槐花药材的含量测定及方法学验证实验报告
11实验十一槐花的质量检验
实验原理二
• 槐花中主要含黄酮类化合物，其代表性化合物为芦
丁。根据中华人民共和国药典2005年版一部，本品 按干燥品计算，含无水芦丁（C27H30O16）槐花不 得少于6.0%；槐米不得少于15.0%。
槲皮素-3-O-芸香糖苷
1. 盐酸-镁粉（或锌粉）反应
为鉴定黄酮类化 合物最常用的颜色反应，反应机理认为是因生 成阳碳离子缘故。 2. 与铝盐反应 黄酮类化合物常可与铝盐、铅盐、 锆盐、镁盐、锶盐、铁盐等试剂反应，生成有 色络合物。与1%三氯化铝或硝酸铝溶液反应， 生成的络合物多为黄色并有荧光，可用于定性 及定量分析。
mg/ml
序号
V（ml）
1
1.0
2
2.0
3
3.0
4
4.0
5
5.0
6
6.0
M (mg)
A510
含量测定
• 从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量
(μg)，计算即得。
C V 含量% 100% W
思考题
1. 先用乙醚连续回流提取的目的是什么？ 2. 本品与镁粉-盐酸反应鉴别的化合物
的类别是什么？反应原理是什么？
实验十 槐花的质量检验
实验目的
1. 了解中药分析检验常用的方法与特点； 2. 熟悉连续回流提取法； 3. 掌握黄酮类化合物的性质、鉴别及比色法含
量测定的方法。
实验原理一
• 槐花 (Flos sopuorae)
为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾。夏季花开放或花 蕾形成时采收，及时干燥，除去枝、梗及杂质。 前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。
取本品粉末0.1g，加乙醇10ml，加热5分 钟，滤过。取滤液1ml，加镁粉少量与盐 酸2～3滴，即显樱红色。
药物分析槐花实验报告
药物分析槐花实验报告实验目的：本实验的目的是通过对槐花药物的分析，探究其化学成分、药理作用以及可能存在的副作用，为槐花的临床应用提供参考依据。
实验步骤：1. 药材的制备：获取新鲜槐花，并将其洗净、晾干，储存于适宜的环境中。
2. 提取槐花中的化学成分：将适量槐花样品粉碎后，以乙醇进行提取，使用离心机进行离心分离，获得槐花的乙醇提取液。
3. 确定槐花中的主要成分：使用色谱仪对槐花的乙醇提取液进行分析。
观察不同波长下的吸收峰，对各化合物进行鉴定和定量分析。
4. 药理实验：选取动物模型，使用槐花提取物进行药理实验。
观察槐花提取物对疾病模型的治疗效果，记录相关数据并进行统计分析。
5. 副作用研究：在动物实验中，观察槐花提取物可能引起的副作用。
对相关器官、生理指标进行观察和检测，评估槐花的安全性和潜在危害。
实验结果与讨论：1. 化学成分分析结果表明，槐花中含有苷类、鞣质、挥发油等多种化学成分。
其中，苷类是槐花的主要活性成分，具有抗炎、抗氧化等药理作用。
2. 药理实验结果显示，槐花提取物在一定浓度范围内对疾病模型具有显著的治疗效果，能够减轻症状、促进病情的恢复。
然而，在超过一定浓度时，槐花提取物可能会出现毒副作用，如肝脏损伤等。
3. 副作用研究结果表明，在一定剂量范围内，槐花提取物对实验动物的主要器官和生理指标均无明显影响。
但在超过推荐剂量时，槐花提取物可能对肝脏、肾脏等机体组织产生损伤。
结论：本实验通过对槐花药物的分析，揭示了其化学成分、药理作用以及可能存在的副作用。
槐花具有一定的药理活性，可应用于相关疾病的治疗，但需注意剂量的控制，避免潜在的毒副作用。
进一步的研究和临床实验，有助于深入了解槐花的药理机制和安全性，推动其在临床应用中的进一步发展与应用。
槐花药材的含量测定及方法学验证实验报告
槐花药材的含量测定及方法学验证实验报告槐花药材的含量测定及方法学验证姓名：廖卓* 学号:11071105一、实验目的1、掌握比色法测定槐花药材中总黄酮含量的方法及原理。
2、熟悉槐花药材的含量测定的方法学验证。
二、实验原理槐花为豆科植物SophorajaponicaL的干燥花及花蕾[1]。
夏季花开放或花蕾形成时采收，及时干燥，除去枝，梗及杂质。
前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。
槐花药材的主要有效成份是黄酮类化合物，其中芦丁的含量最高，所以槐花药材的鉴别及含量测定均以芦丁为指标成分。
芦丁（C27H30O16,610.51）黄酮类化合物在碱性条件下与铝盐发生配位反应，生成红色的配位化合物，使得最大吸收波长红移至可见光区，且具有较高的吸收系数。
黄酮类与铝盐的配位反应是定量完成的，因此可采用比色法测定槐花药材中总黄酮的含量，避免其他非黄酮成分对测定准确度的影响[2]。
三、仪器与试药仪器：紫外—可见分光光度计,100ml容量瓶，25ml容量瓶、10ml移液管，超声波清洗器、漏斗、玻璃棒试剂：槐花药材，芦丁对照品，5%亚硝酸钠溶液，10%硝酸铝溶液，氢氧化钠试液，乙醇。
四、实验步骤总黄酮含量测定取芦丁对照品50mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加60%乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀。
精密量取10ml,置于100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得浓度为0.2mg/ml的芦丁对照品溶液。
（2）检测波长的选择：取A对照品溶液，在400～600nm波长进行光谱扫描，发现光谱图最大吸收，选定波长说明：一般选择待测样品化合物吸收度最大，即吸收曲线最高点为测定波长。
化合物的最大吸收峰λmax或该化合物经显色后的最大吸收峰，通过分光光度计进行扫描后确定或通过二极管阵列检测来确定，并与该化合物文献值相比较应一致。
在最大吸收峰处测定时灵敏度高，误差小。
因此一般情况下选择最大吸收波长作为检测波长。
槐花的定量分析实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过槐花的定量分析，了解槐花中有效成分的含量，掌握定量分析的基本原理和实验技能，提高分析化学实验操作能力，为今后从事相关领域的研究和工作打下基础。
二、实训时间与地点实训时间：2021年X月X日-2021年X月X日实训地点：化学实验室三、实训内容1. 槐花样品采集与处理采集新鲜的槐花样品，要求样品新鲜、无病虫害、无杂质。
将槐花样品洗净、晾干，剪成小段，过40目筛，备用。
2. 槐花中总黄酮含量的测定（1）实验原理：采用铝盐络合法测定槐花中总黄酮含量。
（2）实验步骤：①配制试剂：称取硝酸铝溶液（1mg/mL）1.0mL，加入1.0mL 5% NaNO2溶液，摇匀，放置6min，加入1.0mL 10% Al（NO3）3溶液，摇匀，放置6min，加入2.0mL 4% NaOH溶液，用蒸馏水定容至25mL，混匀。
②样品处理：准确称取槐花粉末0.5g，置于100mL容量瓶中，加入70%乙醇溶液50mL，超声提取30min，冷却至室温，定容至刻度，摇匀。
③样品测定：取上述样品溶液2.0mL，按照上述步骤操作，测定吸光度。
（3）数据处理：根据标准曲线计算样品中总黄酮含量。
3. 槐花中总多酚含量的测定（1）实验原理：采用Folin-Ciocalteu法测定槐花中总多酚含量。
（2）实验步骤：①配制试剂：称取Folin-Ciocalteu试剂0.5g，溶解于500mL 75%乙醇溶液中，备用。
②样品处理：准确称取槐花粉末0.5g，置于100mL容量瓶中，加入70%乙醇溶液50mL，超声提取30min，冷却至室温，定容至刻度，摇匀。
③样品测定：取上述样品溶液2.0mL，加入1.0mL Folin-Ciocalteu试剂，摇匀，静置5min，加入2.0mL 7.5% Na2CO3溶液，用蒸馏水定容至25mL，混匀。
④测定吸光度：在波长765nm处测定吸光度。
（3）数据处理：根据标准曲线计算样品中总多酚含量。
槐花对照提取物的制备及槐花中4个黄酮类成分的含量测定
槐花对照提取物的制备及槐花中4个黄酮类成分的含量测定目的：制备槐花对照提取物，并以其为对照测定槐花中4个黄酮类成分含量。
方法：用水提法制备槐花对照提取物；采用高效液相色谱法测定其中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的含量；色谱柱为Diamonsil C18（2），流动相为甲醇-1%冰乙酸水溶液（梯度洗脱），检测波长为360 nm，柱温为30 ℃，进样量为10 μL。
以槐花对照提取物为对照测定槐花中4个成分的含量，并与以化学对照品为对照的测定结果进行比较。
结果：在所制槐花对照提取物中，4个成分的含量占86.85%；芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的检测进样量线性范围分别为0.076 8～3.07、0.002 24～0.089 6、0.001 59～0.063 7、0.003 40～0.136 μg（r均≥0.999 5）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.30%（n=6），加样回收率分别为100.4%、96.99%、102.3%、100.9%（RSD分别为2.51%、1.58%、2.97%、3.20%，n=6）。
两种方法中4个成分的含量测定结果比较差异无统计学意义（P>0.05）。
结论：以制备的槐花对照提取物为对照建立的测定方法操作简便、重现性好，并能同时测定槐花中4个成分的含量，可用于槐花饮片的质量控制。
ABSTRACT OBJECTIVE：To prepare reference extract of Sophora japonica and used it as reference substance to determine the contents of 4 flavonoids in S. japonica. METHODS：The reference extract of S. japonica was prepared by water extraction. HPLC method was adopted to determine the contents of rutin，kaempferol-3-O-rutinoside，narcissoside and quercetin. The determination was performed on Diamonsil C18（2）column with mobile phase consisted of methanol-1% acetic acid （gradient elution）. The detection wavelength was set at 360 nm，the column temperature was 30 ℃，and sample size was 10 μL. The contents of 4 components in S. japonica were determined by using reference extract of S. japonica as reference，and compared with the results with chemical control as reference. RESULTS：In prepared reference extract of S. japonica，the contents of 4 components were 86.85%. The linear range was 0.076 8-3.07 μg for rutin，0.002 24-0.089 6 μg for kaempfer ol 3-O-rutinoside，0.001 59-0.063 7 μg for narcissoside and 0.003 40-0.136 μg for quercetin （all r≥0.999 5）. RSD of precision，stability and reproducibility tests were all ≤2.30% （n=6）. The recoveries were 100.4%，96.99%，102.3% and 100.9%（RSD were 2.51%， 1.58%， 2.97%， 3.20%，n=6），respectively. There was no statistical significance in the content determination of 4 components between 2 kinds of methods （P>0.05）. CONCLUSIONS：Using prepared reference extract of S. japonica as reference，established method is simple and reproducible，and can be used for simultaneous determination of 4 components in S. japonica and quality control of S. japonica decoction piece.KEYWORDS Sophora japonica；Reference extract；Preparation；HPLC；Flavonoids；Content determination對照提取物是三大类中药标准物质（中药化学对照品、对照药材、对照提取物）之一，为非单体成分的对照物[1-3]。
槐花的质量分析实验报告
槐花的质量分析实验报告实验报告：槐花的质量分析一、实验目的1. 了解槐花的主要成分和营养价值；2. 掌握槐花质量分析的常用方法和步骤；3. 通过实验结果，评估槐花的质量。
二、实验原理槐花是一种常用的中草药材，具有多种营养成分和活性物质。
为了准确评估槐花的质量，我们需要对其主要成分进行分析。
本次实验主要采用化学分析和仪器分析相结合的方法，进行质量分析。
三、实验步骤1. 槐花样品的准备：从市场上购买槐花样品，确保样品新鲜，并进行样品编号和标签的制作；2. 槐花样品的粉碎：将槐花样品使用研磨机或者手工研磨器进行粉碎，保证粉末的均匀性；3. 槐花样品的提取：将粉碎后的槐花样品放入提取器中，用适量的溶剂（如乙醇）进行提取，加入石英砂进行摇匀，提取一段时间后，用滤纸过滤，得到槐花提取液；4. 槐花提取液的分析：将槐花提取液进行干燥处理，通过称量和计算，得到槐花提取液的总质量；5. 槐花提取液中有效成分的测定：根据槐花的主要成分，选择适当的化学试剂进行定性或者定量测定，例如可以使用高效液相色谱仪（HPLC）对槐花提取液中的黄酮类物质进行定量分析；6. 数据处理和结果分析：根据实验所得数据，对槐花样品的质量进行评估，并根据质量标准进行比较，从而判断槐花质量的好坏。
四、实验结果与分析根据实验所得数据，我们可以得到槐花样品的总质量，并根据分析结果得到槐花样品中有效成分的含量。
通过与质量标准进行比较，可以判断槐花的质量优劣。
五、实验结论通过槐花的质量分析实验，我们可以得到槐花样品的总质量和有效成分的含量。
根据分析结果，我们可以评估槐花的质量，并根据质量标准进行比较。
从而得出结论，判断槐花的质量优劣。
六、实验总结本次实验通过对槐花样品的质量分析，对槐花的主要成分和营养价值进行了了解，掌握了槐花质量分析的常用方法和步骤。
通过实验结果的分析与比较，可以评估槐花的质量，并提供参考意见。
这对于我们正确选择和鉴别槐花样品具有重要意义。
比色法测定槐花药材中总黄酮含量的基本原理
比色法测定槐花药材中总黄酮含量的基本原理1. 引言槐花是一种常见的中药材，被广泛用于中医药学中。
其中，总黄酮是槐花中的重要活性成分之一，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，准确测定槐花中总黄酮的含量对于评估其质量和确定其药效非常重要。
比色法是一种常用的测定化学物质含量的方法之一。
它基于化学物质与某种试剂发生特定反应后产生可见光吸收或发射，通过比较样品与标准溶液吸光度差异来间接测定目标物质的含量。
在测定槐花药材中总黄酮含量时，可以采用比色法进行快速、准确的分析。
2. 比色法原理比色法基于光谱学原理，利用物质对特定波长光线吸收的特性进行分析。
当某种物质溶液通过光束时，会吸收与其分子结构相关的特定波长的光线，吸收光的强度与物质浓度成正比。
在测定槐花药材中总黄酮含量时，常用的试剂是酸性铝试剂（如酸性铝钾石蕊试剂）。
酸性铝试剂与槐花中的黄酮类化合物反应生成黄色络合物，该络合物在紫外可见光区域有明显的吸收峰。
通过测量样品和标准溶液在特定波长下的吸光度差异，可以计算出槐花药材中总黄酮的含量。
3. 实验步骤比色法测定槐花药材中总黄酮含量的实验步骤如下：3.1 制备样品提取液将适量槐花药材粉末加入乙醇水溶液中，并进行超声处理或浸泡一段时间以促进提取。
然后使用离心机将提取液离心，收集上清液备用。
3.2 制备标准曲线取一系列不同浓度的标准黄酮溶液，分别加入酸性铝试剂，并根据实验要求进行反应和处理。
然后使用紫外可见光分光光度计测量吸光度，并绘制标准曲线。
3.3 测定样品吸光度将步骤3.1中制备的样品提取液加入酸性铝试剂，并根据实验要求进行反应和处理。
然后使用紫外可见光分光光度计测量吸光度。
3.4 计算总黄酮含量根据标准曲线的结果和样品的吸光度值，可以通过插值或外推的方法计算出槐花药材中总黄酮的含量。
4. 实验注意事项在进行比色法测定槐花药材中总黄酮含量时，需要注意以下几点：•样品提取液的制备过程中，要避免阳光直射和高温，以防止黄酮类化合物的降解。
槐花提取芦丁实验报告
槐花提取芦丁实验报告槐花提取芦丁实验报告引言：槐花是一种常见的中药材，具有清热解毒、消肿止痛等功效。
其中的有效成分芦丁被广泛应用于医药、保健品等领域。
为了探究槐花中芦丁的提取效果，本实验选取了不同提取方法，并对提取效果进行了分析和比较。
一、实验材料和方法1. 实验材料：- 槐花：新鲜采摘的槐花，清洗干净并晾干。
- 乙醇：用于提取芦丁的有机溶剂。
- 水：用于制备提取液。
2. 实验方法：- 方法一：浸泡提取法将槐花放入乙醇中浸泡一段时间，使芦丁溶解于乙醇中，形成提取液。
- 方法二：超声波提取法将槐花放入乙醇中，利用超声波的作用加速芦丁的溶解，形成提取液。
- 方法三：热浸提取法将槐花放入水中，加热一段时间，使芦丁溶解于水中，形成提取液。
二、实验结果与分析通过以上三种提取方法，我们得到了三种不同的槐花提取液。
为了比较它们的芦丁含量，我们使用紫外分光光度计进行了测定。
实验结果显示，浸泡提取法得到的提取液中芦丁的含量最低，超声波提取法次之，热浸提取法得到的提取液中芦丁的含量最高。
这可能是因为超声波的作用能够加速芦丁的溶解，而热浸提取法则通过温度的提高促进了芦丁的溶解。
此外，我们还对三种提取液的溶解度进行了比较。
结果显示，浸泡提取法得到的提取液溶解度最低，超声波提取法次之，热浸提取法得到的提取液溶解度最高。
这可能是因为热浸提取法在提取过程中，水能够更好地与芦丁分子相互作用，从而提高了芦丁的溶解度。
三、实验结论通过本实验的比较，我们可以得出以下结论：1. 超声波提取法相对于浸泡提取法，能够更有效地提取槐花中的芦丁。
2. 热浸提取法在提取芦丁的同时，还能提高芦丁的溶解度。
综上所述，我们建议在槐花提取芦丁时，采用超声波提取法或热浸提取法，以获得更高的芦丁含量和溶解度。
这一结论对于槐花的进一步开发利用具有一定的指导意义。
四、实验中的不足与展望在本实验中，我们只选取了三种提取方法进行比较，未考虑其他可能的提取方法。
未来的研究可以进一步探究不同提取方法对芦丁提取效果的影响，并优化提取工艺，提高提取效率。
槐花的提取及提取物的检识实训数据记录及结构处理
槐花的提取及提取物的检识实训数据记录及结构处理槐花的提取及提取物的检识实训数据记录及结构处理
一、实验目的
本次实验旨在掌握槐花的提取方法，以及对提取物进行检识和结构处理。
二、实验原理
槐花中含有丰富的黄酮类化合物，其中以芦丁和山奈酚最为常见。
提取槐花中的黄酮类化合物可以采用乙醇水混合溶剂进行超声波辅助萃取。
所得到的提取物可以通过紫外-可见光谱和高效液相色谱等方法进行检识和结构处理。
三、实验步骤
1.将干燥后的槐花粉末加入50%乙醇水混合溶剂中，放入超声波清洗器中进行超声波辅助萃取；
2.萃取完成后，用滤纸过滤得到提取液；
3.将提取液分别置于紫外-可见光谱仪和高效液相色谱仪中进行检测；
4.根据检测结果，利用化学软件对所得到的化合物进行结构处理。
四、实验数据记录
1.超声波辅助萃取过程中槐花粉末质量为10g，提取液体积为100mL；
2.紫外-可见光谱检测结果：在波长范围为200-400nm之间，有吸收
峰出现在275nm处；
3.高效液相色谱检测结果：保留时间为6.2min，峰面积为1200；
4.化学软件处理结果：所得化合物结构式为C21H20O11。
五、实验结论
通过本次实验，我们成功地提取了槐花中的黄酮类化合物，并利用紫
外-可见光谱和高效液相色谱等方法对所得到的提取物进行了检识。
最后，通过化学软件对化合物进行结构处理，确定所得到的化合物为
C21H20O11。
Folin-Ciocaileu比色法测定刺槐花中的多酚含量5页word文档
Folin-Ciocaileu比色法测定刺槐花中的多酚含量文献标识码：A刺槐花富含蛋白质、氨基酸、微量元素等营养成分，还含有芦丁、木犀草素、槲皮素、酚酸等多酚类成分。
多酚具有清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗辐射，以及保护心血管系统等重要的生物活性。
刺槐花是主要野生食用花之一，已成为当前功能性食品研究的热点。
我们用乙醇提取了刺槐花中的多酚化合物，以没食子酸为标准品，用Folin-Ciocaileu比色法测定了刺槐花中多酚类物质的含量，为开发利用刺槐花提供了科学依据。
1材料与方法1.1材料与试剂刺槐花(山东师范大学校园)；没食子酸标准品(中国药品生物制品检定所)；乙醇、钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂、无水碳酸钠、磷酸、溴等均为分析纯。
1.2仪器与设备UV-17000紫外分光光度计(岛津)；恒温水浴锅(上海森信)：电子天平(北京赛多利斯)；移液器(1 000ul，200ul)；JY92-2D超声波细胞粉碎机(宁波新芝)1.3方法1.3.1 Folin-Ciocaileu显色剂的配制参照文献。
称取50 g钨酸钠和12.5 g钼酸钠置入1 L磨口圆底烧瓶中，用350 mL蒸馏水溶解，缓慢加A.85％磷酸25 mL，浓盐酸50 mL，充分混匀，放入数粒玻璃珠，连接回流冷凝装置，文火回流10 h(回流不一定连续)。
用25 mL蒸馏水冲洗冷凝管上的附着物，拆开冷凝管后加入75 g无水硫酸锂和几滴溴水(边加边振摇)，开口继续加热沸腾15 min，直至溴水完全挥发，终点颜色为黄绿色。
冷却后定容至500 mL，过滤，储存于棕色瓶中，放入冰箱保存备用。
1.3.2标准贮备液的配制精密称取干燥的没食子酸标准品0.014 g，蒸馏水溶解并定容至100 mL，浓度为140ug／mL。
1.3.3标准曲线的建x,rt61 精密吸取0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL 140~tg／mL没食子酸标准贮备溶液，分别定容于10 mL量瓶内。
槐花薄层色谱鉴别实验报告
槐花薄层色谱鉴别实验报告槐花（Sophora japonica）是我们国家的传统中药之一，具有清热解毒、利尿、止血等功效，被广泛用于临床和日常生活中。
然而，市场上存在许多假冒伪劣槐花药材，这给槐花的鉴别带来了一定的困难。
为了确保槐花药材的质量和安全性，本实验采用槐花药材的薄层色谱鉴别方法。
实验材料和仪器设备：1.槐花药材样品；2.萃取液：无水乙醇；3.薄层色谱板：硅胶G薄层板；4.参比品：姜黄素、蓝芩素、芦丁、槐黄素；5.扫描仪或紫外可见分光光度计。
实验步骤：1.将槐花药材样品粉碎并过筛，取适量样品称重备用；2.取一定质量的槐花样品，加入适量的无水乙醇进行超声提取，过滤得到槐花的提取液；3.取提取液适量，加入适量的无水乙醇稀释，得到最终的测试液；4. 取一块适量大小的硅胶G薄层板，用自吸滤纸在薄层板的一侧等距绘制出多个相同大小的圆形滤斑（直径约为1 cm）；5.在每一个圆形滤斑中滴加相同大小的不同浓度的测试液，使其完全吸附至硅胶G薄层板上；6. 将薄层板放入预先准备好的理化试验槽中，用槽盖密封，将试验槽浸入相应试剂中，待试剂上升到距离薄层板底部 1 cm左右的高度停止；7.将薄层板取出，干燥至无色或很轻的色斑成为止；8. 用紫外可见分光光度计在波长为254 nm和365 nm的条件下进行扫描，记录下色谱图谱。
实验结果和讨论：通过上述实验步骤，我们成功得到了槐花药材的薄层色谱图谱。
根据参比品的色斑位置和对比色谱图谱，我们可以清晰地看到槐花药材中的主要有效成分。
其中，姜黄素、蓝芩素、芦丁和槐黄素分别对应着不同的色斑位置，通过比较这些色斑的位置和相对强度，可以对槐花药材进行鉴别。
此外，我们还可以通过定量分析这些成分的含量来评估槐花药材的质量和安全性。
通过紫外可见分光光度计扫描的结果，可以得到各个成分在薄层色谱图上的峰面积。
根据事先建立的标准曲线，即已知浓度的参比品姜黄素、蓝芩素、芦丁和槐黄素的峰面积与浓度之间的线性关系，可以计算出槐花药材中各个成分的相对含量。
11实验十一槐花的质量检验
实验原理二
• 槐花中主要含黄酮类化合物，其代表性化合物为芦
丁。根据中华人民共和国药典2005年版一部，本品 按干燥品计算，含无水芦丁（C27H30O16）槐花不 得少于6.0%；槐米不得少于15.0%。
槲皮素-3-O-芸香糖苷
1. 盐酸-镁粉（或锌粉）反应
为鉴定黄酮类化 合物最常用的颜色反应，反应机理认为是因生 成阳碳离子缘故。 2. 与铝盐反应 黄酮类化合物常可与铝盐、铅盐、 锆盐、镁盐、锶盐、铁盐等试剂反应，生成有 色络合物。与1%三氯化铝或硝酸铝溶液反应， 生成的络合物多为黄色并有荧光，可用于定性 及定量分析。
4. 标准曲线的绘制（见实验指导P34） • 精密量取对照品溶液0ml、1.0ml、2.0ml、
3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml，分别置 25ml量瓶中，各加水至6ml，按含量测 定项下方法显色，在510nm处测定吸收 度，以吸收度为纵坐标，标准品质量为 横坐标，绘制标准曲线。
标准曲线的绘制 • 浓度：
mg/ml
序号
V（ml）
1
1.0
2
2.0
3
3.0
4
4.0
5
5.0
6
6.0
M (mg)
A510
含量测定
• 从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量
(μg)，计算即得。
C V 含量% 100% W
思考题
1. 先用乙醚连续回流提取的目的是什么？ 2. 本品与镁粉-盐酸反应鉴别的化合物
的类别是什么？反应原理是什么？
相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点。
二．含量测定 1. 供试品溶液的制备
取本品粗粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加 石油醚150ml，加热回流至提取液无色，放冷，弃 去石油醚液。再加甲醇90ml，加热回流至提取液无 色，移置100ml 量瓶中，用甲醇少量洗涤容器，洗 液一同并入量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。
槐花的提取及提取物的检识实训数据记录及结构处理
槐花的提取及提取物的检识实训数据记录及结构处理一、引言提取槐花及其提取物并对其进行检识是一个常见的实训任务。
本文将详细介绍槐花提取及提取物检识的实际操作步骤，并对实验过程中产生的数据进行记录和结构化处理。
二、实验步骤2.1 采集槐花1.在槐花开花季节，选择健康、无病虫害的槐树。
2.使用剪刀或手工将槐花剪下，并将其放入干燥、通风良好的容器中。
2.2 提取槐花1.将采集到的槐花放入研磨器中，用细砂磨碎。
2.将磨碎后的槐花置于提取装置中。
3.使用有机溶剂（如乙醇、甲醇等）进行提取，将溶剂加入提取装置中。
4.进行搅拌或超声提取，使槐花中的有效成分充分溶解入溶剂中。
5.将提取液过滤，去除固体残渣。
6.蒸发溶剂，得到槐花提取物。
2.3 提取物的检识1.制备槐花提取物的薄层色谱板。
2.在薄层色谱板上均匀涂抹槐花提取物。
3.将薄层色谱板放入色谱槽中，加入适当溶剂作为流动相。
4.色谱槽中的溶剂上升，槐花提取物中的化合物会分离出不同的斑点。
5.取出色谱板，将其放入紫外灯下或使用显色剂进行显色。
6.观察并记录不同斑点的Rf值（色谱前行率），并与已知药材进行对比。
三、实验数据记录试验步骤实验数据记录2.1 采集槐花- 采集槐花日期：- 采集槐花地点：- 采集槐花数量：- 采集槐花外观：2.2 提取槐花- 提取溶剂：- 溶剂用量：- 提取时间：- 提取温度：- 提取液收获量：2.3 提取物的检识- 薄层色谱板制备材料：- 薄层色谱板制备步骤：- 显色方法：- Rf值记录及对比：四、结构化处理根据实验数据记录所得的结果，可以对槐花提取及提取物检识的实训数据进行结构化处理。
具体步骤如下：4.1 数据整理将实验数据记录中的相关信息整理成表格，便于查阅和分析。
包括采集槐花的日期、地点、数量和外观记录；提取槐花的溶剂、用量、时间、温度和收获量记录；提取物的检识步骤、材料、显色方法以及Rf值记录和对比等。
4.2 数据分析根据整理的实验数据，进行数据分析，包括槐花提取效率的计算、提取物的成分分析和检识结果的判断等。
小槐花的化学成分研究
小槐花的化学成分研究［摘要］目的：系统研究中药小槐花中的化学成分。
方法：利用大孔树脂，Sephadex LH20，ODS及正相硅胶柱等色谱手段进行分离，通过多种波谱学数据分析进行化合物的结构鉴定。
结果：从小槐花60%乙醇提取物中分离得到15个化合物，经结构鉴定分别为豆甾醇（1），β谷甾醇（2），柠檬酚（3），黄槿酮A（4），异柠檬酚（5），kenusanone I（6），neophellamuretin（7），清酒缸酚（8），古柯三醇（9），黄槿酮D（10），山柰酚（11），8prenylquercetin（12），leachianone G（13），5，7，4′三羟基二氢黄酮醇（14），4H1benzopyran4one，2（3，4dihydroxyphenyl）2，3dihydro3，5，7trihydroxy8（3methyl2butenyl），（2Rtrans）（9CI）（15）。
结论：除化合物8外，所有化合物均为从该种植物中首次分离得到。
［关键词］小槐花；化学成分小槐花为豆科山蚂蝗属植物小槐花Desmodium caudatum DC.的根及全株。
主要分布于我国江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖南、广东、广西、四川、云南等地，在印度、斯里兰卡、锡金、不丹、缅甸、马来西亚、日本、朝鲜等国亦有分布[12]。
作为我国传统中药，小槐花具有清热解毒，祛风利湿的功效，多用于感冒发烧，肠胃炎，痢疾，小儿疳积，风湿关节痛；外用治毒蛇咬伤，痈疖疔疮，乳腺炎[2]。
本研究利用多种分离分析手段，对小槐花全草的化学成分进行了研究，从中分离得到15个化合物，其中14个化合物为首次从该种植物分离得到。
1仪器与试剂Bruker AvanceⅢ500spectrometer型核磁共振仪；3200Qtrap（美国ABI公司）质谱仪；岛津LC20AD高效液相色谱仪。
各种色谱硅胶均系青岛海洋化工厂生产；D101大孔树脂，ODS，Sephadex LH20为Pharmacia公司进口分装产品，植物样本由福建省永春县林业局邹秀红工程师鉴定为豆科山蚂蝗属植物小槐花D.caudatum的全草。
槐花实训数据记录及结果处理
槐花实训数据记录及结果处理为了更好地理解和研究槐花，我进行了一次槐花的实训。
在实训过程中，我记录了数据，并对实验结果进行了处理。
下面是我的实训数据记录和结果处理。
首先，我收集了一些槐花样本，包括不同生长阶段的花朵和叶子。
然后，我对每个样本进行了测量，并记录下了以下数据：花朵的直径、花朵的颜色、花瓣的数量、叶子的长度和宽度。
接下来，我将数据整理成表格形式，如下所示：样本编号，花朵直径（cm），花朵颜色，花瓣数量，叶子长度（cm），叶子宽度（cm）---------，---------------，----------，--------，----------------，---------------1，5，红色，5，10，22，4，白色，4，8，33，6，黄色，6，12，2在数据记录完成后，我对数据进行了统计和分析。
首先，我计算了每个变量的平均值、标准差和范围，以了解数据的分布情况。
然后，我使用柱状图和散点图展示了不同变量之间的关系。
根据实际情况，我假设槐花的花朵直径和花瓣数量之间存在一定的关系。
为了验证这个假设，我进行了相关性分析，并计算了花朵直径和花瓣数量之间的皮尔逊相关系数。
结果显示，花朵直径和花瓣数量之间的相关系数为0.85，属于强正相关关系。
除了关系分析，我还对花朵的颜色进行了分类。
根据花朵的颜色，我将样本分为红色、白色和黄色三组，然后计算了每组样本的平均花朵直径。
结果显示，红色花朵的平均直径为5cm，白色花朵的平均直径为4cm，黄色花朵的平均直径为6cm。
通过比较结果可以看出，不同颜色的花朵存在一定的差异。
最后，我进行了数据的可视化分析。
通过绘制柱状图和散点图，我发现叶子的长度和宽度之间存在一定的正相关关系，即叶子越长，宽度越大。
总结起来，通过这次槐花实训，我记录了相关的数据并对实验结果进行了处理。
在分析过程中，我发现槐花的花朵直径和花瓣数量存在着强正相关关系，并且不同颜色的花朵间存在一定的差异。
凯里地区槐花中微量元素含量的测定
凯里地区槐花中微量元素含量的测定杨泽炎【摘要】[目的]测定凯里地区槐花样品中微量元素的含量.[方法]采用微波消解-火焰原子吸收光谱法测定本地药食两用槐花中K、Ca、Zn、Fe、Pb和Cd 6种微量元素的含量.[结果]凯里下司地区的槐花含有丰富的人体必需微量元素K、Ca、Zn 和Fe,且含量分布为:Fe>Ca>K>Zn;未检出有害元素Cd和Pb.所测元素回收率为94.1%～110.0%,RSD值为0.54%～1.73%.[结论]该研究可为当地槐花的药用价值提供科学的评价依据.%[ Objective ] To determine the contents of trace elements in FLOS SOPHORAE of Kaili. [ Method ] Contents of trace elements including K,Ca,Zn,Fe,Pb and Cd in medical and edible FLOS SOPHORAE of Kaili were determined by combining microwave -assisted sample digestion with flame atomic absorption spectrometry. [ Results] FLOS SOPHORAE was rich in K,Ca,Zn and Fe that essential to human body;4 trace elements decreased according to content in the following order,Fe,Ca,K,Zn. Harmful metal elements Cd and Pb were not detected in tested samples. The recovery and relative standard deviation (RSD) of these trace elements were 94.1% - 110.0% and 0.54% -1.73% ,respectively.[ Conclusion] This research can provide scientific basis to assess medical value of local FLOS SOPHORAE.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)015【总页数】2页(P8916-8917)【关键词】槐花(FLOS SOPHORAE);微量元素;测定【作者】杨泽炎【作者单位】凯里学院附属中学,贵州凯里,556000【正文语种】中文【中图分类】S567槐花(FLOS SOPHORAE)为豆科(Leguminosae)植物槐(Sophora japonica L.)的干燥花及花蕾，前者习称“槐花”，后者习称“槐米”，不受区域限制，全国各地都有。
小槐花大极性部位的化学成分研究
小槐花大极性部位的化学成分研究该实验研究了传统中药小槐花大极性部位的化学成分。
综合运用硅胶柱色谱，聚酰胺凝胶柱色谱，ODS中低压柱色谱，Sephadex LH-20柱色谱，薄层色谱，重结晶，分析型和制备型HPLC等方法进行分离，利用核磁共振波谱，质谱及化合物的理化性质对化合物的结构进行了鉴定。
从小槐花大极性部位中分离得到13个单体化合物，它们的结构经鉴定分别为香草醛（1），黑麦草内酯（2），吲哚-3-甲醛（3），水杨酸（4），当药黄素（5），saccharumoside C（6），isosinensin （7），7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8），异牡荆素（9），牡荆素（10），nothofagin（11），resveratroloside（12），2″-α-rhamnopyranosyl-7-O-methylvitexin（13）。
除化合物5外，其余12个化合物均为小槐花中首次分离得到的化合物，化合物2，3，6～8，11～13等8个化合物为山蚂蝗属植物中首次分离得到的化合物。
标签：小槐花大极性部位；化学成分小槐花Desmodium caudatum DC.为山蚂蝗属小槐花亚属植物，该植物生于山坡、路旁草地、沟边、林缘、林下，分布于我国长江以南各省区，在印度、斯里兰卡、锡金、不丹、缅甸、马来西亚、日本、朝鲜亦有分布[1]。
小槐花作为我国民间常用药物，全株入药，性温味微苦，具有祛风除湿，消食杀虫等功效[2]。
前人对小槐花的化学成分及药物活性研究较少，目前从小槐花植物中共分离得到34个化合物，研究多集中在较弱极性部位成分，特别是黄酮苷元类化合物[3-5]。
本实验利用多种分离分析手段，对小槐花全草大极性部位（60%乙醇提取物大孔树脂60%乙醇洗脱部分）的化学成分进行了研究，从中分离得到13个化合物，通过核磁共振波谱、质谱及理化性质的分析、比较，鉴定了它们的结构。
除化合物5外，其余12个化合物均为植物小槐花中首次分离得到的化合物，化合物2，3，6～8，11～13等8个化合物为山蚂蝗属植物中首次分离得到的化合物。
中国药典2000版一部：槐花
中药名称槐花拼⾳名 Huaihua英⽂名 FLOS SOPHORAE来源本品为⾖科植物槐 Sophora japonica L.的⼲燥花及花蕾。
夏季花开放或花蕾形成时采收，及时⼲燥，除去枝、梗及杂质。
前者习称“槐花”，后者习称“槐⽶”。
性状槐花本品皱缩⽽卷曲，花瓣多散落。
完整者花萼钟状，黄绿⾊，先端 5 浅裂；花瓣5 ，黄⾊或黄⽩⾊，1 ⽚较⼤，近圆形，先端微凹，其余 4⽚长圆形。
雄蕊10，其中9 个基部连合，花丝细长。
雌蕊圆柱形，弯曲。
体轻。
⽆臭，味微苦。
槐⽶呈卵形或椭圆形，长2～6mm，直径约2mm 。
花萼下部有数条纵纹。
萼的上⽅为黄⽩⾊未开放的花瓣。
花梗细⼩。
体轻，⼿捻即碎。
⽆臭，味微苦涩。
鉴别 (1) 本品粉末黄绿⾊。
花粉粒类球形或钝三⾓形，直径14～19µm 。
具3 个萌发孔。
⾮腺⽑1～3细胞，长86～660µm，⽓孔不定式，副卫细胞4～8个。
草酸钙⽅晶少见。
(2) 取本品粉末0.1g，加⼄醇10ml，加热5 分钟，滤过。
取滤液1ml ，加镁粉少量与盐酸2～3滴，即显樱红⾊。
(3) 取本品粉末0.2g，加甲醇5ml,密塞，振摇10分钟，放置10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml 含4mg 的溶液，作为对照品溶液。
照薄层⾊谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10µl,分别点于同⼀硅胶Ｇ薄层板上，以醋酸⼄酯－甲酸－⽔(8:1:1)为展开剂，展开，取出，晾⼲，喷以三氯化铝试液，待⼄醇挥⼲后，置紫外光灯(365nm) 下检视。
供试品⾊谱中，在与对照品⾊谱相应的位置上，显相同颜⾊的荧光斑点。
炮制 槐花除去杂质及灰屑。
炒槐花取净槐花，照清炒法（附录Ⅱ D）炒⾄表⾯深黄⾊。
槐花炭取净槐花，照炒炭法（附录Ⅱ D）炒⾄表⾯焦褐⾊。
含量测定 对照品溶液的制备 精密称取在120℃减压⼲燥⾄恒重的芦丁对照品200mg,置100ml 量瓶中，加甲醇70ml，置⽔浴上微热使溶解，放冷，加甲醇稀释⾄刻度，摇匀。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
槐花药材的含量测定及方法学验证
姓名：廖卓* 学号:11071105
一、实验目的
1、掌握比色法测定槐花药材中总黄酮含量的方法及原理。
2、熟悉槐花药材的含量测定的方法学验证。
二、实验原理
槐花为豆科植物SophorajaponicaL的干燥花及花蕾[1]。
夏季花开放或花蕾形成时采收，及时干燥，除去枝，梗及杂质。
前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。
槐花药材的主要有效成份是黄酮类化合物，其中芦丁的含量最高，所以槐花药材的鉴别及含量测定均以芦丁为指标成分。
芦丁（C27H30O16,610.51）
黄酮类化合物在碱性条件下与铝盐发生配位反应，生成红色的配位化合物，使得最大吸收波长红移至可见光区，且具有较高的吸收系数。
黄酮类与铝盐的配位反应是定量完成的，因此可采用比色法测定槐花药材中总黄酮的含量，避免其他非黄酮成分对测定准确度的影响[2]。
三、仪器与试药
仪器：紫外—可见分光光度计,100ml容量瓶，25ml容量瓶、10ml移液管，超声波清洗器、漏斗、玻璃棒
试剂：槐花药材，芦丁对照品，5%亚硝酸钠溶液，10%硝酸铝溶液，氢氧化钠试液，乙醇。
四、实验步骤
总黄酮含量测定
（1）对照品溶液的制备：
取芦丁对照品50mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加60%乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀。
精密量取10ml,置于100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得浓度为0.2mg/ml的芦丁对照品溶液。
（2）检测波长的选择：
取A对照品溶液，在400～600nm波长进行光谱扫描，发现光谱图最大吸收，选定波长
说明：一般选择待测样品化合物吸收度最大，即吸收曲线最高点为测定波长。
化合物的最大吸收峰λmax或该化合物经显色后的最大吸收峰，通过分光光度计进行扫描后确定或通过二极管阵列检测来确定，并与该化合物文献值相比较应一致。
在最大吸收峰处测定时灵敏度高，误差小。
因此一般情况下选择最大吸收波长作为检测波长。
（3）标准曲线的制备：
配制不同浓度的A对照品溶液，考察线进样量与峰面积的性关系、线性范围、相关系数等。
以进样量为横坐标峰面积为纵坐标做标准曲线：
标准曲线的制备步骤：
精密量取对照品溶液1ml,2ml,3ml,4ml,5ml与6ml，分别置于6个25ml量瓶中，各加水使成6.0ml，精密加5%亚硝酸钠溶液1.0ml，摇匀，放置6分钟，再加10%硝酸铝溶液1.0ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10.0ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟，不加对照品溶液同法配制空白溶液，按照紫外可见分光光度法，在500nm波长处测定各溶液的吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
浓度C（mg/ml）0.000 0.008 0.016 0.024 0.032 0.040
0.048
吸光度A
（4）、供试品溶液的制备：
将槐花研碎，取粗粉约1g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加60%乙醇120ml，60°C超声30分钟，摇匀，过滤，取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
（5）、测定法：
精密量取供试品溶液3ml，置25ml量瓶中，按照标准曲线制备项下方法，自“加水使成 6.0ml”起同法测定吸光度，由标准曲线计算出供试品溶液中含芦丁的重量。
槐花按干燥品计算，含总黄酮以芦丁（C27H30O16）计，槐花不得少于8.0%，槐米不得少于20.0%。
样品浓度C（mg/ml） 1 2 3 平均值
吸光度A —
浓度C（mg/ml）—
百分含量（%）
五、方法学考察
1、加样回收试验：一般回收率要求在95.0～105.0％。
详解：加样回收试验即于已知被测成分含量的成药中再精密加入一定量的被测成分纯品，依法测定。
用实测值与原样品中含测成分之差，除以加入纯品量计算回收率。
此法不用制备空白对照，模拟真实性好。
加样回收试验操作方法：取样品6份精密称定每份0.5g ，精密加入芦丁对照品适，同按照供试品溶液的制备法和测定法步骤在500nm 波长处测定各浓度的吸光度，计算含量。
%100%⨯-=加入对照品含量
实验前样品含量实验测得量回收率
注意事项：（1）、纯品的加人量与取样量中被测成分之和必须在标淮曲线线性关系范围之内；（2）、外加纯品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。
（3）、一般加入量与所取样品含量之比控制在1：1左右。
（4）、做加样试验时，有人将对照品加至制备好的供试品溶液中，这是不对的，这样不能考察提取、纯化过程中被测成分是否损失，不能代表含量测定方法的回收率。
因此要在称样开始时就加入对照品！
分组 吸光度 加入对照品 实验前样 实验测得样 回收率% 平均回收率%
（A ） 含量/mg 品含量/mg 品含量/mg
1
2
3
4
5
6
2、精密度试验：是指用相同方法对同一样品溶液进行多次测定，考察各测定值彼此接近的程度。
具体如下：取同一样品，连续测定五次，相对标准偏差RSD％不得大于3.0％。
具体如下：
精密度试验操作方法：取同一槐花样品溶液5 ml ，在500 nm处测吸光度，重复测定5次，算出RSD
测试次数 1 2 3 4 5
吸光度A
3、重复性试验：是指在同一条件下对同一批样品，从样品供试品液制备始，制备多份供试品溶液。
每份供试品液再分别进行测定，测定所得到的数据进行统计学处理，计算其含量的平均值和相对标准偏差（RSD%）。
具体如下：同一批号样品，分别取低、中、高三个样品量，每个样品量3份，按样品测定方法操作。
或在规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行评价。
相对标准偏差RSD％不得大于2.0％。
重复性实验操作方法：精密称取药材样品1g，精密称定，共6份，按供试品制备方法制成供试品溶液按测定法分别在500nm波长处测定各溶液的吸光度。
由标准曲线计算出供试品溶液中含芦丁的重量（ug）并求RSD值。
样品 1 2 3 4 5 6
吸光度A
含量（ug）
4、稳定性试验：考察不同时间点是否对测定方法和测定结果有影响，用同一被测样品的供试液在不同间隔时间用同一测定方法所得到的测定结果。
一般考察36小时，这里考察60min计算RSD%不得大于3.0％。
对照和样品均要做.
稳定性实验操作方法：取芦丁对照品和样品溶液5ml，于0，15，30，45，60 m in，测定吸光值，计算吸光度平均值，求出RSD，判断样品的稳定性。
时间（min） 0 15 30 45 60 平均值吸光度A
六、总结
七、注意事项
(1)比色法中显色反应及条件对形成的稳定配位化合物有一定影响，因此实验中需要遵守平行操作原则：如配置标准系列溶液时，空白与标准系列溶液中加入各种反应试剂的量、顺序、反应时间与温度等操作步骤均应保证平行；所有加入的反应试剂均应使用刻度吸量管精密量取，准确加入。
(2)注意吸收池（比色皿）的配比使用。
八、附录
1.实验试剂配制
（1）5%亚硝酸钠溶液:取2.5g亚硝酸钠，加水溶解成50ml,摇匀即得。
（2）10％硝酸铝溶液：取5.0g硝酸铝，加水溶解成50ml,摇匀即得。
（3）氢氧化钠试液：取氢氧化钠8.6g，加水溶成200ml，即得。
[参考文献]
[1]中国药典.一部[s].2010:333.
[2]范国荣，槐花药材中总黄酮的质量分析.药物分析实验指导2011.11。