微生物的显微镜直接计数法
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目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍 数而改变,也会因使用不同的显微镜而产生误差, 因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。
目镜测微尺的每格长度(μm)=镜台测微尺×10/目镜测微尺
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酵母菌显微直接计数
方法:活菌计数法——平板菌落计数法;总菌计数 法——血球计数板或霍瑟(Peroff Hausser)细菌计 数板(二者原理和部件相同,只是厚薄不同而已)。
细胞数/ml=100小格内细胞总数÷100×400×10×1000×稀释倍数
细胞数/ml=80小格内细胞总数÷80×400×10×1000×稀释倍数
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1. 取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加 盖血盖片。
2. 取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴 一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有 气泡。
菌号
1 2 3 4 5 均值
酵母的直径大小测定结果
目镜测微尺格数
实际直径/µm
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μm。
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将显微计数结果记录于下表中。T表示五个 中方格中的总菌数;D表示菌液稀释倍数。
各中格中菌数
T D 二室 个
平均 /ml
12345
值
第一 室
第二 室
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问题与讨论
为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来 校正?
在显微镜下直接测定微生物数量有什么 优缺点?
实验三
微生物的显微镜直 接计数法和大小的
测定
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1
实验目的
学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显 微镜下测定微生物大小的方法。
学习使用血球记数板测定微生物数量的 方法。
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2
实验材料
显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、 血球记数板、酵母菌悬液、盖玻片、 无菌滴管、吸水纸、擦镜纸。
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3
实验步骤
测定酵母菌细胞的大小 测定的工具:目镜测微尺 镜台测微尺
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9
本次实验课结束
请确保血球计数板清洗干净! 请值日生同学留下值日 下周再见!
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Baidu Nhomakorabea10
3. 用4×镜观察并将计数室移至视野中央。
4. 在4×镜下计数:计数4个(或5个)中格的平 均值,然后求得每个中格的平均值。乘上16 (或25)就得出计数区总菌数,最后再换算 到每mL菌液中的含菌数。
5. 注意事项:计上不计下,计左不计右。出芽 计一半
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6
实验结果
目镜测微尺标定结果:
×目镜下 倍物镜目镜测微尺每格长度是