利福平的配置资料

曾经一度为配制利福平rif十分困扰。

在本站检索，发现大家的方法很多，如NaOH、氯仿、甲醛、二甲基甲酰胺，但是没人提供过详细的配制过程，于是我只有自己摸索。

shaomin7899 于2004-09-11 19:37提过，“我从经科买的250毫克，250元，用NaOH配的，5M加1毫升就够了，加水搅拌就行，我也不知道哪便宜，可能便宜也就不一定好用”，于是我照办，用5M NaOH来溶125mg（rif来自鼎国），加热搅拌什么招都试了，无法溶解。氯仿甲醛没敢尝试。

在其他网站上看到用二甲基亚砜（二甲基甲酰胺）溶解的方法，大致是说先用二甲基亚砜来溶解，再加入水定容，于是我尝试，将125mg rif（又是125mg！奉劝大家千万别这样，浪费啊~）装入三角瓶，开始一滴一滴的加入DMF。这是一个由希望到绝望的过程，到后来我干脆往里倒了，眼看要加到目的体积了，我终于住手了，没办法，只好放到磁力搅拌器上让它自生自灭。若干小时以后，貌似终于溶了，也舒了口气。最后也没敢加水定容，直接用滤器灭菌。噩梦还在后面。我们用的滤器，怎么说，是那种很原始的，起直接作用的是一小片滤纸。用注射器抽取了红得发暗的液体，插上滤器....不说过程了，有点离题，总之最后的结果是——针管无法推动，千辛万苦滤得的rif溶液比原溶液淡得多，捏开滤器内部一片狼藉，rif的颗粒堵住了各个小孔——没有溶开。这种溶液，我还是勉强用了一阵（但愿别被老板看到）。

我终于学聪明了，50mg rif装入一个1.5ml的炮弹管中，另备一个同样的炮弹管，取50mg rif 中的很少的量弹入其中，然后加入了1ml的二甲基甲酰胺，溶了，然后继续少量的加入rif，用枪头反复的吹打溶解，都溶了。于是，我又陆续加入了50mg，溶解得困难，十分粘稠，我继续加入了50ml 的二甲基甲酰胺，情况有所好转。终于到最后我用1.5ml的二甲基甲酰胺溶解了100mg的rif。

该用水定容了。初恋的雪在下于2005-05-06 18:12提过“.....二甲基甲酰胺.....与水和通常有机溶剂混溶”。于是，我吸取了约30ul装入炮弹管里（看，我终于学聪明了！）加入一滴水，原本暗红色的溶液马上出现了沉淀，并且颜色变浅，无法溶解！

于是，我就干脆不加入水，用二甲基甲酰胺将溶液最终定容为50mg/ml。

过滤灭菌的时候十分顺利，可以说是毫无阻隔，因为二甲基甲酰胺将滤纸顺时腐蚀了，打开滤器，里面的滤纸消失的很干净。为此，我抱着怀疑的精神共灭了3次，前两次我都以为是忘记加滤纸了，还因此对手下的小妹发了火，羞愧啊！

总结：1、二甲基甲酰胺

2、逐渐溶解

3、工作浓度可设定在50mg/ml（我们所需终浓度为25mg/L&50mg/L，依菌种而定）

4、二甲基甲酰胺腐蚀性虽强，但终浓度很低，我已实验，菌种生长良好，但还应尽量将rif的工作浓度设定高些，尽量降低二甲基甲酰胺对菌种的伤害。100mg/ml？也许大家可以试一下，到时交流：）

除了用NaOH溶解过夜的方法外，你还可以考虑用甲醇来配制。我们一直都用甲醇配的呀，挺好的！为此我们实验室还有一个笑话，当我们说谁装青春的时候，就会问一句：请问知道Rif是用什么配的吗？答曰：“假纯”（甲醇也）。用/2DMSO（二甲亚砜）溶解后再加/2甲醇，不用灭菌了直接分装就行。十分感谢wjatree、Atbeijing &wency

受益匪浅！我用甲醇溶的，与搂主有相同的经历，浪费了不少，想起来就好笑，我本人感觉是利福平的原因，不同公司的可能有差异，我曾经问过一位前辈，她说很好溶。我想问Atbeijing 你们用的是利福平，还是利福霉素？大家好！我想问利福平和利福霉素还有利福霉素钠是同一种抗生素吗？那种更容易溶解？我用DMSO溶的利福平，没问题吧？配的是50mg/mL的我的农杆菌LBA4404加了利福平（50mg/mL in DMSO）摇不出来，另外，转

了kana抗性基因的EHA105加卡那长得很好，加了利福平就不长了，请问为什么啊，我用的YEP培养基，

15 g/liter Agar

5 g/liter NaCl

10 g/liter Yeast Extract

10 g/liter Peptone

pH7.0

是pH不对吗，还是利福平的问题？

谢谢LBA4404 不能加利福平，它和其它的农杆菌不一样，我是加链霉素，l浓度为100mg/l，而庆大25mg/L（可选）。用YEP和YEB都能长的很好。挑单菌落摇过夜，就能摇的很浓。搂主，你做百脉根吗？有空交流一下啊？你做什么方面的研究啊？DMSO万能溶剂，有机物我差不多都用它溶解。一点水都不要加，完全用DMSO。为啥要用甲醇溶？我用乙醇溶的，甲醇多毒阿！原来使用浓度20-50mg/ml阿，害得我加了150mg/ml张不出来。二甲基甲酰胺是DMF 二甲基亚砜是DMSO好像有不同,我们是用DMSO直接溶解,不用灭菌,DMSO本身有灭菌效果,利福平也是真核细胞抑制剂