种子生活力测定原理及的方法49页PPT
种子生活力测定原理及方法PPT课件
2012/03/10
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• 2、AOSA活力测定方法（《活力测定手册》， • 广泛应用的方法，将种子活力测定分为3种类型： • 逆境测定（加速老化试验、低温试验、冷发芽试验）； • 幼苗生长和评定试验（幼苗活力分级、幼苗生长速率测定）； • 生化测定（四唑法、电导率法）。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标，三
者有密切的关系，却有完全不同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米：65232、齐319作母本的较高：DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响，测定前
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗
快速， • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率，但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中， • 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N：正常幼苗总数。
种子活力
公式
•0.5%TTC显色实验 活种子百分率（%）=（染成红色的种子粒数/ 实验种子的总粒数）*100 •1%BTB染色 种子活力（%）=（出现黄色晕圈的种子粒数/ 总种子数）*100 •5%红墨水显色 活种子的百分率为不着色或着色很浅的种子 粒数占实验种子的总粒数的百分数
测定结果
谢谢观赏
种子活力的概念与测定
目录
• • • • • • 种子活力的概念 种子活力的意义 种子活力的检测 检测原理 仪器与试剂 检测步骤
概念
种子活力是种子发芽和出苗率、幼苗生长 的潜势、植株抗逆能力和生产潜力的总和
概念
幼苗的生长速度和整 齐度 在不良条件的出苗能 力 贮藏后的表现（特别 是发芽表现）
概念
种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种 胚所具有的生命力，通常是指一批种子中具 有生命力（即活的）种子数占种子总数的百 分率。 种子发芽力是指种子在适宜条件下（实验 室可控制的条件下）发芽并长成正常植株的 能力，通常用发芽势和发芽率表示。关系种子ຫໍສະໝຸດ 活力种子发芽力种子活力
意义
意义：高活力种子具有明显优越性。种子 是重要的农业生产的基本生资料，种子活力 是种子重要的品质，高活力种子具有明显的 生长优势和生产潜力。
测定方法
• TTC染色 • BTB染色 • 红墨水染色
测定
原理
1、活种子的胚在呼吸作用过程中进行氧化还原反应， 而死种子则无此反应。当TTC渗入活种子胚细胞内作 为氢受体而被脱氢辅酶上的氢还原时，无色的TTC转 变为红色的三苯基甲（TTF）。 2.、活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。 CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使 得种子周围环境的酸度增加。BTB法通过测定酸度的 变化来判断种子活性。BTB变色范围为PH6.0—7.6,酸 性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为 PH7.1）。色泽差异显著，易于观察。 3、红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选 择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则 丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
测定种子生活力的方法
实验 17 种子生活力的快速测定种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。
测定种子生活力常采用发芽实验，即在适宜条件下，让种子吸水萌发，在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。
但是常规方法（直接发芽）测定种子生活力所需时间较长，特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定发芽率，遇到休眠种子也无法知道。
而采用以下的化学方法，则能在较短时间内获得结果。
Ⅰ氯化三苯基四氮唑法（ TTC 法）一、原理凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性三苯基甲（ TTF ），而且种子的生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深。
死亡的种子由于没有呼吸作用，因而不会将 TTC 还原为红色。
种胚生活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被染色。
因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的深浅程度来判定种子的生活力。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料玉米、小麦等种子。
（二）试剂0.5% TTC 溶液：称取 0.5 gTTC 放在烧杯中，加入少许 95% 乙醇使其溶解，然后用蒸馏水稀释至 100 mL 。
溶液避光保存，若变红色，即不能再用。
（三）仪器设备恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子，天平。
三、实验步骤1. 浸种将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种（大麦、小麦 6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色取吸胀的种子 200 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于 2 只培养皿中，每皿 100 个半粒，加入适量的 0.5% TTC 溶液，以覆盖种子为度。
然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。
观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。
将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。
种子生活力的快速测定
4 方法步骤
4.1 浸种。将待测种子在 30～35 ℃温水中浸泡 ( 大麦、小 麦、籼谷 6 ～8h , 玉米 5h左右 , 梗谷 2h), 以增强种胚的呼 吸强度 , 使显色迅速。 4.2 显色。取吸胀的种子 50 粒 , 用刀片沿种胚中央纵切为两
半 , 其中一半放入培养皿中加适量红墨水溶液，处理10min
胚部不染色。而死的种胚细胞原生质膜丧生了选择用 的能力， 于是染料便能进入死细胞而使胚着色。故可
根据种胚是否染色来判断种子的生活力。
3 仪器设备、材料和试剂
• 3.1 仪器 培养皿2套；镊子1把；单面刀片1片；垫板(切
种子用)1块；烧杯1个；棕色试剂瓶；解剖针1把；搪瓷
盘1个；PH试纸。 • 3.2 试剂 • 取市售红墨水稀释 20 倍（1份红墨水加 19 份自来 水 ） 作为染色剂。 • 3.3 材料：玉米
。倒去红墨水溶液, 用水冲洗多次 , 至冲洗液无色为止 。观 察结果 。
5 实验结果
染色种子数 红墨水处理 未染色种子数 生活力
6 生理学实验
（多媒体课件）
田国政
湖北民族学院生物科学与技术学院
湖北省生物实验教学示范中心
实验2-2 种子生活力的快速测定
实验类型：基础验证型 实验学时：2学时
1 实验目的
熟悉红墨水法测定种子活力的原理和
方法及其计算。
2 实验原理
凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质能力 ,
某些染料如红墨水中的酸性大红 G 不能进入细胞内 ,
第五章___种子生活力与活力测定
色情况。
20 ml乳酸＋20 ml苯酚＋40 ml甘油＋20 ml蒸馏水
注意
该药液有毒性，最好戴塑胶薄膜手套配 制，并在通风橱里操作。在使用时谨防 触及皮肤或衣服等。
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（4） H202 ：加快酶活化和吸胀。一般用0.3%H202溶液 （5）杀菌剂和抗生素：延缓衰弱种子的劣变进程。
第一节 种子生活力测定原理及方法
2)种子预措
目的：采用适当的方法使胚的主要构造和(或)活的营
养组织暴露出来。
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第一节 种子生活力测定原理及方法
方法：
刺穿：对经过预湿的种子或硬实种子，可利用解剖针或解
剖刀，刺穿种子的非主要部位，适用于小粒（牧草等）种子。
加速四唑还原成甲臜的速度；
或在两端横切，打开胚腔，并 切去小部分胚乳(配子体组织) 针叶树种子沿胚旁 边纵切
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（3）四唑染色
目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的
健壮、衰弱和死亡部分的差异正确地显现出来。 染色程序： 将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或 烧杯中。 加入适宜浓度的四唑溶液，以淹没种子为度，移置 到一定温度的（黑暗或弱光）恒温箱内进行染色反应。
ISTA Working Sheets on Tetrazolium Testing, Volume I, 1st Edition, 2003 Volume I - Agricultural, Vegetable and Horticultural Species By N. Leist and S. Krämer Illustrated by J. Pfäfflin
种子生活力测定
料垫板（切种子用）、放大镜、标签纸等。
项目五. 实验步骤
任务1 浸泡：将种子用温水（约30--35℃）浸泡5h左右，使种 子充分吸胀，便于染色（一般用先泡好的种子）。 任务2 试样数取与切取：随机数取4份，每份50粒种子。沿种 胚中线纵向切成两半，取其中的一半（一定要带胚并且要 完整的暴露在切3 样品染色：向上述 4 个培养皿中加入 5%的红墨水溶液，将切好的种子浸没，室 温下浸10min染色。
任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少 2 次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗， 不要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情 况（可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活 力的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生 活力的种子。 有 生 活 力 的 种 子
无生活力的种子
任务5 计算：
种子生活力（ % ） = （有生活力的种子数／检测种子数） ×100%（保留整数）
先计算每份实验的种子生活力。再计算其平均生活力。
项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称 品种名称 重复 检验粒数 种子 生活 力测 定 有生活力种子数 种子生活力 平均种子生活力
填表日期： 年 月 日
种子生活力测定的记载 表
产地 送检样品重（g）
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中；
3）染色时间不足或太长，否则不易区分；
4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
模块三
快速测定种子生活力
红墨水染色法
第五章 种子生活力与活力测定
Volume II, 1st Edition, 2003 Volume II - Tree and Shrub Species By N. Leist and S. Krämer Illustrated by J. Pfäfflin
Gansu Agricultural Universiry
第一节 种子生活力测定原理及方法
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（2）磷酸缓冲液常用来配制四唑染色液（Ph6.5-7.5） (1)ISTA法： 母液I：9.078g KH2PO4溶解于1000ml蒸馏水；
母液Ⅱ： 9.472gNa2HP04 或11.876g Na2HPO4· 2O溶解于 2H
或在两端横切，打开胚腔，并 切去小部分胚乳(配子体组织) 针叶树种子沿胚旁 边纵切
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（3）四唑染色
目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的
健壮、衰弱和死亡部分的差异正确地显现出来。 染色程序： 将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或 烧杯中。 加入适宜浓度的四唑溶液，以淹没种子为度，移置 到一定温度的（黑暗或弱光）恒温箱内进行染色反应。
种子生活力测定PPT课件
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任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗，不 要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情况 （可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活力 的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生活 力的种子。
有
无生活力的种子
生活Leabharlann 力的种子
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任务5 计算： 种子生活力（%）=（有生活力的种子数／检测种子数）
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
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1
种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。
.
2
项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
.
3
项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不 染色。
×100%（保留整数） 先计算每份实验的种子生活力。再计算其平均生活力。
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项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载表
产地 送检样品重（g）
品种名称
重复
Ⅰ
Ⅱ
检验粒数
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力
Ⅲ
Ⅳ
平均种子生活力
. 填表日期：
年月日
11
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 3）染色时间不足或太长，否则不易区分； 4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
(精品)种子生活力测定的原理
(精品)种子生活力测定的原理种子生活力测定是种子品质检测的重要方法之一。
其原理是利用种子的代谢活动作为生活力的指标，通过测定种子的呼吸率、发芽率、抽胚率等参数来评价种子的生活力。
下面将详细介绍种子生活力测定的原理。
一、种子呼吸率的测定原理呼吸作为种子的代谢过程之一，可反映种子的生物化学活性。
种子呼吸率是指在单位时间内种子的氧气消耗量或二氧化碳产生量，即呼吸强度。
呼吸率的大小直接关系到种子的能量来源和消耗。
种子在用氧进行呼吸作用时，主要的代谢物质是葡萄糖和氨基酸，产生 ATP 等能量分子和二氧化碳、水等代谢产物。
利用呼吸量，可以评价种子存活度和质量。
测定种子呼吸率的方法有很多种，如使用光谱法、显微镜熔点计、低温燃烧法、气体检测法等。
其中，气体检测法是应用最广泛的一种方法。
方法是将种子装在呼吸率仪中，通过不断加入氧气和排出二氧化碳实现测定。
常用的仪器有 WSTE-1、WTmod1-1 等。
种子发芽率是种子生活力测定中最基本的参数之一。
它是指单位时间内种子的发芽数，反映种子生长发育的潜力和种子质量的优劣。
种子发芽过程主要涉及种子萌发、根和胚芽的形成和生长等，需要有充足的水分、适温、氧气和光照等条件。
种子发芽率受多种因素影响，如种子保存条件、处理方式、种子来源、品种特性等。
测定种子发芽率，常用的方法有常规温室法、纸巾培养法、挂网法等。
其中，常规温室法是最常用的一种方法。
其原理是将一定数量的种子放置在经过灭菌处理的仿土或营养物质充足的培养土壤中，在一定的温度和湿度条件下观察种子发芽情况，测定发芽率。
一般情况下，种子发芽率可以在 7-14 天内达到稳定。
种子抽胚率是指在不同水分和温度条件下，种子实现一定程度的萌发至抽胚的百分比。
它是种子品质的重要指标之一，同样受到多种因素影响，如种类、存储条件、处理方式等。
抽胚率的测定，常用的方法是室内拟真鉴别法和高温处理法。
室内拟真鉴别法是将种子放置在一定温度和湿度条件下，观察其抽胚情况；高温处理法是将种子暴露在高温环境中，观察其能否抽胚。
植物生理学实验6种子生活力的测定ppt课件
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
TTC还原反应如下：
氯化三苯基四氮唑
三苯甲腙
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
有生活力种子 占供试粒数的%
TTC
30
红墨水
30
BTB
30
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
注意事项
? 沿种胚中央准确切开，同粒 TTC/红墨水法各一半 ? TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
染料染色法 TTC法
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
?种子生活力（ seed viability ）：指种子能够萌发 的潜在能力或种胚具有的生命力。
?种子活力（ seed vigor）：
资金是运 动的价 值，资 金的价 值是随 时间变 化而变 化的， 是时间 的函数 ，随时 间的推 移而增 值，其 增值的 这部分 资金就 是原有 资金的 时间价 值
思考题
三种方法测定种子生活力的理论依据有何不同 ?
种子生活力测定的原理PPT课件
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种 子 检 验 结 果 报 告 单
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
三、种子生活力的其他测定方法
• 甲烯兰法 • 溴麝香草酚兰法（BTB法） • 红墨水染色法 • 软Ｘ射线造影技术
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等
e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子
f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（2）染色前的样品准备
g) 切去种子基端：茜草科等植物种子
h) 斜切种子：菊科、十字花科和蔷薇科等
i) 横切胚乳：黑麦草、羊茅等植物种子
• 大豆：凡是整个种子染成明亮红色，或仅胚根尖端
1/3不染色，或子叶表面有小范围。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（6）计算和结果表示
生活力测定重复间的最大容许差距
计算各重复有生活力种子百分率，重复间误差不得 超过最大允许误差
6、测定程序
（1）预处理
农作物种子四唑染色技术规定
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种： （为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及 缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
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第五章种子生活力和活力测定
第五章种子生活力和活力测定第五章种子生活力与活力测定本章讲2节§1、种子生活力测定原理及方法§2、种子活力测定原理及方法第一节种子生活力测定的原理与方法在种子贸易中，时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果种子处于休眠状态难以通过发芽测定得到结果，种子生活力测定可以满足这一要求。
一、种子生活力概念：种子生活力(seed viability)指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力；种子生活力和发芽具有不同的含义：一些休眠种子在发芽试验中不能发芽，但它是有生活力的，破除休眠后，能长成正常幼苗。
而生活力反映的是种子发芽率和休眠种子百分率的总和。
所以，种子生活力测定，反映的是种子批的最大发芽潜力。
二、种子生活力测定的意义1、测定休眠种子的生活力新收获的或在低温贮藏处于休眠状态的种子，正常发芽条件下，其发芽力很低，这种情况下，仅用发芽试验测定其发芽率，就不可能测出种子的最高发芽率。
必须进行生活力测定，了解种子的发芽潜力，合理利用种子。
（怎样利用？）播种之前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理后播种。
种子检验时，发芽试验末期有新鲜不发芽的种子或硬实种子，就应接着进行生活力测定；或破除休眠后做发芽试验。
2、快速预测种子的发芽力:休眠种子可借助于各种预处理打破休眠，进行发芽试验，但时间较长；而种子贸易中，因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需的时间较长。
如小麦8d，水稻14d，菠菜21d。
而多数林木种子则需要更长的时间（如月季15～25℃发芽，70d 计算发芽率）。
这时，可用生物化学法测定种子生活力作为参考；而林木种子可用生活力来代替发芽力。
种子生活力测定方法有四唑染色法、靛蓝染色法、红墨水染色法、软X射线造影法等。
本节将重点介绍四唑染色法，并简要介绍其他方法。
三、四唑测定法（GB）(一)四唑测定法概述1、发展简史四唑测定法于1942年由德国kon(莱康)教授发明，二战期间传人美国。
W3105种子生活力的测定-2-微课件(精)
定重复间的最大容许差距
生活力测定重复间的最大容许差距
生活力测定重复间的最大容许差距
1
2 3 4 5 6
试验样品的数取
种子的预措预湿 染色前的准备 染色
观察鉴定
结果表示与报告
— *—
1
试验样品的数取
— *—
样品数取
每次至少测定200粒种子，从经净度分析后并充分混合
的净种子中，随机数取每重复100粒或少于100粒的若干副
重复。如是测定发芽末期休眠种子的生活力，则单用试验 末期的休眠种子。
种子的预措预湿
— *—
不同种类种子的具体预湿温度和时间
种子的预措预湿
不同种类种子的具体预湿温度和时间
种子的预措预湿
不同种类种子的具体预湿温度和时间
种子的预措预湿
不同种类种子的具体预湿温度和时间
种子的预措预湿
不同种类种子的具体预湿温度和时间
种子的预措预湿
3
染色前的准备
— *—
为了使胚的主要构造和活的营养组织暴露出来，便于 四唑溶液快速而充分地渗入和观察鉴定，经软化的种子应
结果表示不报告结果表示不报告计算各个重复中有生活力的种子数重复间最大容许差距丌得超过下表的觃定平均百分率计算到最近似的整生活力测定重复间的最大容许差距生活力测定重复间的最大容许差距生活力测定重复间的最大容许差距
生产环境与农业投入品检测
种子生活力的测定
主讲教师：丽水职业技术学院 陈兵红
目录页
CONTENTS PAGE
染色准备
进行样品准备。准备方法因种子构造和胚的位置不同而异 （详见上表）。 如禾谷类种子沿胚纵切，伞形科种子近胚纵切，葱属 沿种子扁平面纵切等。西瓜等种子预湿后表面有粘液，可