血清浆脂类及脂蛋白测定课件
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脂类及其代谢—血脂及血浆脂蛋白(生物化学课件)
血脂
生物化学 B i o c h e m i s t r y
一、血脂
定义
血浆所含脂类统称血脂，包括：甘油三酯、 磷脂、胆固醇及其酯以及游离脂酸。
（一）组成与含量： 血脂含量受膳食、年龄、性别及代谢等影响，波动范围很大
正常成人空腹血脂的组成及含量
二、来源与去路：
来源：
外源性——从食物中摄取 内源性——肝、速离心法：
按脂蛋白密度高低进行分类，也分为四类： CM → VLDL → LDL → HDL
超速离心法 CM
VLDL
（一）分类
LDL
HDL
乳糜微粒 电泳分类法
-脂蛋白
前-脂蛋白
-脂蛋白
（二）组成
•血浆 •脂蛋白
•蛋白质
•（载脂蛋 白apo）
•甘油 三酯
(TG)
•磷脂 (PL)
•胆固醇 •(Ch)
•酯 •(ChE)
不同的脂蛋白仅有含量上的差异而无本质上的不同。
（三）血浆脂蛋白的结构
血浆脂蛋白颗粒通常呈球形。
其中所含的载脂蛋白多数具有双极性 -螺旋。
各种脂蛋白的结构十分类似，其颗粒外 层为亲水的载脂蛋白和磷脂的极性部分 组成，载脂蛋白和磷脂的疏水部分则伸 入到内部，而疏水的甘油三酯和胆固醇 酯则被包裹在内部。
血浆脂蛋白的分类与组成修改
生物化学 B i o c h e m i s t r y
血脂与血浆中的蛋白质结合，以脂蛋白形式而运输
（一）分类
1.电泳法：根据电泳迁移率的不同进行分类，可分为四类：
乳糜微粒 → -脂蛋白 → 前-脂蛋白 → -脂蛋白
CM 前
♁
血脂与血浆中的蛋白质结合，以脂蛋白形式而运输
血脂及血浆脂蛋白检验ppt
3.抗凝剂 我国多用血清作血脂分析。如果用血浆，多主 张用EDTA ·2Na 抗凝
4.标本处理
标本应尽快送往实验室，室温下放置30 - 45 min 后离心，分离血清。
-
35
血清或血浆外观 （血清/浆静置试验）
-
36
血清（浆）静置试验
将患者空腹12h后采集静脉血分离出血清置4℃冰箱中过夜，然后观 察其分层现象及清澈度。
-
6
（一）血浆脂蛋白的分类
超速离心法：
• 电泳法:
乳糜微粒 CM
－－－－－－－－－－ 乳糜微粒（CM）到 电
密 度
极低密度脂蛋白 VLDL
β脂蛋白
快泳 速
从 中间密度脂蛋白 IDL
度
低 低密度脂蛋白 LDL 到 脂蛋白(a) Lp(a) 高 高密度脂蛋白 HDL
前β脂蛋白
由
慢
α-脂蛋白
-
7
血
浆
CM↑↑
TC N/↑,TG↑↑ （I型）
TG↑↑
VLDL↑↑
TC N/ ↑,TG ↑↑ （IV型）
TC↑↑,TG↑↑ （ IIb型/III型） CM及VLDL↑↑
TC↑↑,TG↑↑ （III型/V型）
TC、TG均正 （正常人） 常TC↑↑,TG正常 （IIa型）
TC↑↑,TG↑ （IIb型）
-
37
-
ApoB100缺陷 不清楚
ApoE异常
不清楚
临床特征
表型分类
以胆固醇升高为主，可伴轻度甘油三酯升 高，LDL明显增加，可有肌腱黄色瘤，多有 冠心病和高脂血症家族史。
同上
胆固醇和甘油三酯均升高，VLDL和LDL都增 加，无黄色瘤，家族成员中有不同型高脂 蛋白血症，有冠心病家族史。
4.标本处理
标本应尽快送往实验室，室温下放置30 - 45 min 后离心，分离血清。
-
35
血清或血浆外观 （血清/浆静置试验）
-
36
血清（浆）静置试验
将患者空腹12h后采集静脉血分离出血清置4℃冰箱中过夜，然后观 察其分层现象及清澈度。
-
6
（一）血浆脂蛋白的分类
超速离心法：
• 电泳法:
乳糜微粒 CM
－－－－－－－－－－ 乳糜微粒（CM）到 电
密 度
极低密度脂蛋白 VLDL
β脂蛋白
快泳 速
从 中间密度脂蛋白 IDL
度
低 低密度脂蛋白 LDL 到 脂蛋白(a) Lp(a) 高 高密度脂蛋白 HDL
前β脂蛋白
由
慢
α-脂蛋白
-
7
血
浆
CM↑↑
TC N/↑,TG↑↑ （I型）
TG↑↑
VLDL↑↑
TC N/ ↑,TG ↑↑ （IV型）
TC↑↑,TG↑↑ （ IIb型/III型） CM及VLDL↑↑
TC↑↑,TG↑↑ （III型/V型）
TC、TG均正 （正常人） 常TC↑↑,TG正常 （IIa型）
TC↑↑,TG↑ （IIb型）
-
37
-
ApoB100缺陷 不清楚
ApoE异常
不清楚
临床特征
表型分类
以胆固醇升高为主，可伴轻度甘油三酯升 高，LDL明显增加，可有肌腱黄色瘤，多有 冠心病和高脂血症家族史。
同上
胆固醇和甘油三酯均升高，VLDL和LDL都增 加，无黄色瘤，家族成员中有不同型高脂 蛋白血症，有冠心病家族史。
第九章血脂及血浆脂蛋白检验PPT课件
（一）高脂蛋白血症
近年来，已逐渐认识到血浆中HDL降低也是一种脂代谢紊乱。
下午4时14分1秒
昆明市卫生学校 检验专业 生物化学检验技 术
2．按是否继发于全身性疾病分类
原发性：
在排除继发性高脂血症后，可诊断为原发性。已知部分原发性高 脂血症由先天性基因缺陷所致
继发性高脂血症：
继发性者由一些全身性疾病引起血脂异常，如糖尿病、肾病综合征、 肾功能衰竭、甲状腺功能减退症、肝胆疾病、系统性红斑狼疮、肥胖症、 饮酒等。此外，某些药物如β-受体阻断剂、降压药等也可引起血脂异 常。
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结构：
大致为球形颗粒，由两大部分组成，即疏水性的内核和亲水性的 外壳（图10-1）。内核由不同量的CE与TG组成，表层由载脂蛋白、PL 及FC组成，FC及PL的极性基团向外露在血浆中，载脂蛋白是兼性化合 物，它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中，而亲水部分突出于脂蛋白颗粒的 表面。
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分类： 1．表型分型法
主要是基于各种血浆脂蛋白升高的程度不同而进行分型。 该分类法不包括病因学，故称表型分类。
电泳法
乳糜微粒、前-、和 四条脂蛋白区带
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（二）血浆脂蛋白的组成与结构
组成：
蛋白质（载脂蛋白）、三脂酰甘油（甘油三脂）、磷脂（phospholipid， PL）、游离胆固醇（free cholesterol ，FFA）及胆固醇酯（cholesterol ester，CE）等成分组成。
实验诊断学课件：血脂及脂蛋白检测
【参考值】
0.56～1.70 以下 合适
1.70 以上
升高
【临床意义】
降低：(1)营养不良、吸收不良综合征。 (2)甲亢。 (3)先天性α-β脂蛋白血症。
升高：(1)动脉粥样硬化、肾病综合征、甲状 腺功能减退、糖尿病。
(2)原发性甘油三酯增多症、糖原累积症。
(3)妊娠后期。
高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定
二、血浆脂蛋白（lipoprotein，LP）
1、定义：血浆脂质与蛋白质结合所组成 的一类大分子复合物，能溶于 水，运输于血。
2、组成： 蛋白质（载脂蛋白） 甘油三酯 磷脂 脂质 胆固醇 胆固醇酯
血浆脂蛋白结构图
3、功能 （1）运输脂类 （2）参与脂类代谢 （3）参与某些疾病的过程
血浆脂蛋白的分类
激活LPL
ApoC III VLDL 肝
抑制肝脏
摄取VLDL
ApoE VLDL,CM,HDL 肝
被CM受体识别
第三节 血浆脂蛋白的代谢与功能 1、CM （1）代谢 （2）生理功能：
转运外源食物中甘油三酯到全身各组织， 氧化分解供能或储存。
2、VLDL （1）代谢 （2）生理功能：
运输内源性的甘油三酯，即将体内多 余糖转变生成的甘油三酯运到肝外脂肪 组织中储存或被肝外组织利用。
3.临床因素，如①疾病继发（内分泌或代谢性 疾病、肾脏疾病、肝胆疾病及其他）；②药物 诱导（抗高血压药，免疫抑制剂及雌激素等）。 4.标本收集与处理，如禁食状态、血液浓缩、 抗凝剂与防腐剂、毛细血管与静脉血、标本贮 存等。
致动脉粥样硬化性脂蛋白谱(ALP)：致动脉粥样 硬 化 性 脂 蛋 白 谱 ( atherogenic lipoprotein profile，ALP)是指有一定遗传基础的几种代谢 异常的综合。主要表现为致AS作用很强的颗粒 小而密的低密度脂蛋白(sLDL)增多、高甘油三 酯(TG)血症及HDL水平低。常伴有以胰岛素抵 抗为基础的代谢综合征。德国PROCAM研究的 初步结果表明，高甘油三酯结合低HDL—C代表 了最不良的脂蛋白类型，它会大大增加发生冠心 病的危险。
血脂及血浆脂蛋白检验ppt课件
种类：
已有很多种，主要有LDL受体、残粒受体（remnant receptor） 及清道夫受体（scavenger receptor）其它有ApoE受体（CM） HDL受体和β-VLDL受体等。
.
16
各种脂蛋白受体功能
➢LDL受体： 分布于肝细胞、动脉壁平滑肌细胞等细胞膜表面 识别结合ApoB100、E的脂蛋白如LDL、VLDL等。 合成受体内胆固醇的负反馈调节
2.胆固醇与高铁 – 硫酸试剂产生稳定的紫红色
Zak反应： Zak提出用硫酸、醋酸和Fe3+等与胆固醇作用生成紫红色化合物 来测定胆固醇，称为Zak反应。 （比L-B反应的灵敏度高，呈色稳定不需要皂 化，反应特异性差）
Ⅱa Ⅱb 同上 Ⅱb
Ⅲ
以甘油三酯升高为主，可有轻度胆固醇升 高，VLDL明显增加。
Ⅳ
.
30
（二）低脂蛋白血症
定义：
一般将血清TC＜3.3mmol/L，或TG＜0.45mmol/L，或LDL-C＜ 2.1mmol/L者，称为低脂蛋白血症。脂质如TC和TG同时降低或脂蛋白 如HDL、LDL和VLDL同时降低多见。
蛋 白
－
＋
电
泳
原点 γ β α2 α1 清蛋白
血
浆
脂
蛋－
＋
白
电
泳
原点
β 前β α
（CM）
.
8
（二）血浆脂蛋白的组成与结构
脂类：甘油三酯、磷脂、胆固醇、胆固醇酯 血浆脂蛋白
蛋白质：载脂蛋白
.
9
各种血浆脂蛋白的组成及功能
密度
脂 组类
成
蛋 白
质
主要生 理功能
CM 乳糜微粒
＜0.95
已有很多种，主要有LDL受体、残粒受体（remnant receptor） 及清道夫受体（scavenger receptor）其它有ApoE受体（CM） HDL受体和β-VLDL受体等。
.
16
各种脂蛋白受体功能
➢LDL受体： 分布于肝细胞、动脉壁平滑肌细胞等细胞膜表面 识别结合ApoB100、E的脂蛋白如LDL、VLDL等。 合成受体内胆固醇的负反馈调节
2.胆固醇与高铁 – 硫酸试剂产生稳定的紫红色
Zak反应： Zak提出用硫酸、醋酸和Fe3+等与胆固醇作用生成紫红色化合物 来测定胆固醇，称为Zak反应。 （比L-B反应的灵敏度高，呈色稳定不需要皂 化，反应特异性差）
Ⅱa Ⅱb 同上 Ⅱb
Ⅲ
以甘油三酯升高为主，可有轻度胆固醇升 高，VLDL明显增加。
Ⅳ
.
30
（二）低脂蛋白血症
定义：
一般将血清TC＜3.3mmol/L，或TG＜0.45mmol/L，或LDL-C＜ 2.1mmol/L者，称为低脂蛋白血症。脂质如TC和TG同时降低或脂蛋白 如HDL、LDL和VLDL同时降低多见。
蛋 白
－
＋
电
泳
原点 γ β α2 α1 清蛋白
血
浆
脂
蛋－
＋
白
电
泳
原点
β 前β α
（CM）
.
8
（二）血浆脂蛋白的组成与结构
脂类：甘油三酯、磷脂、胆固醇、胆固醇酯 血浆脂蛋白
蛋白质：载脂蛋白
.
9
各种血浆脂蛋白的组成及功能
密度
脂 组类
成
蛋 白
质
主要生 理功能
CM 乳糜微粒
＜0.95
血清浆脂类及脂蛋白测定ppt课件
性疾病等。
31
注意事项：
标本： 标本要求是餐后12-14h的空腹血液
——（血清TG易受饮食影响）。 标本存放不宜超过3天
——（避免TG水解而释放出甘油）。 试剂：
酶试剂应4℃避光保存，出现红色不 可再用 。
32
实验53：
免疫透射比浊法测定血清载 脂蛋白A1和载脂蛋白B
33
原理：
ApoA1 ApoA1抗体 ApoB ApoB抗体
20
21
实验49：
磷酸甘油氧化法测定血清甘 油三酯（TG）
22
甘油三酯(TG)的结构：
23
甘油三酯测定的方法：
化学法 酶法
24
化学法
（KOH） （过碘酸）
抽提 甘油 甲醛
皂化
氧化
显色
25
甘油 三酯
甘油
甲醛 变色酸
紫红色
26
☆酶法（磷酸甘油氧; 脂肪酸
GK + ATP
抗原 + 抗体
抗原抗体复合物
比色
34
临床意义：
ApoA1 与高脂血症、冠心病呈负相关； ApoB 与高脂血症、冠心病呈正相关。
35
血清（浆）脂类及脂 蛋白测定
——
1
血脂的组成：
甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯) 磷脂 胆固醇和胆固醇酯 非酯化脂肪酸（游离脂肪酸）等
2
血脂的运输形式—脂蛋白
1、定义： 指血浆脂质与载脂蛋白组成
的可溶性的生物大分子。
3
2、结构：
脂蛋白 微粒
表面 核心
磷脂 胆固醇 载脂蛋白
甘油三酯 胆固醇酯
4
5
9
实验原理： 提取HDL
测定胆固醇
31
注意事项：
标本： 标本要求是餐后12-14h的空腹血液
——（血清TG易受饮食影响）。 标本存放不宜超过3天
——（避免TG水解而释放出甘油）。 试剂：
酶试剂应4℃避光保存，出现红色不 可再用 。
32
实验53：
免疫透射比浊法测定血清载 脂蛋白A1和载脂蛋白B
33
原理：
ApoA1 ApoA1抗体 ApoB ApoB抗体
20
21
实验49：
磷酸甘油氧化法测定血清甘 油三酯（TG）
22
甘油三酯(TG)的结构：
23
甘油三酯测定的方法：
化学法 酶法
24
化学法
（KOH） （过碘酸）
抽提 甘油 甲醛
皂化
氧化
显色
25
甘油 三酯
甘油
甲醛 变色酸
紫红色
26
☆酶法（磷酸甘油氧; 脂肪酸
GK + ATP
抗原 + 抗体
抗原抗体复合物
比色
34
临床意义：
ApoA1 与高脂血症、冠心病呈负相关； ApoB 与高脂血症、冠心病呈正相关。
35
血清（浆）脂类及脂 蛋白测定
——
1
血脂的组成：
甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯) 磷脂 胆固醇和胆固醇酯 非酯化脂肪酸（游离脂肪酸）等
2
血脂的运输形式—脂蛋白
1、定义： 指血浆脂质与载脂蛋白组成
的可溶性的生物大分子。
3
2、结构：
脂蛋白 微粒
表面 核心
磷脂 胆固醇 载脂蛋白
甘油三酯 胆固醇酯
4
5
9
实验原理： 提取HDL
测定胆固醇
血清脂质和脂蛋白检测
cTn 在临床诊断中的用途
➢ 急 性 心 肌 梗 死 （ acute myocardial infarction, AMI）
➢ 不稳定性心绞痛 ➢ 临床诊断心肌炎 ➢ 临床诊断心肌创伤（心脏手术） ➢ 围手术期心脏并发症
IFCC 和 NACB 的专家建议：
临床应用应考虑各自的诊断“窗口期”； 注意选择合适的标本采集时间 疑为急性心肌损伤时标本采集建议
脂蛋白电泳分析
其他测定： 有关的蛋白质、
酶和受体测定
心脏的生物标志物检查 CARDIAL MARKER
心肌损伤早期标志物
C 反应蛋白（C-reactive protein,CRP） ACS炎症、损伤的早期标志物。在心
肌损伤发病后几小时即出现异常增高且 “窗口期”较短，在心绞痛等心肌损伤的 早期诊断和预后估计中有较好的临床价值 High sensitive CRP（hs-CRP）test
——LDL受体的配体
ApoC ApoCI、ApoCII、ApoCIII
——主要由肝合成，小肠合成少量 ——ApoCⅠ促进LCAT的催化作用 ——ApoCⅡ可以激活脂蛋白脂肪酶（LPL）
3、功能：
—构成脂蛋白 —使脂蛋白代谢有关的酶被激活或抑制 —与脂蛋白代谢有关的特异性受体结合
血浆脂蛋白的代谢与功能
4、HDL （1）代谢
（2）生理功能
——将肝脏合成的胆固 醇经酯化生成胆固醇酯 由LDL运到肝外组织利 用。 ——回收全身各组织衰 老与死亡细胞膜上的游 离胆固醇，经血液逆向 运回肝脏，转变成胆汁 酸盐排泄。
脂蛋白受体
一、概述
——位于各种细胞的膜上的糖蛋白，它 能以高度的亲和方式与相应的脂蛋白配 体作用，从而介导细胞对脂蛋白的摄取 与代谢，进一步调节细胞外脂蛋白的水 平
3-血清脂质和脂蛋白检测(一)
血清脂质和脂蛋白检测（一）一、血清脂质检测➢血清脂质包括胆固醇（CHO）、三酰甘油（TG）、磷脂（phospholipid）和游离脂肪酸（FFA），血清脂质除了可作为脂质代谢紊乱及有关疾病的诊断指标外，还可协助诊断原发性胆汁性肝硬化、肾病综合征、肝炎肝硬化及吸收不良综合征等。
（一）总胆固醇（TC）测定胆固醇酯（CE）70%总胆固醇（TC）游离胆固醇（FC）30%参考值1．合适水平＜5.20 mmol/L。
2．边缘水平：5.23～5.69 mmol/L。
3．升高＞5.72 mmol/L。
TC变化的临床意义状态临床意义增高①动脉粥样硬化所致的心、脑血管疾病②各种高脂蛋白血症、胆汁淤积性黄疸、甲状腺功能减退症、类脂性肾病、肾病综合征、糖尿病等③长期吸烟、饮酒、精神紧张和血液浓缩等④应用某些药物，如环孢素、糖皮质激素、阿司匹林、口服避孕药、β-肾上腺素能阻滞剂等减低①甲状腺功能亢进症②严重的肝脏疾病，如肝硬化和急性重型肝炎③贫血、营养不良和恶性肿瘤等④应用某些药物，如雌激素、甲状腺激素、钙拮抗剂等（二）三酰甘油（TG）测定【参考值】0.56～1.70 mmol/L【临床意义】1．TG増高2．TG减低二、血清脂蛋白检测➢脂蛋白是血脂在血液中存在、转运及代谢的形式。
超高速离心法根据脂蛋白密度不同，将其分为：乳糜微粒（CM）极低密度脂蛋白（VLDL）低密度脂蛋白（LDL）高密度脂蛋白（HDL）和VLDL的代谢产物中间密度脂蛋白（IDL）。
脂蛋白（a）[ LP（a）]是脂蛋白的一大类，其脂质成分与LDL相似。
（一）乳糜微粒（CM）测定➢乳糜微粒（CM）是最大的脂蛋白，CM脂质含量高达98％，蛋白质含量少于2％，其主要功能是运输外源性TG。
【参考值】阴性【临床意义】血清CM极易受饮食中TG的影响，易出现乳糜样血液。
如果血液中脂蛋白酯酶（LPL）缺乏或活性减低，血清CM不能及时被廓清，使血清浑浊。
常见于1型和V型高脂蛋白血症。
血脂及血浆脂蛋白的检验 ppt课件
第二节 血清总胆固醇测定
一、原理 二、试剂与器材
三、实践步骤
四、参考范围
五、注意事项
六、临床意义
（一）胆固醇增高
（二）胆固醇降低
七、说明
ppt课件
13
第三节 血清酸三酯酰甘油测定
1、化学测定法： (1)抽提:甲醇、乙醇、正庚烷、氯仿。吸附剂取出干扰。
(2)皂化：氢氧化钾做皂化剂。
(3)氧化：过碘酸做氧化剂。 (4)显色 ：紫红色化合物 或黄色化合物(乙酰丙酮法)。
ppt课件 21
琼脂糖凝胶电泳分析
一、原理 二、试剂与器材
三、实践步骤
四、结果判断
五、计算
六、参考范围
七、注意事项
八、说明
九、临床意义
ppt课件
22
•谢谢
ppt课件
23
Байду номын сангаас
• 脂蛋白电泳的基本原理与蛋白电泳相同，各种脂 蛋白在一定的pH条件下，电场中可以在琼脂糖凝 胶上被分离开来。按照迁移率递增的次序，分别 为：乳糜微粒、LDL.+VLDL和HDL。乳糜微粒分子 较大，甘油三酯含量高，与血清出现乳白色有关 ，通常它们停留在加样点处。LDL通常迁移到β： 球蛋白位置处。VLDL比LDL体积大并且较轻，可 能引起血清的浑浊，它们更容易迁移到β球蛋白 的位置。HDL迁移最快，可到达α2球蛋白的位置 。
血脂及血浆脂蛋白的检验
ppt课件
1
第一节 概述
ppt课件
2
ppt课件
3
ppt课件
4
载脂蛋白的生理功能
• • 一、维持脂蛋白的结构 二、调节脂蛋白代谢的关键酶
•
三、识别脂蛋白受体
ppt课件
《诊断学血脂检查》PPT课件ppt课件
CⅠ激活 LCAT及LPL CⅡ激活LPL CⅢ抑帛LPL 受体识别 HDL形成
Ⅱ型高脂血症 V型高脂血症 IV型高脂血症
血浆脂蛋白代谢
高甘油三脂颗粒(CM、VLDL、β-VLDL) LDL颗粒 HDL颗粒
血浆脂蛋白代谢
1．乳糜微粒(CM) CM是运输外源性甘油三酯的
主要形式，呈球形，直径在80-500nm。CM有强烈的 光散射作用，餐后大量CM进入血液可使血浆产生混 浊，称为乳糜血。CM可飘浮到血浆表面形成一“奶 油”层。
跨膜糖蛋白 两个功能区（结合区和内吞区） 反复使用，群居凹陷小窝 识别LDL的Apo-B和HDL的Apo-E，亦称
Apo-B、E受体 LDL颗粒+ LDL受体 = 1 ：1
HDL颗粒+ LDL受体 = 4 ：1
4．高密度脂蛋白(HDL) HDL的蛋白质含量最
高，所以密度最大，为1.063--1.210。外形呈 球状，胆固醇酯在球的核心部位，而磷脂和载 脂蛋白主要位于球的表面。
外源性TG 肠
CM代谢
新生CM（TG Apo-B48 Apo-A ）
血HDL交换 成熟CM（TG Apo-B48 Apo-C Apo-E）
毛细血管内皮细胞LPL水解 再合成或氧化利用
核心残基（CE Apo-E） 肝受体结合 肝细胞
CM残基
表面残基（PL FC Apo-C） HDL
2．极低密度脂蛋白(VLDL) VLDL是血液中第二
6—10
18—22
45—
50—65
4—8
2—7
4—8 16—22
6—8 45—50
3—5 15—
载脂蛋白
载脂蛋白(Apolipoprotein，Apo)是指血浆脂蛋白中 的蛋白质部分。
Ⅱ型高脂血症 V型高脂血症 IV型高脂血症
血浆脂蛋白代谢
高甘油三脂颗粒(CM、VLDL、β-VLDL) LDL颗粒 HDL颗粒
血浆脂蛋白代谢
1．乳糜微粒(CM) CM是运输外源性甘油三酯的
主要形式，呈球形，直径在80-500nm。CM有强烈的 光散射作用，餐后大量CM进入血液可使血浆产生混 浊，称为乳糜血。CM可飘浮到血浆表面形成一“奶 油”层。
跨膜糖蛋白 两个功能区（结合区和内吞区） 反复使用，群居凹陷小窝 识别LDL的Apo-B和HDL的Apo-E，亦称
Apo-B、E受体 LDL颗粒+ LDL受体 = 1 ：1
HDL颗粒+ LDL受体 = 4 ：1
4．高密度脂蛋白(HDL) HDL的蛋白质含量最
高，所以密度最大，为1.063--1.210。外形呈 球状，胆固醇酯在球的核心部位，而磷脂和载 脂蛋白主要位于球的表面。
外源性TG 肠
CM代谢
新生CM（TG Apo-B48 Apo-A ）
血HDL交换 成熟CM（TG Apo-B48 Apo-C Apo-E）
毛细血管内皮细胞LPL水解 再合成或氧化利用
核心残基（CE Apo-E） 肝受体结合 肝细胞
CM残基
表面残基（PL FC Apo-C） HDL
2．极低密度脂蛋白(VLDL) VLDL是血液中第二
6—10
18—22
45—
50—65
4—8
2—7
4—8 16—22
6—8 45—50
3—5 15—
载脂蛋白
载脂蛋白(Apolipoprotein，Apo)是指血浆脂蛋白中 的蛋白质部分。
相关主题
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血清浆脂类及脂蛋白测定
11Βιβλιοθήκη 淀法原理：ApoB + 多阴离子化合物
沉淀↓
血清浆脂类及脂蛋白测定
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多阴离子（polyanion）化合物
硫酸葡聚糖--Mg2+ 肝素--Mn2+ 磷钨酸--Mg2+
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胆固醇测定（酶法）：
过氧化物酶
胆固醇 + O2
胆甾烯酮 + H2O2
H2O2 + 酚 + 4-氨基安替比林 亚胺醌 + H2O
血清（浆）脂类及脂 蛋白测定
——
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血脂的组成：
甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯) 磷脂 胆固醇和胆固醇酯 非酯化脂肪酸（游离脂肪酸）等
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血脂的运输形式—脂蛋白
1、定义： 指血浆脂质与载脂蛋白组成
的可溶性的生物大分子。
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2、结构：
2
参考值：
0.9~2.0mmol/L
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注意事项：
1、血清标本要及时测定 ——（在室温条件下，各型脂蛋白之间 会发生脂质交换）； ——（游离的胆固醇会不断酯化）。 2、离心过程中防止温度过高（室温 15~25℃），离心后放置时间不能过长。 ——（温度过高使沉淀不完全）。
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脂蛋白 微粒
表面 核心
磷脂 胆固醇 载脂蛋白
甘油三酯 胆固醇酯
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3、分类
(1)按密度不同
HDL LDL IDL VLDL CM
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(2)按电泳时区带的泳动位置不同
α -LP 前β-LP β-LP CM
CM β-LP 前β-LP α -LP
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化学法
（KOH） （过碘酸）
抽提 甘油 甲醛
皂化
氧化
显色
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甘油 三酯
甘油
甲醛 变色酸
紫红色
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☆酶法（磷酸甘油氧化酶法）
LPL
甘油三酯
甘油 + 脂肪酸
GK + ATP
3-磷酸甘油 + ADP
O2 、H2O + GPO 磷酸二羟丙酮 + H2O2
POD +酚、4-氨基安替比
亚胺醌 + H O2 血清浆脂类及脂蛋白测定
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试剂：
酶试剂 2.26mmol/L的三油酸甘油酯标准液
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操作：
加入物(μl) 空白管 标准管(×2) 测定管(×2)
上清液
—
—
20
参考血清
—
20
—
酶试剂 2000 2000
2000
37℃水浴10min；空白管调零，0.5cm比色杯， 500nm比色。
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注意事项：
标本：
标本要求是餐后12-14h的空腹血液
——（血清TG易受饮食影响）。
标本存放不宜超过3天
——（避免TG水解而释放出甘油）。
试剂：
酶试剂应4℃避光保存，出现红色不
可再用 。
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实验53：
免疫透射比浊法测定血清载 脂蛋白A1和载脂蛋白B
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参考血清 蒸馏水 酶试剂
空白管 — — 50
2000
标准管 — 50 —
2000
测定管 50 — —
2000
混匀，37℃水浴15min；空白管调零，0.5cm 比色杯，500nm比色。
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计算：
定值血清胆固醇浓度
测定管吸光度 5.17
HDL-C (mmol/L) =
×
标准管吸光度
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计算：
TG (mmol/L)
测定管吸光度
=
× 标准液浓度
标准管吸光度
参考值：
2.26mmol/L
0.56~1.70mmol/L
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临床意义：
增高: 与动脉粥样硬化关系密切、家族性
的脂代谢紊乱、糖尿病等。
降低:
营养不良、消化吸收综合征、消耗 性疾病等。
＋
CM LDL VLDL HDL
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临床血脂测定的常见项目：
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实验51：
磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂 蛋白胆固醇（HDL-C）
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实验原理： 提取HDL
测定胆固醇
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提取HDL的方法：
超速离心法 层析法 电泳法 ☆沉淀法
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原理：
ApoA1 ApoA1抗体 ApoB ApoB抗体
抗原 + 抗体
抗原抗体复合物
比色
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临床意义：
ApoA1 与高脂血症、冠心病呈负相关； ApoB 与高脂血症、冠心病呈正相关。
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试剂：
沉淀剂 酶试剂 参考血清（TC测定用的定值血清）
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操作步骤：
1、提取HDL 取血清和沉淀剂各200μl，充分
混匀，置室温放置10min后，2500r/min， 15min，吸取上清液按表进行操作。
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2、测定胆固醇
加入物(μl) 上清液
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临床意义：
具有抗动脉粥样硬化作用，是 冠心病的保护因素。
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实验49：
磷酸甘油氧化法测定血清甘 油三酯（TG）
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甘油三酯(TG)的结构：
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甘油三酯测定的方法：
化学法 酶法
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