植物(Plant)过氧化氢(H2O2)ELISA试剂盒说明书
植物(plant)玉米素(zt)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）玉米素/细胞分裂素（ZT）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被玉米素/细胞分裂素（ZT）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的玉米素/细胞分裂素（ZT）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。
4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、0.5、1、2、4、8ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
小鼠过氧化氢酶(CAT)ELISA检测试剂盒使用说明书
小鼠过氧化氢酶（CAT）ELISA检测试剂盒使用说明书小鼠过氧化氢酶（CAT）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被过氧化氢酶（CAT）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化氢酶（CAT）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品活性。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明书操作时样本已经稀释5倍，最结束果乘以5才是样本实际浓度。
严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。
全部液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80U/ml 试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
植物过氧化氢(H2O2)说明书
植物过氧化氢（H2O2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞上清及相关液体样本中过氧化氢（H2O2）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢（H2O2）水平。
用纯化的植物过氧化氢（H2O2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢（H2O2）,再与HRP标记的过氧化氢（H2O2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化氢（H2O2）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢（H2O2）浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
碧云天生物技术过氧化氢酶检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号过氧化氢酶检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0051过氧化氢酶检测试剂盒100次产品简介：过氧化氢酶检测试剂盒(Catalase Assay Kit)是一种简单易行的通过显色反应来检测细胞、组织或其它样品中过氧化氢酶(Catalase)活性的试剂盒。
在过氧化氢相对比较充足的情况下，过氧化氢酶可以催化过氧化氢产生水和氧气。
残余的过氧化氢在过氧化物酶(Peroxidase)的催化下可以氧化生色底物，产生红色的产物(N-(4-antipyryl)-3-chloro-5-sulfonate-p- benzoquinonemonoimine)，最大吸收波长为520nm 。
用过氧化氢标准品，制作标准曲线，这样就可以计算出样品中的过氧化氢酶在单位时间单位体积内催化了多少量的过氧化氢转变为水和氧气，从而可以计算出样品中过氧化氢酶的酶活力。
过氧化氢酶分布非常广泛。
在肝脏、肾脏和红细胞中，过氧化氢酶的水平非常高，是清除能导致氧化损伤的过氧化氢的主要场所。
过氧化氢酶的活性也可以用紫外分光光度计测定A 240，但蛋白质或其它组份在A 240附近都有比较强的吸收，会对测定产生严重干扰。
因此，用紫外法测定过氧化氢酶的活性，比较适合纯化的过氧化氢酶。
本试剂盒通过检测A 520来测定过氧化物酶催化下由过氧化氢氧化生色底物产生的红色产物，受干扰的因素小，检测灵敏度高，可以检测出低达1U/ml 的过氧化氢酶。
本试剂盒可以检测全血、红细胞裂解产物、血清、组织匀浆产物、细胞裂解产物等生物样品中的过氧化氢酶的活性。
一个试剂盒共可以进行100次检测。
包装清单：产品编号 产品名称包装 S0051-1 过氧化氢酶检测缓冲液 60ml S0051-2 过氧化氢 (约1M) 5ml S0051-3 过氧化氢酶反应终止液50ml S0051-4 显色底物 20ml S0051-5 过氧化物酶 20µl —说明书1份保存条件：-20ºC 保存，一年有效。
过氧化物酶封闭液(H2O2法)
北京雷根生物技术有限公司
过氧化物酶封闭液(H 2O 2法)
简介：
在免疫组化染色中，如果组织内存在相同的内源酶，应抑制内源性酶活性，不能让其加入底物的反应体系，以免影响标记的效果。
过氧化物酶反应的最佳pH 值是5，但pH=5.0时反应产物常常比较粗糙，因此在免疫组化染色中常使用pH6.0～7.6以延缓反应，使反应产物颗粒变小。
在免疫组化染色前需要抑制内源性过氧化物酶的活性，以便去除非特异性结合反应。
Leagene 过氧化物酶封闭液(H 2O 2法)由低浓度H 2O 2、磷酸盐等组成，能够很好的非特异性结合反应，尤其适用于封闭内源性过氧化物酶的活性。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 切片贴于玻片上，用PBS 轻轻清洗。
2、 将玻片吸干或吹干，入过氧化物酶封闭液，孵育。
3、 无需清洗，直接将玻片吸干或吹干。
4、 在未标记的一抗中孵育。
注意事项：
1、 一经开启，立即使用，防止有效成分挥发。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关：
编号 名称 IH0111 Storage 过氧化物酶封闭液(H 2O 2法) 100ml RT 使用说明书 1份
编号 名称
CA0075 青霉素-链霉素混合溶液(100×双抗)
DH0006 苏木素伊红(HE)染色液
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒说明书
第 1 页，共4页过氧化氢（H 2O 2）含量检测试剂盒说明书微量法货号：BC3595规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体100 mL×1瓶（自备）4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体6 mL×1瓶4℃保存试剂四液体30 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂一：丙酮自备。
2、试剂二：临用前加入3 mL 浓盐酸充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存。
3、标准品：1 mmol/mL H 2O 2标准液。
产品说明：H 2O 2是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD 和XOD 等催化产生，由CAT 和POD 等催化降解。
H 2O 2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。
一方面，H 2O 2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H 2O 2也是许多氧化应激反应中的关键调节因子。
H2O 2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm 有特征吸收。
技术指标：最低检出限：0.0027 μmol/mL 线性范围：0.0195-3 μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、丙酮、浓盐酸、研钵/匀浆器和冰。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）细菌或细胞样本的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3s ，间隔10s ，重复30次）；8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。
过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书 微量法
过氧化氢酶（CAT）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC0205规格：100T/96S 产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体125μL×1瓶，4℃保存。
产品说明：CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H 2O 2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解H 2O 2，使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔（UV 板）、研钵、冰和蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上，调节波长至240nm，蒸馏水调零。
2、CAT 检测工作液的配制：用时在试剂二中加入25mL 试剂一，充分混匀，作为工作液。
3、测定前将CAT 检测工作液在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min 以上。
4、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL 样本和190μL 工作液，立即混匀并计时，记录240nm 下初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2。
计算ΔA＝A1-A2。
三、CAT 活性计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1、血清（浆）CAT 活力的计算:单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。
过氧化氢检测试剂盒
包装清单：
产品编号 S0038-1 S0038-2 S0038-3
—
产品名称 过氧化氢检测试剂 过氧化氢标准溶液(1M) 过氧化氢检测裂解液
说明书
包装 15ml 1ml 50ml 1份
保存条件：
-20℃保存，一年有效。其中过氧化氢标准溶液需避光保存。
注意事项：
一些干扰氧化还原的试剂或在酸性条件下呈紫色或接近的试剂会对过氧化氢的检测产生干扰，需尽量避免。 如果样品中含有外加的较高浓度的铁盐，会干扰测定。但普通培养基、血清等样品中含有的微量的铁盐不会干扰测定。 所测得的标准曲线尽管在一定的浓度范围内接近直线，但整个标准曲线不是直线。 测定时需可以测定A560的酶标仪一台(测540-570nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
样品在什么溶液中标准品也需用什么溶液稀释，这样可以减小误差。例如对于细胞样品，标准品宜用过氧化氢检测裂解 液稀释，对于培养细胞的上清液样品，标准品宜用相应的细胞培养液稀释。标准溶液可以稀释成1、3、10、30、100微摩 尔/升，或1、2、5、10、20、50、100微摩尔/升，初次测定后知道样品的浓度范围后可以对标准品在样品浓度范围附近密 集测定。 3. 过氧化氢浓度的测定： (1) 把过氧化氢检测试剂在冰上或冰水浴上融解。 (2) 在检测孔或检测管内加入50微升样品或标准品。 (3) 在每个孔内加入100微升过氧化氢检测试剂。 (4) 轻轻振荡或敲打混匀，室温(15-30℃)放置30分钟。然后立即测定A560。如测A560有困难，波长可以选择540-
过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(硫酸钛比色法)
过氧化氢(H 2O 2)检测试剂盒(硫酸钛比色法)简介：过氧化氢(H 2O 2)是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD 和XOD 等催化产生，由CAT 和POD 等催化降解。
H2O2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。
生命体内积累的H 2O 2是由一些氧化物催化超氧阴离子发生氧化还原反应而形成，H 2O 2相对超氧阴离子性质稳定，但其存在可以直接或间接导致细胞膜脂质过氧化损害，加速细胞的衰老和解体，H 2O 2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
Leagene 过氧化氢(H 2O 2)检测试剂盒(硫酸钛比色法)其检测原理是H 2O 2与硫酸肽反应发生的过氧化物-钛复合物黄色沉淀，溶解于强酸中，其黄色深浅与过氧化氢浓度在一定范围内呈线性关系，通过分光光度计检测吸光度。
该试剂盒主要用于检测植物组织、血清、血浆等样品中过氧化氢(H 2O 2)含量。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 丙酮3、 浓硫酸4、 比色杯5、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取，加入预冷的丙酮，在冰浴条件下迅速匀浆或研磨，离心，收集上清液，测量提取液总体积，保存备用。
编号 名称TO1076 50T Storage试剂(A): H 2O 2标准 1ml RT 试剂(B): 碱性基液 10.5ml RT 试剂(C): 硫酸钛 1g RT 试剂(D): 酸性基液 100mlRT 使用说明书1份②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，4℃保存，用于过氧化氢的检测。
③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的过氧化氢，可以使用丙酮进行恰当的稀释。
2、配制丙酮-H2O2溶液：取H2O2标准准确溶解于蒸馏水中，即得H2O2。
取H2O2准确溶解于丙酮中，即为的丙酮-H2O2溶液，按下表依次稀释：加入物(ml) 1 2 3 4 5丙酮-H2O2溶液(100μM)0.2 0.4 0.6 0.8 1预冷丙酮0.8 0.6 0.4 0.2 0H2O2含量(nmol) 20 40 60 80 1003、配制硫酸钛溶液：将硫酸钛小心缓慢的加入浓盐酸中，即为硫酸钛溶液，4℃避光保存。
过氧化氢定量分析试剂盒(水兼容性)H2O2QuantitativeAssayKit
过氧化氢定量分析试剂盒（水兼容性） H 2O 2 Quantitative Assay Kit (Water-Compatible)产品编号：C500069包装规格：50 Assays 离心管法 250 Assays 酶标板法 产品简介在酸性环境中，过氧化氢可将Fe 2+离子氧化成Fe 3+离子，Fe 3+离子再与染料分子结合形成Fe 3+-染料复合物，该复合物在560 nm （或595 nm ）处有最大吸收波长，且吸光值与过氧化氢的浓度成正比。
本试剂盒针对溶解于水相中的样品而设计，通过添加特殊的增敏剂，增强了过氧化氢的检测信号，使得过氧化氢的检测灵敏度得到很大提高，可应用于监测蛋白的糖基化和间接确定生物样品溶液中蛋白质被氧化的程度以及溶液中过氧化氢的含量。
本试剂盒定量过氧化氢的浓度范围为1-100 μM 。
产品特点 1. 不需要过氧化氢酶，快速，即用型。
2. 光谱分析，不需要加热。
3.用于监测蛋白的糖基化和间接确定生物样品溶液中蛋白质被氧化的程度以及溶液中过氧化氢的含量。
运输和保存条件常温下运输，收到后，将溶液A 和B 在2-8°C 的环境中避光保存，保质期两年。
产品组成 成分 C500069 溶液 A 0.6 mL 溶液 B 60 mL操作步骤A 试剂准备 1. 按照以下公式计算所需的工作液总体积。
工作液总体积=（标准曲线测定点数+样品数）×重复次数×每个样品所需的工作液体积2. 根据所需的工作液总体积，取1份溶液A 和100 份溶液B ，混匀，制成工作液。
3. 取一试管，加入1 μL 30%过氧化氢溶液和8.8 mL 纯净水，混匀，配成1 mM 过氧化氢溶液。
4.取若干支1.5 mL 离心管，按照下表平行操作，制备一系列的标准过氧化氢溶液。
S a ng onB i o te chB. 离心管法 1. 制作标准曲线1) 取若干支1.5 mL 离心管，各管分别加入100 μL 相应浓度的标准过氧化氢溶液。
过氧化氢酶（CAT）活性检测试剂盒说明书
过氧化氢酶（CAT ）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0200规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶4℃保存试剂一液体60 mL×1瓶4℃保存试剂二液体320 μL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：液体置于试剂瓶内EP 管中，使用前需先离心。
2、检测工作液的配制：取100μL 试剂二加入20mL 试剂一，充分混匀（约20T ），作为工作液，现用现配；或者根据比例配制。
产品说明：CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H 2O 2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解H 2O 2，使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备a 、细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL ）为500-1000:1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（功率200w ，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
b 、组织：按照组织质量（g ）：提取液体积（mL ）为1：5-10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
过氧化氢H2O2测定试剂盒
过氧化氢（H2O2）测定试剂盒说明书修订日期：2018.07.31 Cat number：KGT018Store at 4℃ for for 6 monthsFor Research Use Only（科研专用）一、原理过氧化氢H2O2可以与钼酸作用生成一种络合物在405 nm处测定其生成量可计算出H2O2的量。
二、试剂组成组份KGT018（50 assays）储存条件Buffer A 60.0 mL 4℃Buffer B 60.0 mL 4℃H2O2标准储备品 5 ml 4℃163mmol/LH2O2标准品工作液的配制：用前按 H2O2标准储备液：蒸馏水＝ 1：9 比例稀释，现用现配。
三、操作方法空白管标准管测定管Buffer A（ml）（37℃预温） 1 1 1 蒸馏水（ml）0.1163mmol/L H2O2标准品工作液（ml）0.1样本（ml）0.1Buffer B（ml） 1 1 1混匀，于405 nm处，1 cm光径，蒸馏水调零，测各管吸光度。
四、计算公式(一)血清、血浆样本：(二)组织样本：准确称取组织重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，10000 rpm/min离心10min，取上清10%匀浆待测。
五、备注1 、Buffer A 使用前需 37℃预温 10 分钟。
2 、样本取样量要做预试，吸光度大于 0.8 以上则需将样本进行稀释。
若吸光度小于 0.05 以下，则需将取样量增加。
（标准管中的标准品工作液及空白管中的蒸馏水均要同样量增加）3 、本试剂盒检测范围为0.5-380 mmol/L。
4 、本试剂盒仅用于科研。
凯基相关产品（详见凯基网站）细胞株、细胞提取物及细胞培养产品人类肿瘤细胞株动物肿瘤细胞株正常细胞株肿瘤耐药细胞株细胞提取物（RNA/DNA/蛋白）细胞培养相关产品细胞凋亡一、细胞凋亡研究试剂盒Annexin V-FITC/ EGFP/PE 细胞凋亡检测试剂盒TUNEL 凋亡原位检测系列试剂盒Caspase(2、3、6、8、9)系列细胞凋亡检测试剂盒线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）TRAP-PCR 端粒酶活性检测试剂盒DNA Ladder 检测试剂盒二、细胞凋亡相关抗体三、凋亡诱导剂、抑制剂四、氧化应激损伤检测试剂盒五、细胞凋亡研究辅助试剂细胞增殖/毒性/活力与细胞周期凯基细胞周期检测试剂盒MTT、XTT、WST-1、CCK-8 等系列细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒细胞染色产品□活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒（AO/EB法.荧光显微镜）凯基细胞凋亡形态学检测试剂盒罗丹明123、DAPI、PI、7-AAD、Hoechst 33258、EB、吖啶橙染色试剂盒亚细胞组分制备细胞核、线粒体制备试剂盒细胞悬液制备试剂盒（组织消化试剂盒）。
过氧化氢酶试剂盒使用说明
过氧化氢酶试剂盒使用说明微量法货号:BC0205规格:100T/96S 产品内容：提取液：100mL×1瓶，4℃保存；工作液：24mL×1瓶，4℃保存；产品简介：CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H 2O 2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解H 2O 2，使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。
操作步骤：一、粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1ML 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20%或200W，超声3秒，间隔10秒。
重复30次）；8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
二、操作步骤1、分光光度计或酶标仪预热30min，调节波长到240nm，蒸馏水调零。
2、测定前将CAT 检测工作液37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴10min。
3、加入10μL 样本和190μL 工作液，混匀5s 或者在酶标仪上振动5s 并立即计时，记录240nm 下的初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2。
计算ΔA=A1-A2三、CAT 活性计算（用石英比色皿）：1、血清（浆）CAT 活力的计算:单位的定义：每毫升血清（浆）在反应体系中每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。
CAT（U/mL）＝反应总体积÷样本体积÷反应时间÷H 2O 2消光系数（43.6×10-3）×ΔA=459×ΔA2、组织CAT 活力计算：（1）按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。
过氧化氢酶（CAT）活性检测试剂盒说明书.pdf_1694043318.0482385
过氧化氢酶（CAT）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0200规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶4℃保存试剂一液体60 mL×1瓶4℃保存试剂二液体320 μL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：液体置于试剂瓶内EP管中，使用前需先离心。
2、检测工作液的配制：取50μL试剂二加入13mL试剂一，充分混匀（约13T），作为工作液，现用现配；或者根据比例配制。
产品说明：CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
H2O2在240nm下有特征吸收峰，CAT能够分解H2O2，使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备a、细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000:1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（功率200w，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
b、组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
植物过氧化氢(H2O2)说明书
本文由上海哈灵生物科技有限公司提供上海哈灵试剂供应商感谢您阅读本文植物过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及相关液体样本中过氧化氢(H2O2)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢(H2O2)水平。
用纯化的植物过氧化氢(H2O2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢(H2O2)，再与HRP标记的过氧化氢(H2O2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化氢(H2O2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢(H2O2)浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.3. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
植物组织过氧化氢含量的测定
配制100ml 、100umol/L 的过氧化氢溶液需要多少30%的过氧化氢原液？请写出计算过程。
答：首先计算其摩尔浓度：若30%为其质量百分数双氧水30%浓度的试剂（国药集团出品），室温时实测密度为：1,122g/L，所以，1L 30%含量的双氧水中过氧化氢含量为：1122g/L ×1L×30%=337g又H2O2的分子量为34.0146，那么1L 30%含量的双氧水中过氧化氢浓度为：337/34.0146=9.908 mol/L.100ml×10-3×100umol/L×10-6=9.908mol/L×VV=10-6L=1 ul若30%为体积分数100% H2O2密度是1,440 g/L, 30 ml H2O2的质量为1440 g/L×30 ml×10-3=43.2g，30%含量的双氧水中过氧化氢浓度为：43.2/34.0146/0.1=12.7 mol/L.100ml×10-3×100umol/L×10-6=12.7mol/L×VV=7.9×10-7L=0.79 ul植物组织中过氧化氢含量测定植物在逆境下或衰老时，由于体活性氧代加强而使H2O2发生累积。
H2O2可以直接或间接地氧化细胞核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体。
过氧化氢酶可以清除H2O2，是植物体重要的酶促防御系统之一。
因此，植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。
本实验用分光光度法测定过氧化氢含量，利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。
[原理]H2O2与硫酸钛（或氯化钛）生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀，可被H２SO4溶解后，在415nm波长下比色测定。
在一定围，其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。
[仪器和用具]研钵；移液管0.2ml×2支，5ml×1支；容量瓶10ml×7个，离心管5ml×8支；离心机；分光光度计。
植物(plant)激素脱落酸(aba)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）激素脱落酸（ABA）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被激素脱落酸（ABA）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的激素脱落酸（ABA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。
4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
过氧化氢试剂盒说明书
过氧化氢试剂盒说明书过氧化氢试剂盒是一种用于检测过氧化氢（H2O2）浓度的化学试剂盒。
过氧化氢是一种强氧化剂，广泛应用于医疗、环境保护、食品加工等领域。
本试剂盒提供了一种简便、快速、准确的检测方法，适用于实验室和生产现场。
使用过氧化氢试剂盒前，首先要准备好实验器材和试剂。
试剂盒包含有氢过氧化物和某种指示剂，可以购买商家提供的成套试剂盒，也可以单独购买所需试剂。
同时还需要一些实验仪器，如移液枪、比色计等。
实验操作的步骤如下：1. 取适量样品，并将其转移到试剂容器中。
样品可以是液体、固体或气体。
2. 使用移液枪向试剂容器中加入适量的试剂。
试剂中的某种成分将与过氧化氢发生反应，并可视化表现出颜色变化。
3. 摇匀试剂容器，使试剂与样品充分混合。
注意避免气泡的产生。
4. 静置适当的时间，让反应充分进行。
具体的反应时间根据试剂盒的说明进行调整。
5. 观察试剂容器中的颜色变化，可以使用比色计进行精确测量。
6. 根据试剂盒的说明书，将颜色变化与过氧化氢浓度进行对应。
一般来说，颜色的深浅与过氧化氢浓度成正比关系。
7. 根据测得的结果，进行相应的数据处理和分析。
可以参考相关文献了解检测指标的单位和范围。
使用过氧化氢试剂盒时，需要注意以下几点：1. 严格按照试剂盒的说明书操作，确保实验的准确性和可重复性。
2. 注意安全操作，避免试剂接触皮肤和眼睛，避免吸入试剂蒸汽。
3. 试剂喷洒或泼溅到衣物或实验室周围时，应及时用大量水冲洗。
4. 使用过程中，注意对试剂进行正确、干燥、防潮密封保存，避免受潮和降解。
总结起来，过氧化氢试剂盒是一种非常实用的化学试剂盒，可以用于快速准确地测定过氧化氢浓度。
通过遵循正确的操作步骤和注意事项，可以获得可靠的实验结果。
这将有助于各个领域的科研工作者、生产工作者和环境监测人员开展实验和工作，为保护环境和改善生活做出贡献。
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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）过氧化氢（H2O2）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被过氧化氢（H2O2）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化氢（H2O2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。
4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80μmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最低检测浓度小于1.0μmol/L。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Plant hydrogen peroxide(H2O2)ELISA KitinstructionIntended useThis H2O2ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of H2O2in the sample, this H2O2ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus H2O2concentration.The concentration of H2O2in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Sample collection and storages1.Can’t detect the samples which contain NaN3,because NaN3inhibits HRPactivity of the horseradish peroxidase.2.Extract as soon as possible after Specimen collection,Extracted according to the relevant literature.Cell culture supernates and plant exact fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20°C or-80°C.Avoid repeated freeze-thaw.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorPrecautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate andmicroplates are matched for optimal e only the reagents supplied bymanufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused stripsshould be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature(20-25°C)Materials suppliedName96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent 6.0ml 3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A 6.0ml 3.0mlChromogen Solution B 6.0ml 3.0mlStop Solution 6.0ml 3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Standard(S0→S5)concentration was followed by:0,5,10,20,40,80μmol/L Reagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.Assay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.3.Add Sample:Add testing sample10μl then add Sample Diluent40μl to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle, manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from light.7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical(Y)axis versus the corresponding concentration on the horizontal(X)axis.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before resultinterpretation.Construct the standard curve using graph paper or statisticalsoftware.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on theY-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point ofintersection,draw a vertical line to the X-axis and read the correspondingconcentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time ortemperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtaintheir own standard curve.5.The sensitivity by this assay is1.0μmol/L6.Standard curveStorage：2-8℃.validity：six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC ORDIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGHENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!。