植物激素的ELISA测定
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
乙烯微孔板。
精品课件
Fra Baidu bibliotek
实验步骤
包被（每孔100μl包被液，37℃过夜）
洗涤
加DBⅡ封板（每孔100μl ，37℃ 30min）
洗涤
加IAA标准液或样液（每孔50μl ）
加IAA抗体（每孔50μl ， 37℃ 0.5h）
洗涤 加酶标二抗（每孔100μl ， 37℃ 0.5h ）
洗涤
显色（每孔100μl OPD基质液， 37℃ 15精-品20课mi件n）
终止反应
读数（OD490）
数据计算
• 根据标注溶液作出标注曲线（以㏒[IAA]为 横坐标、以㏑[Bi/(B0-Bi)]为纵坐标）， 从中找出样液的浓度，具体参照实验指导。
精品课件
实验 6 植物激素的ELISA测定
精品课件
试剂与仪器
• 1、试剂 • 稀释缓冲液（DBⅠ、DBⅡ） • 包被缓冲液（CB） • 基质缓冲液（MB） • 硫酸（3M） • IAA包被液、标准液、兔抗IAA抗体、辣根
过氧化物酶标记抗兔Ig抗体及邻苯二胺。
精品课件
试剂与仪器
• 2、仪器 • 酶联免疫读数仪、微量加样器、96孔聚苯
精品课件
Fra Baidu bibliotek
实验步骤
包被（每孔100μl包被液，37℃过夜）
洗涤
加DBⅡ封板（每孔100μl ，37℃ 30min）
洗涤
加IAA标准液或样液（每孔50μl ）
加IAA抗体（每孔50μl ， 37℃ 0.5h）
洗涤 加酶标二抗（每孔100μl ， 37℃ 0.5h ）
洗涤
显色（每孔100μl OPD基质液， 37℃ 15精-品20课mi件n）
终止反应
读数（OD490）
数据计算
• 根据标注溶液作出标注曲线（以㏒[IAA]为 横坐标、以㏑[Bi/(B0-Bi)]为纵坐标）， 从中找出样液的浓度，具体参照实验指导。
精品课件
实验 6 植物激素的ELISA测定
精品课件
试剂与仪器
• 1、试剂 • 稀释缓冲液（DBⅠ、DBⅡ） • 包被缓冲液（CB） • 基质缓冲液（MB） • 硫酸（3M） • IAA包被液、标准液、兔抗IAA抗体、辣根
过氧化物酶标记抗兔Ig抗体及邻苯二胺。
精品课件
试剂与仪器
• 2、仪器 • 酶联免疫读数仪、微量加样器、96孔聚苯