实验二 环境中微生物的检测
微生物学设计实验_环境微生物的检测
• 根据Logistic模型可以求出与暴露时间相对应的菌体 含量：
图3-6
• 根据实验数据，可以得到一个具体函数关系式，这 可较准确地得出一定范围内任意时刻的细菌含量。
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参考文献
• 中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方 法 微生物指标
• 姜起源，谢金星，叶俊， 《数学模型》，清华大学 出版社
• 当天平均温度14.1，当时的相对湿度82%，室外有 微风，近几天属阴雨天气。
实验步骤
• 本大组分为五小组，每组两人
• 五个小组依次测室外、实验室、厕所、大厅和超净台的微 生物含量。
• 具体步骤为：清洗双手—酒精清洁手部—用报纸包裹灭过 菌的平板到各个环境中—开盖接种半个小时—盖盖后报纸 包好拿回实验室—取出放入培养箱48小时—取出观察—对 比统计——结果分析
• 熊文山，瓶(桶)装饮用纯净水微生物检测方法，检测 与分析，2007年第10卷第6期
• /view/1262256.htm
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4、相对于室外、大厅、厕所，教室内空气中的微生 物含量要少，教室内接种的平板里有五个菌落，这 可能跟教室内的空气相对不流通，人流较少等等因 素有关。
5、在超净台上做的实验产生了三个菌落，而且其直 径要小得多。这与其它的比较，微生物含量明显较 少。但是我们认为超净台上空气的微生物含量应该 没这么多，可能在操作中有少许污染。
• 3）同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空 白对照。
• 4）待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于 36℃±1℃培养箱内培养48h，进行菌落计数，即为 水样1ml中的菌落总数。
• 5）对每个样品都进行上面步骤并计数。
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3、菌落计数报告方法
• 在对菌落进行计数时，需要参照GB/T5750.12— 2006中的菌落计数及报告方法。
检测不同环境中的细菌和真菌实验报告
检测不同环境中的细菌和真菌实验报告一、实验目的本实验的目的是通过对不同环境中的样本进行检测，了解不同环境中细菌和真菌的分布情况，探究环境对菌群的影响，为环境监测提供科学依据。
二、实验方法1. 实验材料•不同环境中的样本：沙土、水、空气、人体皮肤•培养基：营养琼脂平板、麦康凯平板、青霉素葡萄糖琼脂平板、分解蛋白琼脂平板、利福平琼脂平板•器材：移液器、无菌牵引针、灭菌铁锤、无菌移液管、灭菌恒温培养箱、显微镜2. 实验步骤1.取不同环境中的样本，分别取样制备不同培养基的平板。
2.用无菌的牵引针或移液器取样并沿制作好的培养基平板中划线均匀分布。
空气样本需用暴露法取样，将板子直接置于空气中，进行杂菌检测（需注意无法控制检测范围）。
3.将已涂制样本的培养基平板倒置放入灭菌恒温培养箱中，在适当的温度下培养。
4.观察培养基平板的菌落形态、颜色，并进行初步分类鉴定，进行纯化。
5.取纯化后的菌株进行后续实验，如细菌菌株的致病性测试、真菌菌株的发酵等。
三、实验结果及分析通过对不同环境中的样本进行检测，我们观察到了不同的细菌和真菌菌株生长在各自培养基上的繁殖情况。
在沙土样本中检测到了多种细菌菌株和真菌菌株，包括链球菌、大肠杆菌、芽孢杆菌、表皮葡萄球菌等。
这表明沙土中生物数量丰富，成分复杂。
在水样本中检测到了较多的芽孢杆菌、肠球菌、绿脓杆菌等细菌菌株，同时也检出了一些真菌菌株，如曲霉、真菌等。
在空气样本中检测到了多种细菌菌株，主要包括链球菌、葡萄球菌、沙眼衣原体等。
空气中的细菌数量相比沙土和水要少得多，种类也相对单一。
在人体皮肤样本中，检测到了多种细菌菌株和真菌菌株，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、马拉色葡萄球菌等。
这表明人体皮肤表面存在着大量的微生物。
通过观察不同环境中的菌落繁殖情况，我们可以发现，细菌和真菌的分布受到环境的影响很大，不同环境中的微生物组成差异很大。
在进行环境监测时，我们需要考虑到不同环境中微生物的分布情况，制定合理的采样方案和检测方法。
实验二 实验室环境和人体表面微生物的检查
实验二实验室环境和人体表面微生物的检查生科15.2周罡201500181104【实验目的】1.证实实验室环境与人体表面存在微生物。
2.体会无菌操作的重要性。
3.了解高压蒸汽灭菌的原理和应用范围，学习高压蒸汽灭菌的操作技术。
4.观察不同类群微生物的菌落形态特征。
5.比较不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。
6.掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。
【实验原理】通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个聚集在一起的肉眼可见的菌落。
平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在37℃温度下培养，1—2天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。
每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点。
因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。
每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。
因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类。
值得指出的是从微生物群体中经分离、生长在平板上的单个菌落并不一定保证是纯培养。
因此，纯培养的确定除观察其菌落特征外，还要结合显微镜检测个体形态特征等综合考虑。
有些微生物的纯培养要经过一系列的分离与纯化过程和多种鉴定方能得到。
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为分离与纯化。
【实验器材】1.溶液和试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、NaOH溶液、HCl溶液2.仪器和其他用品试管，培养皿，500mL锥形瓶，500mL烧杯，500mL量筒、玻璃棒、胶头滴管、电子秤？、药匙、棉花、纱布、牛皮纸、记号笔、橡皮筋、纸绳、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸【实验步骤】1.配制300mL牛肉膏培养基（1）在烧杯中加入300mL蒸馏水（2）依次称量0.9g牛肉膏，3.0g蛋白胨，1.5gNaCl放入烧杯中（3）待其溶解后，调节pH，使其pH值达到7.4~7.6（4）向烧杯中加入6.0g琼脂粉，并将配好的培养基倒入锥形瓶中，并塞上棉塞，瓶口及棉塞用牛皮纸包好2.高温蒸汽灭菌在3支试管中加入蒸馏水，用棉塞塞好，3支试管口用牛皮纸包在一起。
沉降法检测空气中微生物数量
广东工业大学实验报告实验 二 题目： 沉降法检测空气中微生物数量 第16周 星期 三 第 10-12 节（一） 实验目的1．学习并掌握用沉降法检测空气中的微生物2．了解空气中微生物的分布状况（二）实验原理在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。
空气中也不例外。
虽然空气不是微生物栖息的良好环境。
但由于气流、灰尘和水沫的流动，人和动物的活动等原因，仍有相当数量的微生物存在。
当空气中个体微小的微生物落到适合于它们生长繁殖的固体培养基的表面时，在适温下培养一段时间后，每一个分散的菌体或孢子就会形成一个个肉眼可见的细胞群体即菌落。
观察大小、形态各异的菌落，就可大致鉴别空气个存在的微生物的种类。
（三)实验器材1、 试剂牛肉蛋白胨培养基配方：牛肉膏 1.0g, 蛋白胨 2g ，NaCl 1g, 琼脂粉 4g 水200mL ，pH 7.2~7.42、仪器及其他用品高压灭菌锅，操作工作台，三角瓶，培养皿，酒精灯，培养箱等（四）实验方法1、倒平板：按常法配置上述培养基，装于500mL 三角瓶中，高压灭菌备用。
冷却至45-47℃左右，在超净工作台，倒8个平板备用。
2、暴露取样在指定的地点各放2皿，将平板皿盖打开，在空气中暴露5min 和10min,时间一到，立即合上皿盖。
3、培养观察： 细菌置于37℃培养，培养48h 计数平板上的菌落，观察各种菌落的形态、大小、颜色等特征。
4、计算1m 3空气中微生物的数目奥梅染斯基（Омелянский）曾建议：如面积为100㎝2的平板培养基，暴露在空气中5分钟，置于37℃培养24小时后所生长的菌落数，相当于10L 空气中的细菌数。
X=2100100r N π⨯⨯ X ：每m 3空气中的细菌数N ：平板暴露5分钟，置37℃培养24小时后生长的菌落数r ：平皿底半径（㎝）（五）实验结果1、列表比较不同放置地点空气菌落种类以及数量的差异？X=01001002=π⨯⨯rN （六）思考题1．对沉降测定法的结果，进行分析。
环境中微生物的检测和分离纯化实验报告
环境中微生物的检测和分离纯化一．实验原理1.微生物的分离与纯化土壤中含有丰富的微生物，可以从中分离纯化得到很多有价值的菌株。
微生物常用的分离方法是平板分离法，根据某种微生物对生长条件的不同要求供给它适宜的培养环境，再用稀释涂布平板法或稀释后平板划线分离，纯化该微生物，直到得到纯菌株。
2.平板菌落计数法将待测样品经适当稀释后，其中微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中含的菌落数。
二．实验材料与试剂1.土壤稀释溶液2.取液器（1000ml 1支），培养箱，培养皿（12个），无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂棒，接种环，1000ml无菌吸头若干，记号笔，酒精灯，火柴，试管架。
三．实验步骤（一）.无菌平板制备1.采用叠皿法把牛肉冻蛋白膏培养基倒入灭好菌的培养皿中，制作无菌平板（二）.周围环境中微生物的检测2.取一平板，分成6个区，做好标记。
同一个人同一根手指头按如下要求用力一致进行操作：分别用未洗过的手指头，自来水打湿的手指头，自来水认真洗过的手指头，洗手液洗过一遍的手指头，洗过两遍的，洗手液洗过又用酒精棉球消毒后的手指头在六个区上涂抹。
（平板1）3.取一平板，分区，分别用使用过的纸巾，硬币，旧纸币，餐卡在不同区拖动。
（平板2）4.在培养基上方抖动头发数次。
（平板3）5.取一平板，分区，用无菌接种环分别蘸一滴自来水，河水，豆浆在不同区划线。
（平板4）6.用无菌牙签取一点牙垢在培养基上划线。
（平板5）7.取两个平板，一个打开在实验台上放置30分钟，另一个在酒精灯火焰边打开皿盖1分钟。
（平板6）8.取一平板，打开盖，咳几下。
（平板7）（三）.从土壤中分离微生物1.采土样2.制备土壤稀溶液3.涂布吸取100ml稀释好的土壤稀溶液，较均匀地滴在平板上，再用无菌涂棒涂布均匀，涂1—2分钟4.培养将培养基平板倒置于37℃下培养24小时5.菌落计数四．实验结果1.平板1：从未洗到用酒精消毒总体趋势是菌落数越来越少，用自来水洗过和用洗手液洗过一遍的菌落数差不多；平板2：旧纸币和硬币的菌落数要多；平板3：抖头发的地方附近长出许多菌落；平板4：自来水菌落最多，其次是河水，河水的菌落分布成“牛”字形，和当时划线的形状一样，再其次是豆浆；平板5：划线的地方长出许多菌落；平板6：放在试验台上的平板长出各种形状的菌斑菌块，在酒精灯旁的基本没有菌落；平板7：咳几下的基本没有菌落。
环境微生物实验报告
环境微生物实验报告概述：微生物是地球上最为广泛存在的生物类群之一，它们在环境中扮演着重要的角色。
本实验旨在通过对环境微生物的采集和分析，了解其种类组成及其对生态系统的功能影响。
一、实验方法1. 采集样品：我们选择了不同生态环境中的样品进行采集，并分别选择了土壤、水样以及空气中的微生物。
采集样品的过程中，我们注意避免对样品产生污染，并尽量保持样品的原始状态。
2. 样品处理：在采集完样品后，我们对其进行了处理，包括使用试管进行样品的离心和过滤，以分离微生物并消除杂质。
处理后的样品分别保存在培养皿和离心管中。
3. 培养和观察：我们将处理后的样品接种到含有相应培养基的培养皿，并进行培养观察。
培养过程中，我们关注微生物的生长情况和形态特征，并利用显微镜进行观察和拍摄。
4. 遗传分析：为了更细致地研究微生物的种类和功能，我们对部分样品进行了遗传分析，包括PCR扩增、凝胶电泳和序列测定等。
通过这些方法，我们获得了微生物的遗传信息，并与数据库进行比对以进行种属鉴定。
二、实验结果1. 种类组成：经过培养和观察，我们发现土壤样品中的微生物种类最为丰富，包括细菌、真菌和藻类等。
水样中的微生物种类次之，以藻类为主，而空气中的微生物种类相对较少，以细菌为主。
遗传分析结果进一步确认了各样品中微生物的种类组成，也发现了一些罕见的微生物。
2. 功能影响：根据遗传分析结果，我们得知一些微生物具有对环境的功能影响。
例如，土壤中的某些细菌具有分解有机物的功能，对环境中的有机质降解有重要作用；而水中的藻类则能进行光合作用，通过吸收二氧化碳释放氧气，对水体中的氧气含量和水质有一定的改善作用。
3. 环境变化：通过对不同环境样品中微生物的比较，我们发现环境的变化对微生物群落有重要影响。
例如，在一个受到污染的水源中，我们发现水样中的微生物种类比正常水源中要减少，并且功能多样性也显著下降。
这说明环境的变化会导致微生物群落的改变，从而影响生态系统的稳定性。
实验四、环境中微生物的检测课件
观察
补做实验一 下周实验课暂停一次
第一部分：环境中微生物的检测
一、背景介绍 什么是微生物 微生物分布
二、实验目的 了解环境中微生物的分布情况
三、实验原理 提供微生物生长所需的营养要素，在实验
室中培养微生物 灭菌的方法和原理 培养基的特性
四、实验方法 1、倒平板
2、环境中微生物的检测
五、实验报告
记录你所培养的微生物的形态
观察时间4月5日（下周四）
12：00——13：00
梅老师班：外间202
尹老师班：里间203
三、个体形态的观察 1、细菌：简单染色法（接种环，取样）
Hale Waihona Puke 、酵母：水封片3、放线菌：插片法
4、霉菌：切片
作业：
1、将观察的细菌、酵母菌、放线菌、霉 菌其菌落特征填入表格
2、划出细菌、放线菌的个体形态简图
3、初步判断你所培养的环境中的微生物 属于哪一大类并说明理由
预习：实验七 生物体内部组织细胞的切片观察（一）
天每
开个
放孩
；子
有的
的花
孩期
子不
是一
菊样
花，
，有
选的
择孩
在子
秋是
天牡
开丹
放花
；，
而选
有择
的在
孩春
➢ He who falls today may rise tomorrow.
子天 是开
梅放
花；
，有
选的
择孩
在子
冬是
天荷
开花
放，
选
择
在
夏
我们，还在路上……
实验二土壤微生物的分离鉴定
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5、初步鉴定 对菌体进行革兰氏染色观察，记录结果。
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注意事项
1. 制备土壤稀释液时，要注意应使土样均匀分散在稀释液中。 2. 2. 无菌操作。
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实验思考
1. 在平板划线法中，为何每次都需将接种环上的残余物烧掉？ 2. 为什么要涂布后的平板要先正放一段时间后再倒置培养？ 3. 怎么检验培养皿上的某个单菌落是不是纯培养？
的含待分离微生物的菌液，将其分别涂布在3个牛肉膏蛋白胨培 养基上，共有9个培养基平板，标号，37℃温箱培养24~48 h。
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4. 划线分离（划线培养） 对土壤稀释溶液微生物的培养基平板进行观察，记录区分明显
的细菌特征。挑取此细菌在新的培养基中划线培养（每种细菌培养 3个培养皿），标号，37°C温箱培养。
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（二） 土样
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实验步骤
1. 配制培养基
牛肉膏蛋白胨培养基
牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
3g 10g 5g 15～20g 1000ml
调节pH 至7.2～7.4
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2）121℃灭菌2释液 称取10g土样，放入盛有90ml无菌水的带有玻璃珠的三角瓶中，
2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个 细胞繁 殖形成的。因此可通过挑取单菌落而获得纯培养的 微生物。获得单个菌落的途径可通过稀释涂布平板或平板划 线等方法来完成。
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实验器材
（一）
牛肉膏，蛋白胨， NaCl，琼脂；1mol/L NaOH， 1mol/L HCl； 三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，试管，离心管（50ml）培养皿， 电子天平，高压蒸汽灭菌锅，无菌操作台，恒温培养箱，移液 枪（枪头），pH试纸（pH 6.4~8.0）。
实验环境微生物的检测
实验三环境微生物的检测一、实验目的1.了解周围环境中微生物的分布情况;2.懂得无菌操作在微生物实验中的重要性;3.了解四大类微生物的菌落特征;二、实验原理在我们周围的环境中存在着种类繁多的、数量庞大的微生物;土壤、江河湖海、尘埃、空气、各种物体的表面以及人和动物体的口腔、呼吸道、消化道等都存在着各种微生物;由于它们体积微小,人们用肉眼无法观察到它们个体的存在;但是只要稍加留意,我们就可以在发霉的面包、朽木上看到某些微生物群体;这些现象表明,自然界只要有微生物可以利用的物质和环境条件,微生物就可以在其上生长繁殖;据此,我们在实验室里就可以用培养基来培养微生物;培养基是用人工配制的、适合微生物生长繁殖和产生代谢产物用的混合养料;其中含有微生物所需要的六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、生长因子、气体和水分;此外,根据不同的微生物的要求,在配制培养基时还需用酸液或碱液调节至适宜的pH;配制好的培养基必须进行灭菌;所谓灭菌是指采用各类的物理或化学因素,使物体内外的所有微生物丧失其生长繁殖能力的措施;经过灭菌后的物体是无菌的;消毒是与灭菌完全不同的概念,它是指用较温和的物理因素杀死物体表面和内部病原微生物的一种常用的卫生措施;灭菌的方法较多,广泛使用的是高温灭菌,其中最常用的是高压蒸汽灭菌法;此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的;在cm2的蒸汽压力下,温度可达121℃;一般只要维持15~20min,就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子;微生物的接种技术是生物科学研究中的一项最基本操作技术;为了确保纯种不被杂菌污染,在整个接种过程中,必须进行严格的无菌操作;在实验过程中必须牢固树立无菌概念,经常保持实验台及周围环境的清洁,严格无菌操作,避免杂菌的污染,这是保证实验成功的必要条件;如将微生物接种到适合其生长的固体培养基表面,在适宜的温度下一般细菌37℃：霉菌等28℃,培养一段时间一般24~48h后,少量分散的菌体或孢子就可生长繁殖成肉眼可见的细胞群体,此即菌落;如平板上的菌落是由单个细胞或单个孢子生长繁殖而成的,就是一个纯种细胞群或克隆；若培养后大量菌落聚集在一起形成的为菌苔;不同种的微生物可形成大小、形态各异的菌落,根据微生物菌落形态的不同,可初步鉴别出四大类微生物：细菌、放线菌、酵母菌和霉菌;细菌的菌落呈圆形、较小而薄、透明或不透明、质地“细腻”,有的具有色泽,有的边缘不整齐,有的表面湿润、光滑,有的表面干燥有褶皱;此外,细菌常因分解含氮化合物而产生臭味;酵母菌的菌落通常比细菌菌落大,圆形、厚、不透明、色素单一,多为乳白,少数为橙或红色;酵母菌因普遍能发酵含碳有机物产醇,故菌落多伴有酒香味;防线菌菌落小而致密,或坚硬、或呈粉状;不少放线菌还产生特殊的土腥味;霉菌菌落大而疏松、或大而紧密;气生菌丝会发育形成一定形状、构造和色泽的子实器官,所以菌落表面往往有肉眼可见的构造和颜色;三、实验材料人体表和空气中的微生物;四、实验器材与试剂1.器材恒温培养箱、无菌平皿、电炉、酒精灯、火柴、无菌棉签和记号笔;2.试剂牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、酵母膏葡萄糖培养基简称YPD、高氏一号培养基和查氏培养基;五、实验操作I.融化培养基将装有无菌培养基的三角瓶置水浴中煮沸,待培养基融化后取出,当冷至50~60℃左右时,进行下一步;II、倒平板有持皿法和叠皿法,操作要点如下：1.持皿法1将无菌培养皿叠放在酒精灯左侧,以便拿取;2点燃酒精灯;3酒精灯旁,左手握三角瓶底部,倾斜三角瓶,右手旋松棉塞,用右手小指与小尾鱼际即小指边缘夹住棉塞并将其拔出切勿将棉塞放在桌上,随之将瓶口在火焰上过一下不可灼烧,以防爆裂,以杀死可能沾在瓶口的杂菌;然后将三角瓶从左手换至右手用拇指、食指和中指拿住三角瓶的底部;操作中瓶口应保持在火焰2~3cm,瓶口始终向着火焰,以防空气中微生物的污染;左手拿起一套平皿,用无名指和小指托住皿底,用中指和拇指夹住皿盖,食指于皿盖上为支点,在火焰旁,打开皿盖,让三角瓶伸入,随后倒入培养基;一般倒入15ml左右培养基即可铺满整个皿底;盖上皿盖,置水平位置待凝;然后将三角瓶移至左手,瓶口在次过火并塞紧瓶盖;2. 叠皿法此法适于在超干净台上操作,基本步骤同持皿法;不同之处是左手不必持皿,而是将瓶皿叠放在酒精灯的左侧并靠近火焰;按上述方法用右手拿三角瓶,左手打开最上面的皿盖,倒入培养基,盖上皿盖后即移至水平位置待凝;再依次倒下面的平皿;操作中瓶口始终向着火焰,以防空气中微生物的污染;III、贴标签待培养基完全凝固后,在皿底帖上标签,注明检测类型,组别及日期也可用记号笔书写在皿底IV、检测方法环境中微生物种类多样,检测方法也各异,先选几种列举如下：1.空气检测实验室空气中的微生物时,只要打开无菌平板的皿盖,让其暴露在空气中一段时间5~10min然后将皿盖盖上即可;2.桌面检测实验台桌面微生物是,可用一根无菌棉签,先在无菌平板的图4-1 含菌棉签平板划线示意图左：开启皿盖法右：划线示意图一个区域内湿润和试划几下,然后用其擦抹桌面等物体表面,在以此棉签在平板的另一区域作来回划线接种如图4-1;本操作应以无菌操作要求进行,即在火焰旁用左手拿起平板,用中指无名指和小指托住皿底部,用食指和大拇指夹住皿盖并开成一缝,右手持棉签在培养基表面划线接种,无菌棉签湿润和试剂区可作为无菌对照;3.头发移去放在桌面上的无菌平板的皿盖,是头发部位位于平板的上方,并用手指拨动头发数次,在盖上皿盖即可;4.手指可用未洗的手指先在无菌平板的培养基一侧约一半的面积作划线接种,并在皿底作好标记;然后用肥皂、流水洗手,用洗净的手指于平板培养基的另一侧作同样的划线接种,盖好皿盖;待培养后比较两杂菌生长的情况;5.口腔打开无菌平板培养基的皿盖,使口对着平板培养基的表面,以咳嗽或打喷嚏的方式接种,然后盖上皿盖;V、培养将以上各种检测平板倒置于28℃培养箱中培养,至下周实验时观察并计数各平板上的菌落数;VI、观察注意观察不同类型菌落的大小、外形和颜色等特征,将观察结果记录在实验报告上;VII、清洗观察记录完毕后,将含菌平板放在沸水中煮30min以上,杀死培养基表面生长的各种微生物,然后清洗并晾干培养皿;六、思考题1.通过本实验后,谈谈你对微生物的分布以及数量的认识;2.本实验中那些步骤属无菌操作为什么3.如何描述菌落的形态特征。
有关环境微生物检测的实验设计
有关环境微生物检测的实验设计生命科学与技术学院09级12班李梦宇有关环境微生物检测的实验设计一、实验目的：由于空气中存在各种微生物，而微生物种类、含量是衡量一个地方空气质量好坏的指标，本实验旨在抽测不同环境的空气样本，检测其微生物数目，间接反映其空气质量。
同时学习微生物培养及接种方法，了解不同微生物的菌落形态。
二、实验内容：实验空气样本取实验室，卫生间，楼梯口，室外四个不同场所离地面约70厘米处，接种统一为开盖25分钟。
接种温度为37度恒温，接种时间是48h(注：有通风口的地方平板放置于各通风口等距处)三、实验步骤：1、大组成员分为四个小组，分别对四个场所的空气进行采样。
2、清洗双手，并用酒精棉球擦拭。
领取平板用报纸包好。
3、选好采样本的场所位置，并放置一张凳子，将平板放在上面，统一揭盖接种25分钟。
4、收回平板，贴上标签于37度恒温培养箱中培养，48h后记录并分析。
四、观察结果五、实验样本的采集条件：温度：15.2℃~17℃湿度：70%~79%气压：980~986hPa六、实验结果分析：七、立项意义：在各种微生物的灭菌方法中，紫外杀菌是经常使用的一种常规方法，但是由于空气的流动等原因，超净工作台杀菌后只能保持一段时间的相对洁净。
本实验分别测定紫外杀菌后不同时间段的空气微生物含量，以测定不符合所需无菌条件的临界时间，以此提供一个超净工作台工作的最大时间。
八、参考文献：1、黄秀梨. 微生物学. 北京：高等教育出版社.2、周德庆. 微生物学教程. 北京：高等教育出版社.3、沈萍.微生物学. 北京：高等教育出版社.4、杨汝德. 现代工业微生物学. 广州：华南理工大学出版社.5、杨颐康. 微生物学. 北京：高等教育出版社.6、曹军卫等. 微生物工程. 北京：科学出版社.7、李阜棣胡正嘉. 微生物学（第五版）. 北京：中国农业出版社.8、黄文芳, 张松. 微生物学实验指导. 广州：暨南大学出版社.9、沈萍, 范秀容, 李广斌. 微生物学实验. 北京：高等教育出版社.。
环境中微生物的检测和分离纯化
环境中微生物的检测和分离纯化姓名：王韬班级：生76组号：7-2组同组人：袁堂谧实验日期：2009-11-12一、实验目的：1.熟悉常用微生物培养基配置方法。
2.联系无菌操作技术。
3.学习单菌落划线分离法。
4.通过实验认识环境中微生物的分布。
二、实验原理：1.微生物的分离与纯化：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称微生物的分离与纯化。
常用的是平板分离法。
为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、温度和氧的条件要求不同，而供给他们适宜的培养条件，或加入某些抑制剂造成一支其他菌生长而利于此菌生长的环境。
2.平板菌落计数法：平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分分散成单个细菌，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品的一个单细胞。
该计数法最大的优点是可以获得活菌的信息。
三、实验材料：土壤悬液（稀释100倍），未知菌菌落平板，无菌水，取液器，培养箱，培养皿，无菌涂棒，接种环，接种针，酒精灯。
四、实验步骤：(一)培养基的制备（提前准备）：肉汤蛋白胨培养基：牛肉膏2g蛋白胨4gNaCl 2g蒸馏水400mL琼脂8g1.称量：按上述配方称量各类物质。
2.溶解：在400mL水中溶解牛肉膏、蛋白胨和NaCl，混合加热溶解。
3.调pH值：调至7.2-7.44.过滤（本实验无需过滤）5.加凝固剂：加入称量好的琼脂，混合均匀。
6.分装7.包扎和灭菌8.倒平板(二)从土壤中分离微生物1.采土样（已事先准备）：选择较肥沃的土壤，铲去表层土，挖5-20cm深度的或特殊要求的土壤数十克，装入已灭菌的牛皮纸袋，封好袋口，做好编号记录。
2.制备土壤稀释液（已事先稀释至100倍）：称取1.0g，放入盛99mL无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，置摇床振荡5min使土壤均匀分散成土壤悬液（10-2）。
3.继续稀释土壤悬液至合适浓度：用无菌吸头从上述稀释液中吸取0.1mL土壤悬液，注入事先装有0.9mL无菌水的Ep管中，用同样的方法，分别配置浓度为10-3，10-4，10-5的土壤溶液。
实验二空气微生物的检验
革兰染色 观察溶血 杆菌肽敏感试验 链激酶
报告
α型溶血（草绿色链球菌）：
空气微生物的检验
β 溶血平板观察
空气微生物的检验
生化 鉴定
1、革兰氏染色，阳性，G+链状排列，符合者可做生 化鉴定。 2、生化鉴定
（1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验） 吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水， 混匀，再加入链球菌18-24h36±1℃肉浸液肉汤培养物 0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL，混匀，置于36±1℃水 浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶 解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴 性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶 阳性的菌株做阳性对照。
2）血琼脂平板、匹克肉汤、灭菌生理 盐水、革兰染色液、杆菌肽纸片。
空气微生物的检验
三、实验步骤
1、样品的采集 5个采样点，离地面高度为1.5米，东、西、南、北、
中各放置一个平皿，揭开盖子暴露15min,扣好盖子。
2、培养观察 36±1℃培养24h。
3、菌落形态观察及镜检 血平板：圆形突起，针尖状，灰白色半透明/不透明，
清洁 空气
＜1 500
＜16
＜4 500
＜36
污染 空气
＞2 500
＞36
＞7 000
＞124
空气微生物的检验
空气微生物的卫生标准
室内空气质量标准（GB/T 18883-2002） 对微生物指标的规定： 菌落总数≤2500 cfu/m3
分析实验结果是否满足相应的空气标准。
空气微生物的检验
溶血性链球菌的的检验
空气微生物的检验
（2）杆菌肽敏感试验（药敏试验）
环境微生物学监测流程
环境微生物学监测流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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在开展环境微生物学监测之前，首先要制定详细的监测计划。
空气中微生物的测定实验报告
空气中微生物的测定实验报告本实验旨在测定空气中微生物的数量及种类，探究影响空气质量的因素，并采取相应的预防措施，保证工作场所和生活环境的卫生安全。
一、实验方法1.1 采样器准备准备采样器，将采样器杆插入采样器中心孔内，调整均衡压力，将收集微生物的借腔安装于采样器杆顶部，并使其紧密固定。
1.2 环境样本采集每个采样点进行三次采样，取样位置应保持固定，并在同一时间段进行采集。
1.3 样本处理将收集到的样本传送到实验室，放置在恒温箱内，保持25℃恒温72小时。
每24小时将培养基旋转45度以均匀涂布，并保持培养箱湿度适中。
1.4 微生物分类鉴定与计数于72小时后将培养基取出，用称量器进行称量，计算出微生物的数量，并进行分类鉴定。
二、结果与分析在实验中，对于不同环境样本采集了三次，并将结果取平均值。
结果表明，空气中微生物的数量与环境因素密切相关。
在工厂产生的空气中，微生物数量较高，尤其是在生产车间、食品加工车间和卫生间等空间中，微生物数量更为显著。
而在更干燥、通风良好的办公室和教学楼内，微生物数量较低。
根据鉴定，空气中微生物主要包括真菌、细菌和病毒等。
细菌是空气中最常见的微生物，包括葡萄球菌、耳塞子菌、链球菌等。
此外，还能够检测到黄曲霉、毛霉以及酵母等真菌。
三、结论与建议通过实验结果可得知，维护空气干净的重要性，特别是在工业和生产领域。
对于空气中的微生物，建议加强通风措施，增加房间内过滤空气的方式，定期清洗空调过滤器和通风系统，并且尽可能地避免有机质的堆积。
对于员工应进行健康教育，增强自我卫生防护意识，勤洗手，保持房间干净，预防各种疾病的发生。
此外，空气中微生物数量的变化还与季节、气候条件密切相关，因此，建议每季度进行一次空气微生物测量，及时发现问题并采取相应的防护和治理措施。
这样，才能确保我们的工作和生活场所都能成为一个安全健康的环境。
微生物的检测实验报告
微生物的检测实验报告微生物的检测实验报告一、引言微生物是一类微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界的各个角落，对人类生活和环境具有重要影响。
本实验旨在通过对不同样本中微生物的检测，了解微生物的分布情况以及它们对我们的健康和环境的影响。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 不同样本（如自来水、空气、土壤、食品等）- 培养基（如琼脂、营养琼脂等）- 培养皿- 培养箱- 显微镜2. 实验方法：1) 样本采集：从不同来源采集样本，如自来水龙头、室内空气、户外土壤等。
2) 样本处理：将样本加入适量的生理盐水中，进行均匀悬浮。
3) 培养基接种：将悬浮液均匀涂抹在培养基上，并在培养皿上标记样本来源。
4) 培养皿培养：将培养皿放入培养箱中，设置适当的温度和湿度，培养一定时间。
5) 观察和记录：观察培养皿中微生物的生长情况，记录不同样本中微生物的数量和种类。
6) 显微镜观察：选取培养良好的菌落，进行显微镜观察，进一步确认微生物的形态和结构。
三、实验结果与讨论通过实验我们得到了以下结果：1. 自来水样本中微生物的检测结果显示，其中主要存在细菌类微生物，如大肠杆菌、沙门氏菌等。
这些微生物可能来源于自来水处理过程中的不洁操作或管网污染。
这提示我们在饮用自来水时应注意消毒和过滤，以防止微生物对我们的健康造成威胁。
2. 空气样本中微生物的检测结果显示，其中存在真菌类微生物较多。
这些真菌可能来自于室内的潮湿环境、室外的自然环境等。
有些真菌可能对人体呼吸道有刺激作用，特别是对过敏体质的人。
因此，保持室内干燥、通风，定期清洁和消毒是预防室内真菌感染的重要措施。
3. 土壤样本中微生物的检测结果显示，其中存在丰富的细菌和真菌类微生物。
这些微生物对土壤的肥力和生态平衡起着重要作用。
通过对土壤微生物的研究，我们可以了解土壤的质量和健康程度，为农业生产和环境保护提供科学依据。
4. 食品样本中微生物的检测结果显示，其中存在细菌、真菌等微生物。
实验二环境中的微生物
实验室环境和人体表面微生物的检查
一、实验目的
1. 证明实验室环境和人体表面存在微生物； 2. 比较来自不同场所与不同条件下细菌的数
量与类型； 3. 观察不同类群微生物的菌落形态特征； 4. 体会无菌操作的重要性。
二 、实验原理
• 什么叫菌落？
菌落的形态结构、大小、色泽、透明度、黏稠度、色素及边缘情况等，因各种细菌而异。 ②移去皿盖，将未洗过的手指在琼脂平板表面轻轻地来回划线，盖上皿盖。
（三） 细菌的培养
• 将所有的琼脂平板翻转，使 皿底朝上，放入28℃培养箱 培养1～2d。
（四） 结果记录
• 1.菌落计数 划线的平板数最后1/2面积的菌落数； 非划线平板直接数1/4面积的菌落数。 • 2.特征描述 观察菌落的特点时要选择分离很开的单个菌落。 特征明显的菌落可初步判断属于哪种微生物。
3. 手指上细菌的检查
①用记号笔在平板底部画线，将其平均分成 两部分，标明洗手前与洗手后及姓名、日 期；
②移去皿盖，将未洗过的手指在琼脂平板表 面轻轻地来回划线，盖上皿盖。
③用肥皂将手清洗干净，自然干燥后，在平 板的另外一部分同样划线。
4. 头发上细菌的检查
• 在揭开皿盖的平板上方，用手将头 发拨动数次，使细菌降落到平板表 面，然后盖上皿盖。
细胞的群落 ,称为菌落。 ③先在无菌平板的一个区域内试划几下；
5h后盖上皿盖，倒置于28℃培养箱培养。
• 每一种菌落都有它自己 的特征（如大小、形状 、边缘、表面、质地、 颜色等） ，是衡量菌种 纯度、辨认和鉴定菌种 的重要依据。可通过平 板培养来检查环境中细 菌的数量和类型。
• 菌落的形态结构、大小、色泽、透明度、 黏稠度、色素及边缘情况等，因各种细菌 而异。每一种细菌保持有一定的菌落特征 ，这些菌落特征的区别点都可作为鉴别细 菌的依据之一。
环境微生物学实验内容
环境微生物学实验内容
实验一环境中微生物的检测
实验二微生物的斜面接种法
实验三四大类微生物菌落形态的识别
实验四细菌、放线菌和蓝细菌的个体形态观察
实验五酵母菌、霉菌、藻类、原生动物及微型后生动物个
体形态观察
实验六细菌的涂片及革兰氏染色法及大小测量
实验七细菌的荚膜染色法
实验八细菌的芽孢染色法
实验九微生物直接计数法
实验十培养基的配制与灭菌
实验十一微生物的液体接种法
实验十二平板划线分离法
实验十三菌种保藏法（示范）
实验十四细菌生长曲线的测定
1.侧臂试管三角瓶法；
2.小型台式自控发酵罐法
实验十五水中细菌总数的测定
实验十六水中大肠菌群的检测
实验十七应用API 20E细菌鉴定系统鉴定肠杆菌科和其它部
分革兰氏阴性杆菌
实验十八含酚废水降解细菌的分离、纯化和筛选实验十九纤维素的微生物降解
实验二十用Ames法检测环境中致突变物
实验二十一考试: 混合菌样中微生物的初步鉴定。
微生物的分布实验报告
微生物的分布实验报告篇一：微生物实验报告微生物实验报告一环境中的微生物的检测和分离纯化实验目的：1 学习并掌握无菌操作技术原理和方法2 学习用稀释涂布法分离微生物3 认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的原理实验材料：1 土样溶液0.5ml，无菌生理盐水2 取液器(1000μL一支，100μL一支)，培养箱，培养皿(12个)，无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂棒，接种环，1000μL无菌吸头若干，记号笔，酒精灯，火柴，试管架实验步骤：A培养基的制备(已提前制备好)B周围环境中的微生物的检测，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上作如下实验1 取三个平板，用100μL的取液器分别吸取100μL的河水、豆浆、豆奶，均匀加在三个培养基上，并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时间约1-2分钟，使细菌均匀分布)。
2 再取三个平板，三个同学分别用手指(未洗过)在培养基上涂抹几秒钟，一个同学对应一个平板。
3 再取一个平板，其中一个同学将手用肥皂洗过后，再在培养基上涂抹。
4 再取一个平板，打开皿盖，一个同学对着培养基咳嗽，使口腔中的气流和飞沫落到培养基上。
5 再取一个平板，打开皿盖，在空气中放置10min左右，关上皿盖。
6 将上述9个平板放置在35℃的培养箱中培养24h。
C土壤中分离微生物1 采土样，制备土壤稀释液(已准备好)2 取三个平板，每个培养基上用取液器添加100μL的土壤稀释液，并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时间约1-2分钟，使细菌均匀分布)。
3 将平板依旧放在35℃的培养箱中培养24h。
D菌落计数培养24h后，取出培养平板，算出每个平板上的菌落数量。
其中，土样中的微生物含量可用以下式子计算土壤中的细菌含量(个/g土壤)=菌落平均数×10×稀释倍数实验结果及数据：实验结果如附图。
开盖10min 手指直接按压手指直接按压手指直接按压1号的手指经肥皂洗后按压对着培养基咳嗽豆奶河水土壤溶液土壤溶液豆浆土壤溶液实验讨论及感想：1根据你对周围环境中微生物存在的观察，你认为无菌操作要注意什么？在进行无菌操作的时候，应该要注意始终在明火旁边操作，既不能离得太远，也不能离得太近。
实验二 环境中微生物的检测
实验二环境中微生物的检测微生物是生物界中最小的生物单位，包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于我们生活及工作的环境中，与人类的健康和环境卫生密切相关。
因此，对环境中微生物的检测具有重要的意义。
环境中微生物的检测可以分为定性检测和定量检测两种。
定性检测一般用于检测微生物种类的存在，而定量检测则是通过测定微生物的数量来衡量环境标准和环境质量。
为了保证环境中微生物检测的准确性，需要采用适当的采样、培养和检测方法。
采样是环境中微生物检测的第一步，它的质量直接影响后续检测结果的准确性。
在采样前需要先明确检测对象的种类及数量，采样时应选择合适的位置和采样器具，在规定的采样点进行采样。
对于不同的环境样品，采样器具也应因样品种类而异，如对于空气样品可采用空气孔板法或可旋式空气采样器，对于表面样品可采用棉签或含NaCl的消毒海绵。
采样完成后的样品处理涉及到微生物的分离和富集。
分离需要将微生物从样品中分离出来，可以采用滤膜法、离心沉淀法、平板培养法等分离方法。
富集则是指将微生物数量增加到检测的最小检测水平以上，可以采用预培养法、富集法、膜过滤法等富集方法。
这些方法的选择应根据样品类型、环境条件和检测目的来定。
样品处理完成后，就需要进行微生物的检测。
微生物的检测方法包括传统的培养法、免疫学法、生物学法、分子生物学法等。
其中，传统的培养法是最常用的微生物检测方法。
培养法根据不同微生物种类的需求，选取适当的培养基，对样品进行培养，观察和计数微生物的生长情况和数量，以达到定性和定量检测的目的。
免疫学法基于抗原与抗体的反应，可迅速检测到某些特定微生物，但也有其局限性。
生物学法利用微生物特有的染色噬菌体，对目标微生物的数量快速定量。
分子生物学法则利用了基因的特异性，对微生物进行精确的鉴定和定量，但其结果受到实验室操作的影响。
总之，环境中微生物的检测是环境卫生监测的重要环节，采样、样品处理和检测方法的合理选择对检测结果的准确性至关重要。
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2、环境中微生物的检测
（1）空气 将一个牛肉膏蛋白胨平板放在桌面上，移去皿 盖，使其暴露在空气中5-10min后盖上皿盖。 （2）手指 移去皿盖，用手指在琼脂平板的表面轻轻地来 回划线，盖上皿盖。 （3）头发 取头发一根，在平板表面任一方向划线3~5条， 盖上皿盖。 （4）咳嗽 将揭开皿盖的琼脂平板放在离口约6～8cm处， 对着琼脂表面用力咳嗽，然后盖上皿盖。
④ 光泽：玻璃状、蜡质状、油脂状。
⑤ 高度：扁平、隆起、凹下。
⑥ 透明程度：透明、半通明、不透明。
⑦ 边缘：整齐、不整齐。
1.比较各种来源的样品，哪一种样品的平板菌落 数与菌落类型最多？ 2.通过本次实验，在防止培养物的污染和防止细
菌的扩散方面，你学到些什么？有什么体会？
实验二 环境中微生物的检测
一、目的要求
1、了解环境中微生物的存在。 2、比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。 3、观察不同类型微生物的菌落形态特征。 4、体会无菌操作的重要性，初步建立微生物工作者必须 具有的“无菌”概念。
二、基本原理
微生个体微小，种类繁多且无处不在，但肉眼不可见。若用营 养琼脂平板法进行检测，可以看到其群体结构。 平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源 的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，1～2 d内每一菌 体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞 群体的集落，称为菌落。 每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小、 表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整 齐，菌落透明、半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。 因此，可通过平板培养来检测环境中细菌的数量和类型。
三、实验器材
1、牛肉膏蛋白胨琼脂平板
2、仪器或其他用具、记号笔等
四、实验步骤
1、编号
任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记
号笔做上记号，写上班级、姓名、日期，本次实验 以免影响观察结果。 培养皿的记号一般写在皿底上，如果写在皿盖上，
还要注明处理号，写在皿底的一边，不要写在当中，
同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时，容
3、将所有的琼脂平板翻转
使皿底朝上，放28℃培养箱，培养2～3 d。
五、实验报告
（1）菌落计数 在划线的平板上，如果菌落很多而
重叠，则数平板最后1/4面积内的菌落数。不是划线
的平板，也一分为四，数1/4面积的菌落数。
（2）根据菌落大小、形态、高度、干湿等特征观察
不同的菌落特征。但要注意，如果细菌数量太多， 会使很多菌落生长在一起，或者限制了菌落生长而 要选择分离的很开的单个菌落。
Hale Waihona Puke 变得很小，因而外观不典型，故观察菌落的特点时，
将你自己的平板结果记录于下表中。
菌落数 (近似 值) 特 征 描 写 形状 大小 色泽 光泽 高度
皿号
透明 表面 边缘 度
1 2 3 4 CK
菌落特征描写方法如下：
① 形状：圆状、丝状、不规则状、假根状 。
② 大小：以直径表示。
③ 表面：光滑、干燥、湿润、皱褶。