第十章微生物的分布与消毒灭菌
微生物的消毒和灭菌技术
微生物的消毒和灭菌技术一、微生物消毒和灭菌的概念消毒:是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。
通常用化学的方法来达到消毒的作用。
用于用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
灭菌:是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内全部杀死的方法, 通常用物理方法来达到灭菌的目的。
灭菌方法分为物理灭菌法和化学灭菌法。
防腐:是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
用于防腐的化学药物叫做防腐剂。
无菌:不含活菌的意思,是灭菌的结果。
防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作二、微生物的消毒方法常用的消毒方法有物理法和化学法。
物理法就是用物理方法杀灭或清除病原微生物和其他有害生物,主要有热消毒法、紫外线消毒法、电离辐射法、微波法等。
最常用的物理消毒方法是热消毒法和紫外线消毒法。
热消毒法(煮沸法 :是最简单有效的消毒方法,不需要特殊设备即可进行。
杀灭繁殖型细菌与病毒效果好, 对芽胞作用较小。
煮沸时间一般为 10~30分钟。
金属器械、棉织品、食具、玻璃制品等可用煮沸消毒。
但毛皮、呢绒和塑料制品等不能煮沸消毒。
热消毒法不适用于芽胞污染的消毒紫外线消毒法就是利用紫外线照射使微生物诱变致死, 达到将被服中的有害微生物除掉的目的。
消毒用紫外线灯管有 15W 、 20W 、 30W 等规则。
瓦数代表灯管在 25~40℃时紫外线输出能量。
灯管寿命一般为 3000~4000小时, 超过此时限效果不可靠。
紫外线对一般细菌、病毒均有杀灭作用。
革兰阴性菌最敏感, 其次为革兰阳生菌。
但结核杆菌却有较强抵抗力。
一般紫外线消毒对细菌芽胞无效。
紫外线广泛用于室内空气消毒, 如手术室、烧伤病房、传染病房、实验室等。
灯管距地面约 2.0~2.5m 高。
每 10~15cm 2面积可设 30W 灯管一个,最好每照射 2小时后,间歇 1小时后再照,以免臭氧浓度过高。
灯管用铝制灯罩作反向或侧向照射,可用于有人在的条件下消毒空气。
对污染表面消毒时, 灯管距表面不超过 1m , 灯管周围 1.5~2cm 处为消毒有效范围。
微生物分布与消毒灭菌PPT课件
定病原细菌对哪种药物敏感 药物敏感实验的临床意义
指导临床用药、及时控制感染
15
K-B（纸片扩散）法
原理
药物可干扰细菌的代谢，阻碍 和影响细菌细胞壁的合成、膜 的通透性及核酸和蛋白质的合 成，不同的细菌种类或菌株， 对同一药物的敏感性不同，通 过将药敏纸片放于已接种细菌 的培养基上，测量其抑制细菌 生长所产生的抑菌圈的大小来 判定病原菌对抗菌类药物的敏 感性
2 培养基放入温箱时要底部朝上 3 皮肤上微生物检查时食指要轻按，不要压烂培
养基 4 紫外线杀菌试验时划线接种不要划烂培养基，
照射时间要充分 5 药敏试验要把药敏纸片贴牢固
20
抑菌圈
16
K-B(纸片扩散）法
方法
无菌接种环取菌
固体培养基上划线接种
放置含药纸片
>24mm
37℃温箱孵育24h
>15mm
17
K-B法
结果
用毫米尺量取 抑菌圈直径, 根 据参照表判断 结果
抑菌圈直径
>24mm >15mm
18
K-B法
19
实验注意事项：
1 观察液体培养基中细菌的生长现象时不要摇动 试管
实验三 微生物的分布 与消毒灭菌
1
实验目的
1 了解培养基的种类与细菌的生长现象。 2 掌握空气及咽喉部的微生物检查方法。 3 掌握皮肤上的微生物检查与皮肤消毒试验。 4 掌握紫外线杀菌试验的原理及方法。 5 掌握细菌药敏试验的原理意义及结果判定。
2
实验内容
1.培养基的种类与细菌的生长现象 2.细菌分布（空气及咽喉部的微生物检查,操作，每
12
紫外线杀菌实验
免疫学习题
1 免病绪论1、有关免疫功能正确的叙述是A 、清除损伤的细胞B 、清除衰老细胞C 、抵御病原微生物的感染D 、识别和清除体内突变的细胞E 、以上都是2、免疫稳定功能异常可出现A 、超敏反应B 、自身免疫性疾病C 、发生肿瘤D 、免疫缺陷病E 、反复感染3. 不属于原核细胞型的微生物是A. 细菌B. 病毒C. 支原体D. 衣原体E. 放线菌4. 有关原核细胞型微生物错误的描述是A. 细胞核分化程度高B. 无核膜C. 缺乏完整的细胞器D. 仅有原始核E. 包括螺旋体1 免病绪论答案 EBBA2 免疫系统1、能与绵羊红细胞结合形成 E 花环的细胞是A 、B 细胞 B 、单核细胞D 、NK 细胞E 、中性粒细胞2、经胸腺分化成熟的免疫细胞是A 、B 细胞 B 、T 细胞D 、巨噬细胞E 、单核细胞 3、人类B 细胞分化成熟的场所是 A 、胸腺 B 、脾脏 C 、淋巴结D 、骨髓E 、法氏囊 4、B 细胞和T 细胞均有的表面标志是A 、PHA 受体B 、抗原受体C 、IgGFc 受体D 、绵羊红细胞受体E 、Co nA 受体5、关于中枢免疫器官的描述，下列错误的是A 、是免疫细胞分化成熟的部位B 、产生抗体和效应淋巴细胞C 、可分泌多种激素D 、能产生多种细胞因子E 、胸腺和骨髓是人和哺乳动物的中枢免疫器官2 免疫系统答案 CBDBBC 、T 细胞 C 、NK 细胞3抗原1、下列生物制品中对人既是抗体又是抗原A. 人血浆丙种球蛋白B. 类毒素C.动物来源的抗毒素D. 转移因子E.胸腺素2、与蛋白质载体结合后才产生免疫原性的物质A. 完全抗原抗原抗原D.半抗原E. 超抗原3、抗原具有下列哪项基本特性A. 大分子蛋白质B. 异物性C.具有免疫反应性，无免疫原性D.具有免疫原性，无免疫反应性E.具有免疫原性和免疫反应性4、决定抗原的特异性的物质基础是A. 抗原决定簇B. 抗原的大小C.抗原的电荷性质D. 载体的性质E.抗原的物理性质5．同种异型抗原 (allogenicAg)A.来自同种生物不同基因型个体的抗原B.在同种所有个体中表现相同C.是指蛋白质的同型抗原D.在同种动物中不诱导免疫应答E.在免疫球蛋白中限于IgG存在3 抗原答案 CDEAA4免疫球蛋白1、抗体分子的抗原结合部位在段段2、木瓜蛋白酶水解产物是段段段+Fc段D.Fab 段+Fc段 (ab')2 段 +pFc' 段3、新生儿从母乳中获得的免疫球蛋白是A. IgG4、哪种免疫球蛋白能通过胎盘A. IgG5、人体天然血型抗体是A. IgG6、关于 IgG 的正确解释是A. 胎儿从母体胎盘获得的唯一抗体B. 出现最早的抗体C. 不能通过胎盘的抗体D.相对分子量最大的抗体E.参与I型超敏反应的抗体7、人类亲细胞抗体主要指A. IgG4 免疫球蛋白答案 BCBADAC6 免疫应答1、下列为皮肤黏膜在抗感染过程中起的作用，但应除外的是A. 阻挡作用B. 杀菌作用C. 吞噬作用D. 拮抗作用E. 排除作用2、下列不属于非特异性免疫的物质是A ．补体B ．溶菌酶C ．IgGD ．干扰素 E. 细胞因子3、吞噬细胞的吞噬过程不包括A ．趋化B ．特异性识别C ．吞噬D ．杀菌E ．排出残渣4、机体再次应答产生 Ig 的特征是A . IgM和IgG显着高于初次应答B ． IgM 显着高于初次应答C . IgG 显着高于初次应答D .抗体特异性发生改变E .以IgA升高为主5、发挥体液免疫效应的物质主要是A .细胞因子B .补体C .干扰素D .抗体E .溶菌酶6、免疫耐受是A .机体免疫系统发育不良B .免疫系统处于抑制状态C .免疫功能缺陷D .再次接触相同抗原则发生免疫应答E .某抗原刺激机体后，对该抗原特异性无应答状态6 免疫应答答案 CCBCDE七超敏反应1、下列生物活性介质中哪一种与I型超敏反应的发生关系不大A 、补体B 、白三烯C 、前列腺素D 、组胺E 、缓激肽2、下述哪种超敏反应性疾病的发生与补体无关A、肾小球肾炎B、血清病C、新生儿溶血症D传染性迟发型超敏反应 E 、类风湿性关节炎 3、ABO血型不符引起的溶血属于A、I型超敏反应 B、U型超敏反应C、川型超敏反应D、W型超敏反应E、以上都不是4、下列哪项属于W型超敏反应A、溶血性贫血B、接触性皮炎C、哮喘D类风湿性关节炎 E 、过敏性休克七超敏反应答案ADBB八第八章免疫应用1、下列属于死疫苗的是A.卡介苗B.麻疹疫苗C.脊髓灰质炎疫苗D.百日咳疫苗E.破伤风类毒素2、脊髓灰质炎疫苗是A.活疫苗B.死疫苗C.亚单位疫苗D.基因工程疫苗E.合成肽疫苗3、人工自动免疫的最大优点是A.免疫出现快B.免疫力维持时间长C.制剂好保存D.注射剂量少 E.副作用少第八章免疫应用答案DAB二细菌的生理1、多数细菌生长繁殖的最适PH是A、 B、 C、、 E、、细菌生长繁殖的条件不包括A、丰富的营养物质B、必要的气体环境C、合适的温度D、合适的酸碱度E、充足的光线3、注射液中出现哪种现象说明被细菌污染A、沉淀B、絮状物C、混浊D菌膜 E 、以上都是二细菌的生理答案 AEE3细菌的感染与免疫单选题：1、有助于细菌在体内扩散的物质是A、荚膜B、菌毛C、M蛋白D、血浆凝固酶E、透明质酸酶2、内毒素的主要成分是A、肽聚糖B、脂多糖C、磷壁酸D、外膜 E 、脂蛋白3、与细菌侵袭力无关的物质是A、血浆凝固酶B、芽抱C、荚膜D、菌毛 E 、透明质酸酶4、可经多途径感染的细菌是A、脑膜炎奈瑟菌B、伤寒沙门菌C、淋病奈瑟菌 D 、结核分枝杆菌E 、百日咳鲍特菌5、目前已知最毒的生物毒素是A、金黄色葡萄球菌产物的肠毒素B 、志贺毒素C 、白喉毒素D、肉毒毒素E、破伤风痉挛毒素3细菌的感染与免疫答案EBBDD微生物分布与消毒灭菌1.杀灭芽胞最常用和最有效的方法是：a.紫外线照射b.煮沸5minc. 巴氏消毒法d.流通蒸气灭菌法e. 高压蒸气灭菌法2.火菌方法错误的是a.手术室空气-紫外线b.排泄物-漂白粉c.饮水-氯气d. 温度计-75%酒精e.含血清培养基-高压蒸气灭菌3.下述不可能杀灭细菌芽胞的方法是：a.煮沸法b.巴氏消毒法c.间歇灭菌法d.干热灭菌法e.高压蒸气灭菌法4.关于紫外线，说法错误的是a.其杀菌作用与波长有关b.可损坏细菌的DNA勾型杀菌作用最强d.其穿透力弱，故对人体无损害e.紫外线适用空气和物体表面的消毒5.常用于空气或物体表面的消毒a.高压蒸气灭菌法b. 紫外线照射法c.滤过除菌法d. 巴氏消毒法e.干烤法6.常用于基础培养基灭菌a.高压蒸气灭菌法b.紫外线照射法c.滤过除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法7.常用于手术器械的灭菌a.高压蒸气灭菌法b. 紫外线照射法c.滤过除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法8.常用于血清的除菌a. 高压蒸气灭菌法b. 滤过除菌法c. 紫外线照射法d. 巴氏消毒法e. 干烤法9.将牛奶加热62 C 30分钟的目的是a.使牛奶中的蛋白质变性，易于吸收b.杀灭牛奶中的所有微生物c.杀死牛奶中的病原菌d.使牛奶不含活菌e.防止或抑制微生物在牛奶中生长和繁殖10.乙醇消毒剂常用的浓度是：％％％％％微生物分布与消毒灭菌答案 1— 5EEBDB 6—10AABCC第十章病毒概述单选题1、人类传染病多由哪类微生物引起A 、细菌B 、螺旋体C 、病毒D 、支原体E 、真菌2、病毒增殖的方式是A 、复制B 、二分裂C 、芽生D 、裂殖E 、减数分裂3、干扰素的作用机制是A 、干扰病毒的吸附作用B 、干扰病毒的穿入作用C 、直接杀灭病毒D 、诱导宿主细胞产生抗病毒蛋白质E 、直接干扰病毒RNA的转录4、在病毒增殖周期中不存在的一个环节是A 、吸附与穿入B 、脱壳C 、核酸复制D 、衣壳合成E 、孢子形成与释放5、病毒严格在活细胞内寄生，原因是A 、体积太小B 、人工培养营养不足目C 、对外界环境抵抗力弱D 、缺乏完整的酶系统E 、以上都不是6、对病毒的描述不正确的是A 、体积微小B 、结构简单C 、含单一核酸D 、在活细胞内生长E 、对抗生素敏感7、不用于防治病毒性疾病的制剂（药物）是A 、减毒活疫苗B 、丙种球蛋白C 、干扰素D 、金刚烷胺E 、抗生素8、病毒性疾病的特异性预防方法常用A 、化学药物B 、抗生素C 、干扰素D 、丙种球蛋白E 、疫苗第十章病毒概述答案 CADEDEEE细菌各论1、流感病毒引起大流行的原因是A 、病毒毒力强B 、病毒的免疫原性弱C、病毒的HA和NA易发生变异D 、人对病毒免疫力低下E 、病毒不侵入血流2、麻诊病毒的致病性与免疫性，错误的是A 、通过呼吸道飞沫传播B 、易并发肺炎C 、病后免疫力不牢固D 、麻疹疫苗接种能有效预防感染E 、全身斑丘疹为其特点3、关于流感病毒的叙述中，错误的是A 、经呼吸道传染B 、发病两日内传染性最强C 、流感有明显的全身症状D 、病后可获牢固免疫力，很少再次感染E 、年老体弱者，多继发细菌感染4、预防麻疹流行的最好办法是A 、注射胎盘球蛋白B 、注射丙种球蛋白C 、注射成人全血D 、注射恢复期病人血清E 、接种麻疹疫苗5、孕妇在什么时期感染风疹病毒，胎儿患先天性风疹综合征的发病率最高A 、孕期最初三个月B 、分娩前一周C 、分娩前一个月D 、胎儿出生时E 、孕期最后三个月6、怀孕期受感染引起畸胎的病毒主要是A 、流感病毒B 、脊髓灰质炎病毒C 、风疹病毒D 、冠状病毒E 、麻疹病毒7、严重急性呼吸综合征由下列哪种病毒引起A 、冠状病毒B 、腺病毒C 、麻疹病毒D 、风疹病毒E、SARS冠状病毒8、脊髓灰质炎病毒的传播途径是A 、呼吸道感染B 、粪-口途径C 、虫媒叮咬D 、接触传染E 、皮肤黏膜感染9、脊髓灰质炎的特异性预防是A 、消灭苍蝇B 、隔离病人C 、注射丙种球蛋白D 、口服脊髓灰质炎减毒疫苗糖丸E 、以上都对10、甲型肝炎病毒的致病性，错误的是A 、传染源主要是病人B 、粪-口途径传播C 、很少转化为慢性肝炎D 、病人粪便或血中长期携带病毒E 、易引起散发或暴发流行11、血液中不易查到的HBV抗原是A、 HBsAg B 、 HBcAgC 、 HBeAgD 、抗- HBcE 、抗- HBs12、表示HBV感染，血液有高度传染性的指标是A、HBsAg 抗-HBe、抗-HBcB、HBsAg HBeAg 抗-HBcC、抗-HBs、抗-HBc、抗-HBeD 、 HBsAg、 HBeAg、 HBcAgE、抗-HBs、抗-HBe、HBcAg13、艾滋病的病原体是A、人类嗜T细胞病毒IB、人类嗜T细胞病毒UC、 EB病毒 D 、人类免疫缺陷病毒E 、人白血病病毒14、 HIV的传播途径不包括A 、同性或异性间的性行为B 、垂直传播C 、输血和器官移植D、药瘾者共用污染HIV的注射器E 、日常生活的一般接触15、关于乙脑病毒的叙述，错误的是A 、节肢动物媒介传播B 、水平传播C 、垂直传播D 、病后可获得稳定而持久的免疫力E 、可进行乙脑疫苗的特异性预防16、经病兽咬伤后感染的病原体是A 、水痘-带状疱疹病毒B 、腺病毒C、EB病毒 D 、人类免疫缺陷病毒E 、狂犬病病毒17、下列病毒中可以引起潜伏感染的是A 、疱疹病毒B 、森林脑炎病毒C 、乙型脑炎病毒D 、汉坦病毒E 、麻疹病毒18、狂犬病的潜伏期较长，如及时接种疫苗，可以预防发病，目前使用的狂犬疫 苗属于20、被狂犬咬伤后，最正确的处理措施是A 、注射狂犬病病毒免疫血清 +抗病毒药物B 、清创+抗生素C 、清创+接种疫苗+注射狂犬病病毒免疫血清D 、注射大剂量丙种球蛋白 +抗病毒药物E 、清创+注射狂犬病病毒免疫血清细菌各论答案 1--5CCDEA6— 10CEBDD 11— 15BBDEC1—6 20EAEDC A 、减毒活疫苗 B C 、重组疫苗 D E 、灭活疫苗19、内基小体是A 、麻疹病毒包涵体 C 、疱疹病毒包涵体 E 、虫媒病毒包涵体 、类毒素疫苗、内毒素疫苗 B 、腺病毒包涵体 D 、狂犬病病毒包涵体。
细菌的分布与消毒灭菌优秀课件
第一节 细菌的分布
• 土壤:多为非病原菌,能形成芽胞的可存活数年。 • 水：来自土壤和动物排泄物，易引起消化系统
传染病。 • 空气：唾液、飞沫传染。人口密集的公共场所
或医院细菌种类和数量多，注意消毒。 • 无生命物体的表面和与外界相通的腔道中 • 正常人体：有生命物体的表面和与外界相通的
• 电离辐射
高速电子、X射线、γ射线
• 微波 波长1mm~1m
（三）滤过除菌法
• 滤过除菌法：用物理阻留的方 法将液体或空气中的细菌去除 以达到无菌的目的。主要用于 不耐高温的血清、抗毒素、抗 生素、药液等的除菌。
• 滤菌器：效能与滤孔大小、滤 器电荷有关
二 化学消毒灭菌法
➢消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、
操作技术。
一 物理消毒灭菌法
➢热力灭菌法 ➢辐射杀菌法 ➢滤过除菌法
㈠物理消毒灭菌法
• 1、热力灭菌法
巴氏消毒法 湿热灭菌法煮沸法
流通蒸汽法(间歇灭菌法) 高压蒸汽灭菌法 121℃,103.4kPa,15-30分钟
焚烧 干热灭菌法 烧灼
干烤（160~170℃/2h）
同一温度下,湿热比干热效果好
巴氏消毒法:用较低温度杀灭液 体中的病原菌或特定微生物， 而仍保持物品中所需的不耐热 成分不被破坏的消毒方法。
正常菌群与条件致病菌
❖ 正常菌群：正常人体的体表以及与外界相通的腔 道黏膜上广泛存在着不同种类和一定数量的细菌。 这些细菌通常对人体是无害的，称为正常菌群。
❖ 正常菌群的生理学意义： 生物拮抗作用 营养作用 免疫作用 抗衰老作用
表皮葡萄球菌
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ件致病菌
▪ 寄居在人体一定部位的正常菌群相对稳定，但在特定
细菌的分布与消毒、灭菌
★了解学细菌的分布，树立有菌观念、无菌
观念，严格无菌操作
★掌握目正常菌群、灭菌等概念
★掌握热力灭菌法，了解其他物理灭菌法
★掌握标常用化学消毒剂的种类及其用途
第一章
一、细菌的分布
（（
二一
））
人细
体菌
正 常 菌
在 自
群然
及界
其的
意分
义布
微生物 的分布
土壤
伤寒杆菌 痢疾杆菌 破伤风杆菌 结核杆菌等
室内空气消毒、浸
环氧乙烷 有毒易爆 皮毛、食品、医药、 敷料
食醋
5~10ml/m3
手术醋器械酸等消毒
生石灰 1:4或1:8
熏蒸空气消毒 排泄物、地面消毒
尼泊金 0.05~0.1%
生物制品、中药、
滴眼
乙龙酯胆）紫 2%~4%
浅表创伤消毒剂防腐
3. 影响消毒剂作用的因素
消毒剂 种
类 浓 度
作用时间
环境
(三) 方法— 化 学消毒法
1.消毒剂的作用原理 (1) 使菌体蛋白质变性或凝固。 如红汞、酒精、福尔马林、醋酸等。
(三) 方法— 化学消毒法
(2) 破坏细菌的 酶系统如双氧水、 碘液。
(三) 方法— 化学消毒法
(3) 改变细菌细 胞壁或细胞膜的通 透性，如新洁尔灭、 肥皂等
2. 常用消毒剂的种类和用途
凡能耐高热和潮湿的物品，如普通培养 基、生理盐水、手术器械、敷料、手术 衣、橡皮手套、注射器、玻璃器材等， 都可应用高压蒸气灭菌法灭菌。
(三) 方法— 物理灭菌方法
⑤ 巴氏消毒法： 加热62℃经30min或 71.7℃经15～30秒，可杀死物品中的无 芽胞病原菌。
微生物实验报告微生物形态观察、分布、灭菌消毒
微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜〔油镜〕的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊构造5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的构造特点二、实验原理1. 普通光学显微镜〔油镜〕的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴，当油镜头几乎接触玻片时停顿转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形〔包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等〕杆菌：杆状〔包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等〕螺旋菌：螺旋状〔包括螺旋菌、弧菌等〕2．细菌的根本构造细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊构造荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌〔白念〕生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、脏感染、S感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜〔比菌体大1-3倍〕致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭S——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验容1. 观察细菌三种形态1〕球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌〔子弹形〕、脑膜炎双球菌〔蚕豆形〕、四联菌2〕杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌〔异染颗粒〕、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3〕螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊构造芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌〔Clostridium Tantenus〕；霍乱弧菌〔vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛〔flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下列图，已交。
细菌的分布与消毒灭菌(共10张PPT)
有感染疾病过程中产生的另一种新感染，所以，临床又
称二重感染。
二、消毒灭菌
• 1.消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定 能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。 2.灭菌： 杀死物体上所有微生物（包括细菌的芽孢） 的方法。 3.防腐：抑制体外细菌生长繁殖的方法。 4.无菌： 不存在任何活的微生物。 5.无菌操作： 防止细菌进入人体或其他物品的操作 技术。
• (一)、细菌在自然界的分布
• 1.土壤中的细菌 • 2.水中的细菌 • 3.空气中的细菌
（二）细菌在正常人体的分布
•
1.细菌在正常人体的分布概况
•
2.人体正常菌群及意义
（1）正常菌群的概念：正常人体的体表及与外界相通 的口腔、鼻咽腔、肠道及泌尿生殖道等腔道中，都存在 着不同种类和数量的微生物。在情况下，这些微生物对 人体无害，是人体的正常微生物群，称为正常菌群。
③干烤：干烤箱，加热至160~170℃，2 h。适用于
高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。
• 2.电磁波辐射杀菌法
• (1) 日光与紫外线
（2）电离辐射
• 3．滤过除菌法
（二）化学消毒灭菌法
消毒剂能影响细菌的化学组成、结构和生理活动 从而发挥防腐、消毒甚至灭菌的作用。主要用于人体 体表、医疗器械和周围环境的消毒。影响消毒剂作用 的因素有：
菌群当寄居部位入发生改变或免疫功能低下时可引起疾
病，这些细菌称为条件致病菌。
•
消毒和灭菌的方法主要有热力灭菌法、电磁波辐射
杀菌法、滤过除菌及化学消毒剂的使用，常用的有高压
蒸汽灭菌法、煮沸法、紫外线照射和化学消毒剂的使用
等。
解释消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操作的概念
细菌的分布与及消毒灭菌
大肠埃希菌*
乳酸杆菌 大肠埃希菌* B群链球菌
表皮葡萄球菌 粪链球菌 甲型和丙型链球菌 类白喉杆菌 消化链球菌 耻垢分枝杆菌 解脲脲原体
消化链球菌 产黑色素普氏菌 阴道加德纳菌 甲型和丙型链球菌 脆弱类杆菌 类白喉杆菌 解脲脲原体 白假丝酵母菌
Medical microbiology
02
物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法 影响消毒灭菌效果的因素
巴 氏 消 毒 法：61.1-62.8℃ 30 min or 71.7℃ 15-30sec 煮 沸 消 毒 法：100℃ 5min - 10min 流通蒸汽消毒法：100℃ 15min - 30min 间歇蒸汽灭菌法：100℃ 15min - 30min 37℃过夜（3次） 高压蒸汽灭菌法：103.4kPa（121.3℃）15min - 20min
粘膜：1%硝酸银、3%过氧化氢、0.1%高锰酸钾等 皮肤：2%碘酊、70%酒精、2%红汞、2%碘伏 手： 2%来苏儿、2%碘酊、70%酒精、84消毒液 饮水: 氯气、漂白粉 空气: 甲醛熏蒸、紫外线 病人的排泄物：等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2% 来苏儿 环境：病人居住的房间、地面、墙壁（过氧乙酸喷洒） 厕所（生石灰）
Medical microbiology
2 消毒与灭菌
物理学方法
热
辐
滤
力
射
过
灭
杀
除
菌
菌
菌
法
法
法
超
低
声
温
波
干
燥
杀
抑
菌
菌
法
法
常用消毒灭菌的方法
化学方法
熏
浸
喷
擦
细菌的生理、分布、消毒灭菌
噬菌体在宿主菌体内的增殖过程
谢
谢！
1.在医学中的应用：①诊断和治疗；②细菌鉴定和研 究；③生物制品。
2.在工农业生产中的应用 ：发酵等
3.在基因工程中的应用 ：外源DNA的重组
细菌代谢产物
（一）与致病性有关的代谢产物 （二）与治疗有关的代谢产物
（三）与鉴别细菌有关的代谢产物
三、细菌的代谢产物及意义
（一）与致病性有关的代谢产物
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1．热原质（pyrogen）
菌体中细胞壁的脂多糖，大多是革兰氏阴性菌 产生的。注入人或动物体内能引起发热反应，故名 热原质 特点：耐高温；去除方法：250℃干烤、 蒸馏等
病原菌在代谢过程中合成的具有侵袭 性的酶类，这些物质一般不损伤机体组织 细胞，但能协助病原菌在机体内的定植、 繁殖及扩散。常见的侵袭性酶主要有透明 质酸酶、硫酸软骨素酶、链激酶、胶原酶 等。它们的共性是使机体组织结构疏松， 通透性增强，从而有助于病原菌及其毒素 迅速扩散。
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条件致病菌：指正常菌群在某些非正常条件下（如机 体免疫机能下降、使用抗菌药物、改变寄居部位等）也能 导致机体致病。
中护微生物-实验3细菌分布检查与消毒灭菌实验
一、细菌的分布检查
1.空气中细菌的检查 材料:琼脂平板
方法:将制作好的琼脂平板敞开放置在空气中 37度温箱内培养18-24小时后观察结果。
意义：检测环境达标与否
5min -10min,后盖上皿盖，然后分别做好标记，
2.咽喉部细菌的检查
(1)咽喉拭子法：
材料：血平皿、咽拭子 方法：
1. 用干净棉签咽部取材； 2. 将取得样本以分区划线形式接种在血平皿上； 3. 37℃ 温箱内孵育24小时后观察结果。
三、药物敏感实验（纸片法）
测量抑菌环的大小，初步判定并比较细菌对不 同药物的敏感情况，判断药物的敏感度，一般 以敏感、中度敏感、耐药三个等级报告结果。
药敏实验
材料：琼脂平板、细菌培养物、药敏纸片 方法：1. 挑取少量细菌培养物密集划线； 2. 夹取青霉素及庆大霉素药敏片各一片， 置于琼脂平板表面（注意间隔）；
(2)咳碟法
• 取血平板一个，将盖打开，置于距口腔10厘 米处，用力咳嗽数次，然后盖好，置37度温 箱培养18-24小时观察结果。
二、消毒灭菌的实验
1.皮肤消毒试验（操作） 每两名学生用一个琼脂平板，先在平板底部用蜡笔画 分5格，标明序号。 两人用未消毒手指分别在1、2格内涂布。
然后用2%碘酒消毒手指后再分别涂抹3、4格，余下第5 格作为空白对照。
4.常用消毒灭菌器及除菌滤器介绍
高压蒸汽灭菌器 干烤箱（干热灭菌器） 滤器
三、药物敏感实验（纸片法）
方法：
1. 取琼脂平板一个用记号笔在平板底部标记贴抗生素纸片的位置。
2. 点燃酒精灯。用棉签蘸取菌液，在琼脂平板上密集而均匀地涂布。 3. 待培养基稍干后，无菌操作用镊子分别取抗生素纸片按标记位置贴
微生物知识及消毒与灭菌知识培训
概念
灭菌——使达到无菌状态的方法（GMP 指南）。用物理或化学方法杀灭传播媒 介上所有的微生物，使其达到无菌 （GB）。通常是指杀灭或除去全部活的 微生物（包括繁殖体和芽孢）。 消毒——用物理或化学方法杀灭或清除 传播媒介上的病原微生物，使其达到无 害化（GB）。通常是指杀死病原微生物 的繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消 毒是不彻底的，不能代替灭菌。
滤过除菌
利用细菌不能通过致密孔滤材的原理，除去对 热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方 法。过滤法一般只能除菌，不能除去支原体和 病毒。过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的 大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。滤过除 菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22μm。由于 各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致， 为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的 完好性（如压力维持试验或起泡点试验）。一 个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定， 一般不应超过8小时。
干热灭菌
常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。 ①火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金 属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。 ②干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行 灭菌。一般135~145℃需3~5h，160~170℃需 2h以上，170~180℃需1h以上，180~200℃需 0.5~1h。除热原，则需250℃30min，或 200℃45min，180℃2h。空气传热慢，穿透力 不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内 装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使 箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。
湿热灭菌
通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物 的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。 ①煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的 温度是100℃，一般处理30~60min可杀死细菌 繁殖体，但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不 能高压蒸汽灭菌的物品。 ②低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先 用60~80℃加热（或煮沸）1h，然后置 20~25℃保存24h（或常温过夜），使其中残存 的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如 此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易 变质的物品，但很费时。
细菌的分布与消毒灭菌【优质最全版】
2.水中的细菌
(1)水体中微生物的来源 土壤、空气、动植物尸体、人和动物的排泻物、工业及
生活污水。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ(2)水体中的病原微生物 通过水体传播的病原微生物主要有沙门氏菌属、志贺氏
菌属、霍乱弧菌等。可引起消化系统传染病，甚至爆发流行。
因此，做好水的卫生学检查对预防疾病至关重要。
3.空气中的细菌
（1）空气中缺乏营养物质与水分，且受日光照射，细菌不易繁殖。 （2）但由于人群和各种动物的呼吸道及口腔中的细菌可随唾液、
。
抹布和砧板上的 细菌模式图
针头上的细菌模式图
第一节 细菌的分布
一、细菌在自然界的分布 二、人体正常菌群及分布
一、细菌在自然界中的分布
1.土壤中的细菌
☆ 土壤是细菌生存的天然场所（因为土壤中有水分、营养物 质、空气、一定的PH环境和温度）。
☆ 自然界中，以土壤的含菌量（种类）最多，土壤素有“天 然培养基”之称。
{ 消毒（disinfection）：杀死物体上病原微生物的方法，
但不一定杀死细菌芽胞。 { 灭菌（sterilization）：杀死物体上包括芽胞在内的所 有病原性和非病原性微生物的方法。 { 防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖的方法， 细菌一般不死亡。 { 无菌（asepsis）：不含活菌的意思。防止微生物进入机 体或物体的操作方法，称为无菌操作或无菌技术。进行微生 物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的 无菌操作。
{煮沸法：水温100℃经5分钟可杀死细菌繁殖体，常用 于食具、刀剪、注射器等的消毒，细菌芽胞需煮沸1～ 2小时才被杀灭。水中加入2%碳酸氢钠，可使沸点达 105℃，既可促进杀灭芽胞，又能防止金属器械生锈。
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占位性生物屏障作用
（四）、条件致病菌和菌群失调
正常菌群/
？
非致病菌
条件致病菌
机体方面 细菌方面
免疫功能下降
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寄生部位改变 菌群失调
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第二节 消毒与灭菌
➢消毒灭菌概念 ➢物理方法 ➢化学方法 ➢生物学方法
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消毒灭菌有关概念
消毒:杀死物体或介质中的病原微生物
的方法（芽胞及非病原微生物不 一定能杀死）。
温度开始计。
❖ 锅内水分要充足; ❖ 灭菌物品装量不宜太满; ❖ 灭菌结束需缓慢减压； ❖ 灭菌结束，趁热取出物品。
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（二）辐射 1、日光与紫外光
3
二、微生物在人体的分布
（一）正常菌群的定义
－分布在人类的体表及其与外界相通 的腔道中，在机体免疫机能正常时是无害的 微生物群体。
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（二）人体微生物的分布
眼结膜 白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
外耳道 葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
灭菌: 杀死物体或介质中所有微生物的
方法（包括所有细菌繁殖体及芽 胞）。判断标准？
防腐（抑菌）:防止或抑制微生物生长繁
Hale Waihona Puke 殖的方法。（微生物不一定死亡）
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无菌: 在一定范围内没有活的 微生物存在。
无菌操作:防止细菌进入机体 或对象的技术，称无 菌操作。
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无菌操作
（1）煮沸法
方法：水中煮沸 15min 灭菌效果：可杀死所有营养细胞和一部
分芽胞 适用对象：玻璃注射器和外科器械的消 毒。
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Cncnc-micro
（2）流通蒸汽消毒法
方法：100 ℃蒸汽持续15－30min 效果：杀繁殖体 适用范围：外科手术器械、注射器、
胶管或食具等
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高压蒸汽灭菌法
最有效的湿热灭菌法 121 ℃ 15-20mim（杀芽胞)
煮沸消毒法
水煮100 ℃ 5mim(杀繁殖体)-5h(杀芽胞)
流通蒸汽消毒法
水蒸汽100 ℃ 15-30mim(杀繁殖体)
间歇灭菌法
反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞）
巴氏消毒法
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较低的温度 61 ℃ 30mim/71 ℃ 30s（杀致病菌）
培训资料--第十章微生物的分布与消 毒灭菌(9)
看书找答案
❖ 1、什么是正常菌群？ ❖ 2、什么是灭菌、消毒、防腐、无菌及无
菌操作？想想消毒、灭菌和防腐有什么 区别？
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2
第一节 微生物的分布
一、微生物在自然界的分布 （一）土壤中的微生物 （二）水中的微生物 （三）空气中的微生物
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效果：消毒
适用对象：牛奶、奶酪、果汁、酒类、 糖浆等食品消毒。
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UHT技术 （超高温灭菌瞬时灭菌） 135℃~152℃
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（5）高压蒸气灭菌 湿热灭菌法中效果最好的方法
❖ 灭菌效果：杀芽孢 ❖ 适用范围：耐高温的物体，如普通
干热灭菌法
热力灭菌法
湿热灭菌法
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1、干热灭菌法
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焚烧----最彻底的灭菌方法
烧灼----直接用火焰灭菌方法
如接种环、试管口、三角瓶口
干烤----加热160-170℃ 2h
药粉、玻璃器皿、陶瓷 红外线----热效应，与干烤类似
灭菌效果：可杀死营养体和芽胞
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灼 烧 灭 菌 法
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法 最常用是：
121℃，103.1kPa，15-20min
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高压蒸汽灭菌锅
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常用设备：手提式热压灭菌器
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常用设备：卧式热压灭菌柜
①
高
压
蒸
汽
灭
菌
法
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高压蒸气灭菌注意点:
❖ 检查压力表是否灵敏，压力与温度是否对应 ❖ 灭菌初期先排净锅内冷空气; ❖ 灭菌时间计算：达到规定压力和
鼻咽腔 葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等 表皮葡萄球菌 口腔 甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
皮肽 葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
尿道 白色葡萄球菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
阴道
大肠杆菌、乳杆菌
培养基、生理盐水、玻璃器 皿、敷料、手术器械、某些 注射液、手术衣等。
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灭菌条件
①
高
温度/℃ 压力/kPa(kg/cm2) 时间/min
压
110
40.52(0.4)
40
蒸
115
70.91(0.7)
30
汽
120
101.3(1.0)
20
灭
125
141.82(1.4)
15
菌
130
182.34(1,8)
白2念0珠 20菌 /7/、15类白喉杆菌 非致病性分枝等
肠道
大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌
绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细
菌
真菌、乳杆菌，双歧杆菌等
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（三）正常菌群的作用
1、生物拮抗作用——屏障 2、免疫作用— 免疫刺激 3、营养与代谢作用——合成维生素 4、抑制肿瘤的作用
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2020/7/15
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一、物理方法
常用方法
（一）热力法（干热、湿热）
（二）辐射（紫外线、电离幅射、微波）
（三）滤过除菌（除菌滤器、适用物品）
（四）超声波（机制：裂解细菌，主要用
于粉碎细胞、提取抗原）
（五）干燥
（六）低温
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（一）热力灭菌法
原理：
➢使微生物蛋白质变性凝固，酶失活； ➢核糖体解体 ➢破坏细胞膜的结构； ➢微生物体内的DNA断裂。
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红外线接种 环灭菌器
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实验室常用设备
干 烤 灭 菌 法
真空干燥灭菌箱
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电热烘箱
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湿热灭菌与干热灭菌的比较
同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好
原 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 因 2、湿热的穿透力比干热强
3、湿热的蒸汽有潜热
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2、湿热灭菌法
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奶瓶消毒器
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（3）间歇灭菌 法
方法：常压蒸汽反复几次进行灭菌。
灭菌效果：可杀死芽胞。
适用对象：不宜高压灭菌的培养基， 不耐热的药物和营养物、 发酵车间的管道等。
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（4）巴氏消毒法 （低温消毒法）
方法：61.7－62.8ºＣ处理30min 或71.6ºＣ度处理15秒 或82℃处理4秒