本较低。
然而，铈量法也存在一定的局限性，如受样品基质、溶液酸度等因素影响，且不能测定维生素E类似物。
维生素E测定在营养学和医学领域的应用：维生素E测定方法在食品、饲料、制药等行业有广泛应用。
通过准确测定维生素E含量，有助于确保产品质量和安全。
此外，维生素E测定在医学领域也有重要意义，有助于评估人体维生素E摄入情况和研究维生素E与疾病的关系。
实验九气相色谱法测定维生素E的含量
实验九气相色谱法测定维生素E的含量
一、实验目的
熟悉气相色谱法的操作方法
掌握气相色谱法测定维生素E的色谱条件的选择
掌握基于校正因子的内标一点法的含量测定
二、溶液的制备（预试情况）
内标物溶液的配制：精密称取内标物正三十二烷48mg，置50ml容量瓶中，加正己烷溶解并稀释至刻度，得到浓度为49.6mg/ml的内标物溶液。
对照品溶液的制备：精密称取维生素E对照品20.76mg,精密加入内标物溶液10ml，溶解，得到浓度为2.076mg/ml的对照品溶液。
供试品溶液的制备：精密称取样品30.4mg，精密加入内标物溶液10ml，溶解，即得。
三、色谱条件
流动相：氮气
载气流速： 30ml/min ，空气流速：300ml/min，氢气流速：30ml/min
检测器：氢焰离子化检测器
进样量：2微升
进样口温度：300度
柱温：265度
检测器温度：300度
四、数据处理及结果（）
校正因子的测定：精密吸取对照品2μl，注入气相色谱仪，计算相对校正因子（new calibration建立新的校正曲线，需要输入内标和维生素E的浓度或量，仪器自动给出绝对校正因子，RF显示项下全为NO，ISTD项下内标物选择YES，对照品选择NO，然后点击OK，即可）
样品的测定：精密吸取样品2μl，注入气相色谱仪，计算样品含量。
含量测定方法选择ISTD法，只需要打开样品图谱，即可得到含量。
维生素e的测定方法
维生素e的测定方法
维生素E是一种重要的脂溶性维生素，具有抗氧化、抗衰老等作用。
对于维生素E的测定，目前主要有以下方法：
1.高效液相色谱法：该方法通过色谱分离、检测维生素E的吸收峰来确定维生素E的含量。
该方法操作简便、准确度高、灵敏度较好，适用于各种样品的测定。
2.比色法：该方法将维生素E与少量2,2'-二联苯酚在酸性条件下反应，生成具有紫色的吸收峰，根据吸光度测定维生素E的含量。
该方法操作简单、易于推广，但是因为受到其他物质的干扰较大，准确度较低。
3.氧化法：该方法将样品与氧气或过氧化氢反应，将维生素E氧化为各自二烯酸，再通过比色法或荧光法测定各自二烯酸的含量来确定维生素E的含量。
该方法准确度高、灵敏度好，但是操作相对复杂，需要一定的实验技巧。
总之，不同的测定方法适用于不同的样品和实验要求，应根据具体情况选择合适的方法进行测定。
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维生素e的测定方法
爱你维生素E 测定方法的研究进展
图1 生物酚的化学结构
Fig. 1 ChemicaI structure Of tOcOpherOIs
维生素E结构复杂，异构体种类多，分析测定困难，多年来许多科学家致力于其分析测定的
研究，取得了很大的进展，开发了不少有用的分析方法，主要有：铈量法；分光光度法；色谱法；荧光法；脉冲电极法；示波极谱法；示波滴定法；近红外光谱法；气相色谱法；双波电量法；视差扫描电量法. 这些方法各有优缺点，灵敏度、准确度及适用范围也不尽相同，但应用最多的是以下几种方法，特将它们的分析研究情况及进展叙述如下.
! 分光光度法
维生素E 结构中含有游离的酚羟基，可被强氧化剂氧化生成醌，这是分光光度法分析的基础.
常用的氧化剂有FeCI3、Ce（SO4）2、HNO3等，氧化反应如下［3］：
图2 维生素E 的氧化反应
Fig. 2 The Oxicative reactiOn Of vitamin E
反应（1）可定量进行，直接用于滴定分析维生素E，加入二苯胺作指示剂，用Ce4 + 标准溶液滴定呈现淡蓝色即为终点，按计量关系即可求出试样中游离维生素E 的量，但试剂空白影响较大，必须进行校正. 反应（2）的Fe3 + 可定量地氧化维生素E，其还原产物Fe2 + 可定量地同ａ、ａ*-联吡啶形成配位化合物，用分光光度法可间接测定维生素E的含量.。
项目：气相色谱法测定维生素E软胶囊的含量
w 1 标示量%=Cx实验数据的记录与计算 2.原始数据记录表
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二、 任务实施
（三）. 实验结果与检验报告
1. 采用内标法时，通常配制相当于80%、100%和120%的对 照品溶液，加人规定量的内标溶液，配成3 种不同浓度的溶 液，分别至少进样2 次，计算平均校正因子，其相对标准偏 差应不大于2. 0 % 。 2.结论： 应为标示量的 90. 0%〜110. 0% 。
12 P1236
12
3
（通则0521）
3
4
4
2 .系统适用性试验 除另有规定外，应照高效液相色谱 法（通则0512)项下的规定。
（通则0521）
4 样品的测定 5 仪器系统适用性试验应符合药典或 部颁标准各品种项下的要求。
5
P101
二、 任务实施
校正因子的测定 取正三十二烷适量，加正己烷溶解并 稀释成每lml中含l.0mg的溶液，作为内标溶液。另取维生 素E 对照品约20mg，精密称定，置棕色具塞瓶中，精密加 内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解，作为对照品溶液，取1 〜3μ l注入气相色谱仪，计算校正因子。 测定法 取装量差异项下的内容物，混合均匀，取适量 （约相当于维生素E 20mg)，精密称定，置棕色具塞瓶中， 精密加内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解，作为供试品溶 6 液；取1〜3μ l注人气相色谱仪，测定，计算，即得。
（通则0521）
6
二、 任务实施
（二）. 实验数据的记录与计算 1. 公式
AS / CS f AR / CR
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中αVE的含量
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量一、实验目的本实验旨在采用高效液相色谱法（HPLC）测定维生素E胶囊中α-生育酚（α-VE）的含量，为药品质量控制提供依据。
二、实验原理高效液相色谱法是一种分离和分析技术，利用色谱柱将样品中的各组分进行分离，然后通过检测器对分离后的组分进行检测和定量。
本实验采用C18色谱柱，以甲醇-水为流动相，荧光检测器检测维生素E。
维生素E在流动相中的分配系数不同，因此各组分在色谱柱上的保留时间也不同，从而实现分离。
三、实验步骤1.试剂与仪器准备：甲醇（色谱纯）、维生素E标准品、维生素E胶囊样品、C18色谱柱、荧光检测器、高效液相色谱仪。
2.标准溶液制备：精确称取适量维生素E标准品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的标准溶液。
3.样品溶液制备：取适量维生素E胶囊样品，破碎后混合均匀，精确称取适量样品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的样品溶液。
4.色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水（90:10，v/v），流速为1.0mL/min，荧光检测器激发波长为295nm，发射波长为330nm。
柱温为室温。
5.标准曲线绘制：分别精密吸取不同浓度的标准溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
6.样品测定：精密吸取样品溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
根据标准曲线计算样品中α-VE的含量。
7.数据处理与分析：将实验数据录入表格，进行数据处理与分析，得出实验结果。
四、实验结果与讨论1.实验结果：通过高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，得到如下数据：标准曲线方程：y = ax + b相关系数：r样品中α-VE的含量：X μg/粒回收率：Y%相对标准偏差（RSD）：Z%2.实验讨论：本实验采用高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，方法简便、准确、重现性好。
维生素E测定方法
维生素E测定方法 Prepared on 22 November 2020MM_FS_CNG_0793饲料添加剂维生素E粉检验规程滴定法称量法MM_FS_CNG_0793饲料添加剂维生素E粉1.适用范围本方法适用于以维生素E为原料，加入适当的吸附剂制成的维生素E粉，在饲料工业中作为维生素类饲料添加剂。
2. 分子式、分子量分子式：C31H52O3分子量：(按1983年国际原子量)3.技术要求.外观和性状本品为类白色或淡黄色粉末，易吸潮。
.粒度本品90％通过三号筛。
.项目和指标4.过程简述.外观及粒度称取样品50g，用肉眼观察颜色，再用三号筛测定。
.鉴别主要试剂无水乙醇；硝酸。
鉴别方法称取样品约相当于维生素E15mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75℃加热约15min，溶液显橙红色。
.维生素E含量测定主要试剂95％乙醇；无水乙醇；硫酸；二苯胺：1％(g/ml)硫酸溶液；硫酸铈；硫酸铈标准液：L。
按中国药典一九八五版二部附录134页制备和标定。
测定方法称取样品约相当于维生素E (准确至，置于100ml量瓶中，加无水乙醇至刻度。
振摇30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，准确吸取续滤液50ml，置于回流瓶中，再加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，准确吸取25ml，加乙醇20ml，水10ml，二苯胺硫酸溶液2滴，用L硫酸铈标准液滴定，滴定速度以每10s 25滴为宜，至溶液由亮黄色转变为灰紫色。
持续10s，即为终点，并将滴定结果用空白试验校正。
计算和结果的表示所含维生素E 相当于标示量的百分数X 1(％)按式(1)计算：)1(1008002364.0)((%)01 ⨯⨯⨯⨯⨯-=KG F V V X 式中：V ──样品溶液消耗硫酸铈标准液的体积，ml ；V 0──空白溶液消耗硫酸铈标准液的体积，ml ；F ──硫酸铈标准液浓度校正系数；──滴定度(每1ml L 硫酸铈标准液相当于的C 31H 52O 3)；8──样品稀释倍数；G ──样品重量，g ；K ──维生素E 的标示量(如5010033100251002010010100,,,,等)。
维生素E的含量检验方法
维生素E的含量检验方法一、目的：建立维生素E含量标准检验方法，保证分析结果的准确性。
二、依据：GB/T5009.82-2003三、范围：本规程适用于本公司维生素E含量检验操作四、职责：质量检验员对本标准的实施负责五、正文：1、试制和溶液1.1 无水乙醚：:不含有过氧化物。
1.1.1 过氧化物检查方法:用5 mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1 min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉溶液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后使用。
1.1.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放人纯铁丝或铁末少许。
弃去10%初馏液和10%残馏液。
1.2 无水乙醇：不得含有醛类物质1.2.1 检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加人少量乙醇，摇匀，再加人氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
1.2.2 脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。
取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。
将两者倾人1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50 mL。
当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。
1.3 无水硫酸钠。
1.4 甲醇：重蒸后使用。
1.5 重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
1.6 抗坏血酸溶液(100 g/L)：临用前配制。
1.7 氢氧化钾溶液(1+1),1.8 氢氧化钠溶液(100 g/1)。
1.9 硝酸银溶液((50 g/L)o1.10 银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(3. 9)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液(3.8)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
1.11 维生素E标准液：a一生育酚(纯度95%)>Y一生育酚(950o),S一生育酚(纯度95%)。
用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1 mL 相当于1 mg。
临用前用紫外分光光度计分别标定此三种维生素E溶液的准确浓度。
1. 12 内标溶液：称取苯并「e」芘(纯度98%)，用脱醛乙醇配制成每1 mL相当10 ug苯并「e」芘的内标溶液。
维生素药物分析 维生素E的含量测定
维生素E的含量测定
校正因子的计算
校正因子 f AS / mS AR / mR
式中，AS：为内标物的峰面积 AR：为对照品的峰面积
mS：为加入内标物的质量 mR：为加入对照品的质量
维生素E的含量测定
含量的计算
含量
mi
f
Ai AS / mS
式中，Ai：为供试品峰面积 mi：为供试品的含量
维生素E的含量测定
标示量的计算
标示量%
（mi
/Vi）1000 10 1/1000 取样量 标示量
平均片量
100
%
式中，平均片量、标示量均以mg为单位 mi/Vi：为1μL供试品溶液中所含维生素E的质量，μg
10：为供试品溶液的总体积，mL 1/1000：为将μg换算成mg
1000：为将1μL中的质量换算为1mL中的质量，μg
维生素E的含量测定——内标法
维生素E的含量测定
维生素E
维生素E是有8种形式的脂溶性维生素，为一重要的抗氧化剂。维生素E包括生育酚 和三烯生育酚两类共8种化合物，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，α-生 育酚是自然界中分布最广泛含量最丰富活性最高的维生素E形式。
维生素E的含量测定
测定原理
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样品的测定
测定方法
取本品20粒精密称定，清出内容物混合均匀。囊壳以乙醚清洗干净，置通 风处使溶剂自然挥尽，再精密称定囊壳质量，求得平均每粒质量，精密称取内 容物适量（约相当于维生素E 20mg），置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标 溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取取1῀3μL注入气相色谱仪，计算含量。
供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸 收检测器于波长254nm处检测维生素E（C31H52O3）和内标正三十二烷的吸收 值，计算出其含量。
维生素E检验标准操作规程
取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯硫酸铈滴定液（0.01mol/L）不得过1.0ml为符合规定。
3.3.3微生物限度
取本品10g加至含溶化的（温度不超过45℃）5g司盘80，3g 单硬脂酸甘油酯，10g聚山梨酯80的无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，加入45℃的pH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀使充分乳化，作为1：10的供试液。取适量供试液，照微生物限度检查平皿法（《中国药典》2005版二部附录Ⅺ J）检查，细菌数、霉菌和酵母菌数分别不得过100个/g,金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出为符合规定。
4.4计算
4.4.1理论板数
n——理论板数t′R——组分保留时间
Wh/2——半高峰宽
4.4.2分离度
R——分离度tR1、tR2——1、2组分的保留时间
Wb1、Wb2——1、2组分的色谱峰峰宽
4.4.3校正因子
f——校正因子
CR——对照品的浓度
CS——内标物质的浓度
AR——对照品的峰面积或峰高
As——内标物质的峰面积或峰高
量筒碱式滴定管分析天平
3.2试药与试液
乙醇乙醚无水乙醇二甲基甲酰胺正己烷
酚酞指示液
二苯胺试液
氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）
硫酸铈滴定液（0.01mol/L）
3.3检查项目与操作方法
3.3.1酸度
取乙醇与乙醚各15ml，置锥形瓶中，加酚酞指示液0.5ml，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至微显粉红色，加本品1.0g，溶解后，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）不得过0.5ml为符合规定。
4．[含量测定]
维生素E的测定
维生素E的测定(一)原理试样中的维生素E经皂化提取处理后，将其从不行皂化部分提取至有机溶剂中。
用液相色谱C18反相柱分别维生素E，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定。
(二)仪器与主要试剂高效液相色谱仪带紫外分光检测器；紫外分光光度计；旋转蒸发器；高速离心机。
不含有过氧化物的无水乙醚，检查办法：用5mL乙醚加1mL10％碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0．5％淀粉溶液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后用法。
去除过氧化物的办法：重蒸乙醚时，瓶中放入纯铁丝或铁末少许。
弃去10％初馏液和10％残馏液。
无水乙醇：不得含有醛类物质。
检查办法：取2mL银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入氢氧化钠溶液加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
脱醛办法：取2g硝酸银溶于少量水中，取4g氢氧化钠溶于温乙醇中，将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处2天(时常摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50moL。
当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增强。
甲醇：重蒸后用法。
重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
抗坏血酸溶液(100g/L)：临用前配制。
银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(50g／L)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
维生素E标准液：a-生育酚(纯度95％)，γ生育酚(95％) ，δ沪生育酚(纯度95％)。
用脱醛乙醇分离溶解以上3种维生素E标准品，使其质量浓度大约为1mL相当于1mg。
临用前用紫外分光光度计分离标定此3种维生素E溶液的精确质量浓度。
内标溶液：称取苯并[e]芘(纯度98％)，用脱醛乙醇配制成1mL相当于10μg苯并[e]芘的内标溶液。
(三)测定精确称取1～10g试样(含维生素E各异构体约为40μg)于皂化瓶中，加30mL无水乙醇搅拌到颗粒物簇拥匀称为止；加5mL 10％抗坏血酸、苯并[e]芘标准液2.00mL，混匀。
实验六 维生素E的含量测定-液相色谱
实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE一、实验目的1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。
2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。
二、原理1. 高效液相色谱的特点高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。
2. 高效液相色谱仪(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。
(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。
(3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。
(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。
3. 高效液相色谱的类型根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。
(2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。
(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。
(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。
(5) 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。
(6) 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离。
4. 实验原理反向色谱与正相色谱组成相反，是以非极性或弱极性的固定液制成的固定相，以极性或相对强的极性溶剂作为流动相组成的液—液分配色谱。
但目前多是采用化学反应的方法将非极性或弱极性的有机物分子键合到载体表面，制成键合相的固定相，所以也称键合相色谱。
这种色谱的分离机理比较复杂，一般认为是液—固吸附和液—液分配并存。
在反向HPLC中常用的键合相有十八烷基硅烷(Ｃ18）、辛基硅烷(Ｃ8)氰基硅烷、氨基硅烷等。
高效液相色谱法测定人血清中维生素E
高效液相色谱法测定人血清中维生素E实验目的：1.了解高效液相色谱的结构、原理及其应用范围。
2. 掌握仪器分析的研究方法和基本操作实验耗材与仪器：实验仪器：Agilent高效液相色谱仪1260系列实验设备：MX-F漩涡混合器、TGL-16G高速离心机，BF2000氮气吹干仪实验试剂：无水乙醇（分析纯）、正己烷（色谱纯）、甲醇（色谱纯）超净水、异丙醇（分析纯）实验步骤：一、样品前处理：1. 准确吸取血清0.1mL于2mL朔料离心管中，加入1μg/mL内标液（δ-VE）0.2mL。
2. 加入无水乙醇0.3mL，盖塞，用漩涡混合器充分混匀2min。
3. 加入正己烷0.6mL，盖塞，用漩涡混合器充分混匀2min。
4. 样品取出后立即离心（3000r/min，5mim），去上层（正己烷层）于另外的朔料管中（一定不要取下层）。
5. 对下层溶液重复提取2次。
6. 氮气吹干正己烷7. 立刻加入200μL无水乙醇，用漩涡器充分混合，使提取物完全溶解于无水乙醇中。
取溶解物100μL至带内衬管的进样瓶中待测。
二、标准曲线配置1.分别取γ-VE10μg/mL、α-VE20μg/mL、和内标δ-VE10μg/mL的标准工作液，用无水乙醇配置成1μg/mL的单标工作液。
2. 用α、γ-VE标准工作液配制工作曲线，使每个混合标准液中含有内标（δ-VE）1μg/mL，并用无水乙醇补足至1mL。
见下表1标准曲线配置工作表（直接配置于进样瓶）表1 标准曲线配置浓度与取样量三、用高效液相色谱法测定vit-E1. 过滤流动相2. 上机测定a)测定δ、γ、α-VE、和内标单标，保留时间定性b）测定α、γ-VE标准曲线，用他们与δ-VE内标的峰高比或面积比定量。
c）测定未知样品3. 仪器分析条件色谱柱：ZORBAX SB-Aa 5μm250*4.6mm流动相：甲醇：水=90：10流速：1.0μg/mL紫外线检测波长：295nm荧光激发波长：295nm，发射波长350nm进样量：20μL柱温：35℃实验结果与数据分析1. 定性保留时间见表2。
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MM_FS_CNG_0793料添加剂维生素E粉检验规程滴定法称量法
MM_FS_CNG_0793
饲料添加剂维生素E粉
1.适用范围
本方法适用于以维生素E为原料，加入适当的吸附剂制成的维生素E粉，在饲料工业中作为维生素类饲料添加剂。
2.分子式、分子量
分子式：G1H2Q
分子量：472.75（按1983年国际原子量）
3.技术要求
3.1.外观和性状
本品为类白色或淡黄色粉末，易吸潮。
3.2.粒度
本品90%通过三号筛。
3.3.项目和指标
称取样品50g,用肉眼观察颜色，再用三号筛测定。
4.2.鉴别
4.2.1.主要试剂
无水乙醇；硝酸。
4.2.2.鉴别方法
称取样品约相当于维生素E15mg加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇
匀，在75C加热约15min,溶液显橙红色。
4.3.维生素E含量测定
4.3.1.主要试剂
95%乙醇；
无水乙醇；
硫酸；
二苯胺：1% （g/ml）硫酸溶液；
硫酸铈；
硫酸铈标准液：0.01mol/L。
按中国药典一九八五版二部附录134页制备和
4.3.2.测定方法
称取样品约相当于维生素E 0.18g（准确至0.0002g），置于100ml量瓶中，加无水乙醇至刻度。
振摇30mi n，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，准确吸取续滤液50ml，置于回流瓶中，再加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，准确吸取25ml，加乙醇20ml，水10ml，二苯胺硫酸溶液2滴，用0.01mol/L硫酸铈标准液滴定，
滴定速度以每10s 25滴为宜，至溶液由亮黄色转变为灰紫色。
持续
10s ，即为 终点，并将滴定结果用空白试验校正。
433.计算和结果的表示
所含维生素E 相当于标示量的百分数X i （ %）按式⑴ 计算:
(V -V 。
)F O.002364 8 1OO . G K 式中：V —样品溶液消耗硫酸铈标准液的体积, V ——空白溶液消耗硫酸铈标准液的体积, F ——硫酸铈标准液浓度校正系数；
0.002364 ——滴定度（每 1ml 0.01mol/L 的 G^Q ）;
8——样品稀释倍数；
G —样品重量，g ;
竺邑竺20®等) 100'100'100'100'100 丿
4.4.干燥失重的测定 4.4.1.测定方法
称取样品1g （准确至0.0002g ），置于已在105C 烘箱中干燥至恒重的 构0X
30mm 的称量瓶中，打开称量瓶瓶盖，放置 105°C 烘箱中，干燥至恒重。
4.4.2.计算和结果的表示
干燥失重％（以重量百分数表示）按式（2）计算：
X 2(%^^^ 10。
.......................... ⑵
式中：G ——干燥前的样品加称量瓶重，g ；
G --- 干燥后的样品加称量瓶重，g ；
G 样品重，go
5. 验收规则
5.1. 本产品应由生产厂的质量检验部门进行检验， 生产厂应保证所有出厂的产品 均符合本标准的要求，每批出厂的产品都应附有质量证明书。
5.2. 使用单位有权按照本标准规定的检验规则和试验方法对所收到的产品进行 质量检验，检验其指标是否符合本标准的要求。
5.3. 取样方法
取样需备有清洁、干燥、具有密闭性和避光性的样品瓶。
瓶上贴有标签，注 明
生产厂名称、产品名称、批号及取样日期。
抽样时，应用清洁适用的抽样器。
每批产品抽样2份，每份抽样量应为检验 所需样品的3倍量，装入样品瓶中，一件送化验室检验，另一件应密封保存，以 备仲裁分析用。
5.4. 如果在检验中有一项指标不符合本标准时， 应重新抽样，抽样量是第一次的 二倍，进行核验。
产品重新检验结果即使只有一项指标不符合标准时， 则整批不 能验收。
5.5. 如供需双方对产品质量发生异议时， 可由双方协商选定仲裁单位，按本标准 的验收规定和检验方法进行仲裁检验。
6. 标志、包装、运输和贮存
X,%) (1)
ml
；
ml 硫酸铈标准液相当于0.002364g
维生素 E 的标示量（如
6.1. 标志
6.1.1. 采用鲜明的标签。
6.1.2. 标签的内容应包括：品名、批准文号、商标、批号、贮存条件、净重及生产厂名。
标示量分别为10％、20％、25％、33％、50%。
6.2. 包装
维生素E 粉装于适当容器内，封存。
包装应符合运输贮藏的要求。
每件包装的数量（重量）可根据客户的要求而定。
6.3. 运输过程应有遮盖物，避免日晒雨淋、受热及撞击。
搬运装卸小心轻放，不得与有毒有害或其他有污染的物品以及具有氧化性的物质混装混运。
6.4. 本品应于阴凉干燥处贮存。
6.5.原包装负责期为一年（开封后尽快使用，以免变质）。
7.来源：
GB 7293－87。