GBT肥料中粪大肠菌群的测定

NY884-2012 生物有机肥

NY 884-2012《生物有机肥》原《生物有机肥》（NY 884-2004）经修订后，2012年6月6日中华人民共和国农业部公告第1783号颁布新的版本：NY 884-2012《生物有机肥》，并从2012年9月1日起实施，敬请各有关生产企业及时更换产品登记证，以及更新产品标签、包装等事宜。

为了便于各有关生产企业了解、掌握和按照新版本《生物有机肥》（NY 884-2012）的有关内容，现将修订后的《生物有机肥》（NY 884-2012）文本上传，谨供参考。

有关《生物有机肥》（NY884-2012）的具体条文内容请参见标准的正式文本。

前言本标准按照GB/T 1.1的要求起草。

本标准代替NY 884—2004《生物有机肥》，与NY 884—2004相比修改主要内容：——修改了有机质的质量分数；——修改了颗粒产品的水分质量分数；——修改了产品中砷（As）、镉（Cd）、铅（Pb）、铬（Cr）、汞（Hg）限量指标。

本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。

本标准起草单位：农业部微生物肥料和食用菌菌种质量监督检验测试中心、中国农业科学院农业资源与农业区划研究所。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：NY 884—2004。

生物有机肥1 范围本标准规定了生物有机肥的要求、检验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。

本标准适用于生物有机肥。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 8170—2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T 19524.1—2004 肥料中粪大肠菌群的测定GB/T 19524.2—2004 肥料中蛔虫卵死亡率的测定NY/T 1978—2010 肥料汞、砷、镉、铅、铬含量的测定7.1 检验分类7.1.1 出厂检验（交收检验）产品出厂时，应由生产厂的质量检验部门按表1进行检验，检验合格并签发质量合格证的产品方可出厂。

粪大肠菌群的测定

15.7mg硫代硫酸钠可去除样品中1.5mg活性氯，硫代硫酸钠用量可根据样品实际活性氯量调整。
4 .无菌水:取适量实验用水，经高压蒸汽灭菌20min，备用。 5. 硫代硫酸钠( Na2S2O3.5H2O)。 (去除游离氯) 6.乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2O8Na2 .2H2O)。 7.乙二胺四乙酸二钠溶液: ρ (C10H14N2O8Na2 .2H2O) =0.15 g/ml 称取15g乙二胺四乙酸二钠,溶于适量水中，定容至100ml,此溶液可保存 30d。 8.硫代硫酸钠溶液: ρ ( Na2S2O3.5H2O) =0.10 g/ml 称取15.7g硫代硫酸钠，溶于适量水中，定容至100ml，临用现配。
2. 浓缩乳糖蛋白胨培养液： (此溶液用于检验大肠菌群) 按上述乳糖蛋白胨培养液的制备方法配制。除蒸馏水外，各组分用量增加至三倍。 (即按上述配方比例三倍 (除蒸馏水外) ，配成三倍浓缩的乳糖蛋白胨培养液)
①在何种情况下用多少三倍浓度的培养基接种？答：接种体积为10ml时，试管内应装入有3倍浓度乳糖蛋白胨培养液5ml。
• 三、肯定要加塞子的，我们用的塞子是软材料 (好像是软橡胶？白色的，塞子中间另有一个可以活动的塞子，能保证加塞后的试管透气，其实用什么材料不重要的。
• 四、需要的仪器设备为：生化培养箱、无菌操作台 (空气精华级别100) 、高压灭菌锅、冰箱、干燥箱。
五、干扰和消除
1.
,能破坏微生物细胞内的酶活性，导
若接种量过高，培养液应加倍成分。这是由于样品的量大的情况下，培养液稀释大,各种成分的相对浓度就会不足，就不能满足细菌的生长要求，存在实验失败的概率。因此，合理调整样品量和营养液浓度的比例需要反复实验和多组对照。

粪大肠菌群检测标准

粪大肠菌群的检测标准根据不同的国家和地区以及不同的应用场景可能会有所不同。

一般来说，粪大肠菌群的检测标准通常是以每克或每毫升样品中的大肠菌群数量来表示的，常用的单位有CFU/g或CFU/mL。

在某些国家或地区，对于饮用水、食品等相关行业的检测标准可能会更加严格。

例如，某些国家可能规定饮用水中不得检出大肠菌群，而在某些食品中则可能规定每克样品中大肠菌群的数量不得超过一定数值。

需要注意的是，粪大肠菌群并非单一菌种，而是一组菌群的统称。

因此，在检测过程中需要针对这一组菌群进行检测，而非单一菌种。

同时，为了确保检测结果的准确性，检测过程需要严格遵守相关操作规范，避免交叉污染等因素的影响。

粪大肠菌群数测量方法-概念解析以及定义

粪大肠菌群数测量方法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容可以描述该篇文章的研究背景以及粪大肠菌群数测量方法的重要性。

可以参考以下内容进行撰写：概述粪大肠菌群数（Fecal coliform count）是评估水体、食品和环境卫生安全的重要指标之一。

粪大肠菌群数测量方法的准确性和可靠性对于保障公众健康和环境质量至关重要。

随着生活水平的提高和环境污染问题的日益严重，对粪大肠菌群数测量方法的研究与探索变得尤为重要。

本文旨在详细介绍目前常用的三种粪大肠菌群数测量方法，即第一种测量方法、第二种测量方法和第三种测量方法。

通过比较这三种方法的原理、步骤以及各自的优缺点，可以帮助读者更全面地了解和选择合适的测量方法。

本文结构本文分为引言、正文和结论三个部分。

引言部分对粪大肠菌群数测量方法的研究背景和意义进行了概述。

正文部分详细介绍了三种测量方法的原理、步骤以及优缺点。

结论部分对本文的主要观点进行总结，并对未来相关研究进行展望。

通过本文的阅读，读者可以对粪大肠菌群数测量方法有一个全面的了解，并对选择适合自己研究对象的测量方法具备一定的指导意义。

希望本文能够为相关领域的研究工作者提供有价值的信息和启示，推动粪大肠菌群数测量方法的改进和发展。

1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括对整篇文章的大致框架进行介绍，即各个章节及其内容的概览。

在文章结构部分中，可以简要介绍文章的组成和布局，以帮助读者更好地理解整篇文章的结构和内容安排。

此外，可以提及各个章节的主要目标和内容，以及各个章节之间的逻辑关系。

具体编写文章结构部分的内容如下：文章结构：本文共分为引言、正文和结论三个部分。

引言部分主要概述了本文的研究背景和目的，同时简要介绍了大纲中各个章节的内容安排。

正文部分详细介绍了三种粪大肠菌群数测量方法：第一种测量方法、第二种测量方法和第三种测量方法。

每种测量方法都包括了原理、步骤和优缺点的详细介绍。

通过对这三种测量方法的讨论和比较，读者可以全面了解不同测量方法的特点和应用情况。

过滤膜法测粪大肠菌群数-国标方法

滤膜法-粪大肠菌群的测定1、适用范围本标准适用于地表水、地下水、及水中粪大肠菌群的测定。

用于检验加氯消毒的水样时，在滤膜法之前，先做试验，证实它所得的数据资料与多管发酵试验所得的数据资料具有可比性。

2、原理滤膜是一种微孔性薄膜。

将水样注入已灭菌的放有滤膜（孔径0.45微米）的滤器中，经过抽滤，细菌即被截留在膜上，然后将滤膜贴于M-FC培养基上，44.5℃温度下进行培养，计数滤膜上生长的此特性的菌落数，计算出每1L水样中含有粪大肠菌群数。

3仪器：滤膜（孔径0.45微米）、滤器、接液瓶、垫圈、无菌镊子夹3、培养基和试剂本标准所用试剂除另有注明外，均为符合国家标准的分析纯化学试剂，实验室用水为新制备的去离子水。

M-FC培养基：胰胨10g蛋白胨5g酵母浸膏 3.0g氯化钠 5.0g乳糖12.5g胆盐三号 1.5g1%苯胺蓝水溶10ml1%玫瑰色酸溶液（溶于0.2mol/L氢氧化钠液中）10ml蒸馏水1000ml制法：将上述培养基中的成分（除苯胺蓝和玫瑰色酸外），置于蒸馏水中加热溶解，调节PH为7.4，分装于小烧瓶内，每瓶100ml，于115℃灭菌20min。

储存于冰箱中备用，临用前，按上述配比，用灭菌吸管分别加入已煮沸灭菌的1%苯胺蓝溶液1ml及新配制的1%玫瑰色酸溶液（溶于氢氧化钠溶液）1ml，混合均匀。

加热溶解前，加入1.2%～1.5%琼脂制成固体培养基。

如培养物中杂菌不多，则培养基中不加玫瑰色酸亦可。

4、步骤水样的选择：水样量的选择根据细菌受检验的特征和水样中预测的细菌密度而定。

理想的水样体积是一片滤膜上生长20～60个粪大肠群菌落，总菌落数不超过200个。

滤膜及滤膜灭菌：将滤膜放入高压蒸汽灭菌锅里在121℃灭菌10min，滤器、接液瓶、垫圈分别用纸包好，在使用前经121℃灭菌20min，滤器也可用点燃的酒精棉球火焰灭菌。

过滤：用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘，将粗糙面向上，贴放在已灭菌的滤床上，稳妥的固定好滤器。

粪大肠菌群计数步骤--个人详细介绍

/asphtml/GB071.htm/粪大肠菌群计数步骤GB/T 4789.39-2008一、设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃ 。

2 冰箱：2℃~ 5 ℃ ．3 恒温水浴箱：44.5 ℃±0.2 ℃ 。

4 天平：感量0.1g 。

5 均质器。

6 振荡器。

7 无菌吸管：1 mL （具0.01 mL 刻度）、10 mL （具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。

8 无菌锥形瓶：容量500 mL 。

9 无菌培养皿：直径90 mm 。

10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。

二、培养基及试剂1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（lauryl sulfate tryptose , LST ）肉汤2 EC 肉汤（E.coli broth )3 无菌生理盐水：称取8.5g 氯化钠溶于1 000 mL 蒸馏水中，121 ℃ 高压灭菌15 min。

4 4mol/L 氢氧化钠（NaOH ) ：称取40g 氢氧化钠溶于1 000 mL 蒸馏水中5 1 mol/L 盐酸（HCl ）：移取浓盐酸90 mL ，用蒸馏水稀释至1 000 mL操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品：称取25g 样品，置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min ~10000r/min 均质1 min ~2 min ，制成1：10 样品匀液，或置225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍打式均质器拍打1 min ~2 min ，制成1 : 10 的样品匀液。

6.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取样品25 mL 置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1 : 10 的样品匀液。

6.1.3 样品匀液的pH 值应在6.5 ~7.5 之间，必要时分别用1 mol/L 氢氧化钠（NaOH ）或1 mol/L 盐酸（HCI ）调节。

粪大肠菌群的测定步骤

粪大肠菌群的测定1、半个月前配好初、复发酵所需培养液2、采样时用500ml 广口玻璃瓶分开采样，牛皮纸封口3、操作（1）培养液初发酵单倍乳糖蛋白胨培养液：蛋白胨 10 g牛肉浸膏 3 g乳糖 5 g氯化钠 5 g蒸馏水 1000ml调节PH 为7.2—7.4（NaOH ）6%溴甲基紫乙醇溶液 1 ml 充分混匀后 10ml （三倍是5ml ）分装于试管中，盖紧塞于蒸气锅中灭菌20min （0.1—0.5kpa ），冷却后于药品储存箱保存。

单月13个地表水（每个水样需10个单倍，5个三倍），2个创业（每个水样需15个单倍）。

共190个（1900ml ）单倍，65个三倍（325ml ）。

双月10个地表水，2个创业。

共130个（1600ml ）单倍，50个三倍（250ml ）。

创业的水一个月采两次水样复发酵 EC 培养液胰胨 20 g乳糖 5 g胆盐三号 1.5 g磷酸氢二钾 4 g磷酸二氢钾 1.5 g氯化钠 5 g蒸馏水 1000ml充分混匀后 10ml 分装于试管中，盖紧塞于蒸气锅中灭菌20min （0.1—0.5kpa ），冷却后于药品储存箱保存。

三倍乳糖蛋白胨培养液：蛋白胨 30 g 牛肉浸膏 9 g 乳糖 15 g 氯化钠 15 g 蒸馏水 1000ml 溴甲基紫乙醇溶液 3 ml（2）做样初发酵：地表水15根管为一个水样。

5根为一组。

第一排为5ml三倍培养液，加10ml水样；第二排为10ml单倍培养液，加1ml水样；第三排为10ml单倍培养液，取1ml水样稀释至10ml后再从中取1ml至装有培养液的试管。

（10、1、0.1的取样量）创业，每个水样15根单倍。

同上逐级稀释，取样量为0.1、0.01、0.001ml。

将初发酵管放入培养箱中培养，温度为37℃±0.5℃，时间为24h±2h。

观察：产酸产气为阳性，即变色且有气泡产生，可轻击试管查气泡。

复发酵：呈阳性的试管进行接种后，做复发酵。

粪大肠菌群的测定步骤

粪大肠菌群的测定1、半个月前配好初、复发酵所需培养液2、采样时用500ml 广口玻璃瓶分开采样，牛皮纸封口3、操作（1）培养液初发酵单倍乳糖蛋白胨培养液：蛋白胨 10 g牛肉浸膏 3 g乳糖 5 g氯化钠 5 g蒸馏水 1000ml调节PH 为7.2—7.4（NaOH ）6%溴甲基紫乙醇溶液 1 ml 充分混匀后 10ml （三倍是5ml ）分装于试管中，盖紧塞于蒸气锅中灭菌20min （0.1—0.5kpa ），冷却后于药品储存箱保存。

单月13个地表水（每个水样需10个单倍，5个三倍），2个创业（每个水样需15个单倍）。

共190个（1900ml ）单倍，65个三倍（325ml ）。

双月10个地表水，2个创业。

共130个（1600ml ）单倍，50个三倍（250ml ）。

创业的水一个月采两次水样复发酵 EC 培养液胰胨 20 g乳糖 5 g胆盐三号 1.5 g磷酸氢二钾 4 g磷酸二氢钾 1.5 g氯化钠 5 g蒸馏水 1000ml充分混匀后 10ml 分装于试管中，盖紧塞于蒸气锅中灭菌20min （0.1—0.5kpa ），冷却后于药品储存箱保存。

三倍乳糖蛋白胨培养液：蛋白胨 30 g 牛肉浸膏 9 g 乳糖 15 g 氯化钠 15 g 蒸馏水 1000ml 溴甲基紫乙醇溶液 3 ml（2）做样初发酵：地表水15根管为一个水样。

5根为一组。

第一排为5ml三倍培养液，加10ml水样；第二排为10ml单倍培养液，加1ml水样；第三排为10ml单倍培养液，取1ml水样稀释至10ml后再从中取1ml至装有培养液的试管。

（10、1、0.1的取样量）创业，每个水样15根单倍。

同上逐级稀释，取样量为0.1、0.01、0.001ml。

将初发酵管放入培养箱中培养，温度为37℃±0.5℃，时间为24h±2h。

观察：产酸产气为阳性，即变色且有气泡产生，可轻击试管查气泡。

复发酵：呈阳性的试管进行接种后，做复发酵。

粪大肠、总大肠、细菌总数的测定

一、微生物分析的总体要求（一）、采样瓶及玻璃器皿的清洗1、新购置的玻璃器皿，因含游离碱，2%的盐酸浸泡数小时，自来水冲洗，蒸馏水冲洗干净，沥干。

2、培养细菌后的玻璃器皿，应先经高压蒸汽灭菌，趁热倒出培养基，用洗涤剂刷洗干净，自来水冲洗，蒸馏水冲洗干净，沥干。

3、洗涤吸管时可高压蒸汽灭菌30min，用洗涤剂刷洗干净，自来水冲洗，蒸馏水冲洗干净，沥干。

用牛皮纸包好，可干热灭菌（于烘箱中160℃烘150min）和高压蒸汽灭菌（121℃灭菌20min）。

备用。

所有的吸管上端要用少量普通棉花填塞，注意松紧度，取液时使其准确快速的流出）4、洗涤采样瓶时，用刷子刷洗干净，自来水冲洗，蒸馏水冲洗干净，再烘箱烘干，用牛皮纸包好（鸡肠带捆好），可干热灭菌（于烘箱中160℃烘150min）和高压蒸汽灭菌（121℃灭菌20min）5、培养皿：洗净后，用烘箱烘干，用牛皮纸包好进行灭菌，待冷后放入冰箱中备用。

（二）、培养基的制备1、单倍乳糖蛋白胨培养液-液体培养基用量筒量取1000mlUP水，加23g营养物质，沿烧饼边沿搅拌，使其完全溶解。

用移液管移取9ml培养液分装于试管中，用针管将小导管从底部注满营养液，斜扣入试管中，用胶塞塞紧，用牛皮纸每十个进行包扎。

2、三倍乳糖蛋白胨培养液：营养物质加入69g，用移液管移取5ml培养液分装于试管中，用针管将小导管从底部注满营养液，斜扣入试管中，用胶塞塞紧，用牛皮纸每十个进行包扎。

3、EC培养液（配制过程同乳糖蛋白胨培养液）(称取37g)-液体培养基4、无菌水，吸取9ml新鲜UP水于试管中，其余包扎过程同乳糖蛋白胨培养液。

5、上述培养基及无菌水准备好后高压蒸汽灭菌（121℃灭菌20min）。

灭菌后等室温再放入冰箱。

6、伊红美蓝培养基（EMB培养基）(固体培养基-平板)①称取42g营养物质，加入到1000mlUP水中，加热溶解，用三角瓶分装，盖上绵塞，至于高压蒸汽灭菌锅内，121℃灭菌20min。

GB18466粪大肠菌群验证报告

方法验证报告项目名称：粪大肠菌群的测定方法名称：GB 18466-2005粪大肠菌群的检测方法报告编写人：参加人员：审核人员：报告日期：1 实验室基本情况1.1人员情况表1参加验证的人员情况登记表1.2 检测仪器/设备情况表2使用仪器情况登记表1.3 检测用试剂情况表3使用试剂登记表1.4 环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在温度18⁓26℃，湿度45%⁓65%的要求范围内，满足检测环境条件，实验室人员每天对环境条件进行监控。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。

2 实验室检测技术能力2.1样品采集与保存按照HJ 91.1的相关规定进行水样的采集。

采集样品时，采样瓶不得用样品洗涤，采集样品于灭菌的采样瓶中。

水体采样量不低于200 ml。

样品采集完毕后，迅速扎上无菌包装纸。

采集废水样品及一定深度的样品时，也可使用灭菌过的专用采样装置采样。

如果采集的是含有活性氯的样品，需在采样瓶灭菌前加入硫代硫酸钠溶液，以除去活性氯对细菌的抑制作用（每125mL容积加入0.1g/ml的硫代硫酸钠0.1mL）。

采样后应在2 h内检测，否则，应10⁓以下冷藏但不得超过6 h。

实验室接样后，不能立即开展检测的，将样品于4⁓以下冷藏并在2 h内检测。

2.2 检测步骤2.2.1样品准备污水样品至少取200ml，使用前应充分混匀。

根据预计的污水样品中粪大肠菌群数确认污水样品接种量。

粪大肠菌群数量相对较少的接种量一般为10、1、0.1ml。

粪大肠菌群较多时接种量为1、0.1、0.01ml或0.1、0.01、0.001ml等。

接种量少于1ml时，水样应制成稀释样品后供发酵实验使用。

接种量为0.1、0.01ml时，取稀释比分别为1:10、1:100.其他接种量的稀释比依此类推。

1:10稀释样品的制作方法为：吸取1ml水样，注入盛有9ml灭菌水的试管中，混匀，制成1:10稀释样品。

粪大肠菌群国家标准

粪大肠菌群国家标准粪大肠菌群是指存在于人和动物的胃肠道内的一类细菌群，其中包括了大肠杆菌等多种细菌。

这些细菌在人体内起着重要的生理功能，但同时也可能引发多种疾病。

因此，制定粪大肠菌群国家标准对于保障公共卫生安全、食品安全和环境卫生具有重要意义。

首先，粪大肠菌群国家标准应明确细菌的检测方法和标准。

目前，常用的检测方法包括培养法、PCR法等，国家标准应明确不同检测方法的适用范围和标准要求，确保检测结果的准确性和可比性。

同时，国家标准还应规定细菌的允许浓度范围，以便监管部门对食品、饮用水、环境卫生等方面进行监测和管理。

其次，国家标准应规定粪大肠菌群在不同环境中的允许浓度限值。

比如在饮用水中，粪大肠菌群的允许浓度应严格控制，以保障民众饮用水的安全。

在食品加工环节，也应规定粪大肠菌群的允许浓度限值，以确保食品的卫生安全。

此外，在环境卫生监测中，国家标准也应规定粪大肠菌群的允许浓度限值，以保障公共环境的卫生与安全。

再次，国家标准还应明确粪大肠菌群的防控措施和应急处置措施。

一旦发现粪大肠菌群超标，应该采取哪些措施来防止疫情扩散，保障公共卫生安全？国家标准应对此进行详细规定，以提供参考依据。

同时，应急处置措施也应该在国家标准中得到规范，以便相关部门在突发事件中能够迅速、有效地处置。

最后，国家标准的制定还需要考虑国际标准的趋势和发展。

粪大肠菌群国家标准应与国际标准保持一致，以便我国在国际贸易中能够顺利对接。

同时，国家标准也应不断更新和完善，以适应不断变化的国内外环境和需求。

综上所述，粪大肠菌群国家标准的制定对于保障公共卫生安全、食品安全和环境卫生具有重要意义。

国家标准的制定需要明确细菌的检测方法和标准、规定允许浓度限值、明确防控措施和应急处置措施，并与国际标准保持一致。

希望相关部门能够加强标准的制定和监管，确保粪大肠菌群在合理范围内，以保障公众的健康和安全。

粪大肠菌群检测标准

粪大肠菌群检测标准
粪大肠菌群检测是评价消化道微生物菌群组成和功能的重要指标，常用于评估肠道健康和消化功能。

以下是一般粪大肠菌群检测的参考标准：
1. 总菌群量：正常情况下，粪便样本中的大肠菌群数量应该在10^7~10^9 CFU/g之间。

2. 菌群多样性指数：通常使用菌群多样性指数（如Shannon指数）评估菌群的多样性程度。

正常情况下，指数应该在较高水平。

3. 优势菌群和病原菌：粪大肠菌群检测还可以确定主要的优势菌群种类和比例，以及是否存在潜在的病原菌。

正常情况下，优势菌群应该是益生菌（如双歧杆菌、乳酸菌等），而病原菌应该是少量或不存在。

4. 菌群平衡和稳定性：正常的粪大肠菌群应该具有良好的平衡和稳定性。

如果菌群失调或不稳定，可能会导致肠道问题和消化不良等症状。

需要注意的是，粪大肠菌群检测的标准可能因不同的实验室和研究领域而有所差异。

因此，具体的标准应根据实验室或临床医生的建议进行参考。

生物有机肥2012最新国标.pdf

NY 884-2012《生物有机肥》已颁布原《生物有机肥》（NY 884-2004）经修订后，2012年6月6日中华人民共和国农业部公告第1783号颁布新的版本：NY 884-2012《生物有机肥》，并从2012年9月1日起实施，敬请各有关生产企业及时更换产品登记证，以及更新产品标签、包装等事宜。

为了便于各有关生产企业了解、掌握和按照新版本《生物有机肥》（NY 884-2012）的有关内容，现将修订后的《生物有机肥》（NY 884-2012）文本上传，谨供参考。

有关《生物有机肥》（NY884-2012）的具体条文内容请参见标准的正式文本。

前言本标准按照GB/T 1.1的要求起草。

本标准代替NY 884—2004《生物有机肥》，与NY 884—2004相比修改主要内容：——修改了有机质的质量分数；——修改了颗粒产品的水分质量分数；——修改了产品中砷（As）、镉（Cd）、铅（Pb）、铬（Cr）、汞（Hg）限量指标。

本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。

本标准起草单位：农业部微生物肥料和食用菌菌种质量监督检验测试中心、中国农业科学院农业资源与农业区划研究所。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：NY 884—2004。

生物有机肥1范围本标准规定了生物有机肥的要求、检验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。

本标准适用于生物有机肥。

2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 8170—2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T 19524.1—2004 肥料中粪大肠菌群的测定GB/T 19524.2—2004 肥料中蛔虫卵死亡率的测定NY/T 1978—2010 肥料汞、砷、镉、铅、铬含量的测定NY 525—2012 有机肥料NY/T 798—2004 复合微生物肥料NY 1109—2006 微生物肥料生物安全通用技术准则HG/T 2843—1997 化肥产品化学分析常用标准滴定溶液、试剂溶液和指示剂溶液3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

GBT 肥料中粪大肠菌群的测定

GB/ 肥料中粪大肠菌群的测定1 范围本标准规定了肥料中粪大肠菌群的测定方法。

2 定义粪大肠菌群 fecal coliforms系指一群在℃±℃条件能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

粪大肠菌群数为每克（毫升）肥料样品中粪大肠菌群的最可能数（MPN）。

3 设备和材料（内容略）4 培养基和试剂培养基：遵照附录A的规定。

革兰氏染色液：遵照附录B的规定（略）。

5 检验步骤样品稀释在无菌操作下称取样品g或吸取样品10mL，加入到带玻璃珠的90 mL无菌水中，置于摇床上200 r/min 充分振荡30min，即成10-1稀释液。

用无菌移液管吸取 mL上述稀释液加入到45 mL无菌水中，混匀成10-2稀释液。

这样依次稀释，分别得到10-3，10-4等浓度稀释液（每个稀释度须更换无菌移液管）。

乳糖发酵试验选取三个连续适宜稀释液，分别吸取不同稀释液mL加入到乳糖胆盐发酵管内，每一稀释度接种3支发酵管，置℃±℃恒温水浴或隔水式培养箱内，培养24h±2h。

如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气，则为粪大肠菌群阴性；如果有产酸产气或只产酸的发酵管，则按进行。

分离培养从产酸产气或只产酸的发酵管中分别挑取发酵液在伊红美蓝琼脂平板上划线，置36℃±1℃条件下培养18h～24h。

证实试验从分离平板上挑取可疑菌落，进行革兰氏染色。

染色反应阳性者为粪大肠菌群阴性；如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中，置℃±℃条件下培养24h ±2h。

观察产气情况，不产气为粪大肠菌群阴性；产气为粪大肠菌群阳性。

结果证实实验为粪大肠菌群阳性的，根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN检索表，得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数。

附录 A（规范性附录）培养基乳糖胆盐发酵培养基蛋白胨g猪胆盐g乳糖g%溴甲酚紫水溶液m L蒸馏水1000m LpH值～制法：将蛋白胨、猪胆盐及乳糖溶解于蒸馏水中，校正pH，加入溴甲酚紫水溶液，然后分装试管，每管9mL，并放入一支倒置的小套管，高压灭菌115℃15min。

生物有机肥料国家标准及各个指标的检测方法

生物有机肥料的国家标准及各个指标的检测方法简介：本文介绍了生物有机肥肥料的国家标准，以及各个指标的检测方法。

具体包括：有效活菌数，有机质，水分，PH，粪类大肠菌群数，蛔虫卵死亡率，N，P5O2，K2O,重金属等指标的测定方法和流程。

可供同行人士参考，可大大缩减您查阅资料的时间，本文采用word文字编辑，下载后可以直接复制粘贴。

一．各个指标的标准1.各个技术指标项目指标要求有效活菌数≧0.2亿/g有机质（以干计）≧45%水分≦30%PH 5.5-8.5粪大肠菌群数≦100个/g蛔虫卵死亡率≧95%≧5%总养分质量分数（N+P5O2+K2O，以烘干计）2.重金属指标项目指标要求总AS ≦15mg/kg总Cd ≦3mg/kg总Pb ≦50mg/kg总Cr ≦150mg/kg总Hg ≦2mg/kg二．各个指标检测方法1.有效活菌数的测定（1）稀释称取固体样品10g，加入带玻璃珠的100ml的无菌水中，静置20分钟，在旋转式摇床上200r/min充分震荡30分钟，即成母液菌悬液。

用5ml无菌转液管分别吸取5ml上述母液菌悬液加入45ml无菌水中，按1比10进行系列稀释，分别得到10-1,10-2,10-3、、、稀释倍数的菌悬液。

（2）加样及培养每个样品取3个连续适宜稀释度，用0.5ml无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1ml，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂布于琼脂表面。

每一稀释度重复3次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。

（3）菌落识别根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。

当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应该重做。

（4）菌落计数以出现20-30个菌落数的稀释度的平板为计数标准，（丝状真菌为10-150个菌落数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。

当只有一个稀释度，其有效菌平均菌落数在20-300个之间时，则以该菌落数计算。

GBT肥料中粪大肠菌群的测定

G B T肥料中粪大肠菌群的测定集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#GB/ 肥料中粪大肠菌群的测定1 范围本标准规定了肥料中粪大肠菌群的测定方法。

2 定义粪大肠菌群 fecal coliforms系指一群在℃±℃条件能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

粪大肠菌群数为每克（毫升）肥料样品中粪大肠菌群的最可能数（MPN）。

3 设备和材料（内容略）4 培养基和试剂培养基：遵照附录A的规定。

革兰氏染色液：遵照附录B的规定（略）。

5 检验步骤样品稀释在无菌操作下称取样品g或吸取样品10mL，加入到带玻璃珠的90 mL无菌水中，置于摇床上200r/min充分振荡30min，即成10-1稀释液。

用无菌移液管吸取 mL上述稀释液加入到45 mL无菌水中，混匀成10-2稀释液。

这样依次稀释，分别得到10-3，10-4等浓度稀释液（每个稀释度须更换无菌移液管）。

乳糖发酵试验选取三个连续适宜稀释液，分别吸取不同稀释液mL加入到乳糖胆盐发酵管内，每一稀释度接种3支发酵管，置℃±℃恒温水浴或隔水式培养箱内，培养24h±2h。

如果所有乳糖胆盐发酵管都不产酸不产气，则为粪大肠菌群阴性；如果有产酸产气或只产酸的发酵管，则按进行。

分离培养从产酸产气或只产酸的发酵管中分别挑取发酵液在伊红美蓝琼脂平板上划线，置36℃±1℃条件下培养18h～24h。

证实试验从分离平板上挑取可疑菌落，进行革兰氏染色。

染色反应阳性者为粪大肠菌群阴性；如果为革兰氏阴性无芽胞杆菌则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中，置℃±℃条件下培养24h ±2h。

观察产气情况，不产气为粪大肠菌群阴性；产气为粪大肠菌群阳性。

结果证实实验为粪大肠菌群阳性的，根据粪大肠菌群阳性发酵管数，查MPN检索表，得出每克（毫升）肥料样品中的粪大肠菌群数。

附录 A（规范性附录）培养基乳糖胆盐发酵培养基蛋白胨g猪胆盐g乳糖g%溴甲酚紫水溶液m L蒸馏水1000m LpH值～制法：将蛋白胨、猪胆盐及乳糖溶解于蒸馏水中，校正pH，加入溴甲酚紫水溶液，然后分装试管，每管9mL，并放入一支倒置的小套管，高压灭菌115℃15min。

肥料中粪大肠菌群的测定

肥料中粪大肠菌群的测定说到肥料中的粪大肠菌群，这可是一个让人又爱又恨的话题。

大家知道，肥料是农田的命，没了肥料，庄稼就像是没水的鱼，干巴巴的。

但是，肥料里那些看不见的小家伙们，真的是个谜。

你可能会想，粪大肠菌群，这不是粪便里的细菌吗？对的，就是它们！可千万别小看这些细菌，虽然它们的名字听起来不怎么好听，但其实它们在土壤中的角色可重要了。

嘿，想象一下，咱们在自家菜园里辛勤耕作，种下的可是满满的希望啊。

可如果肥料里含有过多的粪大肠菌群，那就会变得棘手了。

想想看，这些细菌如果进入了蔬菜，最后跑到咱们的餐桌上，那可就让人直冒冷汗了。

人家说了，细菌虽小，危害不小呀！所以，咱们要好好测定一下，确保这些小家伙们不把我们的饭菜搞得乌烟瘴气。

说到测定，咱们先得准备一些工具。

别担心，听起来复杂，但其实就是几样家伙：试管、培养基、还有一个可以让细菌繁殖的环境。

嘿，像是给细菌开了一家“五星级酒店”，只要给它们足够的养分和合适的温度，它们就会像春天的小花一样，争先恐后地冒出来。

你看，细菌们也是有自己的生活哲学的。

在培养过程中，要是不小心让外来的细菌混入，那可就糟糕了。

就像是派对上混进了不受欢迎的客人，气氛瞬间就冷了下来。

因此，保持环境的洁净很重要。

要确保每个步骤都做到位，这样才能准确测定出粪大肠菌群的数量。

等到结果出来，那真是如释重负，心里的大石头总算落下来了。

测定完后，数据也得好好分析。

数一数，这个肥料里的粪大肠菌群到底是个什么情况，是过高还是正常？如果超标了，那就得好好琢磨琢磨，哪里出了问题，是施肥的量不对，还是选择的肥料本身就有问题。

说白了，咱们就像是一名侦探，跟细菌们斗智斗勇，寻找真相。

再说了，细菌也不是全都坏，适量的粪大肠菌群在土壤中其实可以促进微生物的活动，提升土壤的肥力。

就像家里养的小狗狗，虽然有时候调皮捣蛋，但它的存在却能给生活增添很多乐趣。

所以，咱们要做的，不是一味地排斥这些细菌，而是要搞清楚它们的数量和比例，做到心中有数，才能更好地利用肥料。

粪大肠菌群检测方法20110520

粪大肠菌群的测定（多管发酵法）一、检测限二、试剂(均为分析纯)1、配制单倍乳糖蛋白胨培养液（1份量）(因有固体培养基，以下配置方法仅做参考)单倍乳糖蛋白胨培养液成分：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、乳糖5g、氯化钠5g、1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL、碳酸钠10.6g。

1.6%溴甲酚紫乙醇溶液（1mL）：称取溴甲酚紫1.6g倒入小烧杯，用少量95%乙醇溶解，移至100mL容量瓶，用95%乙醇多次洗小烧杯，洗液移入容量瓶，最后用95%乙醇定容至100mL，摇匀备用。

（滤纸、100mL小烧杯2只、100mL容量瓶1只、95%乙醇、玻璃棒、药匙、天平、滴管、溴甲酚紫）碳酸钠（10.6g）：称取10.6g碳酸钠溶于蒸馏水，并定容到100mL。

（100mL容量瓶1个、100mL小烧杯2只、碳酸钠）将单倍乳糖蛋白胨培养液成分蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、乳糖5g、氯化钠5g加热溶解于1000mL蒸馏水中，调节pH为7.2~7.4（用10%碳酸钠调节），再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于含有倒置的小玻璃管的试管(10mL左右)中，于高压蒸汽灭菌器中，在115℃灭菌20min，贮存于暗处备用（冰箱中可存放3个月）。

(>1L锥形瓶1只、1mL移液管1根、pH计、电炉、倒置的小玻璃管的试管60套（小试管(12x150mm ）+小套管（杜氏小管）（约6mm × 36mm )）、高压蒸汽灭菌器、试管架（10只入）、纱布和棉花)2、三倍配制单倍乳糖蛋白胨培养液：制法同上，除蒸馏水外，其余配方比例三倍。

3、EC培养液（1份量）将EC培养液所需成分胰胨20g、乳糖5g、胆盐三号1.5g、磷酸氢二钾（K2HPO4）4g、磷酸二氢钾（KH2PO4）1.5g、氯化钠5g，加热溶解于1L烧杯中，然后分装于含有玻璃倒管的试管中。

用10%Na2CO3调节pH以防止培养基灭菌后pH上升0.2左右（确定值需要前期在实验室寻找规律）。

化肥产品质量监督抽查实施细则

菏泽市产品质量监督抽查实施细则化肥编制：审核：批准：菏泽市产品检验检测研究院化肥产品质量监督抽查实施细则1 范围本规范适用于肥料产品质量市监督抽查，监督抽查产品范围包括复合肥料（复合肥料、硝基复合肥料、缓释复合肥料、控释复合肥料、硫包衣缓释复合肥料、脲醛缓释复合肥料、稳定性复合肥料、无机包裹型复合肥料）、掺混肥料（掺混肥料、缓释掺混肥料、控释掺混肥料、脲醛缓释掺混肥料、稳定性掺混肥料、硫包衣缓释掺混肥料、无机包裹型掺混肥料）、有机-无机复混肥料、有机肥料、尿素、复合微生物肥料、生物有机肥、脲胺氮肥、农用微生物菌剂、水溶肥料、硫酸铵。

本规范内容包括产品分类、术语和定义、企业规模划分、检验依据、抽样、检验要求、判定原则、异议处理复检及附则。

2 产品分类2.1 产品种类2.1 产品分类及代码产品分类及代码见表1表1 产品分类及代码2.2产品按养分总类分2.2.1复合肥料（复合肥料、硝基复合肥料、缓释复合肥料、控释复合肥料、硫包衣缓释复合肥料、脲醛缓释复合肥料、稳定性复合肥料、无机包裹型复合肥料）、掺混肥料（掺混肥料、缓释掺混肥料、控释掺混肥料、脲醛缓释掺混肥料、稳定性掺混肥料、硫包衣缓释掺混肥料、无机包裹型掺混肥料）、有机-无机复混肥料、有机肥料、复合微生物肥料、生物有机肥、农用微生物菌剂、水溶肥料2.2.2单一肥料可分为尿素、脲铵氮肥、硫酸铵，3术语和定义复混肥料：氮、磷、钾三种养分中，至少有两种养分标明量的由化学方法和（或）掺混方法制成的肥料。

复合肥料：氮、磷、钾三种养分中，至少有两种养分标明量的仅由化学方法制成的肥料，是复混肥料的一种。

掺混肥料：氮、磷、钾三种养分中，至少有两种养分标明量的由干混方法制成的颗粒状肥料，也称BB肥。

有机-无机复混肥料：含有一定量有机质的复混肥料。

单一肥料：氮、磷、钾三种养分中仅具有一种养分标明量的氮肥、磷肥和钾肥的通称大量元素(主要养分)：对元素氮、磷、钾的通称。

中量元素（次要养分）：对元素钙、镁、硫等的通称。