动物感染试验

动物感染试验

小白鼠资料：一天前攻毒，呈死亡状态，雄性。

临床观察：小白鼠全身轻微僵硬，可视粘膜呈苍白色，皮肤轻微发紫。剖检观察：1.腹膜光滑均匀白色，无弹性；胸膜有轻度的粘连。

2.心包膜有轻度的粘连，有少量的心包积液，心脏表面附有纤维样物质，不光滑。肺脏呈深红色，间质增宽，切开有液体流出。

3.肝脏呈暗红色，边缘5mm均变为黑紫色，肝门附近有数个针孔大小的红斑，指压不褪色，切面轻微外翻。脾脏呈暗红色，边缘有数个米粒大的隆起，切开有深红色凝胶样物质。肾脏，表面光滑，切面轻微外翻。肠管质软，无弹性。

抹片镜检细菌形态（革兰氏染色）：红色的球杆状菌，有些二到三个连续排列，有些单独存在；同时也有些两节排列的蓝色的长杆状菌。但肝、脾、肺抹片视野均以红色球杆菌为主。

鉴定感染小鼠细菌：

1.初步判断：结合小鼠的病理剖检、抹片染色镜检结果可以初步猜想攻毒细菌为副猪嗜血杆菌或是胸膜肺炎放线杆菌。

2.鉴定方法：

1）病料采集：心包积液、肺、肝、脾等病变组织

2）病料抹片，革兰氏染色镜检（已做）

3）血液琼脂、巧克力琼脂、巧克力琼脂+V因子培养基分离培养

4）菌落观察溶血与否 V因子需要，革兰氏染色镜检观察

5）选取典型菌，分别进行下列试验

①生化试验：接触酶试验、葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖试验等

②血清凝集试验血清定型鉴定

③“卫星现象”试验

④分子生物学鉴定：PCR片段扩增16SrRNA分析

6)条件允许，可以做动物再接种，看能否引起类似的症状和分离到相同的病原菌。