植物信号转导

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protein,Gi)偶联,抑制腺苷酸环化酶
Gt:激活cGMP磷酸二酯酶,同视觉有关 Go:调节磷脂代谢,与肌醇磷酸信号系统有关 Gq:与磷脂代谢有关,但活性不受细胞毒素的修饰
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③ 异三聚体G蛋白跨膜转换细胞信号模型
细胞外信息分子(第一信使) 刺激型受体 (Rs) 受体 抑制型受体(Ri) 刺激型G蛋白(Gs) G蛋白
分类: a) 配体依赖性复合体 b) 电压依赖性复合体
二级结构:
盐碱型乙酰 胆碱受体 (nAchR)
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b. G蛋白耦合型受体
—— 必须与G蛋白耦合产生胞内信使 如cAMP、cGMP、DG、IP3等 七跨膜结构:
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c. 具有酶活性的受体
—— 一种具有跨膜结构的酶蛋白,其胞外域与配体结 合而被激活,通过包内侧激酶反应将胞外信号传 至胞内
具S结构域(S-domain)的RLKs
类表皮生长因子RLKs(EGF-like RLKs) 类肿瘤坏死因子受体(TNFR-like)RLKs 凝集素样(lectin-like)RLKs
几丁质酶相关RLK(chitinase-related RLK)
类细菌双组分系统受体激酶
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b. RLKs的信号转导
70年代,Ca2+受体蛋白——钙调素(CaM)的发 现,Ca2+作为第二信使学说
80年代,质膜肌醇磷脂代谢途径产生的另外两 个胞内信使——IP3和DG的发现 同时,G蛋白的发现,依赖胞内信使的蛋白质可 逆磷酸化的研究
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化学信号分子与信号传递途径的特征:
信号分子一般分子质量较小而易于移动
a. iGluR的结构
拟南芥中可能含有一个编码iGluR的基因家族,并且iGluR 的相关基因存在于多种高等植物中(双单子叶植物)
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b. iGluR的功能
添加iGluR的拮抗剂(DNQX) 拟南芥幼苗表现出下胚轴伸长,叶绿素合成降低60%
说明该拮抗剂至少部分阻断了光抑制下胚轴伸长的 能力和诱导叶绿素合成的能力
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④ 病原信号转导
CTX和PTX 增加 一种豆科植物细胞对真菌病原激发子的反应能力
真菌激发子 增强 马铃薯块茎微粒体结合GTPγS的能力和GTPase的活性 一种G蛋白激活剂 可模拟 病原激发子刺激大豆细胞产生H2O2的反应 并被CTX所促进 p cab::CTX导入烟草细胞 烟草对病原的抗性增强 并引发一些与病原相关基因的表达和内源水杨酸的积累
基因
CLV1
ER PRK1 SRK
组织
顶端分生组织
顶端分生组织 花粉 花柱
功能
细胞分裂和分化; 花器官发育 细胞分化 花粉发育、萌发 特异性控制自交不亲和
这些基因的表达具有组织表达特异性,并在不同发育时期表达也不相同
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参与植物防御反应 PTO(番茄细菌病)
没有胞外域,是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶
CLV2:编码一个受体蛋白激酶,胞外也有
LRR结构域,但缺少胞内激酶区
百度文库
CLV3:编码一个配基蛋白
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3
SRK途径 与自交不亲和有关
S 结 构 域
SCR
花粉
SRK受体蛋白
P
P
柱 头 细 胞
ARC1
P P
P P
蛋白
花粉萌发
激活了SRK的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 17
c. RLKs的生物学功能
调控植物生长发育
刺激GTP酶活性
与效应器竞争Gα
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④ 小G蛋白家族
分子量小,单亚基蛋白 包括ras、rho、rab、Arf等几个家族 四个保守结构域(Ⅰ~Ⅳ) 与效应酶结合部位
小G蛋白与异三聚体G蛋白的比较:
相同: 1. 都具有两种鸟嘌呤核苷酸的结合形式
2. 内源GTPase活性
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不同:
小G蛋白主要受质膜上酪氨酸蛋白激酶受体调节
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② 受体-配体结合的主要特征
受体与配体结合的特异性 识别过程:
配体 受体 氢键、离子键 疏水作用 范德华力
空间结构互补
诱导-契合
• 同一配体可结合不同受体产生不同反应
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③ 细胞表面受体的种类与结构
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a. 离子通道型受体
特点:由多亚基组成受体/离子通道复合体,除有信号
接受部位外,本身又是离子通道。反应极快
④ 胞质Ca2+外流调控
Ca2+-ATPase Ca2+/nH+反向运输器
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2.植物细胞钙离子信号特异性的产生
钙离子信号特异性可能模式:
a. 钙离子独立诱导细胞反应,特异性的Ca2+变化决定 生理反应的特异性;
b. 刺激因素除引起钙信号外还可以产生胞质中下游的 其他多种信号转导因子,由它们的不同组合来决定 反应特异性。
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2.植物细胞膜表面受体
① 类受体蛋白激酶
(receptor-like protein kinases)
a. RLKs的种类和结构
胞 外
结 构 域
跨 膜 胞 内 激 酶
功能涉及到植物生长发育和抗病、抗逆等各个方面
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7类RLKs:
富含亮氨酸重复区(leucine-rich repeats, LRRs)RLKs
存在于不同的细胞部位的“小G蛋白”
(small GTP-binding proteins)
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① 异三聚体G蛋白的基本结构
α、β、γ三种亚基
(膜内侧)
α亚基结构:
• G1-G5(GTP结合位点和酶活性位点; 与Gβ、效应器结合位点) • C端α螺旋区(与受体作用位点) • N端(插入脂膜内侧) • 与毒素修饰位点
小G蛋白信号转导还需两种蛋白中介: 接头蛋白(adaptor)和 鸟苷酸释放因子(GRFs)
小 G 蛋 白
GDS
正调控
GDI
负调控
酪氨酸蛋白激酶受体
GRFs
adaptor
小G蛋白GTPase活性很低, 下游还需要GTP酶激活蛋白(GAPs)的催化
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⑤ G蛋白的生物学意义
信号放大作用
胞外信号 cAMP cAMP cAMP cAMP ……
Cf-9(番茄叶霉病)
胞外域有LRR结构,胞内没有激酶结构
Xa21(水稻百叶枯病)
胞外有LRR结构,胞内有丝氨酸/苏氨酸激酶结构
参与激素信号传递
细胞分裂素受体CKI1和CRE1 乙烯受体ETR1 油菜素类固醇受体BRI 1
编码组氨酸蛋白激酶
编码含有LRR重复单元 的受体蛋白激酶
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② G蛋白偶联受体
在cAMP特异的环核苷酸磷酸二酯酶 (cAMP-PDE)催化下cAMP水解, 产生5’-AMP,信号灭活
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2. 植物中的G蛋白
① 植物中的异三聚体G蛋白基因
Gα(gpa1拟南芥, tpa1番茄)
普遍存在于显花植物的一类保守基因
Gβ(zgb1玉米, agb1拟南芥)
② 植物小G蛋白基因
(G protein-coupled receptor, GPCR)
a. GPCR的结构
b. GPCR的功能(GCR1)
转化反义GCR1基因后,拟南芥子叶减少,叶伸展减弱。并 且植株减弱了对6-BA的敏感性,而对其它激素反应正常
参与了细胞分裂素的信号转导过程
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③ 离子通道型谷氨酸受体
(ionotropic Glutamate receptor, iGluR)
G蛋白活化剂 G蛋白抑制剂
CTX、 GTPγS PTX、 GDPβS
cab(叶绿素a,b结合蛋白基因) chs(查耳酮合成酶) fnr(铁氧还蛋白)
G蛋白参与了光敏色素调控的某些过程
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② 离子通道
蚕豆保卫细胞 GTPγS、CTX和PTX
GDPβS
K+内流
K+内流可能受G蛋白负调控的
蚕豆叶肉细胞 GTPγS和CTX
受 体
G G
G
GTP 10~15s
腺苷酸 环化酶
提供一个重要的调节步骤
G蛋白-GTP / GDP,开通/关闭信号通路
G蛋白自身共价修饰和浓度变化,影响受体与酶间耦合有效性
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※ 第二信使cAMP
(环核苷酸)
cAMP是在腺苷酸环化酶催化下, 由ATP脱去一个焦磷酸形成
微量cAMP在短时间内迅速增加数 倍以至数十倍,从而形成胞内信号
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② 影响胞质自由钙离子水平的细胞内因素
许多第二信使调节胞内钙离子水平:
IP3; cADPR(环腺苷二磷酸核糖);
环核苷酸(cAMP和cGMP);
pH梯度;
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③ Ca2+流入细胞质的调控机制
植物中三种Ca2+通道:
电压门控通道;
配体控制的通道;
张力控制的通道;
拟南芥中克隆到第一个植物小G蛋白基因
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③ G蛋白偶联受体
GPCR是受体家族中一个巨大的成员 GPCR结构特征:
N
C
④ G蛋白下游效应器
离子通道(K+,Ca2+) 、各种效应酶(磷脂酶C,D)
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3. G蛋白在植物细胞信号转导中的作用
① 光信号转导
Red
失活
植物蛋白提取物 的GTP结合活性
活化
Red → Far Red
参与了植物的光信号转导过程
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二.植物细胞G蛋白与跨膜信号转导
1. G蛋白概述(GTP
binding proteins)
G蛋白(鸟苷酸调节蛋白): 所有能与GTP结合的蛋白 质 细胞传递中两类:
与膜受体耦合的异三聚体G蛋白
(heterotrimeric GTP binding proteins)
I.植物信号转导
1
遗传信息
环境信息
新陈代谢 生长发育
2
“信号转导”的研究对象
细胞感受、转导环境刺激及调节代谢生理反应和基因表 达的分子途径
生物信息流
外界环境刺激因子/胞间通讯信号分子 细胞表面或胞内受体
胞内第二信使
信号途径组分级联传递
细胞生理反应和诱导基因表达
3
发展历史
20世纪60年代,提出环核苷酸(cAMP)为第二 信使学说(胞间到胞内)
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三.植物细胞内钙信号转导途径
1.植物细胞钙离子动态及其调控机制
① 细胞内Ca2+分布
在质膜、液泡膜、内质网膜上都存在着跨膜的钙离
子电化学梯度;
细胞质和细胞核内游离钙离子也呈现不均匀分布; 细胞质膜的钙离子梯度最为明显; 液泡是植物细胞内储量最大的钙离子库
※ 钙离子梯度是钙信号产生的基础
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钙指纹(Ca2+signature)
细胞能对某一刺激产生独特的Ca2+时空特异性 (spatio-temporal characteristics)变化方 式
a. Ca2+峰 足够数量的基本单位的钙信号 b. 钙振荡 重复性、连续性不同形式的钙峰 c. 钙波 钙离子在细胞内某一个位点开始升高, 1 并从该位点向周围扩散
独立激活效应酶
c. G蛋白对效应蛋白的多种调节模型
不同效应蛋白,比如腺 苷酸环化酶、磷脂酶C等 (用E1,E2,E3代表)
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d. G蛋白跨膜信号转换的终止
加速α 亚基上GTP的水解
效应器
刺激GTP酶活性
G蛋白调节子 (负调节)
(regulators of G-protein signaling, RGS)
信号分子应快速产生而且快速灭活
信号传递途径的级联放大作用
信号传递途径是一个网络系统
5
6
一.植物细胞膜表面受体
1. 基本概念
① 受体与配体
受体是细胞表面或亚细胞组分中的一种生物 大分子物质,可以识别并特异地与有生物活 性的化学信号物质(配体)结合,从而激活 或启动一系列生物化学反应,最后导致该信 号物质特定的生物效应
(偶连于Rs)
识别部
转换部
抑制型G蛋白(Gi)
(偶连于Ri)
腺苷酸环化酶(AC)
cAMP(第二信使)
效应部
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a. Gαs的调节作用模型
信号传递者:Gα 关键步骤:
Gα 上结合GTP或GDP,循 环激活-灭活环化酶的过程
关键酶:GTP酶
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b. Gβ γ 的调节作用
铆钉位置 抑制Gα上的GTP酶活性
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② 异三聚体G蛋白的种类
Gs:细胞表面受体与Gs(stimulating adenylate cyclase g
protein,Gs)偶联,激活腺苷酸环化酶(AC),产生cAMP第二信 使;激活Ca2+通道、抑制Na+通道
Gi:细胞表面受体同Gi(inhibitory adenylate cyclase g
K+外流
不同组织细胞,G蛋白调控K+通道具有普遍性
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③ 植物激素信号转导
IAA 促进 水稻胚芽鞘膜组分与 GTPγS的结合活性和GTPase活性
GTPγS和CTX处理后,乙烯 促进 花瓣质膜组分对 GTPγS 的结合活性 GA诱导的黄花小麦原生质体的膨大 GDPβS GA诱导的大麦糊粉层α淀粉酶基因表达 G蛋白活化剂
1
RLK5和KAPP
(蛋白磷酸酶)
RLK5自磷酸化的位点: 丝氨酸和苏氨酸
N
15
(顶端分生组织第一、二层细胞)
2
CLV途径
(第三层细胞)
拟南芥突变体: 顶端分生组织数量增加而导致其变大, 花数量增加,额外产生花器官
CLV1:编码一个RLK,其胞外结构域含有
21个LRR结构,胞内具有丝氨酸、苏氨 酸蛋白激酶结构域
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