花青素提取方法总结优秀课件
花青素提取方法总结课件
简单方法。其主要原理是依据花色苷的不同
基团的在不同的波长下有不同的吸收峰,进而
推断出其结构。
• ①B环有邻位羟基的确定。②糖基位置的确
定。③酰基是否存在的确定。④甲基化与羟
基化
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HPLC
• 高效液相色谱法( HPLC) 以经典的色谱法为基础,引入
提高23 %。H HP 具有提取温度低,时间短,不破坏色素
结构等优点,但应用于花色苷等活性成分提取的报道还
不多见。
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提取条件比较
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纯化
经过提取的花色苷粗品中往往含有很多有机
酸、糖等杂质,产品质量稳定性差、纯度不高
80℃时，温度对花色苷有较明显的降解作用；
• 光对花色 苷的稳定性影响 很大
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辅色剂的影响
花色苷同辅色剂联合形成一种垂直层叠的复
合物(Goto 等1979) ,这种层叠过程产生一种
疏水力,从而防止亲水核的加合作用和失色。
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提取方法：
一、萃取
素- 3-二丙二酸酰基葡萄糖苷。
• Zhao等对中国紫玉米杂交品种的籽粒进行了质谱分析, 初步发
现9个花青苷单体物质, 包括矢车菊素- 3-葡萄糖苷、天竺葵素
- 3-葡萄糖苷、芍药素- 3-葡萄糖苷、两个矢车菊素- 3-丙二酸
酰基葡萄糖苷同分异构体、天竺葵素- 3-丙二酸酰基葡萄糖苷
、两个芍药素- 3-丙二酸酰基葡萄糖苷同分异构体、天竺葵素
花青素提取方法
*花青素的提取:花青素的提取是目前花青素研究发展的热点问题，也是花青素生产、投入使用的关键性环节。
近年来，在传统提取方法的基础之上，一些凭借新技术或经过改良后的提取方法也开始崭露头角。
1有机溶剂萃取法这是目前国内外最广泛使用的提取方法。
多数选择甲醇、乙酮、丙酮等混合溶剂对材料进行溶解过滤，通过调节溶液酸碱度萃取滤液中的花青素。
国内吴信子等用盐酸一甲醇溶液提取，然后用纸层析法(中号)和柱层析法(聚乙酰胺)进行花色苷的分离。
目前，有机溶剂萃取法已成功地应用于诸如葡萄籽、石榴皮、蓝莓等绝大多数含花青素物质的提取分离。
有机溶剂萃取法的关键是选择有效溶剂，要求既要对被提取的有效成分有较大溶解度，又要避免大量杂质的溶解。
该方法原理简单，对设备要求较低，不足之处是大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。
2水溶液提取法有机溶剂萃取的花青素多有毒性残留且生产过程环境污染大，有鉴于此，水溶液提取应运而生。
该方法一般将植物材料在常压或高压下用热水浸泡，然后用非极性大孔树脂吸附；或直接使用脱氧热水提取，再采用超滤或反渗透，浓缩得到粗提物。
它是Duncan和Gilmour(1998)发明的提取花青素的方法，此方法设备要求简单，但产品纯度低。
3超临界流体萃取法超临界流体萃取是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响进行提取。
这种方法产品提取率高，但设备成本过高。
孙传经采用超临界CO：萃取法从银杏叶、黑加仑籽及葡萄籽中提取花青素工艺进行了研究。
该工艺中CO 和改性剂可循环使用，对环境无污染。
4微波提取法该法于1986年被Ganzlert E9]等人首先用于分离各种类型化合物。
国内李风英探讨了微波技术对葡萄籽中原花青素提取量和分子结构的影响。
为微波在葡萄籽中有效成分浸提方面的研究奠定了基础。
微波提取法是利用在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离，进入到具有较小介电常数、微波吸收能力相对较差的萃取溶剂中。
花青素的提取方法和步骤
花青素的提取方法和步骤花青素是一类广泛存在于植物中的天然色素，具有重要的生物学和营养学价值。
提取花青素的方法有很多种，下面将介绍其中几种常用的方法和步骤。
一、酸碱法提取花青素1. 材料准备：将需要提取花青素的植物材料（如紫苏叶、蓝莓等）洗净，晾干备用。
2. 粉碎植物材料：将晾干的植物材料用粉碎机或者研磨器研磨成细粉末。
3. 提取溶剂的准备：准备酸性和碱性的溶剂，如乙酸、盐酸和氢氧化钠等。
4. 酸性提取：将粉碎的植物材料与酸性溶剂混合，加热搅拌一段时间，使花青素溶解在溶剂中。
5. 碱性提取：将酸性溶剂中的混合物与碱性溶剂混合，再次加热搅拌一段时间，使花青素从酸性溶剂中转移到碱性溶剂中。
6. 分离花青素：用分液漏斗将混合溶液分离，花青素会被碱性溶剂提取出来。
7. 萃取花青素：将碱性溶剂中的花青素进行浓缩和纯化，可用醇类溶剂进行萃取。
8. 干燥花青素：将提取到的花青素溶液经过过滤和浓缩后，用低温真空干燥仪将溶剂去除，得到干燥的花青素。
二、醇法提取花青素1. 材料准备：将需要提取花青素的植物材料（如紫薯、葡萄皮等）洗净，晾干备用。
2. 粉碎植物材料：将晾干的植物材料用粉碎机或者研磨器研磨成细粉末。
3. 提取溶剂的准备：准备醇类溶剂，如乙醇、丙酮等。
4. 醇提：将粉碎的植物材料与醇类溶剂混合，加热搅拌一段时间，使花青素溶解在溶剂中。
5. 过滤：将醇提液进行过滤，去除固体杂质。
6. 浓缩：将过滤后的溶液进行浓缩，可用旋转蒸发仪等设备进行浓缩。
7. 纯化：对浓缩后的花青素溶液进行纯化处理，如用硅胶柱层析等方法进行纯化。
8. 干燥花青素：将纯化后的花青素溶液进行低温真空干燥，得到干燥的花青素。
三、超声波法提取花青素1. 材料准备：将需要提取花青素的植物材料（如紫甘蓝、蓝莓等）洗净，晾干备用。
2. 粉碎植物材料：将晾干的植物材料用粉碎机或者研磨器研磨成细粉末。
3. 提取溶剂的准备：准备酸性和醇类溶剂，如盐酸和乙醇等。
花青素用水提取的原理
花青素用水提取的原理
花青素是一类水溶性天然色素，其主要存在于蓝色、紫色的植物和食物中，如紫菜、蓝莓、紫薯、葡萄皮等。
提取花青素的一种常用方法是水提取，其原理如下：
1. 破碎：首先，需要将含有花青素的植物材料（例如紫薯）进行破碎，以增加其表面积，便于花青素与水的接触。
2. 溶解：破碎后的植物材料会与水接触，其中的花青素会溶解在水中。
这是因为花青素具有较好的水溶性，其分子结构中含有亲水基团，可与水分子形成氢键。
3. 过滤：提取出的花青素溶液需要通过过滤的方式去除杂质、植物残渣等固体物质。
一般会使用滤纸或滤网等设备进行过滤。
4. 蒸发：将过滤后的花青素溶液进行蒸发，去除水分，使溶液中的花青素浓缩。
5. 结晶：浓缩后的花青素溶液可能会形成结晶，可以通过结晶的方式进一步提纯花青素。
需要注意的是，水提取花青素的效果受到多种因素的影响，包括植物原料的质量、温度、时间等。
此外，花青素的稳定性较差，容易受到光、热、氧化等因素的影响而降解，因此在提取过程中需要注意保护花青素的稳定性。
色素提取和分离ppt课件
胡萝卜素（橙黄色）
类胡萝卜素
1 /4
叶黄素（黄色）
叶绿素
3 /4
叶绿素a (蓝绿色) 叶绿素b（黄绿色）
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根据物理知识，什么颜色的物体透过（反射） 什么颜色的光，吸收其他颜色的光，白色物体反 射各种色光，黑色物体吸收各种色光。
叶绿素主要吸收_蓝__紫__光__、__红__光 类胡萝卜素主要吸收_蓝__紫__光___
求的是（ ）C。
A. 提取高等植物叶绿体中的色素 B. 用纸层析法分离色素
C. 了解各种色素的吸收光谱
D. 验证叶绿体中所含色素的种类
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7．在进行绿叶中色素的提取和分离的实验时不让层
析液触及滤液细线的原因是（ C ）
A．滤纸上几种色素会扩散不均匀而影响实验结果 B．滤纸上的滤液细线会变粗而使色素太分散 C．色素会溶解在层析液中而使实验失败 D．滤纸上的几种色素会混合起来不分散
分离色素。
★扩散速度与色素在层析中的溶解度的关系：
溶解度大，扩散速度快 溶解度小，扩散速度慢
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1.准备滤纸条
铅笔线 画铅笔细线
滤液细线
画滤液细线
★要求：细而齐 精品课重件 复2—3次
2.分离色素：
培养皿
层析液 插滤纸条
★层析液不能没及滤液线
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胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b
★色素的种类
素环，排列在最里圈的色素呈（ C ）
A．橙黄色 B．蓝绿色 C．黄绿色 D．黄色
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3 、从绿叶中提取色素，选取的最佳叶片应是（ D）。
A. 肥嫩多汁的叶片 B. 革质叶片 C. 刚刚长出来的小嫩叶 D. 鲜嫩，颜色浓绿的叶片
4 、绿叶中的色素能够在滤纸上彼此分离开的原因是（ C）。
花青素提取
桑椹酒渣中花青素提取1材料与方法1.1材料桑椹果酒酒渣。
1.2试剂药品试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。
1.3主要仪器电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。
1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀）释后在分光光度计上测出OD值，以OD值代表桑椹红色素的含量。
1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较分别以75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
1.4.2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。
1.4.3温度对提取效果的影响以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于60、50、40、30、20℃下提取1h。
1.4.4提取时间对提取效果的影响每隔20分钟取样测得OD值。
1.4.5正交实验1.4.6得率试验称取一定量样品，经提取后。
提取液经旋转蒸发仪蒸发，真空干燥，求得率。
方法一稀HCl+95%乙醇提取1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较固定浸提温度、提取时间、液料比，分别85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）为提取剂进行浸提试验，色素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2~0.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液ODλmax和700nm处的吸光值A。
按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。
注：ODλmax的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
原花青素提取
原花青素提取
原花青素是一种天然的色素，存在于一些水果、蔬菜和植物中，如蓝莓、紫薯、紫甘蓝、红心莲雾等。
原花青素具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性，对人体的健康和预防疾病具有重要的作用。
原花青素的提取方法主要有以下几种：
1. 溶剂提取法：使用适当的溶剂（例如乙醇、甲醇、丙酮等）将植物材料中的原花青素溶解出来，然后进行过滤、浓缩、沉淀等步骤，最后得到纯化的原花青素。
2. 水溶性聚合物提取法：将适量的植物材料浸泡在水溶性聚合物（如聚乙烯吡咯烷酮）溶液中，利用聚合物与原花青素之间的亲和性，将原花青素吸附到聚合物上，然后经过水洗、离心等步骤，最后从聚合物中脱附得到原花青素。
3. 超声波提取法：利用超声波的震荡作用，加速溶剂与原花青素之间的质量转移，使得原花青素更容易被溶解和提取出来。
该方法操作简单、高效，可以快速得到较高纯度的原花青素。
值得注意的是，不同的提取方法可能适用于不同的植物材料和实验要求，选择合适的提取方法可以提高提取效率和纯度。
同时，提取过程中还应注意对材料的保护，避免影响原花青素的质量和活性。
花青素提取方法
*花青素的提取:花青素的提取是目前花青素研究发展的热点问题，也是花青素生产、投入使用的关键性环节。
近年来，在传统提取方法的基础之上，一些凭借新技术或经过改良后的提取方法也开始崭露头角。
1有机溶剂萃取法这是目前国内外最广泛使用的提取方法。
多数选择甲醇、乙酮、丙酮等混合溶剂对材料进行溶解过滤，通过调节溶液酸碱度萃取滤液中的花青素。
国内吴信子等用盐酸一甲醇溶液提取，然后用纸层析法(中号)和柱层析法(聚乙酰胺)进行花色苷的分离。
目前，有机溶剂萃取法已成功地应用于诸如葡萄籽、石榴皮、蓝莓等绝大多数含花青素物质的提取分离。
有机溶剂萃取法的关键是选择有效溶剂，要求既要对被提取的有效成分有较大溶解度，又要避免大量杂质的溶解。
该方法原理简单，对设备要求较低，不足之处是大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。
2水溶液提取法有机溶剂萃取的花青素多有毒性残留且生产过程环境污染大，有鉴于此，水溶液提取应运而生。
该方法一般将植物材料在常压或高压下用热水浸泡，然后用非极性大孔树脂吸附；或直接使用脱氧热水提取，再采用超滤或反渗透，浓缩得到粗提物。
它是Duncan和Gilmour(1998)发明的提取花青素的方法，此方法设备要求简单，但产品纯度低。
3超临界流体萃取法超临界流体萃取是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响进行提取。
这种方法产品提取率高，但设备成本过高。
孙传经采用超临界CO：萃取法从银杏叶、黑加仑籽及葡萄籽中提取花青素工艺进行了研究。
该工艺中CO 和改性剂可循环使用，对环境无污染。
4微波提取法该法于1986年被Ganzlert E9]等人首先用于分离各种类型化合物。
国内李风英探讨了微波技术对葡萄籽中原花青素提取量和分子结构的影响。
为微波在葡萄籽中有效成分浸提方面的研究奠定了基础。
微波提取法是利用在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离，进入到具有较小介电常数、微波吸收能力相对较差的萃取溶剂中。
《高中生物课件：植物色素的提取与鉴定》
几种植物色素含量的比较
叶绿素 4.2 mg/g
类胡萝卜素 0.05 mg/g
花青素 0.21 mg/g
植物色素的生物学意义及与人类生活的 关系
植物色素可以为人类提供营养，抗氧化，还有助于维持免疫和调节血糖，是食品、保健品制造业非常重 要的原料。
植物色素的提取与鉴定
植物色素是植物体内一类重要的有机化合物，不仅给植物赋予了不同的颜色， 还起到重要的生理功能。了解植物色素的提取和鉴定方法，有助于我们更好 地理解植物的生物学特征和优化植物的栽培、利用过程。
植物色素种类及功能
1 类别多样
植物色素种类众多，常见的包括叶绿素、类胡萝卜素、花青素等等。
避免实验误差
精确称量
实验中要尽量准确控制样品的 质量及用量。
使用干净的试剂
使用经过清洁处理的试剂和仪 器，防止其他物质的污染和影 响。
确保仪器准确
使用准确、稳定的仪器，并进 行必要的校正。
植物色素的生物学意义及应用
植物色素是维持植物生长发育和调节植物光合作用的重要分子，是绿色食品 和保健产品的重要成分，还具有潜在的药用价值。
2 生理功能
植物色素能够吸收光能，完成光合作用, 还能够抗氧化，参与细胞信 号传导等生理功能。
植物色素的提取方法
溶剂提取法
色谱法提取
溶剂提取法是常用的一种方法， 其原理是利用溶剂或油脂将植 物色素溶解出来。
色谱法提取是一种高效、分离 度好的提取方法，可以获得相 对纯净的植物色素。
超声波提取法
超声波提取法是一种新兴的植 物色素提取方法，利用超声波 的机械作用使植物细胞内色素 析出。
色谱仪和球差仪
常用于色素的分离和鉴定。
滤纸和滤膜
用于过滤来提取植物色素。
(原花青素提取分离)
定量分析
标准曲线
配制0.05—0.5mg/mL的原花青素对照品水溶液，于试 管中依次加入0.5mL丌同浓度对照水溶液，加入 2.5mL30g/L香草醛的甲醇溶液及2.5mL30%硫酸的甲 醇溶液，混匀后于30℃水浴保温20min后在波长为 500mn下测定绘制标准曲线。 2 线性方程为：Y=2.0669X-0.0196， R =0.9994
工艺流程
粉碎葡萄籽
称量
浸提
浓缩
合并上清液
过滤并离心
上柱洗脱
浓缩含量较高的洗脱液
喷雾干燥
实验步骤
提取
取粉碎后的葡萄籽20g 按料液比1:7加入 70%乙醇，在50℃下回流提取30min，浸 提3次，分别过滤，冷却后在4 000 r/min 转速离心10min，合并上清液，蒸发浓缩 回收乙醇。
实验步骤 分离
原花青素的用途 由于原花青素属于黄酮类化合物，具有多种生理功能 及药理作用。 随着研究人员对原花青素的研究一步一步深入，发现 原花青素的功效甚好，用途及其广泛。 原花青素的主要作用: 抗氧化剂 由于opc分子结构中有多个酚羟基B环上具有相邻 二酚羟基，且分子中有几个不氧原子相邻的二羟酚基， 有利于分子不金属离子及蛋白结合，阻止了催化自由 基反应金的属离子的活性。所以是一种很强的抗氧化 剂。
大孔树脂柱层析:将浓缩液上样已经处理好的大孔 树脂层析柱上,分别用水和20%、40%、60%、 80%的2BV的乙醇洗脱，分别收集洗脱液，检测 含量，合并含量较高的洗脱液，蒸发浓缩。
干燥
将浓缩好的样液进行喷雾干燥。
定性分析
盐酸镁粉反应 将样品 溶于1ml 乙醇 加入少 许镁粉 振摇 滴加几 滴浓盐 酸
实验试剂和仪器
黑枸杞提取花青素21页PPT
•
46、寓形宇内复几时，曷不委心任去 留。
•
47、8、啸傲东轩下，聊复得此生。
•
49、勤学如春起之苗，不见其增，日 有所长 。
•
50、环堵萧然，不蔽风日；短褐穿结 ，箪瓢 屡空， 晏如也 。
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
谢谢！
花青素
花青素的作用不仅使植物呈现五彩缤纷的颜色，也具有降低酶的活性，抗变异等保健功能的活性分子。研究 表明有一定花青素浓度的提取物能有效预防不同阶段癌变发生，但花青素的个体作用并不确定，部分原因是与其 它酚类物质等稳定成分分离后进行生物测定，花青素易降解。
在食品中的应用
随着科技的发展，人们对食品添加剂的安全性越来越重视，天然添加剂的开发利用已成为添加剂发展使用的 总趋势。花青素在食品中不但可作为营养强化剂，而且还可作为食品防腐剂代替苯甲酸等合成防腐剂，并且可作 为食品着色剂应用于平常饮料和食品，符合人们对食品添加剂天然、安全、健康的总要求 。
种类
已知天然存在的花色素有250多种，存在于27个科、73个属的植物中。已确定的有20种花青素，在植物中常 见的有6种，即天竺葵色素（Pg）、矢车菊色素（Cy）、飞燕草色素（Dp）、芍药色素（Pn）、牵牛花色素（Pt） 和锦葵色素（Mv）。
结构及特性
花青素是糖苷衍生物，基本结构如下：
一般自然条件下游离的花青素极少见，常与一个或多个葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等通过糖 苷键形成花色苷，花色素中的糖苷基和羟基还可以与一个或几个分子的香豆酸、阿魏酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸 等芳香酸和脂肪酸通过酯键形成酸基化的花色素 。
国外提取花青素的传统方法是采用低温（4~8℃）或者常温（25℃）避光条件下1%HCl甲醇溶液浸提16~20h， 或者采用5%、1%的三氟乙酸的甲醇溶液，4℃条件下浸提24h。考虑到食品中残留甲醇的毒性，也有用1%的HCl乙 醇溶液代替甲醇溶液。另外为了避免酰基化的花青素的水解，也可选择弱酸如酒石酸、柠檬酸代替盐酸。而国内 则多采用热溶剂（50~70℃）浸提1~2h的方式，溶剂可选择不同浓度的醇溶液或酸化的水溶液。