实验设计-细胞核的提取与鉴定
2024年全新初三生物上册期末试卷及答案(仁爱版)
一、选择题（每题1分，共5分）1. 细胞是生物体结构和功能的基本单位，下列哪项不是细胞的基本结构？（）A. 细胞膜B. 细胞核C. 细胞质D. 细胞壁2. 下列哪项不是动物细胞特有的结构？（）A. 细胞膜B. 细胞核C. 细胞质D. 细胞壁3. 下列哪项不是植物细胞特有的结构？（）A. 细胞壁B. 细胞膜C. 细胞核D. 细胞质4. 下列哪项不是细胞的基本功能？（）A. 新陈代谢B. 生长C. 分裂D. 感应5. 下列哪项不是细胞分裂的意义？（）A. 个体生长B. 繁殖C. 维持种族的延续D. 增加细胞的数量二、判断题（每题1分，共5分）1. 细胞膜具有选择性通透性，能够控制物质的进出。
（）2. 细胞核是遗传物质的主要载体，包含DNA和RNA。
（）3. 细胞质是细胞内的液体，包含细胞器。
（）4. 细胞分裂过程中，细胞核先分裂，然后细胞质分裂。
（）5. 细胞分裂的结果是产生两个相同的细胞。
（）三、填空题（每题1分，共5分）1. 细胞的基本结构包括____、____、____。
2. 细胞膜具有____、____、____的功能。
3. 细胞核包含____和____，是遗传物质的主要载体。
4. 细胞质是细胞内的____，包含____。
5. 细胞分裂的结果是产生两个____的细胞。
四、简答题（每题2分，共10分）1. 简述细胞膜的功能。
2. 简述细胞核的功能。
3. 简述细胞质的功能。
4. 简述细胞分裂的过程。
5. 简述细胞分裂的意义。
五、应用题（每题2分，共10分）1. 根据细胞膜的结构，解释为什么细胞膜具有选择性通透性。
2. 根据细胞核的功能，解释为什么细胞核是遗传信息的主要载体。
3. 根据细胞质的功能，解释为什么细胞质是进行生命活动的重要场所。
4. 根据细胞分裂的过程，解释为什么细胞分裂是产生新细胞的重要途径。
5. 根据细胞分裂的意义，解释为什么细胞分裂对个体生长和繁殖具有重要意义。
六、分析题（每题5分，共10分）1. 分析细胞膜的结构与功能之间的关系。
实验六 细胞核的分离与核酸的鉴定
2、核酸的水解 、
磷酸 核酸 核苷酸 碱基 戊糖 • 定糖法（戊糖的差异） 定糖法（戊糖的差异）
（1）核糖核酸的鉴定
RNA
CHO
H C OH H C OH H C OH CH2OH
ＯＨ¯ ＯＨ 水解
β－ D－核糖 －
浓HCl
HC HC O
CH C CHO
＋ 3H2O
β－ D－核糖 －
CH3
糠醛
CH3 HC CH C C O O OH CH3
沸水浴(10′) 沸水浴
冷却
加入5%三氯 加入 三氯 醋酸 (8ml) 2000r/min； 2000r/min；5′
搅匀后离心 上清液
2．鉴定：取试管三支，编号，按下表操作: ．鉴定：取试管三支，编号，按下表操作 1 2 3 编 号 细胞质水解液（滴） 细胞质水解液（ 核液水解液（ 核液水解液（滴） 5％三氯醋酸（滴） ％三氯醋酸（ 3,5一二羟基甲苯液（滴） 一二羟基甲苯液（ 一二羟基甲苯液 20 10 30 20 10 30 30 30
一、分离细胞质与细胞核
１.破碎细胞
机械法 细胞破碎的方法 物理法 高速组织捣碎机 玻璃匀浆器 研钵 超声匀浆器 冻融法 自溶法 酶处理 表面活性剂处理法
化学法
２.离心技术 离心技术
利用各细胞器在一定介质中的沉降速度的差 利用各细胞器在一定介质中的沉降速度的差 可采取离心的方法，将细胞器分离出来。 异，可采取离心的方法，将细胞器分离出来。
实验6 实验6
细胞核的分离与核酸的鉴定
（Separation of cell nuclei and identification of nucleic acids） ）
遵义医学院生物化学教研室 曹桂群
细胞核质分离实验注意点
细胞核质分离实验注意点细胞核质分离实验是生命科学中常用的实验操作之一，它可以将细胞的核与细胞质进行有效分离，从而研究细胞的结构和功能。
在进行细胞核质分离实验时，需要注意以下几个关键点。
一、实验材料和设备准备1. 细胞培养物：选择适合的细胞培养物，如哺乳动物细胞、鸡胚细胞等。
2. 细胞培养基：根据实验需求选择合适的培养基，如DMEM、RPMI 1640等。
3. 细胞裂解缓冲液：选择适当的缓冲液，如Tris缓冲液、PBS等。
4. 裂解酶：根据细胞类型和实验需求选择适当的酶，如胰蛋白酶、丝氨酸蛋白酶等。
5. 离心管和离心机：选择适当的离心管和离心机，以满足实验的离心需求。
二、细胞处理与裂解1. 细胞培养：细胞应在适当的培养条件下进行培养，保证细胞的健康状态。
2. 细胞数目：根据实验需求和细胞类型，确定合适的细胞数目，以获得较高的细胞核质分离效率。
3. 细胞裂解：选择适当的裂解方法，如机械裂解、超声波裂解等，注意避免对细胞核和细胞质造成损伤。
4. 裂解缓冲液浓度：根据实验需求和细胞类型，确定合适的缓冲液浓度，以保证细胞的完整性和裂解效果。
三、离心与分离1. 离心条件：根据细胞类型和实验需求，确定适当的离心条件，如离心速度、离心时间等。
2. 离心温度：细胞离心过程中，保持适当的温度，如常温或低温，以避免细胞核和细胞质的降解。
3. 离心管选择：选择适当的离心管，以适应实验需求和离心机的要求。
4. 离心后处理：离心后，及时将上清液转移到新离心管中，避免细胞核和细胞质的重新混合。
四、实验操作技巧1. 操作环境：实验室应保持清洁、整洁的操作环境，避免细菌和其他污染物的干扰。
2. 操作手法：进行实验时，需要熟练掌握操作手法，如离心、抽液等，以确保实验的准确性和可重复性。
3. 实验时间：对于细胞核质分离实验，实验时间的控制非常重要，避免细胞核和细胞质的长时间接触，以免相互干扰。
五、数据分析与结果解释1. 数据收集：实验完成后，及时记录实验数据，包括细胞核和细胞质的含量、纯度等。
细胞核分离与鉴定
医学细胞生物学设计型实验设计报告姓名吴远依班级医检12-1班学号1210850116 评分实验项目：细胞核的分离与鉴定实验原理：1.细胞是由膜包围着含细胞核、线粒体、核糖体、内质网等结构及其细胞质构成。
细胞内的这些结构的比重和大小等不相同，同一离心场内其沉降速度也不同。
根据这一原理，常用不同介质和转速离心，将细胞各组分分级分离出来，即细胞的分级分离。
2.常用的分级分离法有差速离心法和密度梯度离心法。
差速离心法是指由低速到告诉逐级沉降分离，当离心力低、离心时间短时，较大的颗粒如细胞核先沉淀到管底。
密度梯度离心是用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。
本实验只需把细胞核沉降下来即可，因此不需要使用密度梯度离心法。
然而，差速离心法的使用，必须要把细胞裂解使细胞器暴露出来。
3.细胞核的结构由核膜、染色质、核仁和核基质构成。
本实验采用鸡血细胞，因为鸡血细胞容易吸水胀破。
加入蒸馏水是低渗环境，所以可以使得细胞膜低渗破裂，而由于核膜的组成（蛋白质及脂类的种类、数量、比例）与细胞膜有差别，因此核膜在低渗环境下破裂需要更长的时间，所以控制相对较短的时间，可使细胞核暴露出来。
实验步骤：一、原料的准备取新鲜鸡血5ml加入已经配置好的5g/L的柠檬酸钠抗凝剂5ml 置于烧杯中（柠檬酸钠抗凝剂的制备0.1g加入20ml的蒸馏水）。
二、裂解细胞向烧杯中加入5ml蒸馏水，用玻璃棒沿着同一个方向搅拌1min。
离心取已经处理过的鸡血细胞5ml置于离心管中，以2000r/min离心5min。
涂片取上清液制成一张涂片，标记为①。
将原离心管中剩余上清液吹打沉淀成悬液（如果上清液多，可以倒掉些），标志为②。
染色分别在涂片①②上滴加甲苯胺蓝染液，染色5~7min。
洗涤冲去染液，晾干显微镜下观察注意事项：1.取到鸡血时不能过较长时间才加入抗凝剂；2.裂解鸡血细胞时，一定要严格控制时间，否则时间过长细胞核也会裂解；3.制片过程中要把握涂片的力度，以免涂片过厚；洗涤切片时，时间不要太长，以免把染料全部冲去，观察不到细胞核。
细胞生物学设计性实验：细胞核的分离鉴定
医学细胞生物学设计型实验设计报告班级10级k-7班评分实验项目：细胞核的分离与鉴定实验原理：1、细胞内各种结构的比重和大小不同，在同一离心场内其沉降速度也不同。
所以，用差速离心法可将细胞内各种细胞器及组分分级分离出来。
差速离心法也是用来研究亚细胞成分的化学组成，理化特性及其功能的主要手段。
2、分离细胞核最常用的方法是将组织制成匀浆，在特定的条件下进行离心分离，然后分析鉴定。
3、匀浆是指在低温条件下，将组织放入匀浆器，加入等渗匀浆介质进行研磨，破碎细胞，使之成为各种细胞器及其包含物的匀浆液。
实验步骤：1、处死：断头处死小白鼠，手提尾部使其学业尽量流出。
2、取材：迅速开腹取肝，在盛有生理盐水的小烧杯中反复洗涤，称取湿重约为1g的肝组织放在烧杯中。
3、匀浆：加油8ml预冷的0.25mol/L蔗糖0.003mol/L绿化高永夜于烧杯中，尽量剪碎肝组织，将剪碎的刚组织倒入玻璃匀浆器，是匀浆器下端侵入盛有冰块的器皿（如冰盘）。
左手握持匀浆器，右手将匀浆捣杆垂直插入管中匀浆，直至看不到明显的组织块。
4、过滤：用8层纱布（先用少量生理盐水或蔗糖液润湿纱布）过滤匀浆液于离心管中。
5、离心：在天平上平衡每对离心管，2500r/min离心15min，取上清液于另一离心管中。
6、涂片：取上清液制一张涂片（涂片1）。
将原离心管中剩余上清液吹打成沉淀成悬液，另制一张涂片（涂片2），自然干燥。
7 、染色：分别在涂片1和2上低价甲苯胺蓝染液，染色5到7分钟（即滴染）。
8、洗涤：冲去染液，晾干。
9、镜检：结合实验结果的描述，镜下观察分析。
注意事项：1.操作规范，防止试剂污染。
2.细胞悬液的涂片制作要轻柔。
3.使用离心机要注意平衡，转速从低到高。
预期结果：低倍镜下找到标本，再换高倍镜，可见肝细胞核已游离出来，被染成蓝紫色，圆形，中央有2到4个甚至更多个深蓝色的核仁。
实验用品：材料：小白鼠肝脏。
试剂：生理盐水、0.25mol/L蔗糖0.003mol/L氯化钙溶液、1%甲苯胺兰染液。
《细胞核》 作业设计方案
《细胞核》作业设计方案一、作业目标1、帮助学生深入理解细胞核的结构和功能。
2、培养学生观察、分析和解决问题的能力。
3、增强学生对细胞生物学知识的综合运用能力。
二、作业内容1、知识回顾（1）让学生画出细胞核的结构示意图，并标注出核膜、核仁、染色质等重要结构。
（2）简述细胞核各结构的功能。
2、阅读理解提供一篇有关细胞核研究新进展的科普文章，让学生阅读后回答以下问题：（1）文章中提到的细胞核新功能是什么？（2）这种新功能对细胞的生命活动有何影响？3、实验设计假设你是一名生物学家，要探究细胞核在细胞分裂过程中的作用，请设计一个实验方案，包括实验目的、实验材料、实验步骤和预期结果。
4、案例分析给出一个细胞异常的案例，其中细胞核的结构或功能发生了改变，让学生分析可能的原因，并提出相应的治疗策略。
5、拓展思考（1）细胞核与细胞质是如何相互协作，共同维持细胞的正常生命活动的？（2）细胞核在不同类型细胞中的差异及其原因是什么？三、作业形式1、书面作业（1）完成知识回顾和阅读理解的题目，以书面形式提交。
（2）撰写实验设计和案例分析的报告。
2、小组讨论针对拓展思考的问题，组织学生进行小组讨论，然后每个小组推选一名代表进行发言。
四、作业难度作业分为基础、提高和拓展三个层次，以适应不同学习水平的学生。
1、基础层次主要包括知识回顾中的结构绘制和功能简述，以及阅读理解中的简单问题回答，旨在帮助学生巩固基础知识。
2、提高层次涵盖实验设计和案例分析中的部分内容，要求学生能够运用所学知识进行一定的分析和推理。
3、拓展层次涉及拓展思考中的问题，鼓励学生进行深入思考和探索，培养创新思维。
五、作业时间安排1、知识回顾和阅读理解：建议在课堂上完成一部分，课后再花 30 分钟左右的时间进行整理和完善。
2、实验设计和案例分析：作为课后作业，给学生 2 3 天的时间完成。
3、小组讨论：安排在课堂上进行，时间约为 20 分钟。
六、作业评价1、评价方式采用教师评价、学生互评和自我评价相结合的方式。
单细胞测序的细胞核的分离和纯化方法
单细胞测序的细胞核的分离和纯化方法
单细胞测序的细胞核的分离和纯化方法主要包括以下步骤：
1. 酶解：使用胶原酶和胰蛋白酶等酶将组织样本消化，将细胞间的连接分解，使细胞分散成单个细胞。
2. 离心：通过离心将单个细胞收集到管底部，形成细胞沉淀。
3. 洗涤：去除细胞沉淀中的组织残留物和杂质。
4. 重悬浮：将单个细胞重新悬浮在适量的缓冲液中，以便后续处理。
5. 过滤：通过过滤膜或滤器将细胞核与其他细胞成分分离，收集细胞核。
需要注意的是，上述步骤仅为一种参考方法，实际操作可能因实验条件、样本类型等因素而有所不同。
因此，在进行单细胞测序实验前，请详细阅读相关文献，了解并优化适合自己实验的细胞核分离和纯化方法。
同时，务必遵循实验室安全规范，确保实验过程的安全性。
细胞核的分离与鉴定设计型实验设计报告_(2)
实验项目：细胞核的分离与鉴定实验原理：分离细胞核的可用方法有吸出法、原生质体破裂法、差速离心法排和排除法。
差速离心法是根据细胞内各种细胞结构的比重和大小不同，因而在同一离心场内的沉降速率不同从而将细胞内的结构分级分离出来。
本实验就采用差速离心法。
细胞核的鉴定，因为细胞核中主要含DNA，而DNA是碱性蛋白，可用甲苯胺蓝染液可使细胞核内碱性蛋白呈现出来。
实验器材：显微镜，普通离心机，离心管，滴管，玻璃漏斗，纱布，烧杯，解剖剪，镊子，玻璃匀浆器，载玻片/盖玻片，染色盘架，小白鼠肝脏。
实验试剂：甲苯胺蓝染液，蒸馏水，0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L的CaCl2溶液，生理盐水实验步骤：（1）、用颈椎脱臼法处死小白鼠，迅速解开其腹腔取出肝脏，去出结缔组织，剪成小块，尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中。
反复洗涤尽量除去血污，用滤纸吸去表面的液体。
（2）、将湿重为1g的肝组织放入烧杯中，用量筒取8ml预冷的0.25mol/L 蔗糖-0.003mol/L的CaCl2溶液，先加少量溶液于烧杯中，尽量剪碎肝组织后全部加入。
（3）、将剪碎的肝组织导入匀浆管中，使匀浆器下端侵入盛有冰块的器血中，左手持，右手将匀浆捣杆垂直插入管中，上下转动研磨3-5次。
用3层纱布过滤于匀浆管中，然后制备一张涂片①，自然干燥。
（4）、将装有滤液的离心管配平后，放入普通离心机以2500r/min离心15min,弃去上清液。
（5）、用6mol 0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L的CaCl2溶液悬浮沉淀物，以2500r/min离心15min 弃去上清液，将残留液体用气管吹成悬液，滴一滴于干净的载盖玻片上，制成涂片②，自然干燥。
（6）在①·②上滴加甲苯胺蓝染液，染色5-7min，洗涤干燥后镜检。
⑺记录观察结果注意事项：（1）尽可能充分剪碎肝组织，缩短匀浆时间，整个分离过程不宜过长，以保持组分生理活性。
（2）将匀浆液置于蔗糖溶液上层时要沿管壁小心加入，同时及时离心，以防止浆液中的颗粒自然下沉过快，影响后面的离心分层效果。
细胞的结构与功能的教学案例与实验设计
细胞的结构与功能的教学案例与实验设计细胞是生物体的基本单位，了解其结构与功能对于生物学的学习至关重要。
本文将介绍一些教学案例与实验设计，帮助学生深入了解细胞的结构与功能。
一、细胞的基本结构细胞是由细胞膜、细胞质和细胞核组成的。
可以通过以下案例来帮助学生理解细胞的基本结构。
案例1：细胞的磷脂双层结构磷脂是构成细胞膜的主要成分之一。
通过如下实验设计，可以观察到磷脂双层结构。
实验设计：1. 准备两个透明的容器，注入等量的水。
2. 向其中一个容器中加入适量的食用油，并轻轻搅拌均匀。
3. 在两个容器中分别加入小量的红色食用染料。
4. 观察两个容器中染料的分布情况。
预期结果：加入食用油的容器中，染料呈现出较为均匀的分布，说明食用油和水不相容，油分子会自发地排列成双层结构。
这个实验可以帮助学生理解细胞膜的磷脂双层结构。
案例2：细胞核的功能细胞核是细胞中负责存储遗传信息的部分。
通过如下案例，可以帮助学生理解细胞核的功能。
案例设计：1. 选择几个参与生长发育的植物组织，如芽、叶片等。
2. 提取这些植物组织中的细胞核。
3. 利用显微镜观察细胞核的形态和结构。
预期结果：通过观察，学生可以看到细胞核呈现出较为规则的形状，其中包含着遗传信息。
这个案例可以帮助学生了解到细胞核在细胞中的重要性。
二、细胞的功能细胞具有多种功能，通过实验设计可以帮助学生理解细胞的功能多样性。
案例3：细胞的呼吸作用细胞的呼吸作用是产生能量的重要过程。
以下是一个简单的实验设计，帮助学生理解细胞的呼吸作用。
实验设计：1. 准备两个等容积的气球，一个装满空气，另一个装满二氧化碳。
2. 向两个气球中分别加入等量的小苏打粉。
3. 将两个气球封口，观察气球的膨胀情况。
预期结果：加入二氧化碳的气球会比装满空气的气球膨胀得更快更大，这是因为小苏打粉和二氧化碳反应产生了气体。
这个实验可以帮助学生理解细胞通过呼吸作用产生能量的过程。
案例4：细胞的分裂过程细胞的分裂是生物体生长和繁殖的基础。
细胞核的分离与鉴定设计型实验设计报告_(2)
细胞核的分离与鉴定设计型实验设计报告_(2)一、实验目的1.熟悉细胞分离和鉴定的基本操作方法。
2.掌握用离心技术从小鼠肝脏中提取细胞核的方法。
3.通过细胞核染色体形态的观察，了解细胞核在生物体中的作用。
二、实验原理细胞分离和鉴定是细胞学的基础实验，也是细胞学研究的重要手段之一。
细胞分离是将组织或细胞块中相关性高的细胞或不同类型的细胞分离开，以便进行对其性质和功能的分析和研究。
细胞鉴定是针对某种细胞类型，利用某种特异性分辨手段，对该细胞的特定结构或成分进行检测和区分，以便识别该细胞类型的性质和角色。
2.离心技术离心是利用离心机中高速旋转的离心头，通过离心力的作用，使样品中不同的物质沉淀到零件上，从而实现分离的技术手段。
离心用于分离固体及液体的混合物，也可用于分离生物学样品中的细胞、细胞器、酶和其他生物大分子，常用于提取细胞核或线粒体等细胞器。
三、实验步骤1.制备小鼠肝脏组织样品取2只小鼠，用无菌注射器注射适量无菌生理盐水溶液，待小鼠麻醉后，将小鼠放在消毒过的工作台上，采用外科手术的方法，将小鼠的腹部切开，取出小鼠肝脏，用无菌生理盐水清洗小鼠肝脏，用吸水纸吸干水分后，将小鼠肝脏组织分为小块状，存放于无菌离心管中备用。
2.分离细胞核将小鼠肝脏样品加入预冷的离心管中，用等体积的细胞破碎缓冲液A混合，使溶液刚好能淹没样品。
再次加入等体积的细胞破碎缓冲液B，使样品浓度适当。
将混和物在冰上慢慢摇晃，5分钟后，离心5分钟，去除上清液，洗涤后继续离心5分钟，去除上清液，洗涤后再次离心5分钟，去除上清液，离心操作后小鼠肝脏组织在管底沉淀下来。
3.制备细胞核标本将离心完成后的小鼠肝脏组织中的细胞核有效部分，制备成固定标本。
首先，将组织标本样品用福尔马林固定10-20分钟；然后，在干净玻璃片上滴上碘静（10-15μL），用酒精进行漂白，再用氢氧化钠溶液中和酒精，将玻璃片在空气中晾干，制备成细胞核标本。
4.细胞核染色滴一滴核染色剂（主要成份为酸性染料FOSCIN）在经过固定、漂白、中和后的细胞核标本中央，静置2-3分钟，漂洗干净后，在细胞核标本切片下滴上甘油凝胶，覆盖上玻片，并晾干即可。
《DNA 的粗提取及鉴定》 教学设计
《DNA 的粗提取及鉴定》教学设计一、教学目标1、知识目标（1）理解 DNA 粗提取和鉴定的原理。
（2）了解 DNA 在细胞中的存在部位和提取的方法。
2、能力目标（1）通过实验操作，培养学生的动手能力和实验技能。
（2）学会分析实验现象，得出正确的实验结论。
3、情感目标（1）体验科学探究的过程，培养学生严谨的科学态度。
（2）激发学生对生物学的兴趣，培养学生的创新意识。
二、教学重难点1、教学重点（1）DNA 粗提取的原理和方法。
（2）DNA 鉴定的方法和实验操作。
2、教学难点（1）DNA 粗提取过程中去除杂质的方法。
（2）实验操作的规范性和准确性。
三、教学方法讲授法、实验法、讨论法四、教学准备1、实验材料和试剂鸡血细胞液、柠檬酸钠溶液、蒸馏水、2mol/L 的氯化钠溶液、体积分数为 95%的酒精溶液、二苯胺试剂、研钵、漏斗、纱布、玻璃棒、烧杯、试管、离心机等。
2、多媒体课件五、教学过程1、导入新课通过播放一段关于 DNA 鉴定在刑侦案件中的应用视频，引起学生的兴趣，从而引出本节课的主题——DNA 的粗提取及鉴定。
2、讲解 DNA 粗提取的原理（1）DNA 在氯化钠溶液中的溶解度是随着氯化钠浓度的变化而改变的。
当氯化钠的物质的量浓度为014mol/L 时，DNA 的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的 DNA 析出。
（2）DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提纯 DNA。
3、实验步骤（1）制备鸡血细胞液在鸡血中加入柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
将血液倒入离心管中，离心后去除上清液，留下鸡血细胞液。
（2）提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入蒸馏水，使细胞吸水涨破，释放出细胞核物质。
（3）溶解 DNA向溶液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液，搅拌，使 DNA 溶解。
（4）析出 DNA缓慢加入蒸馏水，使氯化钠溶液的浓度降低至 014mol/L，这时DNA 会析出。
动物细胞融合、细胞核的分离与鉴定
二、细胞核的鉴定
细胞来源： 细胞来源：
本次试验细胞选择的是小白鼠的肝细胞， 本次试验细胞选择的是小白鼠的肝细胞， 肝细胞 这是因为肝细胞分裂旺盛。 这是因为肝细胞分裂旺盛。
鉴定试剂： 鉴定试剂：Fra bibliotek甲苯胺蓝
甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种 属于醌 甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌 是常用的人工合成染料的一种 亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团 这类染料一般含有两个发色团,一个是胺 亚胺染料类 这类染料一般含有两个发色团 一个是胺 一个是醌型苯环,来构成色原显色 基,一个是醌型苯环 来构成色原显色。染料除有发色 一个是醌型苯环 来构成色原显色。 团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和 团外 还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和 力的原子团即助色。 力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐 帮助发色团对组织产生染色力, 类,帮助发色团对组织产生染色力 使切片上的组织细 帮助发色团对组织产生染色力 胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个 胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团 还含有两个 助色团,为碱性染料 为碱性染料,因此可以和组织细胞的酸性物质 助色团 为碱性染料 因此可以和组织细胞的酸性物质 结合而使其染色。即可染细胞核使之呈蓝色。 结合而使其染色。即可染细胞核使之呈蓝色。 另外， 另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色 性物质遇到甲苯胺蓝可呈易染性紫红色， 性物质遇到甲苯胺蓝可呈易染性紫红色，因此可用于 肥大细胞的检测，例如色素性荨麻疹。 肥大细胞的检测，例如色素性荨麻疹。
动物细胞融合、细胞核的分离与鉴定 实验设计报告
动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动
受精作用
两个细胞正在融合
动物细胞融合基本过程： 动物细胞融合基本过程：
《3.3细胞核的结构和功能》教学设计、教案、导学案、同步练习
《3.3细胞核的结构和功能》教学设计【教学目标】1．掌握真核细胞的细胞核的结构。
2．理解真核细胞的细胞核的主要功能，并能运用所学知识，分析解决实际问题。
【教学重难点】1．真核细胞的细胞核的结构和主要功能。
2．真核细胞的细胞核的结构和主要功能。
【教学过程】一、导入：用光学显微镜观察细胞，最容易注意到的就是细胞核。
除了高等植物成熟的筛管细胞和哺乳动物成熟的红细胞等极少数细胞外，真核细胞都有细胞核。
本节课请同学们重点掌握和理解细胞核的结构和主要功能。
二、细胞核的功能资料1：科学家用黑白两种美西螈（一种两栖动物）做实验，将黑色美西螈胚胎细胞的细胞核取出来，移植到白色美西螈的去核卵细胞中。
移植后长大的美西螈，全部都是黑色的。
资料2：科学家用头发将蝾螈的受精卵横缢为有核和无核的两半，中间只有很少的细胞质相连。
结果发现，有核的一半能分裂，无核的一半则停止分裂。
而当有核的一半分裂到16~32个细胞时，如果这时一个细胞核被挤到了无核的一半，这一半也会开始分裂。
最后两半都能发育成正常的胚胎，只是原来无核的一半发育得慢一些。
资料3：科学家做过这样的实验。
将变形虫切成两半，一半有核，一半无核。
无核得一半虽然仍能消化已经吞噬的食物，但不能摄取食物；对外界刺激也不再发生反应；在电子显微镜下，也会观察到高尔基体、内质网等细胞器在退化。
有一半核的情况则大不相同，照样摄食，对刺激仍有反应，失去的伸缩泡可以再生，还能生长和分裂。
这时，如果用显微钩针将有核一半的细胞核钩出，这一半的行为就会像上述的无核的一半一样。
但如果及时地植入同种变形虫的另一个核，各种生命活动又会恢复。
……大量的事实表明一个共同的结论：细胞核控制着细胞的代谢和遗传。
我们把细胞核的重要功能总结如下：①细胞核是遗传物质储存和复制的主要场所。
②细胞核是细胞遗传特性和细胞代谢活动的控制中心。
③细胞核在细胞生命活动中起着决定性作用。
也正是如此，有人把细胞核比喻为细胞的“大脑”。
细胞核的分离与鉴定
预期结果
在低、高倍镜下，可以观察到肝细胞核已经游离出
来，被染成蓝紫色，中央有2~4个或以上核仁。
方案选择
在书上以及网络上对本实验进行查询后，选择了 本方案。本方案是较常见的方案之一，除此之外还有 用碱性固绿染液作为染色剂，在用三氯醋酸处理标本 （抽取核酸）后，对DNA进行染色的方案，但在一番 详细查询后，我们认为该方案不可行。因为无论DNA 还是RNA都是酸性的，其次，在之前的实验课程中， 实验结果里碱性固绿染液染色效果并不好，而且着色 时间长，需要30分钟到一个小时，会大大增加试验时 间。
解剖剪 镊子
纱布 玻璃匀浆器 载玻片、盖玻片 吸水纸 染色盘架
1 1
1 2 1 1
解剖及取材
图片制作
实验步骤
腹内血液尽量流出
取出 肝脏
剪成小块
生理盐 水清洗
0.25mol/ L蔗糖0.003mol /LCaCl2 称取 湿重 为1g
断头处死小白鼠
离心
取上 层清 液
2500r/min 离心 15min
实验试剂表
名称
生理盐水 0.25mol/L蔗糖0.003mol/L的氯化 钙溶液 1%甲苯胺蓝染液
规格
0.9%NaCl
用量
蔗糖 氯化钙 蒸馏水 甲苯胺蓝 蒸馏水 85.5g 0.33g 100ml 1g 100ml
说明
作为等渗溶液 作为等渗溶液 染色
实验材料：小白鼠肝脏
实验器材
名称 显微镜 普通离心机 离心管 滴管 玻璃漏斗 烧杯 天平 25ml 规格、型号 数量 1 1 1 1 1 1 1 过滤 盛放肝组织 称量 说明 镜检 离心 装离心液
第五次实验 设计性实验
实验I 细胞核的分离与鉴定
实验高中生物DNA的粗提取与鉴定
②鸡血细胞极易吸水胀破
1.准备鸡血细胞液 ①过程： 取柠檬酸纳溶液（抗凝剂）100ml，注入新鲜的鸡血 （约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分 混合，以免凝血。 ②柠檬酸钠作用:防止血液凝固
讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液中的上清液？ 获取血液中的血细胞，以及除去血浆中的蛋白质杂质
（3）析出含DNA的粘稠物
（4）滤取含DNA的粘稠物
（5）将DNA的粘稠物再溶解 （6）过滤含有DNA的氯化钠溶液
（7）提取含杂质较少的DNA （8）DNA的鉴定
一.DNA的提取原理 1.DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L时，DNA的溶解度最大， 浓度为 0．14 mol／L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理， 可以使DNA在盐溶液中溶解或析出
③两次析出 第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液含杂质多 第二次：用冷却的95％的酒精
2.方法步骤 ①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到50 mL烧杯中。 向烧杯中加入蒸馏水20 mL，同时用玻璃棒充分搅拌5 min，使 血细胞加速破裂。然后，用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至 500mL，取其滤液。 讨论： （1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞会有什么变化？ 让细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至涨破
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1.动物细胞
动物细胞的破碎较易，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水(渗透 作用吸水涨破），同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可 2.植物细胞
①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜.
实验九DNA的粗提取与鉴定原理DNA在0.14molLnaCl中溶解度最解读
[例：某种鼠的种群密度调查]
方法：标志重捕法
过程：捕捉一部分个体，标记、计数（P）后放回原环 境；
一段时间后进行重捕，计数总捕获数（N1）和重捕中 标记个体数（P1）。 求种群数量（N）： N：P== N1：P1
• [说明]：应尽量防止种群内有迁入或迁出的个体。
洪泽外国语中学：生物组
将两条细铁丝的末端分别拴到另一个塑料框一侧的 两端。
洪泽外国语中学：生物组
实验十一：性状分离比的模拟实验
取甲、乙两个小桶，每桶中各放两色小球10只 [分别标上D和d ]
1、摇匀两只小桶 2、随机各抓取1球[相当于两配子结合成合子] 3、统计后将小球放回原桶
重复50—100次 4、填写实验报告 5、计算各组合比例[DD：Dd：dd=？]
洪泽外国语中学：生物组
研究性课题：调查人群中的遗传病
（１）计算遗传病的发病率 （２）调查一对相对性状中的显隐性 （３）调查一种遗传病是常染色体遗传还是伴性遗
某遗传病的患病人数
某遗传病的发病率＝—————————— ＊１００％
某遗传病的被调查人数
洪泽外国语中学：生物组
实习3：种群密度的取样调查
原理：样方法（样方是指从研究对象的总体中抽取出 来的个体的集合）—在被调查种群的生存环境内， 随机选取若干个样方，以所有样方种群密度的平均 值作为该种群的种群密度。
加入到溶解有DNA 的NaCl中
加入到过滤后DNA 的NaCl中
析出DNA丝状物
产生特定的颜 色反应
洪泽外国语中学：生物组
实验十：制作DNA双螺旋结构模型 实验原理： DNA分子具有特殊的空间结构：规则的双螺旋结构 1、 DNA分子由两条反向平行脱氧核苷酸链盘旋
脑组织中细胞核提取方法
脑组织中细胞核提取方法
脑组织中细胞核提取方法主要包括以下步骤：
1. 样本处理：将样本置于干冰中转移至实验台，用镊子从冻存管中取出组织，放入研磨器研磨，至视检无明显的组织团块。
2. 裂解：研磨后组织于裂解液中冰上裂解3-20 min（裂解时间根据组织类
型及裂解液的种类不同有所差异）。
3. 过滤：裂解后的悬液通过30um的滤筛。
4. 清洗：滤液离心清洗一次。
5. 密度梯度离心：得到细胞核。
6. 清洗与质检：清洗后，显微镜下质检。
在整个组织抽核实验中用到的关键试剂是Lysis Buffer，主要原理就是利用
表面活性剂使细胞膜破裂，细胞核从组织中释放出来。
请注意，具体的实验步骤可能会因研究需求和实验条件而有所不同。
建议在进行实验前仔细阅读相关文献，并咨询专业人士以获取准确的信息和指导。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
医学细胞生物学设计型实验设计报告
姓名：李飘班级：K—10班学号：1020151004 评分
【实验项目】：动物细胞细胞核的分离与鉴定
【实验原理】：核体的制备核体是指含有少量细胞质并由质膜包裹的
细胞核。
因为在实际中我们不可能100%的得到细胞核，因此,我们只能制备含有少量细胞质的核体，核体的制备方法主要有吸出法和原生质体破裂法等。
在本实验中我们采用排除法来制备核体。
排除法制备核体是通过细胞松弛素和高速离心的作用使细胞核排出，然后从离心管底部沉淀中收集获得核体。
细胞核的鉴定因为细胞核中主要含DNA，是碱性蛋白。
因此将分离出的核体经三氯醋酸处理,抽提掉核酸后，用碱性固绿溶液染色，可以使细胞核内的碱性蛋白显示出来。
【实验步骤】：
1．细胞培养：将欲分离微核体和细胞质的动物接种于脱核塑料圆板上，使适宜的培养基中于37 ℃的条件下培养，使细胞固定在脱核塑料圆板上，脱核塑料圆板的直径应稍小于离心管的直径，使用前先用水洗干净再经过乙醇杀菌处理。
2．秋水仙碱处理：细胞培养一段时间以后，加入0.1ug/ml的秋水仙碱，处理细胞48～60h 滤纸，使细胞形成多个大小不同的核体。
3．细胞松弛素处理：在离心管内加入5ml预热至37 ℃的细胞松弛素B溶液将固定有动物细胞的圆板面朝下放入离心管内，固定圆板位置后，再加入10ml37 ℃的CB溶液。
4．离心：在1000～15000r/min核体从细胞排出。
5．收集核体：由于核体的贴附力弱，可以从离心管底部的沉淀中收集。
6．固定：将收集的核体涂于玻片上制成涂片，滴加15%乙醇于涂片上，固定5min，室温晾干。
7．三氯醋酸处理：将已固定的血涂片浸在90 ℃的三氯醋酸溶液中处理20min，细流水反复冲洗玻片上的三氯醋酸直至冲尽。
用滤纸吸于玻片上多余水分晾干。
8．染色：将制作好的涂片放入0.1%碱性固绿染液中染色10～15min，细流水冲去多余染液，晾干，镜检。
【注意事项】：
1．在离心管内加入的5ml细胞核松弛素B溶液要预热到37 ℃，因为只有这样才接近动物的最佳体温37 ℃。
2．涂片在用三氯醋酸处理时，时间不宜过长或过短，过长会使核膜裂解，过短使抽提的核酸不够。
3．在染色时，时间一定要足够，否则染色不完全，得不到理想的实验结果。
4．因去掉胞质的核体贴附能力弱，因注意在固定、三氯醋酸处理、染色时、尽量避免胞核的脱落。
【预期结果】：经碱性固绿染色的核体涂片被染成绿色，说明这是碱性
蛋白，即细胞核。