正反定型不符及疑难血型鉴定处理分析
血型鉴定正反定
▼抗体太弱或消失 如新生儿、老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年龄
和诊断
▼非正常高浓度的抗－A、抗－B可引起前带现象，导致假 阴性,将血清稀释或用EDTA（2.5％）处理可消除 ▼A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗－A1, 抗－A1
只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
应用抗－A、抗－B试剂未能出现预期的凝集反应
原因
二、红细胞标问题
患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏（包
被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体 试剂的特异性免疫反应所致
红细胞表面包被IgG类抗体
原因
三、血清标本的问题
免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老
年人ABO抗体减弱
c.将血清用0.01mol/L DTT处理和再定型
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼同种抗体/意外抗体 室温下抗-P、抗-M、抗E等，可能出现意外反应，干
扰ABO血型鉴定
抗体特异性抗体鉴定，选择抗原阴性的红细胞做反定
谢 谢
使用了受到细菌污染的试剂 试验器皿不干净 实验结果记录、解释错误
原因
二、红细胞标本问题
患者近期接受了大量ABO血型相容但不同
型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型
人接受O型红细胞
原因
二、红细胞标本问题
◆某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些
白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，
6.室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应
7. 做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰
分析和处理
ABO正反定不符的分类
ABO疑难血型三步分析法
ABO疑难血型三步分析法在血型分类中没有疑难血型,迄今为止在文献中也查不到“疑难血型”的定义，因为“疑难血型”是1种血型难以检定或判定的“现象”,而不是1种型别。
检定1份标本是否属“疑难血型”，除了标本本身的特殊性外，还与实验室的设备、技术人员的水平、经验等多种因素有关，例如1份ABO亚型标本,在基层医院血库可能因为正定型与反定型不一致而分析不出原因被认为是“疑难血型”,但在血液中心血型参比实验室该问题可能就易于迎刃而解。
在检定血型时,标本如果受多种因素干扰使结果难以判定,便呈现“疑难血型”现象。
一、干扰ABO血型正确判定的因素（一）生理性因素1.年龄老年人(ABO抗原或ABO抗体减弱),6个月前的婴儿(ABO 抗原或ABO抗体不成熟),可能导致ABO血型误定。
2.ABO亚型包括A(B)型、B(A)型,ABO抗原减弱导致细胞定型(正定型)受干扰,或血清中出现不规则抗体干扰血清定型(反定型)。
3.冷凝集素有些健康人血清中含有冷凝集素,且在<4℃才有活性,不干扰ABO血型检定,如果冷凝集素效价升高,或在室温以上反应,致敏自身红细胞可能干扰ABO正定型,存在于血清可能干扰ABO反定型。
4.“先天性”无ABO抗体近年有“先天性”无ABO抗体的个案报告,原因有待研究。
5.双精子授精红细胞呈嵌合体。
6.个体特异性个别人血清中ABO可溶性血型物质过高,ABO正定型红细胞凝集减弱。
（二）实验技术原因1.标本混淆如采错被检者,红细胞和血清非同一人,记录结果与标本编号不对应。
2.静脉输液处采样ABO抗体被输液稀释,干扰ABO反定型。
3.采样不规范用凝血块洗下红细胞检定血型，其中混有凝集程度不一的红细胞；用血浆做ABO反定型,操作过程中纤维蛋白析出凝集试剂红细胞。
4.试剂质量问题或漏加试剂定型试剂过期失效，未达标准，被污染。
操作中未遵循“先加血清后加细胞”的原则，大批量样本试验时漏加试剂血清或试剂红细胞。
5.实验操作不规范被检红细胞未洗涤,非特异性粘附血浆蛋白,或被检红细胞悬液过浓或过稀。
ABO疑难血型鉴定
ABO正、反定型不合疑难血型三步分析法”ABO正反定型不符定义：①ABO正反定型不符，即正定型与反定型提示的血型结果不一致②ABO正反定型相符，但为弱反应，正定型反应强度＜3+，或反定型反应强度＜2+③正定型为O型，反定型与A细胞、B细胞凝集强度差别≥2+凡是遇到ABO正、反定型不合的病人第一步: 排除人为因素／操作失误１，重新采集血样⑴分抗凝，不抗凝两管⑵排除采错人，输血/输液处采样……２，核对试剂，器材仔细阅读试剂效期，说明书，操作方法，注意事项３，规范化操作复检复检ABO 血型仍然正、反定型不合，就确定为疑难血型进入三步法第二步第二步：凡是ABO正、反定型不合的病例按下面方法，分析病人的抗原、抗体是“变多？还是变少？”正、反定型结果判断1，正定型AB, (两种抗原) 抗原变多正定型O, (无抗原) 抗原变少2，反定型O, (两种抗体) 抗体变多反定型AB, (无抗体) 抗体变少3，正定型A, 或B (一种抗原) ①抗原变多;②抗原变少反定型A, 或B (一种抗体) ①抗体变多;②抗体变少★不要过问“真滴变多变少没有”，你依样画葫芦就是了规律很好记，不管是抗原/抗体：两种→肯定是变多没有→肯定是变少；一种→可能是变多，也可能是变少归纳ABO正,反定型不合的“五大类30种原因”知道有个“五大类30种原因”就可以了不要记，书上有这些表，现用现翻书★用排除法（1）红细胞抗原变少7种（2）红细胞抗原变多7种①＜6月,老年（临床）□①自身凝集素（临床诊断）□②白血病（临床诊断）□②红细胞粘附大量蛋白（RBC未洗）□③输异型血（输血史）□③样本含试剂反应物（RBC未洗）□④造血干细胞移植（病史）□④造血干细胞移植（病史）□⑤血型物质↑□⑤获得性B抗原（类B）（临床感染）□⑥急性大失血（临床病史）□⑥B(A)表型□⑦ABO亚型□⑦输异型血（输血史）□注意：每条的临床提示（3）血清抗体变少6种（4）血清抗体变多7种①<6个月/老年（临床）□①自身抗体（临床诊断AIHA）□②ABO亚型□②同种抗体（抗筛）□③低丙种球蛋白血症（化验）□③对试剂反应的物质□④造血干细胞移植（病史）□④血清蛋白异常（化验）□⑤先天性ABO抗体缺失□⑤输异型血浆（输血史）□⑥大量输液（输血史）□⑥造血干细胞移植（病史）□⑦输含血型抗体Ig（输血史）□注意：每条的临床提示5）混合凝集（mf）3种①3个月内输异型血（输血史）□②造血干细胞移植（病史）□③双精子受精/嵌合体（问家系）□注意：每条的临床提示归纳剩下不能排除的原因：第三步: 实验验证针对剩下几种不能排除的原因, 选择针对性实验验证，如何选择针对性实验呢?翻看书本:《输血免疫血液学实验技术》人民卫生出版社,2011 .1; P131。
ABO血型正反定型不符的原因调查与分析
（ 山西省中医院 ， 山西 太原 ０ ３ ０ ０ １ ２ ）
文章编 号 ： １ ６ ７ １— ８ ６ ３ １ （ ２ ０ １ ６ ） １ ２— ０ ９ ２ ２— ０ ２
摘要
目的： 回顾 分析山西省 中医院 Ａ Ｂ Ｏ血型测定结果 ， 总结造 成 Ａ Ｂ Ｏ血 型正反定 型不符 的原 因， 并提 出解决
ｄ ｉ ｓ ｃ ｒ ｅ ｐ ａ ｎ ｃ ｙ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｆ ｏ ｒ ｗ ａ ｒ ｄ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｖ ｅ ｒ ｓ ｅ ＡＢＯ ｔ ｙ ｐ ｉ ｎ ｇ ， ａ ｎ ｄ ｐ ｕ ｔ ｏｒ ｆ ｗａ ｒ ｄ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ： Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｔ ｕ ｂ ｅ ｓ ｇ ｅ ｌ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗ ｉ ｌ ｌ ｂ ｅ ａ ｐ － ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ ｔ ｏ ｔ ｅ ｓ ｔ ｔ ｈ ｅ ｆ ｏ ｗａ ｒ ｒ ｄ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｖ ｅ ｒ ｓ ｅ ｔ ｙ ｐ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ａ ＢＯ ｂ ｌ ｏ ｏ ｄ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｆ ｏ ｒ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ａｌ ｌ ７ ８ ５ ０ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｅ ｘ ａ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ
ｏ ｆ ｓ ｅ ｌ ｆ —ａ ｇ ｇ ｌ ｕ ｔ ｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ， ４ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｗｅ ａ ｋ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ， １ ｃ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ ｃ ｏ ｎ ｇ ｅ ｎ ｉ ｔ ａ ｌ ｌ ｙ ｎ ｏ ｎ ＡＢＯ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ， ａ ｎ ｄ ２ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ｉ ｒ ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ —
血型鉴定常见疑难问题分析及处理
ABO血型系统特殊表达的血型 ABO血型亚型：亚型是指属同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数有一定差异。 如A1、A2、A3/B3、Ax/Bx、Am/Bm、Ael /Bel,以及相应的AB亚型如A3B、AxB、ABx、ABel等。 输血时血型的选择：除非患者血清中存在37℃下有反应活性的抗-A1/-B1抗体，否则无必要同亚型输血。一般采用同类抗原血型或O型洗涤细胞输注则可。如A亚型输A型血、B亚型输B型血、AB亚型输AB型血。
三、反定型---血清自身相关问题
6.年龄因素 在未产生自己抗体的婴儿、由母亲被动获得抗体的婴儿，或抗体水平下降的老人，试验时可出现不见凝集或仅见弱凝集反应等异常结果。 7.骨髓移植术后 ABO不同型骨髓移植患者术后。 8.纤维蛋白原的影响 使用血浆或凝固不完全的血清会形成很小的纤维蛋白凝集包裹的红细胞凝块。
ABO定型常见问题的解决方法
获得性B红细胞 * 询问病史 * 酸化抗-B血清（pH6.0) * 唾液型物质检测 * 家系调查证明没有遗传基础
ABO定型常见问题的解决方法
混合视野凝集 * ABO亚型：A3、B3亚型等 * ABO不同型输血（非O型人近期输入O型血)：询问近期输血史、毛细管离心分离自身红细胞等 * ABO不同型骨髓移植术后 * 单合子的相嵌红细胞、双合子交移体红细胞
一、技术和管理错误
（5）阳性反应产生溶血现象未能识别，导致假阴性结果。 （6）漏加试剂，产生假阴性结果。 （7）结果记录或判断错误，产生假阳性或假阴性结果。 （8）细胞与血清比例不适当，产生假阳性或假阴性结果。
二、正定型---红细胞自身相关问题
1.红细胞致敏 直接抗球蛋白试验阳性的红细胞（如自身免疫性溶血性贫血患者的红细胞）在含高蛋白介质的试剂中可发生凝集，产生假阳性结果。 2.异常基因型 ABO亚型的弱抗原常规方法难以检出，产生假阴性结果。 3.Cis-AB型（顺式AB型） 指从父母的一方同时得到A和B基因在一条染色体上，而另一条染色体上是从父母中另一方来的O基因。顺式AB细胞的B抗原较弱，类似B3亚型。
ABO血型抗体缺失致ABO血型正反定型不符的检测分析
ABO血型抗体缺失致ABO血型正反定型不符的检测分析目录一、内容综述 (2)1. 研究背景 (3)2. 研究目的与意义 (4)二、ABO血型系统概述 (5)1. ABO血型系统的基本概念 (5)2. ABO血型系统的遗传特性 (6)3. ABO血型系统在临床输血中的应用 (7)三、ABO血型抗体缺失的原因分析 (9)1. 遗传因素 (9)2. 免疫因素 (10)3. 感染因素 (11)4. 药物因素 (12)四、ABO血型正反定型不符的临床表现及诊断方法 (13)1. 临床表现 (15)2. 诊断方法 (15)血型鉴定 (16)抗体检测 (17)家族调查 (17)五、ABO血型抗体缺失致ABO血型正反定型不符的检测策略 (18)1. 传统检测方法的应用与局限性 (19)2. 新型检测技术的研发与应用 (20)酶免疫分析法 (21)聚合酶链反应技术 (22)流式细胞术 (23)六、案例分析 (24)1. 案例一 (26)2. 案例二 (26)3. 案例三 (27)七、讨论与展望 (28)1. ABO血型抗体缺失对输血安全的影响 (29)2. ABO血型抗体缺失在法医学中的应用价值 (30)3. 对未来检测技术发展的展望 (31)八、结论 (32)1. ABO血型抗体缺失致ABO血型正反定型不符的检测分析的重要性332. 积极应对ABO血型抗体缺失带来的挑战，提高输血安全性 (34)一、内容综述在现代医学实践中，血型鉴定作为一项基础而重要的检测技术，在众多临床应用中发挥着至关重要的作用。
ABO血型系统作为最基础的血液分类方法之一，其抗体缺失所引发的ABO血型正反定型不符问题，一直是输血医学和血液病学研究的热点议题。
当个体因遗传或后天因素导致ABO血型系统中某些抗体的缺失时，其血型的正反定型可能会出现不一致的情况。
这种现象的发生，不仅给血型鉴定工作带来了极大的困扰，还可能对患者的输血治疗和器官移植等高风险手术产生重大影响。
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程一、正反定型不一致1、重复试验（严格正规操作）。
2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。
3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。
）1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。
2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。
3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型：①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+以上）；②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。
③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。
4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。
）5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，或用灵敏度更高的血型卡做反定型。
6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性后再定血型。
4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。
二、交叉配血不合（一）主侧端不相合1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。
2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。
3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。
4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性。
5、试验系统被污染。
（二）次侧端不相合1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。
2、病人与供血者的ABO血型不相合。
3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。
4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通过可输血）。
（三）配血不合的主要因素1、血型是否正确。
疑难血型鉴定及处理分析
疑难血型鉴定及处理分析摘要：目的：探究ABO疑难血型产生原因和正确血型鉴定方法，意在提高疑难血型鉴定准确性。
方法：把2022年1月到2023年7月本院收集的献血者45例纳入研究，经微孔板法开展ABO血型正反定型检测，选出疑问标本并开展试管法复检，并实行吸收放散试验、不规则抗体筛查、抗球蛋白试验、特异性鉴定工作，鉴别患者血型。
结果：本组45例患者进行血型鉴定后，无标本差错例数35例，10例ABO血型正反定型不相符样本，包括4例（40.00%）抗体减弱，2例（20.00%）抗原减弱，2例（20.00%）冷自身抗体，1例（10.00%）同种抗体，1例（10.00%）亚型。
结论：ABO疑难血型正反定型不相符的原因比较复杂，结合患者基本资料，开展科学检验和分析，可保证疑难血型鉴定准确性，提高患者输血安全。
关键词：疑难血型；鉴定；原因临床输血是抢救危重疾病患者的重要手段，但人体血型类型多样，只有选择合适的血型输血，才可保证患者安全，鉴于此，血型准确鉴定至关重要[1]。
然而实际血型鉴定过程中，正反定型不相符现象时常出现，导致血型鉴定难度变大。
为分析疑难血型的鉴定方法，提高实际鉴定结果准确性，本文以2022年1月到2023年7月收治的献血者为研究对象，现报道如下。
1资料和方法1.1一般资料2022年1月到2023年7月期间，在本院收集的献血者45例均为研究对象，其中男性患者25例，女性患者20例，年龄分布在24~67岁间，均数（44.27±4.58）岁。
医院伦理委员会批准，患者或家属签署同意书。
1.2研究方式本组患者分别完成相关检测工作，包括：（1）ABO血型初筛：微孔板法正反定型，如果血型正反定型不相符，盐水介质试管法二次检测，如果O细胞阴性，正定型抗-A、抗-B反应强度<4+，反定型A型或B型红细胞<2+，亦或者抗原抗体不对应，增加开展试管法抗-AB、抗-H、抗-A1、抗-A1c和抗-A2c血清检验，完成血型正反定型试验工作。
ABO血型鉴定中正反定型不一致时的分析与探讨
ABO血型鉴定中正反定型不一致时的分析与探讨目的：利用ABO疑难血型3步分析法对正反定型不一致时导致的疑难血型进行鉴定和分析，探讨其原因与解决办法。
方法：用试管法和微柱凝胶卡法常规检测ABO血型，正反定型不符者进一步做吸收放散试验、唾液血型物质测定、抗体筛选、亚型检测等，并应用ABO疑难血型3步分析法进行分析、鉴定。
结果：共检测正反定型不符20例。
其中2例属于人为原因操作不规范导致正反定型结果不符，另外18例疑难血型鉴定分析原因主要为：生理因素、自身抗体、不规则抗体、血浆蛋白异常、血液病等影响因素。
结论：按照不同的确诊试验分别进行鉴定分析判断，选择正确的辅助方法检测ABO血型，提高血型鉴定的准确性与输血的安全有效性。
关键词ABO疑难血型3步分析法疑难血型鉴定输血安全ABO血型是人类最早发现也是对输血安全影响最大的血型系统。
ABO定型错误会导致溶血性输血反应，轻者可能导致无效输血，重者危及受血者的生命[1]。
当发现ABO正反定型不一致时如何查找原因并快速正确地鉴定患者血型就显得尤为重要。
我们在输血前试验中应用ABO疑难血型3步分析法[2]，对20例疑难血型进行鉴定分析及总结，报告如下。
1 材料与方法1.1 标本来源上海市中医药大学附属曙光医院2011年1月至2012年6月拟输血患者中ABO血型正反定型不符20例，年龄3个月～80岁。
1.2 试剂和仪器抗A、抗B和抗AB血型定型试剂（单克隆抗体），抗H、抗A1和RhD（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体），人ABO血型反定型用红细胞试剂盒（其中包括：A1细胞、B细胞、O细胞）、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG，C3d多特异性）、抗体筛检红细胞试剂盒等由上海血液生物医药公司生产；抗人球蛋白检测卡、ABO 血型微柱凝胶卡、37 ℃专用孵育器、卡式离心机由强生医疗器材有限公司生产；2002-2型血清学专用离心机由台湾贝索公司生产。
1.3 方法根据ABO疑难血型3步分析法。
ABO血型疑难定型
ABO疑难定型ABO系统是唯一一个在红细胞上缺乏相应抗原的情况下其血清或血浆中存在对应抗体的最重要的血型系统。
因此ABO定型必须进行正反定型并且正反定型结果相一致的前提下才能准确鉴定ABO血型。
在正定型试验中，一般我们使用抗-A和抗-B来检测红细胞上是否存在A和/或B 抗原，反定型试验中使用A和B型标准试剂红细胞来检测血清/血浆中是否存在抗-A和/或抗-B 抗体。
一般而言，正反定型的结果互相一致。
但在一些特殊的情况下，正反定型的结果相互不一致，在本文中分析了ABO正反定型不一致的原因，并对不同的原因加以分析解决，即分别在正定型和反定型中增加一些试剂来更进一步的细化检测红细胞上的抗原和血清/血浆中可能出现的抗体，并通过型物质测定及吸收放散等方法来准确定型。
一、ABO疑难血型鉴定的方法（一）正反定型：正定型：-A, -B，-AB, -H, -A1反定型：Ac, Bc, Oc, 自身对照1. ABO正定型中各种试剂用途疑难定型中正定型用抗血清抗-A及抗-B抗-AB:确认弱A和弱B抗原,与弱A及弱 B抗原亲和力强,会产生强反应抗-H:用于检查亚型及孟买型, A亚型红细胞上的H抗原多于正常A型抗-A1: 用于A亚型(如A2, A3)检测2. H抗原在红细胞上的分布3. ABO反定型中各种试剂的用途反定型中试剂红细胞的意义A及B细胞: 确认抗-A或抗-B抗体O型红细胞:检查是否存在ABO系统以外抗体干扰ABO反定型自身对照: 用于确认正反定型结果的有效性,排除自身抗体对定型的干扰(如冷凝集等) A2细胞: 用于亚型的鉴定, 尤其是在怀疑是A亚型且又存在抗-A1抗体的情况下（二）型物质测定型物质准备：1~2ml唾液，沸水煮10分钟，离心后得到的上清。
标清的调制：标清用盐水稀释至其效价为1：16中和：将0.5ml型物质与调制后的标清0.5ml等体积混合,室温放置30分钟检测：用Ac检测中和后的抗-A, Bc检测中和后的抗-B.结果判断：如果抗-A被中和，则被检者为A型，如果抗-B被中和，则被检者为B型。
ABO血型鉴定正反向定型不符的原因与分析
ABO血型鉴定正反向定型不符的原因与分析【摘要】目的分析ABO血型正反向定型不符的原因及防治措施。
方法应用正反向定型、唾液血型物质测定试验及吸收放散试验，检测16例ABO血型正反定型不符标本。
分析其原因，并正确分型。
结果本组16例出现正反向定型不符。
其中冷抗体6例，血浆异常3例，ABO亚型3例，抗原或抗体减弱2例，人为操作因素和试剂因素2例。
结论对ABO血型正反向定型不符，无法定型的血液样本，可针对原因，采取多种方法，正确鉴定ABO血型。
【关键词】ABO血型鉴定；正反定型不符；原因；解决方法正确的血型鉴定，是保证临床输血安全和抢救生命的重要工作。
输血前必须检查血型，选择血型相同的供血者，进行交叉配血，结果完全相合才能输血［1］。
但在临床血型鉴定时，也会遇到正反向定型不符等情况，给临床输血带来隐患，2008年8月至2010年10月，我院共接受各科申请血型鉴定2380例，其中ABO 血型正反定型不符16例，现分析如下。
1 资料与方法1.1 一般资料血型鉴定对象：2380例血型鉴定者，均为我院2008年8月至2010年10月间住院患者；其中男1630例，女750例；年龄1.6~86岁，平均58.6岁；正反向定型不符16例。
1.2 方法1.2.1 试剂来源正定型单克隆抗A、抗B、抗AB试剂由长春生物制品有限公司提供。
反定型标准红细胞A、B、O有上海血液研究所提供。
1.2.2 鉴定方法①血型正反定型：玻片法和试管法；②唾液血型物质的检测：检测分泌型者唾液中的血型物质，并结合临床病史、用药史、输血史等为血型鉴定提供依据；③ABO亚型鉴定及抗人球蛋白试验、抗体鉴定试验等均按照文献操作［2］。
2 结果本组血型鉴定者2380例，其中16例出现正反向定型不符。
经过对16例血液样本各种方法的综合检查，其中冷抗体6例，血浆异常3例，ABO亚型3例，抗原或抗体减弱2例，人为操作因素和试剂因素2例。
3 讨论3.1 血型鉴定的意义随着现代工业、交通的发达，很多肿瘤、创伤的发病率呈上升趋势；而外科手术，器官移植，创伤急救等均需要进行治疗性输血。
ABO血型鉴定正反不符及其原因
二、血液标本的问题
19
20
红细胞多凝集现象，遗传性或获得 性红细胞膜改变，隐蔽的自身抗原暴 露，也称T-激活红细胞，因为人血清 中都含有这些暴露的抗原的自然发生 的抗体，故ABO血型相容的血清和T激活红细胞发生凝集反应。单克隆抗 体血型试剂不发生这类反应。
血清标本中如果含有试剂红细胞保护 剂成份相应的抗体，则可能发生与ABO 血型抗原抗体反应无关的红细胞凝集反应。
02
正反定型不符的原因查找和处理
（1）基本程序
首先
，如果先前试验中红细胞悬浮在血清或血浆中，则改为洗涤
后的红细胞并悬浮在盐水中，进行重复试验。如果重复试验仍是正反定型不符，
则继续下列试验：
01
02
03
04
重新采集献血 员和受血者的 血液新鲜标本， 这样可能解决 标本采集或标 记的错误或原 标本受污染所 致的错误结果。
可能被误判为红细胞凝集。
2 3
出现混合视野凝集现象，病人血液中不只是一个 ABO血型的红细胞，如将O型红细胞，或O型造血细胞输 给A型人。病人接受了ABO血型不相容的骨髓细胞移植， 并产生了耐受。比如，A型病人接受了O型人的骨髓后， 血循环中有O型红细胞，但血清中只存在抗-B。病人近期 接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如非O型人 接受了O型红细胞，或骨髓移植病人血液循环中有多于一 个ABO型别的红细胞。
ABO血型正反定型不符及其原因
目录
CONTENTS
01ABO血型正反定型 结果不相符合的原因
03 正定型的意外反应 结果
02 正反定型不符的原 因查找和处理
04 反定型的意外反应 结果
除对新生儿只检测其红细胞抗原，即只进行正定型外，临床常规检测ABO血型，必 须正反定型，正定型是检测红细胞抗原，反定型是检测血清中抗体，判定ABO血型，结 果相符。病人或者献血者（待输血液）ABO正反定型结果不相符合，要详细记录实验， 不能确定ABO血型，记录该标本血型结果有疑问。如果是待输血的标本，该袋血就不能 发出使用，应换一袋正反定型相符的血液，或者在时间允许情况下，重新进行试验，如确 定是否试验操作错误等原因，即已经明确该袋血ABO正反定型相符，可以重新考虑使用 该袋血。除此之外，不管是什么原因，只要是ABO正反定型不符的血，都不能用于临床 输血。如受血者（病人）标本ABO正反定型不符，必须首先为该受血者准备RhD同型的 O型血，以应病人治疗急需。然后进行研究，查找该受血者ABO正反定型不符的原因。
医学疑难血型鉴定疑难配血
输血：确认血型之前可输O型红细胞，确认后 输B型红细胞。
ABO正反定型不符病例分析3
抗体鉴定：患者血型B、RhD+ 自身抗体特异性：抗-D（与D阴性细胞呈
阴性反应，与D阳性细胞均呈阳性反应）
配血与输血 自身抗体干扰-凝集强度最弱 血液选择
患者，女性，64岁，诊断：巨球蛋白血症。 贫血，输血
ABO正反定型不符病例分析4
血清学检查 抗-A 抗-B 抗-A,B Ac Bc Oc 4＋ 2＋ 4＋ 2＋ 4＋ 2＋
分析：患者的血型可能是A型。 巨球蛋白血症血液中异常球蛋白升高，导 致缗钱状凝集。有时MM也会出现。
ABO正反定型不符病例分析4
4＋ 2＋ 4＋
Ac Bc Oc － 3＋ －
分析：根据患者诊断及临床表现，血型可能是 A型，获得性B。
ABO正反定型不符病例分析6
进一步试验 自身细胞+自身血清：阴性 酸化试剂血清：pH＜6.0无凝集 唾液血型物质
结合病史 抗体筛查阴性 交叉配血：与A型阴性，与AB型阳性。 输血：A型血。
某患者，男性，初步诊断骨髓增生异常综合征 （MDS）
ABO正反定型不符病例分析1
血型鉴定 抗-A 抗-B 抗-A,B
Ac Bc Oc
＋mf － ＋mf
－ 3＋ －
－ － ±/－
－ 3＋ －
分析：亚型？诊断？抗原减弱的可能性很 大。非前述血液病患者，有可能是亚型。
最后：A型
ABO正反定型不符病例分析1
ABO正反定型不符病例分析7
新生儿，出生后24小时内黄疸，诊断新生儿溶 血症。
血型鉴定常见的疑难问题分析及处理剖析
2020/10/17
8
A O
B
O
O
大多数CisAB型的人血清中含有弱抗-B抗体，能与 所有普通B型或AB型人的血液凝结，但不与顺式 AB细胞反应。因此输血时不能输B型或AB型的血 液，而应该输O型或A型的洗涤红细胞，或者考虑 自体输血。
2020/10/17
9
二、正定型---红细胞自身相关问题
4.嵌合体血型 体内有两群红细胞，定型时显示“混 合外观凝集”现象。真正的嵌合体非常少见，可出 现于双胞胎，在胚胎期由于血管的吻合使得2个胎儿 的血液发生混合，2种血液都被机体认做自我，不产 生抗体。也可见于ABO不同型的骨髓移植术后。人工 嵌合状态可出现于输血后，如O型红细胞输给A或B型 的病人。
2020/10/17
13
二、正定型---红细胞自身相关问题
8.可溶性血型物质增多 胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中 可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗A （B）血清从而影响正定型结果。
2020/10/17
14
二、正定型---红细胞自身相关问题
9.红细胞发生自凝现象 患者血清中的高效 价自身冷凝集素使红细胞发生凝集。
1.技术和管理错误 2.正定型---红细胞自身相关问题 3.反定型---血清自身相关问题
2020/10/17
4
一、技术和管理错误
（1）标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果。 （2）器材不洁产生假阳性结果。 （3）试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果。 （4）离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果。
3.高分子聚合物的影响 血浆增容剂也会引起缗钱状凝集导 致假阳性结果。
2020/10/17
16
三、反定型---血清自身相关问题
ABO正反定型不符原因分析及对策精选全文
精选全文完整版（可编辑修改）红细胞凝集强度判断标准【《输血免疫血液学实验技术》】ABO正反定型不符常见情况有：一、弱反应或缺失抗原。
二、多余的抗原反应。
患者正定型结果均为阴性，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强度的凝集，不属于抗体水平减弱的现象，依据反定型结（1）患者正定型结果与正常的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗AB的弱反应且与抗A 缺乏凝集反应提示为A亚型。
患者正定型结果与抗A出现1+混合视野反应，与正常的4+反应强度明显减弱，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强（1）患者正定型结果与正常抗A的凝集强度反应出现明显减弱。
依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗A、抗AB的弱（1）患者正定型结果与正常的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗AB的弱反应且与抗A患者正定型结果与抗B出现混合视野反应，与正常的4+反应强度明显减弱，但在反定型试验中，与B细胞不反应，而与A1型红细胞出现正常反应强度的（1）患者正定型结果与正常抗B的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有B抗原，正定型患者红细胞与抗B、抗AB的弱患者正定型结果与抗A出现4+混合视野反应，与正常的4+反应强度出现减弱，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强（1）患者正定型结果与正常抗A的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型解决方法:解决方案:在37℃定型,去除自身冷抗体(红细胞用DTT处理血浆用白身红细胞吸收)干扰后定型，或进行血型物质检测2.致敏lgG抗体的红细胞引起自身凝集多凝集是在正定型试验中使用人血清来源的定型血清时出现,现在定型试剂使用鼠单克隆来源的定型血清不存在此问题。
（三）血清中存在针对试剂红细胞保存液成分的抗体。
正反定型不符及疑难血型鉴定处理分析
正反定型不符及疑难血型鉴定处理分析准确的血型鉴定是临床安全、有效输血的重要基础保证，是使交叉配血实验顺利进行的前提，随着《临床输血技术规范》的实施，标准血型鉴定操作越来越为大家重视，不再以简单的红细胞肉眼玻片法抗原鉴定来确定被检者血型，而是以正定型和反定型双相结果来综合判断。
使输血安全向前迈进了一步。
但也会经常遇到一些正反定型不符的病例，经过一些特殊实验，如抗人球蛋白实验、吸收放散实验血型物质的测定，基因分型等方法，最终确定了血型，现将各种疑难病例分为7类，总结报告如下：1对象与方法1.1检测对象自2001年5月～2008年5月来我站自愿无偿献血者8000名中，共检出血型正反不符者82例。
1.2试剂、仪器仪器：日本以保田普通离心机，达亚美卡式离心机、温浴箱；试剂：抗人球蛋白试剂（上海市血液中心），标准谱细胞（上海市血液中心），凝聚胺法试剂（珠海贝索），Coombs卡（达亚美）。
标准血清抗A抗B抗A1血清、A1、A2红细胞（长春博德生物制品公司），抗D（上海血液生物医药有限公司）1.3实验方法正反定型及抗体筛查鉴定方法均按照《临床输血与输血技术学实验指导》；抗人球蛋白实验方法按照《临床输血与输血技术学实验指导》；血清浓缩法：即在观察完原来实验结果的基础上再次离心，弃掉上清液，再次加入血清（试剂或标本）离心后再观察结果，还可以反复进行以上操作；吸收放散实验：按照《临床输血与输血技术学实验指导》；亚型血型鉴定实验：方法同血型鉴定，试剂为抗A1血清、A1、A2红细胞；唾液血型物质测定：包括被检者唾液的留取，抗血清标化和血型物质测定均按照《临床输血与输血技术学实验指导》。
2结果将正反定型不符结果分类如表3讨论血型不符的输血一旦发生，会导致严重的并发症[1]，Linden等[2]报道在美国每年因溶血反应死亡的病例中，约10例是输血失误引起的。
SaZamn[3]报道，在输血相关死亡病例报告中，51%是由于输入了ABO不相溶的血液制品导致急性溶血反应致死的。
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正定型是用已知的标准血清检测红细胞上未知的抗原ABO反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体一．引起ABO正反定型不一致的原因分析1.技术因素例如(1) 试剂贮存不当(2) 使用技术错误(3) 使用错误的试剂(4) 使用污染或失效的试剂(5) 离心速度不当2.存在IgM性质的自身冷抗体由于自身冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自身溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型。
3.抗原表达弱或缺失例如a.白血病 b.双胞胎 c.H基因变异4.高水平可溶性血型物质的病人。
5.混合视野：例如(1) 来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样(2) 骨髓移植后不久(3) Tn或A3型红细胞6.缺失或弱抗-A、抗-B例如(1) 新生儿血清(2) 免疫缺陷、紊乱病人(3) 老年人7.前带现象当抗-A或抗-B的效价（如35000）IgG太高时, 立即离心法与A 或B细胞不反应。
8.多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。
9.不正常血清蛋白：白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。
10. 血样血清中存在抗试剂成分的抗体：例如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。
二、ABO正反定型不符的解决方法有以下几个（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方法有1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是血型物质的抑制2.酶处理红细胞再次试验3.吸收放散确定是否是亚型。
4.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野5.了解病情诊断（尤其是白血病）6.了解是否是骨髓移植受者7.了解是否是双胞胎8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定9.分泌型型物质检查10. 进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离（二）出现弱反应或缺失抗体例如1.年龄：新生儿及老人。
Autocue Innova全自动血型仪正反定型不符原因分析和对策
Autocue Innova全自动血型仪正反定型不符原因分析和对策目的：調查Autovue Innova全自动血型仪在ABO血型鉴定中正反定型不符的原因，探讨相应的处理措施。
方法：选取2016年1-12月采集送检的全血标本4 371份，采用Autovue Innova全自动血型仪进行ABO血型鉴定，并采用手工方法复查。
结合病史资料、抗体筛查、抗体鉴定、蛋白定量等方法，分析两种方法出现正反定型不一致的原因及其对策。
结果：（1）Autovue Innova系统成功鉴定4 312份（98.65%），系统提示错误信息的11份（0.25%）经系统重新检测均可成功分级，另48份（1.10%）正反定型不符；手工方法成功鉴定4 345份（99.41%），正反定型不符26份（0.59%）。
两种方法的成功鉴定率比较差异无统计学意义（字2=0.003，P=0.959）。
（2）经Autovue Innova系统判定为正反定型不符者含正定型不符7份及反定型不符41份。
7份正定型不符包括红细胞弱反应（4份）及混合红细胞反应（3份）；41份反定型不符包括血清额外反应（9份）及血清弱反应（32份，其中22份可被手工法纠正）。
（3）婴幼儿样本（37.50%）、恶性血液病（12.50%）、同种异体抗体（8.33%）、冷抗体（8.33%）是造成Autovue Innova 系统48份正反定型不一致的主要原因，但绝大部分（16/18）婴幼儿样本及全部冷抗体、M蛋白所致的正反定型不符者可被手工法纠正。
结论：Autovue Innova 全自动血型仪的ABO血型鉴定准确率高，对于其判断为正反定型不符者，首先应采用凝胶卡式法、试管法等手工方法复查，若经手工复查仍不能纠正结果者，可考虑行抗体筛查、抗体鉴定、蛋白定量等进一步检查。
在采供血系统及器官移植中，ABO血型定型是一个重要组成部分[1]。
血型鉴定错误会引发致命性输血反应，因此血型鉴定的正确性极为重要和关键。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
正反定型不符及疑难血型鉴定处理分析
准确的血型鉴定是临床安全、有效输血的重要基础保证，是使交叉配血实验顺利进行的前提，随着《临床输血技术规范》的实施，标准血型鉴定操作越来越为大家重视，不再以简单的红细胞肉眼玻片法抗原鉴定来确定被检者血型，而是以正定型和反定型双相结果来综合判断。
使输血安全向前迈进了一步。
但也会经常遇到一些正反定型不符的病例，经过一些特殊实验，如抗人球蛋白实验、吸收放散实验血型物质的测定，基因分型等方法，最终确定了血型，现将各种疑难病例分为7类，总结报告如下：
1对象与方法
1.1检测对象
自2001年5月～2008年5月来我站自愿无偿献血者8000名中，共检出血型正反不符者82例。
1.2试剂、仪器
仪器：日本以保田普通离心机，达亚美卡式离心机、温浴箱；试剂：抗人球蛋白试剂（上海市血液中心），标准谱细胞（上海市血液中心），凝聚胺法试剂（珠海贝索），Coombs卡（达亚美）。
标准血清抗A抗B抗A1血清、A1、A2红细胞（长春博德生物制品公司），抗D（上海血液生物医药有限公司）
1.3实验方法
正反定型及抗体筛查鉴定方法均按照《临床输血与输血技术学实验指导》；抗人球蛋白实验方法按照《临床输血与输血技术学实验指导》；血清浓缩法：即在观察完原来实验结果的基础上再次离心，弃掉上清液，再次加入血清（试剂或标本）离心后再观察结果，还可以反复进行以上操作；吸收放散实验：按照《临床输血与输血技术学实验指导》；亚型血型鉴定实验：方法同血型鉴定，试剂为抗A1血清、A1、A2红细胞；唾液血型物质测定：包括被检者唾液的留取，抗血清标化和血型物质测定均按照《临床输血与输血技术学实验指导》。
2结果
将正反定型不符结果分类如表
3讨论
血型不符的输血一旦发生，会导致严重的并发症[1]，Linden等[2]报道在美国每年因溶血反应死亡的病例中，约10例是输血失误引起的。
SaZamn[3]报道，在输血相关死亡病例报告中，51%是由于输入了ABO不相溶的血液制品导致急性溶血反应致死的。
因此，正确的血型鉴定，尤其是ABO血型是正确配血，安全输血的基础。
若血型鉴定准确无误，大部分配血是安全顺利的。
过去，由于条件和观念所限，许多地方医院仅凭简单的玻片法的的红细胞抗原测定（正定型）就确定患者血型，进而给患者输注同型血液，使输血中的人为错误率很高。
2001年后卫生部《临床输血技术规范》实施后，人们安全输血的意识不断提高，血型鉴定技术也规范为正反定型技术，有些医院还在正定型中添加被检者RBC与抗A+B(O型血清)的反应结果的观察，以对与抗A抗B反应进行质量控制，在反定型中添加
被检者血清与O型红细胞的反定结果，以排除ABO以外的抗体影响定型实验结果，从多方面控制实验结果的准确性。
在我们日常工作中遇到的各种情况的处理中发现，添加这些检查很有必要。
反定型时增加O管检查是检出ABO以外抗体的有效方法之一，因为正常情况下O型红细胞上不存在ABO抗原的，若O管发生凝集，很可能存在ABO以外抗体。
提示我们进行抗体筛查和鉴定来进一步确定抗体的性质。
在我们实验中40例O管凝集标本中，通过抗体筛查抗体鉴定，发现28例为非特异性抗体（大多为RBC直接Coombs试验阴性的病人和冷凝集病人），12例为特异性抗体，包括抗M、抗E、抗D等盐水抗体，因此O管反定型十分必要。
通常情况下，红细胞上的抗原是不变的，而且用来检测抗原的标准血清效价较高。
因此正定型的错误率很低。
反定型则是检测被检者的血清中抗体，由于人血清中抗体强弱差异较大，尤其是老人小孩或免疫功能低下者及大量输液病人，血清中抗体较弱使得反定型检出率降低。
在这种情况下，通常用血清浓缩的方法来使实验更加清晰，即通过增加血清抗体的浓度和比例，使抗原完全结合，使弱凝集转强供肉眼观察，我们用这种方法对29例弱抗体患者进行实验，效果很明显，只有3例患者反复浓缩无效，后用家系调查确证了血型，此类病人体内确无抗体，属免疫缺陷病。
在正反定型不符问题的解决中，家系调查也是可以帮助我们确定疑难血型的有效方法之一，在一些疾病如癌症肿瘤或亚型血型中，抗原减弱或消失时有发生，往往会影响被检血型的准确判断。
我们有5例血液病及肿瘤患者，红细胞上抗原已经完全消失用浓缩法无法确定，3例血清抗体缺失病人，将其父母、兄弟、配偶及子女的血型鉴定出来和被检者的实验结果综合起来加以分析判断,也可以得出正确的血型，此外，基因分型也是取得正确血型的方法之一。
在血型鉴定中尤其是亚型的鉴定时，唾液的血型物质鉴定和血液的吸收放散实验也是一种必不可少的检测手段，因为红细胞抗原还少量存在于唾液等体液中，检测到唾液中的血型抗原，亦可以帮助确定血型。
因为微量抗原可以通过吸收放散实验才能检出，血液中抗原减弱无法检出时，可以借助吸收放散实验来检测以帮助抗原确定。
3例亚型和2例肿瘤病人的血型用此方法得以确定。
只是此方法操作有些繁琐，需要较长时间，不适合急诊情况下的处理。
此外，人源性血清在弱抗原检出方面优势相当明显，因为多个人份新鲜抗血清混合应用效价很高，确实可以使不易观察的弱凝集变得清晰可见。
另外，我们在工作中发现：在ABO血型一时还不能确定的情况下，病人急需输血，输注O型洗涤红细胞确实为一种可行有效的方法，因为有些血型鉴定需要花费很多时间进行很多实验来综合分析判定结果，为了不因此而延误病情，先给病人输注O型洗涤红细胞应急，待血型确定后再输入同型血液是较好的解决方法。
参考文献
[1]魏小斌，输血人为误差和输血安全，中国输血杂志2005.6.18（3）.
[2]LindenJV,TouraultMA,ScribnerCL.(letter)Decreaseinfre-quencyoftransfusionf atalities.Transfusion,1997,37(2):243.
[3]SazamaK. Report sof355 transfusion-associated deaths:1976 through 1985.Transfusion,1990,30(7).。