氯化汞与家兔急性肾功能不全
急性肾功能不全
氯化汞与家兔急性肾功能不全【摘要】目的学习用氯化汞复制急性肾功能不全的动物模型；观察急性肾功能不全时蛋白尿、血肌酐、肾酚红排泄率的变化，并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。
方法本次实验共分为两大组，肾衰组和对照组。
用分光光度计测量吸光度的方法算出血肌酐、尿肌酐和酚红排出量，然后再通过计算公式计算出肌酐清除率和酚红排泄率。
结果肾衰模型组家兔肾脏体积变大，颜色较浅，外表出现颗粒，体重比正常组重得多，血清肌酐41.7mg%，尿肌酐12.25mg%；对照组血清肌酐7.97mg%，尿肌酐2.25mg%，酚红排泄率50%。
结论急性肾功能不全会引肾小管上皮细胞受损，从而导致起肾小管的重吸收功能障碍和分泌功能障碍。
【实验原理】肾脏是一个多功能的器官，具有排泄、调节、内分泌等功能。
引起急性肾功能不全主要原因有肾前性、肾性、肾后性三种。
氯化汞是重金属盐，家兔皮下或肌肉注射10g/L氯化汞，可引起以肾小管坏死为主的急性肾功能不全。
急性肾功能不全临床分为少尿型和非少尿型两种，前者多见。
少尿型一般出现少尿甚至无尿，等渗尿，尿钠浓度高，尿常规可发现血尿，镜检有多种细胞并有管型〔颗粒管型和细胞管型等〕。
血液尿素氮〔BUN〕和血浆肌酐进行性升高，肌酐从尿中排出障碍，尿肌酐/血肌酐<20，与功能性肾衰时>40有明显的区别。
急性肾功能不全评价的病理生理学指标有内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值、肾脏酚红排泄率、钠排泄分数等，本实验主要测定酚红排泄率、内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值及肾形态学的改变。
【关键词】急性肾功能不全酚红排泄率血清肌酐尿肌酐【材料和方法】1、材料：家兔；分光光度计，离心机，恒温水浴箱；氯化汞，氨基甲酸乙酯，酚红，NaOH，醋酸，碱性苦味酸，肌酐标准应用液，生理盐水，葡萄糖。
2、方法2.1本组作为对照组兔则皮下或肌肉注射等量的生理盐水。
麻醉固定将氨基甲酸乙酯以5ml/kg 的体重剂量由兔耳缘静脉内缓慢注入。
家兔急性肾功能不全
实验原理 HgCl2
肾小管上皮细胞坏死
原尿回漏
细胞碎片形成管型
肾间质水肿
肾小管阻塞
囊内压升高
GFR
实验步骤
急性肾功能不全动物模型的制备 称重、固定、颈部手术气管、A插管 下腹部手术(暴露膀胱时取尿5ml备用) 耳缘静脉缓慢输10%葡萄糖液50ml/kg 尿常规检验（尿液沉渣的镜检和尿蛋白定
取血0.1ml浆加入显色剂，在沸水中加热10min
取出置于冷水中冷却，用分光光度计测定尿素氮 的浓度（波长520nm）
试管
空白管 标准管 测定管
血浆 0.1
标准液 0.1
蒸馏水 显色剂
0.1Leabharlann 101010尿蛋白定性检查结果判断标准
结果 无混浊
微混浊 混浊 颗粒状混浊 絮状混浊 凝聚成块
符号 — ± ＋
取5ml尿液于离心管中，离心5min、 1500r/min
上清夜做尿蛋白检查，取3ml上清夜放入试管 加热至沸腾，然后加入5﹪醋酸3～5滴，再加
热至沸腾，在黑色背景下观察
离心管底部沉渣用生理盐水（1：3）稀释摇匀 取一滴滴在载玻片上，盖上盖玻片进行镜检
取1ml血液置于用草酸钾作抗凝处理的离心管内， 离心5min、3000r/min
性检查） 血浆尿素氮测定
实验后处理
列表显示实验结果
动物 血浆尿素氮（mg/ml） 尿蛋白（﹪） 尿沉渣 对照兔 实验兔
分析结果写出实验报告
注意事项
实验前一天给家兔注射氯化高汞以制备病 理模型。
实验前要对试管和注射器做抗凝处理。不 可用肝素。
尿液加热时应缓慢转动试管，逐渐加热升 温，避免受热不均。试管口不可对人
3 急性中毒性肾功能不全
3 急性中毒性肾功能不全3急性中毒性肾功能不全三、急性中毒性肾功能不全【实验目的】1.复制急性中毒性肾功能不全动物模型。
2．观察急性肾功能不全时动物血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化，分析其发生机制。
[实验原理]采用肾毒物重金属hgcl2溶液造成家兔急性肾小管坏死，复制急性肾功能不全的动物模型，通过观察动物的血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化，学习急性肾衰时内环境的变化。
[实验动物]家兔，体重1.5～2.5kg。
[实验药物和设备]1%hgcl2溶液，3%戊巴比妥钠溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液，1%普鲁卡因溶液，生理盐水，1%肝素生理盐水溶液；兔台，手术器械，1ml和5ml注射器，试管，滴管，漏斗，吸管，试管夹，酒精灯，试管架，颈动脉插管，血气分析仪，生化分析仪，离心机，光电比色计，水浴锅。
[观察指标]全血：血气分析仪测定ph值、paco2、[hco3]、[k]、[na]和[cl]；血清：生化分析仪测定bun；尿：尿量、尿蛋白定性和镜检；肾：大体、剖面。
-++-【实验方法与步骤】1.取两只家兔，一只作正常对照，一只作中毒实验。
实验前一天称重后，给实验兔皮下或肌肉注射1%HgCl2（1.5~1.7ml/kg，一次注射），建立急性中毒性肾功能不全模型。
对照兔在与对照兔相同的部位注射等量的生理盐水。
将两个兔笼放在一个大漏斗上，收集尿液，并在24小时内测量尿液量。
2．实验开始，家兔称重后，20%氨基甲酸乙酯溶液(0.5～1g/kg体重)或3%戊巴比妥钠（30mg/kg体重）耳缘静脉注入麻醉后，仰卧固定于兔台。
下腹部剪毛，在耻骨联合上1.5cm做一个长约4cm的正中切口，分离皮下组织，沿腹部白线切开腹膜，露出膀胱，穿刺取出所有尿液，进行尿蛋白定性测定和尿液镜检。
3．颈部正中切口，分离一侧颈总动脉，颈动脉插管内注入肝素生理盐水溶液，进行颈动脉插管。
4.抽取0.5ml动脉血进行血气分析，取3ml动脉血（滴几滴肝素后）离心（1500rpm，5~10分钟），取血清进行尿素氮测定。
家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测姓名温正煌学号 201912200904011 专业临床医学班级本部 4 班实验目的1. 用氯化汞中毒方法复制家兔急性肾功能不全模型。
2. 观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化，从而探讨致病因素及急性肾功能不全的可能发病机制。
实验材料和方法实验仪器：分光光度计，离心机，恒温水浴锅，哺乳动物手术器械，注射器，试管架，试管，试管夹，微量移液器，量筒实验药品和试剂：20%氨基甲酰乙酯， 0. 6%酚红溶液， 20%葡萄糖溶液， 10%NaOH，12. 5%NaOH 溶液， 50%乙酸溶液， 1%氯化汞，碱性你苦味酸，生理盐水，肌酐标准应用液，蒸馏水实验动物家兔实验步骤 1.1 急性肾功能不全模型复制：于实验前 24h，取两只家兔，称重，一只作为实验兔，按0. 8~1. 0ml/kg 体重剂量皮下或肌肉注射 10g/L 氯化汞造成急性肾功能不全备用，另一只皮下注射或肌肉注射等量的生理盐水作为对照兔。
1. 2 麻醉固定：用 200g/L 氨基甲酸乙酯按 5ml/kg 体重剂量注射耳缘静脉，缓慢注射。
1 / 10待兔麻醉后将其仰卧，先后固定四肢及兔头。
1. 3 心脏采血：剪去家兔胸前区部位的毛，在第 3~4 肋间靠近胸骨处，用左手食指摸到心跳最明显处，右手持注射器垂直刺入心脏，当针穿刺心脏时，血液由于心脏搏动的力量自动进入注射器，取血 3ml，推入干燥试管，静置。
1. 4 膀胱插管术：从耻骨联合向上沿中线作约 3~4 厘米的切口，沿腹白线打开腹腔，将膀胱轻拉至腹壁外，先辨认清膀胱和输尿管的解剖部位，先用注射器取尿液 2ml 于试管中，然后在输尿管下方穿线结扎尿道，再用止血钳提起膀胱前壁（靠近顶端部分），选择血管较少处，切一纵行小口，插入插管后结扎，将膀胱插管平放于耻骨处，引流管自然下垂，管口低于膀胱水平，排空膀胱，术毕，用温热生理盐水纱布覆盖腹部切口。
急性中毒性肾功能不全
2. 急性肾功能损害时尿常规和尿沉渣成分 的变化；
3. 少尿和无尿的概念。
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3
难点
1. 血清尿素氮测定方法 2. 尿沉渣成分变化的分析
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观察指标
➢动物一般状况 ➢尿量 ➢尿蛋白 ➢血清尿素氮 ➢肾脏形态
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复制急性中毒性肾功能不全模型
麻醉，背位固定
颈部手术 膀胱插管
气管插管 颈总动脉插管 取血5毫升 血清尿素氮测定
收集尿液
尿蛋白定性测定 尿沉渣检测
耳缘静脉快速注射37℃生理盐水(10ml/kg) 静脉注射速尿(5mg/kg)
分别记录注射后5min、10min、20min、30min尿量
打开腹腔，取出肾脏，观察肾脏外观及切面形态学改变
原因： ① 肾小管泌NH3、泌H+障碍,NaHCO3重吸收 减少； ② GFR↓，固定酸排出减少； ③分解代谢增强，固定酸生成↑。
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思考题
（1）血清尿素氮在正常值范围，是否说明肾 功能正常？
（2）简述急性中毒性肾病的机能代谢变化及 其机制。
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急性中毒性肾功能不全
教学对象：高等医学院校医学专业学生 实验课时：4学时 课程类型：医学基础课 课程要求：必修 每组人数：4人
南华大学医学机能学实验中心
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1
目的要求
1. 复制中毒性肾功能不全的动物模型
2. 观察汞中毒家兔的一般状况，肾功能
的变化以及肾脏的形态改变。
家兔急性肾功能不全
家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测【实验目的】1、用氯化汞中毒方法复制家兔急性肾功能不全模型。
2、观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化。
肾功能评价指标：（1）测定血肌酐、尿肌酐，计算内生肌酐清除率（2）测定酚红排泄率（3）观察肾脏形态学改变。
【实验材料】器械家兔手术台、常用手术器械一套、止血钳、眼科剪、支架、照明灯、纱布、丝线、1ml、10ml、50ml注射器药品生理盐水、20% 氨基甲酸乙酯、0.6%酚红溶液、20%葡萄糖溶液对象家兔分组：1-4组——模型组(头部黄色标志 5-8组——对照组【实验方法】一、复制急性肾功能不全模型（已完成）：实验前24小时，取家兔两组，称重。
模型组——皮下注射1%氯化汞溶液 0.8-1ml/Kg体重；对照组——皮下注射等计量生理盐水二、急性肾功能不全指标检测1、家兔称重、麻醉和固定：取家兔一只，称重：2.16kg；20%氨基甲酸乙酯：5ml/kg体重，耳缘静脉缓慢注射，共注射10.8ml至呼吸深而慢、反射迟钝（角膜反射、夹肢反射）为止。
背位固定。
2、心脏采血—测血肌酐（颈动脉）左侧第3-4肋间，靠近胸骨，心跳最明显处垂直进针穿刺，取血3 ml，推入干燥试管，静置，——备用测血肌酐。
3、膀胱插管术—测尿肌酐、收集尿液1）如何进行膀胱插管，请按实际操作详细描述。
2）先用注射器取尿液2 ml于试管中，——备用测尿肌酐。
3）然后在输尿管下方穿线结扎尿道，再行膀胱切口，插管固定，排空膀胱。
4）准备小烧杯，收集尿液。
4、酚红排泄率测定1）0.6%酚红溶液1 ml/Kg体重，耳缘静脉头皮针注射，总共注射2.16ml。
计时—开始收集尿液。
2）然后20%葡萄糖溶液30 ml/Kg体重，耳缘静脉缓慢推注。
3）从注射酚红溶液起收集15分钟（对照组）、30分钟（模型组）尿液。
5、生化检测——血肌酐、尿肌酐、酚红排泄率1）测酚红排泄率收集注射酚红后的全部尿液-→250 ml量筒内-→然后加入10% NaOH 5 ml-→再加自来水至250 ml混匀-→取适量混合液-→小试管中与标准比色管进行比较即为15分钟、30分钟酚红排泄率。
实验性肾功能不全zdl-new
蛋白尿的形成机制
正常人每天尿中有少量的蛋白质,其量小于 200mg。日小便排出蛋白大于200mg时,就称之为病 理性蛋白尿。
形成机理:
肾小球滤过膜由三层结构组成,即肾小球毛细 血管内皮细胞,基底膜和肾小球囊脏层上皮细胞(足 细胞)。间隙覆有粘多糖薄膜,并带有负电荷,其通 透性大小与滤过膜的结构和电荷屏障有关。炎症﹑ 损伤和免疫复合物可以破坏滤过膜的完整性或降低 其负电荷而导致通透性增加,引起蛋白尿和血尿。
实验性急性肾功能不全
武大医学院病生教研室 张德玲
急性肾功能不全
（acute renal insufficiency, ARI）
定义： 各种病因引起双侧肾泌尿功能急剧降低，导致机体
内环境出现严重紊乱的病理过程。
主要表现： GFR下降，少尿或无尿
尿成分改变（蛋白，细胞，管型） 氮质血症，高钾血症 代谢性酸中毒
细胞 （高倍镜）
6. 尿蛋白定性检查
取尿液3ml于试管中 酒精灯上加热至沸腾 若混浊，加入5%醋酸3-5滴
再煮沸 尿变清，尿内有尿酸盐 混浊加重，尿中有蛋白
程度
等级
清晰
－
轻度白色浑浊 ＋
乳样浑浊
＋＋
浑浊或少量碎片 ＋＋＋
絮状浑浊
＋＋＋＋
蛋白含量 （g%） <0.01
0.01~0.05
0.05~0.2 0.2~0.5 >0.5
肾衰肾脏大体观的的形成机制
急性肾功能不全时,肉眼见肾脏体积增大，苍 白，切面肾皮质苍白缺血，髓质色深淤血,有时有 出血点。 形成机理:
汞中毒时,间质水肿,压迫血管,肾皮质缺血。 肾血流重新分布,肾髓质淤血。
氮质血症的的形成机制
是指尿素﹑尿酸和肌酐等非蛋白含氮物质的增多, 而这三种物质又以尿素增多为主,故常用血浆尿素氮 (BUN)作为氮质血症的指标。正常值10～20mg%。 形成机理:
机能实验报告_肾衰
一、实验背景肾脏作为人体的重要器官，负责调节水电解质平衡、排泄代谢废物、生成红细胞生成素等功能。
肾功能不全（肾衰）是指肾脏功能部分或完全丧失，导致代谢废物和多余水分不能正常排出体外，从而引起一系列生理和代谢紊乱。
本实验旨在通过模拟急性肾功能不全动物模型，观察肾脏形态学变化和肾功能指标检测，探讨肾衰的发生机制及其临床表现。
二、实验目的1. 复制急性中毒性肾衰动物模型。
2. 通过对肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的观察，了解中毒动物肾功能的变化。
3. 判断和分析致病因素和可能的治疗方法。
三、实验材料与方法1. 实验动物：成年家兔3只，体重约2.5kg。
2. 实验试剂：氯化汞、生理盐水、肝素钠、EDTA-K2、0.9%氯化钠溶液、碱性苦味酸、硫酸铵、酚红、苯巴比妥钠等。
3. 实验仪器：手术显微镜、电子天平、离心机、生化分析仪、显微镜等。
4. 实验方法：（1）建立急性中毒性肾衰动物模型：将家兔随机分为实验组和对照组，实验组给予氯化汞灌胃，对照组给予等量生理盐水灌胃。
（2）检测肾功能指标：实验前后分别采集家兔血液，检测血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿量、尿蛋白等指标。
（3）观察肾脏形态学变化：处死实验动物后，取肾脏进行常规石蜡切片，显微镜下观察肾脏组织形态学变化。
四、实验结果1. 实验组家兔在给予氯化汞灌胃后，Scr、BUN水平明显升高，尿量减少，尿蛋白阳性，表明实验动物出现急性肾功能不全。
2. 对照组家兔Scr、BUN水平及尿量、尿蛋白等指标无明显变化。
3. 显微镜下观察，实验组家兔肾脏出现肾小球肿胀、肾小管扩张、间质水肿等病理变化。
五、讨论与分析1. 急性肾功能不全的发生机制：氯化汞是一种重金属，具有肾毒性，可导致肾小管细胞损伤，从而引起肾功能不全。
本实验通过给予氯化汞灌胃建立急性中毒性肾衰动物模型，成功模拟了急性肾功能不全的临床表现。
2. 肾功能指标的检测：Scr、BUN是反映肾功能的重要指标，急性肾功能不全时，Scr、BUN水平明显升高。
试验性呼吸衰竭的发生与治疗
3. 急性肾衰发病机制： • 不同原因所致ARF机制不尽相同，但其中 心环节均为GFR降低 • 影响GFR的因素
– 肾血流
• • • 肾灌注压 肾血管舒缩 肾血管通畅程度
– 肾小球有效滤过压
• • •
•
肾小球血液流体静压 肾小囊内压 肾小球血浆胶体渗透压
肾小球滤过面积及通透性
– 肾小球滤过系数降低
谢 谢！
肾泌尿功能与肾功能不全
【实验目的】
1.通过肌肉注射氯化汞复制家兔急性肾功能不 全动物模型，并分析氯化汞导致急性肾功能不 全的可能发病机制。 2. 观察利尿药对肾泌尿功能的影响，以及对肾 功能不全的治疗作用，分析其可能的作用机制。
【实验原理】
1. 概念：急性肾功能衰竭（ARF）是指各种原因在短期 内引起双肾泌尿功能急剧障碍，以致机体内环境严重 紊乱的病理过程，临床表现有尿量和尿液成分改变、 水中毒、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒。 2.病因： • 肾前因素：肾血流灌注急剧减少 - 各型休克早期 HgCl2中毒 • 肾性因素：肾实质病变 - 急性肾小管坏死：肾缺血、肾中毒 - 肾小球、肾间质和肾血管疾病 • 肾后性因素：肾以下尿路（从肾盏到尿道口）梗阻
2. Cr尿/Cr血
3. 肾脏酚红排泄率
–
4. （滤过）钠排泄分数（fraction excretion of Na, FENa）
– 意义：反映肾小管重吸收功能。在急性肾衰时， FENa常被用 于区别功能性与器质性肾衰 – 计算方法： [Na+u]/[Na+p] FENa= ×100 [Cru]/[Crp]
– 判断标准： 1）正常： FENa＜1 2）功能性肾衰： 1＜ FENa ＜3 3）器质性肾衰： FENa ＞3
设计实验——两种家兔肾功能不全复制模型方法学的比较
两种家兔急性肾功能不全模型复制方法学比较设计者：###临床医学本科 2003级##班指导老师：###一、实验目的制备中毒性肾功能不全的家兔模型，比较高浓度甘油和氯化高汞两种方法复制动物模型的差异。
二、立题依据急性肾功能不全是由于肾小球滤过率急剧减少或肾小管发生变性坏死而引起的一种严重的急性病理过程，多数为少尿或者无尿型。
其中，肾性肾功能不全由肾实质器质性病变引起，临床上以肾缺血和肾毒物引发的急性肾小管坏死最多见。
常见的制备中毒性肾功能不全的动物模型有两种方法：肌注50％甘油和1％氯化高汞。
其中50％甘油由于能造成挤压综合症，产生大量坏死脱落的肌红蛋白，入血后形成肾小管腔内压、肾小球囊内压均升高，引发肾血流重布，肾皮质缺血，髓质淤血，造成肾小球滤过率降低而引起少尿。
1％氯化高汞在临床上可作为非金属器皿的消毒剂使用。
氯化高汞对人体组织有腐蚀作用，且其中的重金属Hg²+对各种动物均可造成“坏死性肾病”，故用来制备中毒性肾功能不全的动物模型，主要作用部位是肾脏近端小管。
临床上尿常规检验包括尿液的蛋白质定性检验和沉渣镜检两种。
正常情况下，尿液中蛋白质含量极微，不能用普通方法检出，在尿液沉渣中也只偶有少量白细胞，上皮细胞和个别红细胞。
如在尿液当中检出蛋白质，在尿液沉渣中发现有较多红细胞、白细胞、上皮细胞，特别是各种管型，即表示肾脏已有实质性损害。
肾功能发生障碍时，体内代谢产物尿素的排泄量减少，血浆中尿素氮含量升高。
因此，通过测定血浆中尿素氮的含量来反映肾的功能。
尿素与二乙酰肟在酸性溶液中经Fe³+的翠华发生缩合，并在氨基硫脲的存在下，生成3－羟基－5，6二甲基－1，2，4－三嗪，使溶液转为红色，利用比色法对血浆尿素氮进行定量测定。
参考文献[1] 赵自刚，牛春雨，侯亚利等. 甘油致家兔急性肾功能衰竭血黏度及凝血功能的变化.中国微循环，2004，8(3):146-148[2] 赵自刚，牛春雨，侯亚利等. 两种家兔急性肾功能衰竭模型复制方法的比较，河北北方学院学报，2004，21（5）三、实验方法及技术路线实验材料：家兔、兔手术台、手术器械、试管、试管夹、恒温水浴、注射器、玻璃分针、塑料插管、光学显微镜、载玻片、离心机、离心管、752型紫外分光光度计、50％甘油、1％Hgcl2 、生理盐水、1％普鲁卡因、50％葡萄糖溶液实验分组：甘油组：肌注50％甘油氯化高汞组：皮下注射1％HgCl2对照组：注射生理盐水观察指标：血浆尿素氮，尿液沉渣，尿蛋白实验方法与步骤：1、实验前24小时，分别为甘油组兔肌内注射50％甘油10.0ml/kg.bw，氯化高汞组兔皮下注射1％HgCl21.5ml/kg.bw，以制备急性中毒性肾功能不全模型。
急性肾功能不全(打印)
急性肾功能不全【实验目的】学习用氯化汞复制急性中毒性肾功能不全的动物模型。
观察急性肾功能不全时动物尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾酚红排泄率的变化以及肾脏的形态改变，分析和讨论其致病因素及发生机制。
【实验原理】采用肾毒物重金属氯化汞溶液造成家兔急性肾小管坏死，复制急性肾功能不全的动物模型，通过观察动物的尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾酚红排泄率的变化以及肾脏的形态改变，学习急性肾衰时内环境的变化。
1 材料家兔；分光光度计，光学显微镜，离心机，恒温水浴箱；1%氯化汞溶液，氨基甲酸乙酯溶液，生理盐水，酚红，NaOH,醋酸，碱性苦味酸，肌酐标准应用液，葡萄糖；兔台，手术器械，1ml和5ml注射器，试管，滴管，漏斗，吸管，试管夹，酒精灯，试管架，颈动脉插管。
2 方法2.1 急性肾功能不全模型复制（已完成）：取家兔两组，于实验前24小时称重后，一组为正常对照组，一组为中毒实验组。
实验兔皮下或肌肉注射1%氯化汞（按0.8～1.0ml/kg），造成急性肾功能不全模型；对照兔则在相同部位注射同量的生理盐水，作为对照。
2.2麻醉固定：用200g/L的氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉，将家兔仰卧位固定于固定架上。
2.3 心脏采血：先用手摸到第3、4肋间，心脏活动最为活跃处，垂直进针，有落空感，缓慢抽取血液约2ml于干燥试管中，作血肌酐检查。
2.4 采集尿液：下腹部剪毛，从耻骨联合向上沿中线作约4cmd切口，沿腹白线打开腹腔，暴露膀胱，用注射器抽取膀胱内尿液2ml于干燥试管中，作尿肌酐、尿常规检查。
2.5 输尿管插管：在膀胱底部仔细分离两侧输尿管。
用出线结扎近膀胱处的两侧输尿管，以阻断尿流，结扎固定。
将两侧导尿管外端用线扎在一起，用于收集尿液。
手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖腹部的创伤。
2.6 实验观察2.6.1血清和尿肌酐含量测定：将各组装有血液的试管放入离心机内，静置10min后，3000r/min离心15min。
内科肾衰实验报告
一、实验目的本次实验旨在通过模拟内科肾衰竭的动物模型，探讨肾功能不全的病理生理机制，了解肾功能不全的临床表现、诊断方法及治疗方法，为临床诊断和治疗肾衰竭提供理论依据。
二、实验方法1. 实验动物选用健康成年家兔6只，体重2.5kg左右，随机分为实验组和对照组，每组3只。
2. 实验材料氯化汞、生理盐水、葡萄糖、氯化钠、肝素、试管、离心机、显微镜、离心管、移液器、肾小球滤过率（GFR）测定试剂盒、尿素氮（BUN）测定试剂盒、血肌酐（Scr）测定试剂盒等。
3. 实验步骤（1）实验组：将氯化汞溶液（1mg/mL）按0.1mL/kg体重经腹腔注射，造成急性肾功能不全动物模型。
（2）对照组：给予生理盐水按相同剂量和途径注射。
（3）实验动物注射后，分别于注射后0.5小时、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、120小时进行以下检测：① 血常规：包括红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、白细胞计数（WBC）等。
② 尿常规：包括尿量、尿比重、尿蛋白、尿糖等。
③ 肾功能指标：包括GFR、BUN、Scr等。
④ 肾脏形态学观察：取实验动物肾脏，进行HE染色，观察肾脏病理变化。
4. 数据处理采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，实验数据以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。
三、实验结果1. 血常规实验组动物注射氯化汞后，RBC、Hb、WBC均无明显变化。
2. 尿常规实验组动物注射氯化汞后，尿量逐渐减少，尿比重升高，尿蛋白、尿糖呈阳性。
3. 肾功能指标实验组动物注射氯化汞后，GFR、BUN、Scr均明显升高，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。
4. 肾脏形态学观察实验组动物肾脏HE染色结果显示，肾脏出现明显的肾小球病变，包括肾小球毛细血管扩张、红细胞外渗、肾小球囊壁增厚等。
四、讨论1. 急性肾功能不全的病理生理机制急性肾功能不全是指各种原因导致的肾脏功能急剧下降，导致机体内环境紊乱。
氯化汞引起的家兔急性肾功能不全
氯化汞引起的家兔急性肾功能不全摘要【目的】学习用氯化高汞复制急性中毒性肾功能不全的动物模型；观察急性肾功能不全时尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾酚红排泄率的变化及肾形态学的改变，并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。
【方法】采用苦味酸沉淀蛋白法对正常家兔和急性肾功能不全的家兔血肌酐、尿肌酐、酚红排泄率进行测定，对数据进行统计学的处理，肉眼肾形态学的改变。
【结果】与正常组的家兔对比，实验组急性肾功能不全的家兔的血清肌酐升高，尿肌酐（P<0.05）明显降低，每分钟的尿量（P<0.01）减少，内生肌酐清除率显著下降，酚红排泄率下降，肾系数略有增大。
【结论】重金属等毒物可直接损害肾小管，引起肾脏急性中毒性肾功能不全。
急性肾功能不全会引起家兔肾小球滤过率下降，引起肾小管上皮细胞变性、坏死，引起肾血管收缩，肾血流减少，肾灌注压下降，肾小管排泌功能、肾小管上皮细胞重吸收功能障碍。
关键词：氯化汞；肾功能不全；血清肌酐；尿肌酐Abstract:【Objective】learn to use chlorinated high mercury copy acute toxic renal insufficiency of animal model. Acute renal not observe full-time urine protein, creatinine, serum creatinine, renal phenol red urine discharge rate changes and renal morphology change, and according to the analysis of experimental results and discussion of pathogenic factors and results in acute renal insufficiency may pathogenesis.【Method】the GuWeiSuan protein deposition method to study and normal acute renal all serum creatinine, urine rabbit serum creatinine, phenol red excretion rate for the determination of the statistical data, the processing, the naked eye kidney the morphology of the change.【Aesult】the normal group and the rabbit, and the contrast of acute renal insufficiency rabbit serum creatinine, urine creatinine increased (P < 0.05) reduced significantly, and each minute of urine output (P < 0.01), reduce the endogenous creatinine clearance decreased significantly, phenol red excretion rate, renal coefficient increases slightly.【Conclusion】other kinds of heavy metals can be directly damage caused renal tubular, acute toxic renal insufficiency. Not all the cause acute renal rabbit glomerular filtration rate drop, cause renal tubular epithelial cells degeneration and necrosis, cause renal vascular contraction, renal decreased blood flow, renal perfusion pressure drop, renal tubular row secrete function, renal tubular epithelial cells heavy absorption function obstacle. Keyword: Chlorinated mercury; Renal insufficiency; Serum creatinine; Urine creatinine肾脏是一个多功能的器官，具有排泄、调节、内分泌等功能。
氯化汞诱导獭兔急性肾功能衰竭模型的病理学研究
氯化汞诱导獭兔急性肾功能衰竭模型的病理学研究
宾俊毅;于立新;马学恩
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2007(28)2
【摘要】将家兔15只随机分为ARF模型Ⅰ组、ARF模型Ⅱ组和对照组.模型组每只家兔分别一次性背部皮下注射10 g/L氯化汞0,9 mL/kg和1.7 mL/kg.24 h后采集尿液和血液进行肾功能生化指标的检测,处死家兔取肾组织制片进行光镜和电镜检查.结果表明,急性肾功能衰竭的家兔血肌酐(SCr)、血清尿素氮(BUN)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cys-C)、尿微球蛋白(β2-MG)、尿微量白蛋白(MAlb)含量均升高,但尿酶变化并不显著;近曲肾小管上皮细胞变性坏死,呈现一种典型的高位肾单位肾病.
【总页数】5页(P32-36)
【作者】宾俊毅;于立新;马学恩
【作者单位】内蒙古农业大学,内蒙古,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学,内蒙古,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学,内蒙古,呼和浩特,010018
【正文语种】中文
【中图分类】S859.8;S852.3
【相关文献】
1.二硫氨基甲酸肽吡咯烷对氯化汞所致的急性肾功能衰竭大鼠模型的保护作用 [J], 蒋文功;出蒲照国;井上嘉彦
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3.壳寡糖对氯化汞诱导的兔急性肾功能衰竭的保护作用 [J], 王顺蓉;陈蓉;张春梅;李著华
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急性肾功能衰竭
急性肾功能衰竭【摘要】目的：复制家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的动物模型。
观察升汞中毒的一般状态，尿质和量的变化,以及肾脏人体形态及病理组织学改变。
根据实验指标判断、分析和讨论急性肾功能衰竭的发病机制及病理生理变化。
方法：复制家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的动物模型，观察其病理特征。
结果：尿蛋白含量增高，出现管型。
结论：学习了制作了家兔升汞中毒致急性肾功能衰竭的模型，该模型的建立助于掌握急性肾功能衰竭的特点及其对动物机体的影响。
关键字：重金属类毒物、肾小管坏死、血尿素氮。
材料及方法：1.实验前一天取家兔12只，其中10只做为实验组，另外2只作为对照组，在实验组家兔的皮下注射1%氯化汞适量，在对照组家兔皮下注射等量的生理盐水作为对照。
2.实验时将家兔称重后，以20%乌拉坦溶液以5ml/kg的剂量由耳缘静脉慢慢推注，进行全身麻醉，期间观察动物的肌张力、呼吸频率、角膜反射作为观察麻醉的深度指标。
3.将家兔仰卧固定于兔试验台上，自尿道口插入导尿管导尿，如果尿量过少，下腹剪毛在耻骨联合上1.5厘米处正中切口，长约4厘米，分离皮下组织沿腹白线切开腹膜，暴露膀胱，用注射器取适量尿液备测尿蛋白、尿沉渣镜检。
4.颈部剪毛，做颈部切口，分离右侧颈总动脉、左侧颈静脉，分别做颈总动脉插管和颈静脉插管，经总动脉放血5ml，离心后取血清备测尿素氮。
5.尿蛋白定性检查：用吸管吸取尿液3ml加入试管内，用试管夹夹着在酒精灯外焰上加热至沸，多数情况下尿液煮沸后会变浑浊此时加入5%醋酸溶液3-5滴，继续加热煮沸，若尿液由浑浊变为透明则为尿酸所致；若仍浑浊则表示尿液中含有尿蛋白，⑴取收集的尿液2ml至于离心管内离心5分钟，使尿液中的有形成分沉淀，离心后去掉上清液。
⑵将试管内的尿沉渣混匀，吸取一滴加于载玻片中央，用盖玻片覆盖后镜检。
⑶暗视野下先低倍镜后高倍镜，移动视野，寻找并观察管型。
（注：管型是蛋白质、细胞及其碎片等物质在远曲小管、集合管中凝固形成的圆柱体蛋白聚体）7.血清尿素氮的测定：所需试剂：动物的血清、尿素氮标准应用液Ⅰ、尿素氮标准应用液Ⅱ、蒸馏水、二乙酰一污一氨硫脲液（试剂Ⅰ）、酸混合液（试剂Ⅱ）配置方法如下：721型分光光度计上用520mm波长比色，以空白管调零，读取各测定管及标准管的吸光度。
褪黑素对氯化汞所致家兔急性肾功能衰竭的影响
褪黑素对氯化汞所致家兔急性肾功能衰竭的影响发表时间：2017-01-21T14:33:07.637Z 来源：《心理医生》2016年32期作者：刘昌明黄香尘孙玉锦邓良超[导读] 急性肾功能衰竭（acute renal failure ARF）是临床常见的危重病症，其发病机制较为复杂。
（雅安职业技术学院基础医学部四川雅安 625000）【摘要】目的：探讨褪黑素对氯化汞所致家兔急性肾功能衰竭的影响。
方法：随机将18只家兔分为正常对照（NC）组、急性肾功能衰竭（ARF）模型组、褪黑素治疗（M）组，ARF组和M组每天给予褪黑素20mg/kg灌胃，NC组给予等量生理。
连续7天后，ARF组和Mel组给予1%氯化汞1.0ml/kg肌肉注射，NC组注射等量生理盐水。
36h后各组家兔麻醉后取血，检测血浆尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)以及氧化应激指标MDA的水平和总SOD活力，取肾组织观察肾组织形态学变化及TUNEL染色观察肾组织细胞凋亡指数(apoptosisindex，AI)的变化。
结果：与NC组相比，ARF组家兔注射氯化汞后肾组织肾小管上皮细胞明显水肿，肾小球充血，血浆BUN、Scr，MDA及AI明显升高（P<0.05），SOD活力明显降低（P<0.05）；与ARF组相比，Mel组家兔肾小管上皮细胞水肿减轻，肾小球充血减轻，血浆BUN、Scr，MDA及AI明显降低（P<0.05），SOD活力明显升高（P<0.05）。
结论：预防性给予外源性的褪黑素可以有效的减轻汞中毒家兔的肾脏损伤，具有一定的保护作用【关键词】褪黑素；氯化汞；急性肾功能衰竭【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）32-0272-02 【Abstract】Objective To investigate the effect of melaton in acute renal failure rabbits was caused by mercuric chloride. Methods 18 rabbits were randomly divided into three groups,The normal control (NC) group, the acute renal failure (ARF) model group and the melatonin (Mel) group, ARF group and Mel group were given melatonin into stomach by 20mg / kg irrigation,the NC group was given the same amount of physiological. After 7 days, ARF group and Mel group was given inject 1% mercuric chloride by 1.0ml / kg, the NC group were injected with normal saline. after 36 hours later each group of rabbits were exsanguinated after anesthesiaed ,to detected the total urea nitrogen (BUN) and the creatinine (Scr) in plasma ,the level of SOD activity and the level of MDA , the kidney tissue was removed for viewing morphological changes in kidney and the changes apoptosis index (AI) with TUNEL staining. Results Compared with NC group, edema obviously in renal tubular epithelial cells in ARF rabbits was injected mercuric chloride and the glomerular hyperemia, the plasma BUN, Scr, MDA and AI was significantly increased (P <0.05), SOD vitality decreased significantly (P <0.05); compared with ARF group, after, the cell edema epithelial of renal tubular in Mel group, and the glomerular congestion. BUN, Scr, MDA and AI decreased significantly (P <0.05 ), SOD activity was significantly increased (P <0.05). Conclusions Give Prophylactic of exogenous melaton was effectively reduced the damage in kidney rabbits have a protective effect on mercury poisoning. 【Key words】Melatonin; Mercuric chloride; Acute renal failure 急性肾功能衰竭（acute renal failure ARF）是临床常见的危重病症，其发病机制较为复杂。
氯化汞与家兔急性肾功能不全
氯化汞与家兔急性肾功能不全摘要：【目的】复制急性中毒性肾衰动物模型，通过对肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的观察，了解中毒家兔肾功能的改变。
判断、分析致病因素及导致急性肾衰的可能发病机制【方法】取家兔两只，分为实验组（急性肾功能不全）和对照组，分别对家兔行心脏采血和膀胱取尿，分别测定并比较两兔的血清肌酐和尿肌酐含量以及酚红排泄率，比较肾衰家兔和正常家兔的肾脏排泄功能，最后取两兔肾脏观察比较。
【结果】与正常家兔相比，急性肾衰家兔尿肌酐、尿/血肌酐比值（<10:1）、酚红排泄率均明显下降，血肌酐含量也有所下降，肾比重减小，肾脏外观苍白肿大，切面苍白，皮髓质分界不清。
【结论】氯化汞可直接损伤肾小球和肾小管引起器质性肾功能衰竭，引起肾小管上皮细胞变性坏死，肾血管收缩，肾血流减少，肾灌注压下降，肾小管排泌功能、肾小管上皮细胞重吸收功能障碍。
【关键词】氯化汞；急性肾功能不全；血肌酐；尿肌酐；尿肌酐/血肌酐；酚红排泄率【引言】肾脏是一个多功能器官，其主要功能之一是泌尿功能。
肾脏通过调节肾血流、肾小球滤过率、肾小管排泌与重吸收以及排泄体内代谢物质以维持机体内环境的稳定。
当肾血流量减少，肾小球滤过率下降或肾小管排泌重吸收功能障碍时，肾的泌尿功能受到影响，从而导致肾功能不全。
[1]1、实验材料和方法1.实验材料1.1实验对象：家兔1.2药品和试剂：氨基甲酸乙酯、生理盐水、葡萄糖、酚红、NaOH、醋酸、碱性苦味酸、肌酐标准应用液1.3实验器材：手术器械一套、试管、分光光度计、水浴锅、离心机2.实验方法2.1复制肾功能衰竭模型：于实验前一天，取两只家兔，称重，一只皮下或肌肉注射1％HgCl2(o．8～1．0ml／kg)造成急性肾功能衰竭，为实验组兔；另一只皮下或肌肉注射等量的生理盐水(1．0ml／kg)作为对照组兔。
2.2麻醉手术：家兔称重，按5 ml/kg体重剂量于耳缘静脉缓慢注射200 g/L氨基甲酸乙酯麻醉。
实验五中毒性肾病
尿蛋白测定检查
取正常及中毒家兔尿液各3mL分别放入试管 中，以试管夹夹试管在酒精灯上加热至沸 腾（切勿使尿液溢出）。 加入5%醋酸3～5滴，再煮沸。若尿变清， 是尿酸盐所致；若变浊，则表示尿中含有 蛋白，以浊度程度不同判断尿蛋白含量标 准如下：
蛋白浊度判断标准
清晰 程度
含蛋白 量g%
轻度 浑浊 +
0.010.05
稀薄乳 乳浊少 样浑浊 量碎片 ++
0.050.2
絮状 浑浊 ++++
>0.5
0
+++
0.20.5
尿液镜检
取1~2滴的尿液涂片,先高倍后 低倍观察。计算10个不同高倍视野 细胞的近似平均数，低倍视野观察 管型并计算。
形态学观察
将对照及中毒家兔一并杀死， 解剖取出肾脏，观察并比较二者的 肉眼变化如体积，皮质条纹，色泽 等。
试验结果
中毒兔
尿蛋白定性 尿中细胞 尿中管型 酚红排泄率 解剖所见
对照兔
思考题
• 结合实验，讨论蛋白尿，管型尿的 发生机制。
模型复制
• 实验前2d，取健康雄性兔2只，称 重后一只皮下注射1% HgCL2，（按 1.5~1.7mL/kg，一次注射），造成 急性肾功能不全；另一只则在相同 部位注射等量生理盐水作为对照备 用，于实验前12h禁食。
不同稀释倍数酚红(0.6%)对 应的吸光度
% 500 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 ml A 1
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.5 0.5 0.6 8 7 6 3 4 9 0.7 1 4 6 8 8 8 7 2 5
急性肾功能不全及药物的影响
整理ppt、肾小管的排 泄与重吸收，排泄体内的代谢物质以维持机体 内环境的稳定。动脉血压、血容量、肾自身调 节与神经体液调节因素，可影响肾尿液生成。 当肾功能不全时，肾血流量减小，肾小球滤过 率下降或肾小管排泄、重吸收功能障碍，肾的 排泄功能受到影响。通过对尿量、肌酐、酚红 的检测以及尿常规和肾形态的观察可以判断肾 功能状态。
整理ppt
5
▪ 6. 形态学观察
耳静脉注射10ml空气处死家兔，取出肾脏 称重，计算肾/体重比。观察肾脏外形，色泽。 纵向剖开，观察皮髓质条纹，色泽。
▪ 7. 尿常规检查
取实验前留存的尿液作下列检查： (1) 镜检细胞和管型 (2) 尿蛋白测定
取少量尿液于载玻片，加4%磺柳酸一滴，观 察溶液浑浊程度。
整理ppt
3
▪ 4. 尿液肌酐浓度测定 取实验前留存的尿液或治疗开始前收集的15min尿液，
取去蛋白后的上清，按试剂盒测定。
尿肌酐浓度（mg/ml）每分钟尿量（ml） 肌酐清除率 =
血浆肌酐浓度（mg/ml）
整理ppt
4
▪ 5. 酚红排泄的测定 iv0.3%酚红1ml/kg，接着注射20%葡萄糖5ml/kg，
整理ppt
2
▪ 三、实验方法和步骤 1. 造模，提前24hr，给兔皮下注射0.3-0.4%HgCL2 1ml/kg，造成急性肾功能衰竭模型。 2. 称重、麻醉(3%戊巴比妥钠1ml/kg, iv)、膀胱插管 （在插管前，先留取尿液，供测定肌酐用）。
3. 实验治疗对尿量的影响 (1)记录5min尿量。 (2)快速iv注射 37℃生理盐水20ml，记录5min尿量。 (3)缓慢iv 20%葡萄糖5ml，记录5min尿量。 (4)iv多巴胺20μg/Kg，记录10min尿量。 (5)iv速尿5mg/kg，记录10min尿量。
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氯化汞与家兔急性肾功能不全
摘要：
【目的】复制急性中毒性肾衰动物模型，通过对肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的观察，了解中毒家兔肾功能的改变。
判断、分析致病因素及导致急性肾衰的可能发病机制【方法】取家兔两只，分为实验组（急性肾功能不全）和对照组，分别对家兔行心脏采血和膀胱取尿，分别测定并比较两兔的血清肌酐和尿肌酐含量以及酚红排泄率，比较肾衰家兔和正常家兔的肾脏排泄功能，最后取两兔肾脏观察比较。
【结果】与正常家兔相比，急性肾衰家兔尿肌酐、尿/血肌酐比值（<10:1）、酚红排泄率均明显下降，血肌酐含量也有所下降，肾比重减小，肾脏外观苍白肿大，切面苍白，皮髓质分界不清。
【结论】氯化汞可直接损伤肾小球和肾小管引起器质性肾功能衰竭，引起肾小管上皮细胞变性坏死，肾血管收缩，肾血流减少，肾灌注压下降，肾小管排泌功能、肾小管上皮细胞重吸收功能障碍。
【关键词】氯化汞；急性肾功能不全；血肌酐；尿肌酐；尿肌酐/血肌酐；酚红排泄率
【引言】肾脏是一个多功能器官，其主要功能之一是泌尿功能。
肾脏通过调节肾血流、肾小球滤过率、肾小管排泌与重吸收以及排泄体内代谢物质以维持机体内环境的稳定。
当肾血流量减少，肾小球滤过率下降或肾小管排泌重吸收功能障碍时，肾的泌尿功能受到影响，从而导致肾功能不全。
[1]
1、实验材料和方法
1.实验材料
1.1实验对象：家兔
1.2药品和试剂：氨基甲酸乙酯、生理盐水、葡萄糖、酚红、NaOH、醋酸、碱性苦味酸、肌酐标准应用液
1.3实验器材：手术器械一套、试管、分光光度计、水浴锅、离心机
2.实验方法
2.1复制肾功能衰竭模型：于实验前一天，取两只家兔，称重，一只皮下或肌肉注射1％HgCl2(o．8～1．0ml／kg)造成急性肾功能衰竭，为实验组兔；另一只皮下或肌肉注射等量的生理盐水(1．0ml／kg)作为对照组兔。
2.2麻醉手术：家兔称重，按5 ml/kg体重剂量于耳缘静脉缓慢注射200 g/L氨基甲酸乙酯麻醉。
2.3心脏采血：在心尖搏动最剧烈的地方用干燥针管，垂直进针进行取血。
放置10min后，3000r/min离心15min，小心吸取血清置于另一干燥管中，备测血肌酐。
2.4腹部手术：将麻醉的兔子仰卧位固定于手术台上，下腹部正中剪毛，在耻骨联合上约1．5cm处做切口，长约4cm，暴露膀胱，用注射器收集2ml尿液于试管中，做尿肌酐检查。
随后在膀胱底部，找出两侧输尿管，并分离之。
在近膀胱端结扎输尿管，稍等片刻，待其略充盈后，用眼科剪剪一小口，向肾脏方向插入一细塑料管(塑料管事先用肝素冲洗或充满肝素)，结扎并固定，用于收集尿液。
2.5血清和尿液肌酐含量测定——苦味酸沉定蛋白法：
（1）血清肌酐含量测定取硬质试管3只编号，分别为空白管、标准管及测定管。
按表1加
样，混匀，37℃水浴30min ，用分光光度计以波长510nm ，空白管调零，读OD 值。
然后，各管加50%乙酸溶液两滴，放置6min 后，再测定OD’值。
按①式计算血清肌酐（[Cr]p ）：
''[](%)0.01/0.2100p OD OD Cr mg OD OD -=⨯⨯-测测标标
① （2）尿肌酐测定：按表2加样，混匀，放10min 后加蒸馏水6.0ml ，摇匀，用分光光度计以波长530nm ，空白管调零，读OD 值。
按②式计算尿肌酐（[Cr]u ）：
[](%)0.05100/0.1u Cr mg OD mg ml ml =⨯⨯测 ②
2.6酚红排泄率测定：1)两组家兔分别耳缘静脉注射o ．6％酚红溶液(1ml ／kg)，接着从颈外静脉插管处注射20％葡萄糖溶液(30ml ／kg)。
收集从开始注射酚红起15min 或30min 的尿液，换算成单位时间的尿量(ml ／min)。
2）将收集的尿液倒入500ml 量筒内，加10％NaOH lOml ，用自来水补充至500ml 处，混匀后，取出适当量放入与比色管口径相同的试管中与标准比色管比较，得出15min 或30min 内肾脏酚红排泄率。
2、实验结果
1.对照组（正常）与实验组（肾衰）家兔血清肌酐、尿肌酐及酚红排泄率测定值如下：
实验组与对照组相比，尿肌酐/血肌酐值降低，酚红排泄率下降，肾比重减小。
2.对照组与实验组家兔肾脏形态比较：
正常肾脏颜色为红褐色，正常肾脏的切面色泽鲜艳，皮髓质分界清晰；
急性肾衰竭家兔肾脏重量增加，中毒肾脏表面颜色苍白，体积增大，表面肿胀。
中毒肾脏切面为苍白色，皮髓质分界不清，偶有淤血。
正常肾
肾衰竭
3、分析与讨论
1.氯化汞引起家兔急性肾功能不全的机制：氯化汞是一种有毒的重金属化合物，在肾内蓄积量最高，主要贮存于近曲小管。
由于汞是许多活性酶的非特异性抑制剂，胞膜是汞的首要作用点，故汞对肾小管细胞具有明显的毒害作用，造成肾小管坏死。
坏死的肾小管上皮细胞及脱落上皮细胞和微绒毛碎屑、细胞管型或血红蛋白、肌红蛋白等阻塞肾小管，使原尿不易通过，引起少尿。
同时，管腔内压升高，继而使肾小球囊内压力升高，当后者压力与胶体渗透压之和接近或等于肾小球毛细管内压时，遂引起肾小球滤过停止。
有效滤过压降低，导致肾小球滤过率下降，近曲小管重吸收水钠减少，致密斑分泌肾素，激活肾素-血管紧张素系统，促进水钠潴留。
且毛细血管内皮损伤、肿胀，致滤过膜通透性降低也引起肾小球率过滤下降。
2.急性肾功能衰竭时的功能代谢变化：（本实验中毒家兔处于少尿期）
⑴尿变化：①少尿或无尿；②低比重尿；③尿钠高；④血尿、蛋白尿、管型尿。
⑵水中毒：ARF时，因少尿、分解代谢所致内生水增多、摄入水过多等原因，导致体内水潴留、稀释性低钠血症和细胞水肿。
严重时可出现心功能不全、肺水肿和脑水肿。
⑶高钾血症：①尿量减少使钾随尿排出减少；②组织损伤和分解代谢增强，使钾大量释放到细胞外液；③酸中毒时，细胞内钾离子外溢；④低钠血症，使远端小管的钾钠交换减少。
⑷代谢性酸中毒：①GFR降低，使酸性代谢产物在体内蓄积；②肾小管分泌H+和NH3能力降低，使NaHCO3重吸收减少；③分解代谢增强，固定酸产生增多。
⑸氮质血症：血中尿素、肌酐、尿酸等非蛋白氮含量显著增高，称氮质血症，其发生主要是
由于肾脏排泄功能障碍和体内蛋白质分解增加所致，少尿期，氮质血症进行性加重，严重时可出现尿毒症[2]。
3.肌酐的代谢与清除：肌酐是肌酸代谢的最终产物，体内的肌酸大部分与磷酸结合生成磷酸肌酸，磷酸肌酸与能量代谢有关。
在体外肌酐与肌酸可以互变，在酸性溶液中，肌酸及易脱水而变成肌酐，在碱性溶液中，肌酐则可变回肌酸。
但是，在体内肌酸脱水生成肌酐是一种不可逆反应。
本实验中，氯化汞中毒所致家兔急性肾功能衰竭为器质性肾衰，因此造成血中肌酐排泄障碍，尿肌酐含量明显下降，而肾衰组血肌酐较对照组有所下降，可能是实验操作过程中的测量误差引起。
4. 氯化汞中毒导致肾小管上皮细胞损伤，尿量减少，酚红排泄率降低。
酚红排泄率是反映肾血流量与肾小管排泌功能的指标。
在实验中注射大量的葡萄糖溶液是为了造成渗透性利尿，利于排除酚红。
酚红是一种对人体无害的红色染料，经静脉注射后，大部分与血浆蛋白结合，除20%为肝脏清除，经胆道排出外，其余则由肾脏排出。
在肾脏的排泌过程中，94%由近曲小管上皮细胞主动排泌，小部分不与白蛋白结合者可从肾小球滤过，尿中排出4%左右，2%通胆汁到大肠由粪便排出，因为酚红大部分通过近曲小管分泌、排出，所以其尿中排出量，可作为判断近曲小管排泌功能的指标。
4、实验结论
氯化汞可直接损伤肾小球和肾小管引起器质性肾功能衰竭，引起肾小管上皮细胞变性坏死，肾血管收缩，肾血流减少，肾灌注压下降，肾小管排泌功能、肾小管上皮细胞重吸收功能障碍。
【参考文献】
[1] 陆源，林国华，杨午鸣主编. 机能学实验教程，第二版.一北京：科学出版社，2005
[2] 金惠铭，王建枝主编.病理生理学，第七版—北京：人民卫生出版社，2008.1。