微生物实验室标本接种程序

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微生物接种流程规范版本

一、痰液标本1.痰液标本接种流程1)接种编号：1401xx2)接种培养基：血平板中国蓝平板嗜血巧克力平板金黄色葡萄球菌显色板（CHRO）附加：呼吸科，血液科，肿瘤科，ICU，感染科种沙保弱平板3)培养条件：35℃温箱:血平板、中国蓝平板、金黄色葡萄球菌显色板（CHRO）35℃ + 5%CO2温箱：嗜血巧克力平板25℃温箱：沙保弱平板（装进塑料密封袋或纸胶带封口）2.痰涂片及染色镜检流程1)涂片编号：革兰氏染色：1404xx抗酸染色：1406xx2)一般细菌涂片镜检A.涂片：挑取痰液均匀涂于玻片表面，风干备用。

B.革兰氏染色：龙胆紫（30S）→碘液（60S）→丙酮乙醇（30S）→沙黄（30S）C.痰样本质量评估：上皮细胞≥25/LP,判定为不合格标本上皮细胞≤25/LP，判定为合格标本3.浓集法抗酸杆菌涂片镜检1)痰标本制备：取全部标本于50ml离心管中，加等量84消毒液混匀后静置15min， 3000rpm/min离心30min，弃上清取沉淀涂片2)抗酸染色：石碳酸复红（5min）→盐酸酒精（60S）→亚甲蓝（30S）3)结果判读：二、咽拭子标本1.咽拭子标本接种流程接种编号：1401xx接种培养基：血平板培养条件：35℃温箱一般细菌涂片镜检:同痰标本1404xx三、尿液标本1.尿液标本接种流程接种编号：1402xx接种培养基：血平板（1ul尿液标本均匀涂抹,行菌落计数）中国蓝板(四区划线)培养条件：35℃温箱一般细菌涂片镜检(1404xx)尿标本制备：取15ml标本3000rpm/min离心15min，取沉淀涂片涂片染色：步骤同痰样本四、生殖道分泌物标本1. 生殖道分泌物标本接种流程接种编号：1402xx接种培养基：血平板中国蓝平板淋球菌TM平板培养条件：35℃温箱：血平板、中国蓝平板35℃ + 5%CO2温箱：淋球菌TM平板2. 一般细菌涂片镜检(1404xx)同痰标本五、宫颈分泌物（B族链球菌培养）1.宫颈分泌物接种流程接种编号：1402xx接种培养基：血平板B群链球菌筛选平板（STRB）[一块种六个标本] 培养条件：35℃温箱六、脓液标本1.开放性脓液标本接种流程接种编号：1402xx接种培养基：血平板中国蓝平板复合因子巧克力平板培养条件：35℃温箱2.封闭腔脓液标本接种流程接种编号：1402xx接种培养基：血平板中国蓝平板厌氧平板（放于厌氧产气袋GENbag anaer中）培养条件：35℃温箱3.一般细菌涂片镜检(1404xx)同痰标本七、无菌体液标本1.无菌体液标本接种流程接种编号：1407xx接种瓶：取1-3ml标本直接注入儿童瓶增菌培养。

微生物标本的接种及流程

微生物标本的接种及流程Microbial specimen inoculation is an essential process in microbiology that involves the transfer of a specific microorganism onto a solid culture medium for growth and analysis. This process is crucial for identifying and studying various pathogens, determining antibiotic susceptibility, and conducting research on different microbial species. 微生物标本接种是微生物学中一个至关重要的过程，涉及将特定微生物转移到固体培养基上进行生长和分析。

这个过程对于识别和研究各种病原体、确定抗生素敏感性以及对不同微生物种类进行研究至关重要。

The first step in the inoculation process involves obtaining a sample of the microorganism through various techniques such as swabbing, scraping, or collecting specimens from clinical samples. It is crucial to handle the sample carefully to prevent contamination and ensure the accuracy of the results. 接种过程中的第一步涉及通过擦拭、刮取或从临床样本中收集标本等各种技术获得微生物样本。

必须小心处理样本，以防止污染并确保结果的准确性。

临床微生物检验标本采集程序

临床微生物检验标本采集程序1 标本采集的基本原则：1.1 严格的无菌操作，避免污染，避免来自寄生菌的污染，应当保证每份样本代表感染过程｡1.2 选择正确的解剖部位、合适时间、合乎规程技术，采集样本。

1.3 选择合适的部位采集用于厌氧菌培养的样本。

1.4 要收集足够量的样本，量少可能导致假阴性结果。

1.5 应尽可能在病人使用抗菌药物前采集样本，如不能停用抗菌药物，应于下次抗菌药物应用前采集。

1.6 血培养样本在病人寒颤和发热初起时为最佳时机。

1.7 导尿留取样本时，不可从尿袋中采集样本。

引流液样本不能直接从引流袋放出，因引流液在袋中潴留时间太长容易滋生细菌。

1.8 各类微生物样本不宜加防腐剂1.9 盛标本的容器须先经灭菌（煮沸、高热、或高压灭菌），但不得用消毒剂或酸类处理。

1.10 有些临床标本还要注意采集的时机和部位，如伤寒沙门菌的阳性检出率，发病的第1～2 周采集血液，第3～4 周采集大便和尿液，阳性率较高。

1.11 样本的运送处理和储存规定1.11.1 样本2h之内送到实验室。

1.11.2 血培养瓶如果不能及时送检，应置室温保存（但不得超过24 小时）。

禁止将不能及时送检的血培养瓶放置冰箱保存。

1.11.3 淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌培养时，样本不能放4℃条件保存，应在30min内送检，并注意保温。

1.11.4 痰培养疑为嗜血杆菌、肺炎链球菌感染时，应立即送检，因为这些细菌在自然环境中极易死亡。

1.11.5 导管样本如不能在规定时间内送检，应在盛装导管的容器中加少量无菌生理盐水，以免导管干燥，病原微生物死亡。

1.11.6 活检组织样本和眼分泌物样本应在30min内送检，如样本较小或不能在规定时间内送检，应在盛装组织的容器中加少量无菌生理盐水，以免样本干燥，病原微生物死亡。

不可用纱布包裹组织样本。

2 常见临床微生物标本的采集方法。

2.1 血液及骨髓样本2.1.1 检验项目：血液及骨髓培养。

2.1.2 适应症病人出现以下临床表现：发热（38℃）或低温（36℃）、寒战、白细胞增多（白细胞数>10×109/L，特别有“核左移”时）、皮肤粘膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低、C反应蛋白升高及呼吸加快、血液病患者出现粒细胞减少、血小板减少等临床可疑血流感染时应采集血液样本进行血培养及骨髓培养。

微生物的实验室培养2

5、菌种的保存
1、临时保藏：
接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。
2、长期保存：
甘油冷冻管藏法
微生物的类群
病毒界原核生物界（如细菌、放线菌等）真菌界（如酵母菌、霉菌等）原生生物界
•细菌的结构
细胞壁一般结构细胞膜
细胞质(核糖体、质粒等) 拟核
特殊结构荚膜、鞭毛、芽孢
培养基的配制
培养基的种类
• 理想的凝固剂应具备以下条件： –不会被微生物分解利用； –不会因高温灭菌而受到破坏； –在微生物生长的温度范围内保持固体状态 –对微生物及操作人员均无毒害作用； –透明度好、凝固力强； –价格低廉，配制方便。
• 常用的凝固剂——琼脂
–主要成分是硫酸半乳聚糖 –熔点为96℃
凝固点为40℃ –透明度强。
一、无菌技术
A.培养细菌用的培养基或培养皿灭菌 B.玻棒、试管、烧瓶和吸管灭菌 C.接种环、接种针灭菌 D.实验操作者的双手消毒
二、基本操作程序
1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
A.培养细菌用的培养基或培养皿。 B.玻棒、试管、烧瓶和吸管。 C.接种环、接种针。 D.实验操作者的双手。
一、无菌技术
消毒
使用较温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。
灭菌
使用强烈的理化因素杀死物体内所有的微生物，包括芽孢和孢子。
一、无菌技术
• 不加氮源的无氮培养基分离固氮菌
• 不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物
• 加入青霉素等抗生素的培养基分离导入了目的基因的受体细胞

临床微微生物标本的采集注意事项接种及涂片染色

第三十页，共67页
导管尖端阳性培养结果
第三十一页，共67页
6、脑脊液标本
⑴ 培养基：5%羊血琼脂、5%兔血巧克力琼脂、
葡萄糖肉汤
⑵ 培养环境：置5 % CO2、35℃环境培养。
第三十二页，共67页
7、胆汁或胸水或腹水标本
⑴ 培养基：如标本量大时可按血液培养方法直接
取16-20ml分别种入需氧和厌氧培养瓶。如标本
的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗。
5、长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取
尿标本。
第四页，共67页
（三）分泌物的采集
1、对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、扁桃
体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶。应先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的组织送检。
宜做培养的标本；
当白细胞≤10个／L ，上皮细胞≤25个／L时再参照油
镜观察标本中细菌分布作出判断。
第四十八页，共67页
痰镜检的判断标准：
当标本中细菌种类超过3种以上，未见到钎毛拄状上皮细胞，作为不合格标本；如见到数量不等的白血
胞或钎毛拄状上皮细胞或两者同在，含1-2种不同细
菌，可考虑继续培养，结果可根据病情再作分析；当涂片中见到1-3种细菌，少量的扁平上皮细胞，少量或较多钎毛拄状上皮细胞均可按合格标本继续培养。
10ml）。 9、粪标本培养，放置时间过长，已干。
第十七页，共67页
三、分离培养基本操作规范
合格的标本是保证培养成功的重要条件，但如果没有适宜的分离培养基、培养环境以及正确的处理方法同样不能获得好的结果，为此制定
如下基本操作规范以保证致病细菌分离成功。

临床微生物实验室标本处理流程详细

微生物实验室标本处理流程涂片革兰染色，其他形
态：1.弧形菌属根据标本种类标本接种后油镜下观察染色 2.弯
曲菌3.酵母菌上显板挑选可疑菌落，35°C培养，情况和细菌形
态4其他菌：鉴定参照《全国必要时可做18~24h 检验操作规
程3版》） CO2，厌氧培养 G+球菌G-球菌：主要奈瑟G-杆菌 G+
杆菌（分芽菌属和布兰汉菌属（多为污为主孢和无染，结合
临芽孢）床）触酶（+）触酶试验氧化酶触酶（-）：链球菌属
氧化酶（+）：氧化酶(-): 血浆凝固酶非发酵菌（不动，嗜肠杆
菌属麦除外）血浆凝固酶血浆凝固酶（+）（-）参照《全国
检验操作规一般采用肠杆菌属鉴定板程3版》鉴定，并做链条，
沙门志贺加做血清学球菌属药敏鉴定葡萄糖O/F F（+）：金F （-）：新生霉新生霉素参照《全国检验操作规程按照肠杆菌属
做药敏微球菌试验并报告黄色葡萄素（+）：（-）：腐生3版》
鉴定按照非发酵菌球菌葡萄球菌属做药敏试验并报告表皮葡萄
球菌备注：此图为粗略图，以全国检验操作规程3版为准按照
葡萄球标本处理：1.痰液：血板+麦康凯（插管痰注明）菌属做
药敏 2.大便：血板+麦康凯+SS平板（稀便注明）试验，报
告 3.尿：血板+麦康凯（中段尿注明，用大环取样）
4.棉签取样的标本: 血板+麦康凯(最好以生理盐水湿润后接种)
5.带菌量少的标本：需要增菌处理注意事项：接种标本后平板
注意注明接种时间和标本编号，性病衣原体筛查要留标本于冰
箱中。

支原体标本避免干燥和高温，及时处理为宜。

微生物标本接种(两篇)2024

引言概述微生物标本接种是一项重要的实验室技术，它在微生物学研究、医学诊断和食品工业等领域中起着关键作用。

本文将继续介绍微生物标本接种的相关内容，包括无菌技术、常用标本接种方法、优化接种条件、接种后的菌落观察与鉴定，以及相关的规范要求。

通过本文的阐述，读者将进一步了解微生物标本接种的重要性以及操作技巧。

正文内容一、无菌技术1.理解无菌技术的意义和目的a.防止外源性微生物污染b.保证实验结果的准确性2.熟悉无菌技术的基本要求a.选择适当的工作环境与设备b.采取适当的个人防护措施c.消毒操作的重要性与方法二、常用标本接种方法1.心形接种法a.标本接种器的选择与使用b.接种斜面固体培养基的操作步骤c.控制接种量的技巧2.点菌接种法a.接种环的选择与使用b.点菌接种的操作流程c.避免混合样品的方法3.涂片接种法a.特定细菌的涂片接种方法b.真菌与酵母菌的涂片接种注意事项c.涂片的热固化与染色技巧三、优化接种条件1.温度控制的重要性a.理解不同微生物的生长温度要求b.设定合适的培养温度2.湿度和氧气的影响a.理解湿度对微生物生长的影响b.确保适当的氧气供应3.营养物质的选择与配比a.确定微生物所需的营养物质b.确保培养基的合理配比四、接种后的菌落观察与鉴定1.菌落形态的观察与描述a.形态特征的分类与测量b.菌落颜色的描述与分析2.镜检观察技巧a.镜检与染色的操作流程b.不同染色方法的选择与应用3.菌种鉴定的基本步骤a.生理生化特性的鉴定b.分子生物学方法的应用五、规范要求与注意事项1.实验室安全与操作规范a.安全规章制度的遵守b.废物处理与消毒措施的要求2.实验记录与数据分析a.正确记录实验数据与结果b.数据的统计与分析方法3.质量管理与质控措施a.核心实验室的质量管理要求b.质控措施的实施与监督总结微生物标本接种是微生物学研究和医学诊断中至关重要的步骤。

通过本文的介绍，我们了解了无菌技术的重要性以及常用的标本接种方法。

微生物标本接种操作规程

微生物标本接种操作规程微生物标本接种操作规程一、接种前准备1. 检查试剂和培养基的使用期限和保存情况，确保其质量可靠。

2. 准备好所需的培养器具和实验用具，如试管、培养皿、培养瓶、个体接种环、接种针、显微镜等。

二、接种环境准备1. 实验室内要保持整洁，无杂物和灰尘，防止外界微生物的污染。

2. 实验室要保持恒定的温度和湿度，避免温度过高或过低、湿度过低或过高对微生物生长的影响。

3. 空气中要保持无菌状态，使用高效过滤器过滤空气，防止微生物的传播和污染。

三、接种手部消毒1. 洗手后，戴上实验手套，确保双手干燥。

2. 取适量洗手液，搓揉双手至起泡，按照手部清洁步骤进行洗手。

3. 洗手液清洗后，用自来水充分冲洗干净。

4. 用干净的纸巾或者吹风机将双手彻底擦干。

5. 手套使用后，及时更换。

四、接种操作1. 将待接种的微生物培养物摇匀，取适量的培养物。

2. 打开培养器具和培养基，注意避免接触容器口和培养基内壁，避免污染。

3. 将所取的适量培养物分别接种在相应的培养器具中，如试管、培养皿、培养瓶等。

4. 接种时要避免接触到环境中的空气，以免引入外来微生物。

5. 接种环具要经过高温灭菌处理后再取用，避免对微生物生长的影响。

6. 接种完毕后，及时将培养器具密封，避免细菌外界的污染。

五、接种后处理1. 接种完毕后，将接种环具和接种针等实验用具用适当方法进行处理，如高温炙烧、高压灭菌等。

2. 培养器具和培养基未使用完的部分要密封保存，避免受到外界的污染。

3. 接种完毕后，要及时将工作台面清洁干净，防止微生物交叉污染。

六、接种操作注意事项1. 接种操作要迅速而准确，避免接触到环境中的空气，以免引入外来微生物。

2. 接种环境要保持无菌状态，严格控制操作员的接触，避免污染。

3. 接种操作要注意卫生与安全，避免操作员自身的污染和微生物的传播。

4. 接种操作之间要经常更换实验用具，避免传播微生物。

七、接种结果判断与记录1. 接种完成后，根据培养基的特性，放置在相应的培养条件下进行培养。

微生物标本接种[1](共81张PPT)

大多数尿路病原菌能在血平皿上生长麦康凯平皿有鉴别功能，为革兰阴性杆菌的选择性培养基
尿培养的划线方式
第一区 = 50,000 cfu/ml 第二区= 75,000 cfu/ml 第三区= 100,000 cfu/ml
沿中心线向下= 50,000 cfu/ml
长向边缘= 100,000 cfu/ml
➢管腔刷 ➢定量培养 (CVC & 外周血)
➢达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
哪部分用于培养
Maki 滚动法
导管尖阳性培养结果
苛养菌
不要放置常规血培养>5天
•由如下微生物引起的可疑的败血症或心内膜炎:
霉菌(组织胞浆菌 , 镰刀菌, 等等
秕糠马拉癣菌
军团菌属巴尔通体
3 分离管
新型隐球菌
血液培养
【特别提醒】厌氧菌从血液中培养出厌氧菌的比率相对比较少，不推荐每个
病人常规增加一个厌氧血培养，但如果必要，选用其配套的厌氧培养基来培养厌氧菌。营养苛刻的细菌（Fastidious Bacteria）
布鲁氏菌属可以在常规血液培养基中生长，并且尽管可以在三天内分离到，但是推荐培养21天，且有必要进行末次接种。
尿培养的培养基
•5%血平皿（美国用羊血，欧洲用马血） •伊红美兰平皿（EMB）大肠埃希菌为金属绿
•麦康凯平皿 – LF vs NLF
•胱氨酸-乳糖-低电解质平皿（CLED） •显色平皿(BBL公司的CHROMagar ，Hardy BluEcoli Biplate)
• CUTI（Oxoid公司）; CPSID2（生物梅里埃公司）; UriSelect （Biorad公司）;
效。
血培养
常规血液培养基不能分离钩端螺旋体。分枝杆菌（Mycobacteria）使用常规血培养

微生物标本采集与送检

微生物标本的采集与送检一、血液培养1、血液培养的送检指征：⑴症状指征：发热（≥38℃）、皮疹、肝脾肿大、关节疼痛、神志不清、昏迷或休克。

⑵疾病指征：化脓性病灶或损害、粘膜损伤性疾病、肝脏疾病、糖尿病、血液疾病及恶性肿瘤、艾滋病、呼吸道感染或呼吸衰竭、长期输液或导管介入疾病、血液透析患者。

2、采集流程：⑴培养瓶消毒程序：75%酒精擦拭橡皮塞，作用60秒后，用无菌棉签清除橡皮塞表面残余酒精；⑵皮肤消毒程序：75%酒精擦拭静脉穿刺部位，从穿刺点向外花圈消毒，至消毒区域直径3cm以上，作用60秒，待酒精挥发干燥后采血；⑵静脉穿刺和培养瓶接种程序：用注射器无菌穿刺取血（成人：5-10ml，婴幼儿1-2ml），直接注入血培养瓶后，轻轻颠倒混匀并立即送检。

3、注意事项：⑴血培养采血最好不要和其他检验项目采血同时进行，否则应先采血培养标本；⑵切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血；⑶不宜从静脉导管或静脉留置口取血；⑷建议在患者出现寒战、体温升高前采血。

如患者有明显的发热前期症状，在患者寒战前或寒战后1h内采血可提高阳性率；⑸应同时在不同部位或在不同时间段内采集2次以上标本，只采集一瓶的血培养标本是不允许的，因为一瓶血培养标本的培养结果很难解释是致病菌还是污染菌。

⑹一般情况下（怀疑为持续性菌血症者除外），在采血后的2-5天内，无需重复采血培养标本。

二、脑脊液培养1、脑脊液培养的送检指征：⑴症状指征：发热等感染性全身性症状、颅内压升高症状、脑膜刺激症状等。

⑵疾病指征：化脓性、非化脓性脑膜炎。

2、采集方法：检查和细胞计数、⑵经脑室导管采集：无菌操作采集脑部脓肿或活检标本的抽吸物，立即送检。

3、注意事项：⑴如果只采集了一管脑脊液，应首先送到细菌室；⑵做脑脊液培养的同时，建议同时做血培养。

三、胸腹水培养1、胸水培养的送检指征：⑴症状指征：多伴有胸痛、发热、胸腔积液。

⑵疾病指征:细菌性肺炎引起的胸膜炎、真菌感染引起的胸腔积液。

2、腹水培养的送检指征：⑴症状指征：腹部有积液伴腹痛、呕吐、肌紧张、肠鸣音弱或消失等。

微生物标本的核收和接种程序

微生物标本的核收和接种程序1 目的对微生物检验的标本制定验收和评估程序，以保证检验前的质量控制，并对合格的标本进行规范的接种，有针对性的分离出有临床意义的致病菌。

2 适用范围适用于所有的微生物检验标本。

3 职责微生物室所有工作人员均应执行本程序。

4 程序内容4.1 标本的交接程序标本转运人员将微生物检验标本送至微生物室后，由微生物室工作人员进行电脑签收，确认接收时间。

检验申请单或条码信息应包括标本来源和临床诊断，必要时说明感染类型和/或目标微生物。

4.2 标本的评估与处理4.2.1 标本的验收处理：当标本出现以下情况时，应按不合格标本处理，同时在《不合格检验标本记录表》上登记。

a)化验单与标本上病人姓名不符，退回原送检单位，化验单未注明标本来源及培养项目，查询正确情形。

b)送检容器不当或标本类别错误，在 LIS 系统中将条码退回，注明原因，建议重新留取。

c)条码信息不完整，应电话联系临床科室查询正确情形。

d)采集容器有破损或标本有泄漏、污染时，应在 LIS 系统中将条码退回，注明原因，建议重新留取。

e)标本未注明身体部位者，进一步查询。

f)拭子样本要求厌氧培养，退回条码，并注明标本留取不合格，建议用运送转运培养基运送。

g)痰液采取不当（如唾液）或干燥拭子，退回条码，并注明标本留取不合格，建议重新留取。

h)尿液置室温超过 2 小时，退回条码，并注明标本留取不合格，建议重新留取。

i)一支无菌拭子有多项培养目的（如细菌培养、支原体培养、衣原体检测等），联系临床补送标本。

j)进行 G 试验检测项目的血标本有凝块，或离心后发现有溶血、脂血、黄疸时，退回条码，并注明标本留取不合格，建议 1 周后重送。

k) 以上不合格标本的条码在 LIS 系统退回后，半小时内相应临床科室无人确认此事时，应立即电话联系，告知并敦促确认，并在《不合格检验标本记录表》上登记标本信息、退回原因及临床科室确认人信息。

4.3 标本的电脑签收4.3.1 有条码标本（无论是门诊标本还是住院标本）进入 LIS 系统“微生物”软件程序，点击“接收登记”按钮，将光标移至“申请单号”，扫描标本容器上的标本条码，系统根据已设定的编号规则，自动生成该标本的编号，如为急诊标本，在生成标本号的同时可弹出急诊字样，提醒优先处理。

微生物血液标本的接种流程

微生物血液标本的接种流程1.洗手并穿戴好实验室衣物和手套。

Wash hands and put on laboratory coats and gloves.2.拿出需要接种的微生物血液标本。

Take out the microbiological blood specimen for inoculation.3.在无菌条件下打开血液标本管。

Open the blood specimen tube under aseptic conditions.4.使用无菌的吸取器将标本转移到无菌培养皿中。

Transfer the specimen to a sterile culture plate using a sterile pipette.5.涂布或点接种标本在培养基上。

Spread or streak the specimen onto the agar plate.6.用无菌的棉签将标本均匀涂抹在培养基表面。

Spread the specimen evenly on the agar surface with a sterile cotton swab.7.将接种好的培养皿放入孵化箱中。

Place the inoculated plates into the incubator.8.调整培养箱的温度和湿度以促进微生物的生长。

Adjust the temperature and humidity of the incubator to promote microbial growth.9.根据需要，对接种的血液标本进行不同的培养条件和时间。

Culture the inoculated blood specimen under different conditions and for different lengths of time as required.10.在不同的培养条件下观察微生物的不同生长情况。

临床微生物检验标本的采集、运送及接种要点

针对不同的微生物种类和检验目的，选择适当的培养基和试剂，确保微生物能够在适宜的环境中生长繁殖。
检查采集器具和试剂的有效期
在采集前，检查采集器具和试剂的生产日期和有效期，确保采集过程中使用的物品符合质量要求。
无菌操作技术规范培训
01
02
03
培训采集人员
对采集人员进行无菌操作技术规范的培训，确保他们掌握正确的采集方法和注意事项。
报告审核
由经验丰富的专业人员对报告进行审核，确保报告的准确性和可靠性。
报告存档
对出具的报告进行存档管理，以备后续查询和追溯。
07 注意事项与常见问题解答
采集过程中注意事项
严格无菌操作
采集标本时应避免污染，确保无菌操作，以免影响检验结果。
采集适量标本
采集标本量应适中，过多或过少均可能影响检验结果。
定期监测
定期对保存条件进行监测和记录，确保标本保存环境稳定可靠。
超出保存期限处理
对于超出保存期限的标本，应按照相关规定进行处理，避免误用或浪费。
05 标本接种操作要点
接种前培养基准备工作
选择合适培养基
根据待检微生物种类选择合适的培养基，确保能够提供其生长所需的营养物质和环境条件。
培养基灭菌
对培养基进行高压蒸汽灭菌或干热灭菌，以消除杂菌和污染。
将拭子插入鼻腔至鼻咽部，轻轻旋转后取出。
03
02
咽拭子
用无菌拭子擦拭咽后壁及两侧扁桃体，避免触及舌部。
采集容器
应使用无菌、有盖、干燥的容器，痰标本也可使用无菌痰杯。
04
其他类型标本采集
脑脊液标本
由医生进行腰椎穿刺采集，过程中需严格无菌操作。
穿刺液标本

微生物接种方法

常用的几种微生物接种方法接种细菌应用接种针（环）来沾取细菌标本，进行接种。

接种环与接种针为用白金丝或合金丝所制，亦可用电炉丝代替，因它能耐高热且散热快，便于接种前后通过火焰灭菌（整个接种环烧红即达到灭菌目的）。

在使用接种环时一般用右手持笔式较为方便，左手可持培养基进行配合，其接种程序可分为：灭菌接种环→稍冷→沾取细菌样品→进行接种（包括：启盖或塞、接种划线、加盖或塞）→进行接种环灭菌等五个程序。

不同培养基，接种方法也不同，分述如下：一、平板划线接种法（分离培养法）是将细菌分离培养的常用技术，其目的是将混有多种细菌的培养物，或标本中不同的细菌（病原菌与非病原菌）使其分散生长，形成单个菌落或分离出单一菌株，便于识别鉴定。

平板划线接种方法较多，其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。

（一）分段划线法平板分段划线(左)及培养后菌落分布图本法多用于含菌量较多的标本。

方法是以接种环沾取少许样品先涂布于平板培养基表面一角作为第一段划线（划线时接种环与培养基表面呈45度角），然后将接种环置火焰上灭菌，俟冷（可接触平板试之，如不融化琼脂，即已冷却），于第二段处再作划线，且在开始划线时与第一段的划线相交接数次，以后划线不必再相接，待第二段划完时，再如上法灭菌，接种划线，依次划至最后一段，灭菌接种环。

这样每一段划线内的细菌数逐渐减少，即以获得单个菌落，划线接种完毕，盖好平皿盖，倒置（平板底部向上）于37℃温箱中培养。

（二）连续划线法：此法多用于接种材料中含菌数量不太多的样品或培养物。

方法是先将样品或培养物涂于平板表面的一角，然后用接种环自样品涂擦处开始，向左右两侧划开并逐渐向下移动，连续划成若干条分散的平等线。

二、斜面接种法此法主要用于移种纯菌，使其增殖后用于鉴定或保存菌种。

通常是从平板培养物上挑取某一单独菌落或者从一支已长好的斜面菌种，移种至斜面培养基上，接种步骤如下（以从已长好的斜面菌种转接为例）：（一）左手拿两支试管，一支为经灭菌的斜面，另一支为已长好的菌种。

微生物实验室标本处理程序

微生物实验室标本处理程序
1.目的
规范标本处理标准操作规程，
2.范围
临床微生物标本
3.职责
微生物检验人员严格执行本程序
4.程序
4. 1血液标本
接收标本后，立即对标本进行编号、登记。

门诊病人要同时登记住址、联系电话等信息。

将血培养瓶置于全自动血培养仪中培养。

4.2痰标本
4.2. 1接收编号、登记后的痰标本，加入痰消化剂或无菌生理盐水处理。

用无菌棉签挑取标本分别涂布于血琼脂平板、巧克力琼脂平板、中国蓝平板的第一区，然后用接种环划第二、第三区..…
4.2 3同时做痰涂片镜检
4.3咽拭子标本涂布于血琼脂平板、巧克力琼脂平板、麦康凯平板的第一区，然后用
接种环划第二、第三区..…
4.4脑脊液、胸腹水等穿刺液
床边抽取体液标本1〜2ml注入多功能体液培养瓶或需氧血培养瓶，即送实验室。

接收标本后，立即对标本进行编号、登记，置孵育箱培养。

脑脊液标本需涂片检查。

4.5粪便或肛拭标本
接收标本后，立即对标本进行编号、登记，取粪便脓血部位标本根据检验申请单要求选择平板，立即接种。

4.6尿标本
接收标本后，立即对标本进行编号、登记，将尿标本混匀，用10^1定量接种环立即接种血琼脂平板、中国蓝平板，分离细菌和菌落计数。

微生物标本接种

微生物标本接种
1 痰、咽拭子、灌洗液：接种血平皿、巧克力（嗜血型）、中国兰各一个；
2 尿、脑脊液、胆汁、胸腹水等无菌体液标本：接种血平皿一个；
3 阴道分泌物、尿道分泌物：接种血平皿、巧克力（普通型）各一个；
4 大便标本：接种MAC、SS各一个；
5 导管尖端：接种血平皿一个（将导管尖端放入血平皿后用接种环滚动，导管尖段放入血平皿一起培养）；
6 分泌物（眼、耳、伤口等）、脓液标本：接种血平皿一个；
7 血培养瓶阳性报警：转接种血平皿、巧克力各一个（玻片涂片一块，革兰染色）。

注意事项：
1未收费标本（需接种平皿的标本）在标本接收界面扫码后先点“接收清单打印”后再存入，可以直接打印出微生物工作单（不用手写）；
2 编号时请注意勿重号；需手写工作单的，请在接收日期、科室床号、微生物编号、姓名、住院号、标本类型、接种平皿处填写清楚；
3 接种标本时请分区划线（三区或四区）；
4 所有接种标本请涂片，一块玻片可用蜡笔划线涂3个标本(玻片上写上标本编号)；
5 所有初代培养标本请放入5%的CO2培养箱中。