活化部分凝血活酶时间(APTT)测定教案资料
C3510活化部分凝血活酶时间(APTT)磁珠法
活化部分凝血活酶时间（APTT）测定（分析仪器法）1实验原理：光电磁珠法测试杯两侧的有一组驱动线圈，它们产生恒定的交替电磁场，使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动。
凝血激活剂加入后，随着纤维蛋白的产生增多，血浆的粘稠度增加，小钢珠的运动振幅逐渐减弱，仪器根据另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化，当运动幅度衰减到50%时确定凝固终点。
2标本采集2.12.23.831小时，236.6.16.2 ,室温保存7.7.17.27.37.4 仪器技术参数:7.4.1 速度:最快检测速度350测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2 试剂位:28个,具冷藏功能。
7.4.3 样本位:80个,可自动连续添加。
7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。
8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)。
8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。
8.2 开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。
8.31.2.目345.8.4按8.38.5 按“8.68.6.1 用蘸有清洗液的纱布或棉签擦拭加样针和试剂的外表面。
8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯，检查清洗液是否充足。
8.6.3 检查预温及测量通道内是否有掉落的钢珠，如果有请清除。
8.6.4 仪器连续工作24小时后需要关机1次。
9．检验结果的判断与分析:9.1 仪器测定APTT的线性范围在5-300秒,测定完成后仪器显示APTT秒数值等参数。
若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据ˉˉˉ.ˉ不能计算参数＋＋＋.＋数值超出线性范围.9.2 仪器设定APTT参考范围在23-40秒,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:﹡出现错误信息< 数据低于可报告的低限> 数据高于可报告的高限10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
APTT操作规程一例(检验SOP)
APTT操作规程一例活化部分凝血活酶时间测定（APTT）一、项目名称：活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time, APTT）二、检验方法名称：凝结法三、方法学原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂。
加入试剂后，采用波长为660nm 的光照射样本。
凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。
从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method方法求得凝血时间。
四、方法学溯源：37℃条件下，以白陶土激活因子Ⅻ和Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板，在Ca²+参与下，观察贫血小板血浆凝固所需时间，即为活化部分凝血活酶时间，是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验。
五、仪器：（一）型号：Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪（二）分析和计算参数：1．处理量：约120个测试/小时2．所需样本量：50μl3．检验时间：在最长检验时间之内测出结果，典型最长检验时间：190秒4．重复性：CV≤2%六、试剂及配套品：（一）试剂：1. 肌动蛋白活化Cephaloplastin试剂（Dade® Actin® Activated Cephaloplastin Reagent）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 10×4ml（3）代码：B4218 G1 E0533 (0450) H/W（4）成分：脑磷脂（从干燥兔脑粉中提取）加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.0×10-4M的鞣酸溶液。
2. 氯化钙溶液（Calcium Chloride Solution）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 6×15ml（3）代码：ORHO 33（4）成分：0.025mol/L的氯化钙溶液3．佛罗那巴比妥缓冲液（Dade® Owren'S Veronal Buffer）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 10×10ml（3）代码：B4234 G25 E0533 （0461）W（4）成分：1）2.84×10­²M的巴比妥钠(sodium barbital)2）1.25×10­¹M的氯化钠(sodium chloride)3) PH 7.35±0.14. 清洗液（Cleaning）2%次氯酸钠溶液（自配）（二）配套品：1.标准血浆（Standard Human Plasma）(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）(2) 代码：No. ORKL2.校准质控血浆（Ci-Trol®）(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）(2) 代码：Level 1, B4244-10Level 2, B4244-20Level 3, B4244-303.质控血浆（Control Plasma）(1) 商标：太平洋（Pacific Hemostasis）(2) 代码及规格：Level 1 (Normal), 100595 10×1mlLevel 2 (Abnormal), 100596 10×1mlLevel 3 (Abnormal), 100597 10×1ml七、操作步骤：（一）开机：开机前，先打开连机的打印机。
活化部分凝血酶时间(APTT)测定
出凝血3.1活化部分凝血酶时间（APTT）测定（第四版）出凝血3.2 原理：在37℃条件下用激活剂（糅花酸）激活因子XII和XI，以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面，在因子IX的参与下，测定贫血小板血浆的凝固时间。
部分活化凝血酶时间测定（APTT）是内源性凝血系统的筛选实验。
标本处理：患者处于休息状态下，采空腹静脉血（急诊病人除外）。
采血者应技术熟练，“一针见血”，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进入标本。
最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。
采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生气泡；然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。
分离乏血小板血浆时，要在室温下3000rpm离心10分钟，室温下可存放4小时。
全部试验不能在4小时内完成，应将乏血小板血浆分装在0.5～1.0ml的小试管中快速冷冻，储存于-20℃冰箱中。
冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果会不准确。
冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化。
出凝血3.4 试剂：APTT试剂：试剂购于天津威士达公司。
德灵Actin试剂（试剂盒代号B4218-1）。
每瓶试剂内含磷脂（从兔脑中提取），1.0×104mol/L糅花酸，稳定剂共2ml。
0.025M氯化钙：实验室自制。
试剂从冰箱中取出，室温平衡15min后上机分析。
出凝血3.5 仪器：使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。
出凝血3.6 操作：按仪器操作步骤执行标准操作。
出凝血3.６.1开机：按下机器侧面的POWER 按钮。
开机后机器进行自检，当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。
出凝血3.６.2检查消耗品：1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。
（一次性最多可放1000 个杯子）2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把试剂准备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的量和有效期。
活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍
活化的部分凝血活酶时间(APTT)检测介绍用途液体试剂，提纯的大豆和兔脑磷脂，以及血浆激活物。
是一种活化的部分凝血活酶试剂，对狼疮样抑制剂的敏感性升高，用于测定活化部分凝血活酶时间和其它需要使用活化部分凝血活酶试剂的凝固方法。
概要和原理活化的部分凝血活酶时间(APTT)，是一种全球通用的筛查方法，主要用于内源性凝血途径异常的评价，也用来检测因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ或者纤维蛋白原等严重的功能障碍。
APTT还广泛用于普通肝素疗效的监测方法中，血液凝固时间延长与肝素的水平成正比。
在口服抗凝剂的患者中，血液循环中因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的水平受到抑制，导致APTT延长。
非特异性抑制剂，如狼疮样抗凝剂，能使APTT延长，但是，此类影响是可变的，而且通常认为与所采用的APTT试剂的性能有关。
总之，APTT是一种重要的临床筛查试验，广泛应用于诊断凝血障碍性疾病、出血和血栓性疾病的治疗监测。
方法原理孵育血浆、适当量的磷脂和表面激活剂能够激活内源凝血系统因子。
添加的钙离子能触发凝血过程，然后测定凝固时间。
标本采集及准备将9份新鲜病人血液和1份0.11或0.13mol/L的枸橼酸钠（3.2或3.8％）混合。
商品化真空采血管含有指定抗凝剂，按血凝研究注意事项使用。
对于特殊的研究，采集技术必须很好。
采集后，立即于室温下按1500转/分，至少离心15分钟离心血液标本。
保存于室温下密封试管中。
若立即进行检测，则血浆可以不分离。
否则，需将血浆与血细胞分离。
分离血浆时，需使用塑料移液器，将其移至塑料试管中。
请勿冰冻。
非肝素化血浆应在采血后4小时内检测。
含有普通肝素的血浆应在采血后1小时内离心，室温下保存，4小时内检测。
乏血小板血浆可在≤－20℃冷冻条件下保存2周。
冰冻血浆应在37℃快速融解，轻柔混匀，立即检测。
样本在37℃下不得超过5分钟。
关于样本准备与保存的详细信息请参考CLSI文件H21－A5。
操作方法每个实验室必须测定其自身测试系统的最佳加热－活化时间。
活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书
活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书1.实验原理：于37 C下在贫血小板血浆（PPP）中，加入激活剂，激活FXD和FX I，以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面，在Ca 离子的参与下，观察血浆凝固所需时间，即为待测血浆活化部分凝血活酶时间（APTT）。
2.标本采集：2.1早晨空腹采血（空腹12 小时左右），静脉采血。
2.23. 8％（w/v）枸椽酸钠0.2ml+ 静脉血1.8ml ，混匀。
3.标本存放：1小时内（3000r/min x 10min）分离血浆，室温放置不超过2小时，2〜8 C保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70 C不超过6个月），只能冻融1次，在37 C 迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
4.标本运输：低温条件下运输。
5.标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作该项目检测。
6.实验材料：北京世帝科学仪器公司活化部分凝血酶原时间测定试剂盒，主要成分由APTT试剂和氯化钙溶液组成，APTT 试剂的主要成分为鞣花酸和脑磷脂。
7.仪器设备：7.1仪器名称：M200全自动凝血因子分析仪。
7.2仪器厂家：北京世帝科学仪器有限责任公司。
7.3仪器型号：Coagulation analyzer M2007.4仪器技术参数：7.4.1试剂位：16 个，可放置不同规格大小的试剂瓶。
7.4.2样品位：60 个，可放置原试管。
7.5仪器校准程序：7.5.1校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。
7.5.2校准操作：设置标准曲线分析（由仪器提供商指定工程师执行）。
8.操作步骤：8.1开机前应先检查清洗液、废液、测试杯、试剂量是否足够。
8.2打开血凝仪电源开关，打开电脑双击图标，输入密码。
8.3试剂按照图形显示的位置摆放。
8.4联机完成后，预温1 0-1 5min 。
8.5点击“输入”选择“项目”再选择单孔或批量，完毕后点击“新增”后，再点击退出。
实验三活化部分凝血活酶时间测定(精)
活化部分凝血活酶时间测定
一、试管法
【目的】 掌握活化部分凝血活酶时间(APTT) 测 定的试管法。 【原理】 APPT是在体外满足内源性凝血全部条件 后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下，以白 陶土（激活剂）激活因子Ⅻ，以脑磷脂（部分凝 血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面，再加 入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。 测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。
【操作】 1．分离乏血小板血浆 同试管法。 2．平衡温度 同试管法。 3．温浴氯化钙溶液 同试管法。 4 ．测定正常人参比血浆的APTT。 5．测定待测血浆的APTT。 6．报告方式 同试管法。
【注意事项】 同试管法。
【操作】 1．分离乏血小板血浆 2．平衡温度 3．温．报告方式
【注意事项】 1．试剂质量对APTT测定结果影响很大，不同的部 分凝血活酶试剂,其质量也不同。一般选用对因子 Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ在血浆浓度为200～250U/L时灵敏的试 剂。激活剂因规格不一，其致活能力不同，因此 参比值有差异。如果正常人参比血浆APTT明显延 长，则提示APTT试剂质量不佳。 2．采血后应尽快检测，最迟不应超过2h。被检血 浆放置过久，凝固时间有缩短的倾向。 3 ．血浆加APTT试剂后的温浴时间不得少于3min 。 时间过短，APTT延长。 4．其它同血浆凝血酶原时间测定。
二、血凝仪法
【目的】 掌握活化部分凝血活酶时间的血凝仪测 定法。 【原理】 APPT 是在体外满足内源性凝血全部条 件后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下，以 白陶土（激活剂）激活因子Ⅻ，以脑磷脂（部分 凝血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面，再 加入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。 测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。
活化部分凝血活酶时间(APTT)测定标准操作规程
活化部分凝血活酶时间（APTT）测定标准操作规程1.检验原理：待测血浆加入糅花酸激活剂及脑磷脂（部分凝血活酶），37℃温育一定时间，激活内源凝血因子刈，XI等，在Ca?+参与下，最终使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白。
在光学比浊法仪器上测定加入CaCl2凝固所需的时间,即为待测血浆的APn.2.试剂主要组成成分RI：APTT试剂:糅花酸、兔脑磷脂；R2:CacI2溶液：25mmol∕L氯化钙。
3.样本要求3.1.采集静脉血，立即按9份血：1份抗凝剂比例与0.109mol∕L枸檬酸钠充分混合均匀。
室温300OrPm离心12分钟，上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。
3.2血浆室温放置，宜在2小时内检测。
3.3血浆若不能及时检测，用塑料吸管分离，-20℃可保存2周。
测定前37℃快速融化，轻微混匀后立即检测。
4.检验方法：全自动血凝分析仪测定（详见雷杜RACT830标准操作规程）5.参考区间：24—36秒6.检验结果的解释6.1报告APTT秒数（三）和/或比值，检验结果与各实验室的参考值范围相关。
7.2口服肝素、香豆素类药物会使APTT延长。
8.检验方法的局限性8.1凝血过程包括从因子激活到纤维蛋白形成的一系列反应。
因此，检验结果可能受到治疗药物（干扰物）、检验操作、检验系统等因素的影响，应考虑这些因素。
8.2试剂被污染，或者样品杯、吸管等被凝血剂/抗凝剂污染，会导致凝血异常，需严格控制。
9.产品性能指标重复性：用质控血浆重复测试所得结果的变异系数（CV）应不超过3.8%。
10临床意义APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验，也可作为内源性途径凝血因子的定量试验，可检测除Vil因子外的其他血浆凝血因子，特别是用于因子VIIIIXXII和前激肽释放酶的测定。
同时，APTT测定可用于肝素治疗监控。
APTT延长：见于凝血因子IIVVfflIXXIXII减低，纤维蛋白原缺乏症，纤溶活力增强，抗凝物质存在，是监控肝素治疗的重要指标。
活化部分凝血活酶时间APTT
活化部分凝血活酶时间（APTT）测定方法操作规程一.【产品名称】活化部分凝血活酶时间（APTT）测定试剂盒（鞣花酸）（凝固法）二.【预期用途】供医疗机构用于体外人血浆中活化部分凝血活酶时间测定,用于辅助诊断。
三.【临床意义】APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验，也可作为内源性途径凝血因子的定量试验，可检测除Ⅶ因子外的其他血浆凝血因子，特别是用于因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前激肽释放酶的测定。
同事，APTT测定可用于肝素治疗监控。
APTT延长：见于凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ减低，纤维蛋白原缺乏症，纤溶活力增强，抗凝物质存在（如血内肝素含量增加及口服抗凝剂），是监控肝素治疗的重要指标。
APTT缩短：见于高凝状态，血栓性疾病，如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合征等。
四.【检验原理】待测血浆加入部分凝血活酶溶液，在Ca艹参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆活化部分凝血活酶时间。
五.【主要组成成分】1.APTT（鞣花酸）试剂：10瓶（含脑磷脂、鞣花酸、稳定剂、防腐剂）2. 0.025mol/L CaCl2：1瓶（含氯化钙、防腐剂）3.说明书：1份注：不同批号试剂盒中0.025mol/L CaCl2可以互换。
六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃～+8℃保存可稳定至标签所示失效日期； 2.试剂开启后于+2℃～+8℃可保存4天。
试剂保存应防止冷冻。
七.【适用仪器】血凝分析仪。
八.【样本要求】1. 静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液（1份抗凝液+9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm（或2500g）离心15分钟，收集上层液（血浆，黄色）。
2.采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管。
不宜使用普通玻璃器，避免凝血因子活化。
活化部分凝血活酶时间测定
** 医院文件编号:
输血科参比实验室
版序:
活化部分凝血活酶时间测定(APTT )页码：第1页，共1页
［检测原理］
在37P下以白陶土激活因子和以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面，在Ca2 +参与下，观察乏血小板血浆凝固所需时间，是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验。
［试剂与仪器］
1,试剂：
(1),鞣化酸或2.40g/L白陶土--脑磷脂的混悬液。
( 2 ), 0.025mol/L氯化钙溶液。
2,仪器：
ACL90全自动血液凝固分析仪。
［质量控制品］
Hemosil血凝质控物。
［标本采集与处理］
用血凝试验专用1： 9枸橼酸钠抗凝真空采血管抽取静脉血，轻摇抗凝° 30r/min离心、10 min，获乏血小板血浆。
［操作步骤］
1，标本编号后，放在分析仪样品架上。
2，编入样品编号，须检项目及其它。
3，启动分自动分析仪进行检测。
［质量控制］
1，每天同步进行三种质控物检测，以控制室内检测质量，及时发现失控原因，并及时纠正。
2，参加室间质评工作，以使结果与全国水平一致。
3，每批试剂使用前必须应用标准品，质量控制品进行试剂评价。
4，为保证标本质量，统一使用一次性真空采血管采血。
［参考范围］
男性 31.5--43.5s,女性 32--43s。
待测者的测定值较正常对照值延长超过10s以上才有病理意义。
［临床意义］
用于手术前检查内源性途径凝血因子一VIII、IX、XI、XII；是监测肝素的首选指标，凝血因子治疗以及检测狼疮抗凝物的主要手段。
临床护理：活化部分凝血活酶时间(APTT)监测
临床护理：活化部分凝血活酶时间（APTT）
监测
（一）评估和观察要点。
1评估测量仪工作状态。
2.评估患者病情及穿刺部位皮肤的完整性。
3.观察患者出凝血状况及测量数值。
（二）操作要点。
1.采血O.2m1做标本。
2.加入适宜血液标本到APTT测量仪上。
3.记录测量数值。
（三）指导要点。
1.告知患者监测的目的、配合方法和测量结果。
2.指导患者用干棉签按压穿刺点约3~5min,不出血后方可松开。
（四）注意事项。
1.保持操作环境的清洁，避免局部环境受到血源污染。
2.尽量采空腹血，检测时避免气泡进入，动作轻柔避免溶血。
活化部分凝血活酶时间测定
活化部分凝血活酶时间（APTT）测定1. 实验原理将试剂加入抗凝血浆中，试剂中的微粒硅胶是血小板因子3的表面活性剂，与牛脑磷脂一同作用于内源凝血系统，当加入CaCl2后，开始凝集，产生纤维蛋白血凝块，通过660nm 光照射血浆，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定，然后通过标准曲线求出活化部分凝血活酶时间。
2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。
2.23.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml，混匀。
3. 标本存放：全血贮存在4～10oC不超过2小时，最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆，此血浆在室温22～24oC下可存放2小时，在2～4oC可存放4小时，在-20oC 可存放2周，长时间保存需在冰冻条件下，在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时，应将盛血浆的容器置37oC水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解冻后立即测试。
冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果不准确。
4. 标本运输：低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作该项目检测。
6. 实验材料：6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。
1）APTT测定试剂盒（代号P/N: 8468710）冻干脑磷脂 5瓶CaCl2 5瓶(25mmol/L)2）定标血浆Calibration Plasma（代号P/N: 20003700）3）正常质控血浆Normal control plasma（代号P/N: 20003110）4）低水平质控血浆Abnormal control plasma level I/Low（代号P/N: 20003210）5）高水平质控血浆Abnormal control plasma level II/High （代号P/N: 20003310）6）因子稀释液（代号P/N:9757600）6.2试剂准备用9mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶冻干脑磷脂，盖上盖子，轻摇至完全溶解，置15～25oC30分钟，用前摇匀，勿用力振摇。
医学检验·检查项目：活化部分凝血活酶时间(APTT)_课件模板
活化部分凝血活酶时间主要反映内源 性凝血是否正常。 活化部分凝血活酶时 间延长见于： a)血浆因子Ⅷ、因子Ⅸ和 因子XI水平减低：如血友病A、血友病B及 因子XI缺乏症； b)严重的凝血酶原（因 子Ⅱ）、因子Ⅴ、因子Ⅹ和纤维蛋白原缺 乏：肝脏疾病、阻塞性黄疽、新生儿出血 症。肠道灭菌综合征
医学检验·各论：活化部分凝血活酶时间（APTT） >>>
临床意义：
吸收不良综合征、口服抗凝剂及低（无） 纤维蛋白血症等； c)纤维蛋白溶解活力 增强：如继发性、原发性纤维蛋白溶解功 能亢进等； d)血液循环中有抗凝物质： 如抗凝因子Ⅷ或因子Ⅸ抗体等； e)系统 性红斑狼疮及一些免疫性疾病。 活化部 分凝血活酶时间缩短见于： a)于高凝状 态：如促凝物质进人
医学检验·各论：活化部分凝血活酶时间（APTT） >>>
相关疾病：
出血性休克和脑病综合征、肝素诱导性血 小板减少症、血友病甲、血友病乙、血小 板型假性血管性血友病、原发性纤维蛋白 溶解症、老年人急性非淋巴细胞白血病、 新生儿血小板减少性紫癜、新生儿呕血和 便血、小儿埃莱尔-当洛综合征、小儿血 管性血友病、血友病、心原性肝硬化、药 物性肝病、药物性肝硬化。
医学检验·各论 活化部分凝血活酶时间
（APTT） 内容课件模板
医学检验·各论：活化部分凝血活酶时间（APTT） >>>
别名： 活化部分凝血活酶时间。
医学检验·各论：活化部分凝血活酶时间（APTT） >>>
简介： 活化部分凝血活酶时间是内源性凝血
系统的一个较为敏感的筛选试验。
医学检验·各论：活化部分凝血活酶时间（APTT） >>>
正常值： 35~45s。
APTT
原理：
待测血浆加入部分凝血活酶溶液，在Ca2+参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆活化部分凝血活酶时间。
主要组成成分：
APTT（鞣花酸）试剂（脑磷脂、鞣花酸、稳定剂、防腐剂），0.025mol/LCaCl
2
储存条件及有效期：
未开启试剂于+2-+8℃保存可稳定至标签所示失效日期；试剂开启后于+2-+8℃可保存14天。
试剂保存应防止冷冻。
样本要求：
静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液（1份抗凝液+9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm（或2500g）离心15分钟，收集上层液（血浆，黄色）。
检测方法：
1、试剂使用前请振摇混匀。
2、取待测血浆0.1ml，加入37℃预温APTT试剂0.1ml，37℃孵育5min；
溶液0.1ml，记录凝固时间
3、加入37℃预温0.025mol/L CaCl
2
参考值：22-38秒
临床意义:
APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验，也可作为内源性途径凝血因子的定量试验，可检测除Ⅶ因子外的其他血浆凝血因子，特别是用于因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前激肽释放酶的测定。
同时，APTT测定可用于甘肝素治疗监控。
APTT延长：见于凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ减低，纤维蛋白原缺乏症，纤溶活力增强，抗凝物质存在（如血内肝素含量增加及口服抗凝剂），是监控肝素治疗的重要指标。
APTT缩短：见于高凝状态，血栓性疾病，如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合症等。
活化部分凝血活酶时间测定
活化部分凝血活酶时间测定活化部分凝血活酶时间（activate partial thromboplastin time，APTT）测定是内源性凝血系统常用的筛选试验之一，它可反映凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ及Ⅴ、Ⅹ的活性。
（一）检验原理凝固法：在37℃条件下，以白陶土、硅化土或鞣花酸为激活剂，活化凝血因子Ⅻ和Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面，在钙离子的参与下，观察乏血小板血浆凝固所需的时间。
（二）检验方法学1.试剂（1）4%白陶土-脑磷脂混悬液。
（2）0.025mol/L CaCl2。
2.标本采集受检全血与0.1mol/L草酸钠溶液或0.109mol/L枸橼酸钠溶液作1∶9抗凝，充分混匀，1500r/ min离心10分钟，以此制备乏血小板血浆。
3.标本检验取玻璃小试管1支，加入受检血浆、白陶土-脑磷脂混悬液各0.1ml，充分混匀，置37℃水浴3分钟，其间轻轻摇动数次。
加入0.025mol/L氯化钙溶液0.1ml，立即启动秒表，将受检标本在37℃水浴中不断轻轻摇动，约30秒时取出，记录受检标本出现纤维蛋白丝的时间，重复上述检测，取平均值。
（三）方法学评价离心时间及特殊的标本类型均会对检测构成影响（详见凝血酶原时间测定）。
（四）质量保证1.正常对照为保证白陶土（对凝血因子缺乏较为敏感）、硅化土（对狼疮抗凝物较为敏感）或鞣化酸（对肝素较为敏感）的质量，每天应以正常人混合血浆做正常对照。
2.检验温度水浴温度应恒定在36～38℃，受检血浆温浴时间不得短于3分钟。
3.检验周期应在采血后4小时内完成检测，否则可使结果假性延长。
4.调整抗凝剂比例同凝血酶原时间测定。
（五）参考范围男性：（37±3.3）秒；女性：（37.5±2.8）秒。
受检者的测定值较正常对照延长超过10秒才有病理意义。
（六）临床意义1.APTT延长主要见于凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ、激肽释放酶原（PK）和高分子量激肽原（HMWK）缺乏症，也可见于凝血因子Ⅴ、Ⅹ、Ⅱ和纤维蛋白原缺乏症及血液循环中存在抗凝物质等。
活化部分凝血活酶时间(APTT)分析
感谢
内源性凝血过程，由 因子Ⅻ活化而启动。 当血管受损，内膜下 胶原纤维暴露时，可 激活Ⅻ为Ⅻa，进而 激活Ⅺ为Ⅺa。Ⅺa在 Ca2+存在时激活Ⅸa， Ⅸa再与激活的Ⅷa、 PF3、Ca2+形成复合 物进一步激活X。
临床意义；延长
一．因子Ⅷ Ⅸ 和Ⅺ血浆水平减低,如血友病甲乙.因子 Ⅷ减少还见于部分血管性假血友病患者.
活化部分凝血活酶时 间(APTT)结果分析
基本介绍
APTT是内源性凝血系统的一个较为敏感的筛选试验，主要反映内源性 凝血是否正常。是用来证实先天性或获得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ的缺陷 或是否存在它们相应的抑制物，同时，APTT也可用来凝血因子Ⅻ、激肽 释放酶原和高分子量激肽释放酶原是否缺乏，由于APTT的高度敏感性和 肝素的作用途径主要是内源性凝血途径，所以APTT成为监测普通肝素首 选指标。
临床意义；缩短
一．见于高凝状态：如促凝物质进人血液及凝血因子的活性增高等情 况。
二．血栓性疾病：如心肌梗死、不稳定型心绞痛、脑血管病变、糖尿 病伴血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成。
三．妊娠高血压综合征和肾病综合征等。
Hale Waihona Puke 结果一般为 26-36s（仪器法）， 32-43s（手工法），与对照血 浆比较大于10s以上有意义。
二．严重的凝血酶原(因子Ⅱ) 因子Ⅴ Ⅹ和纤维蛋白原 缺乏.如肝脏疾病.阻塞性黄疸.新生儿出血症.肠道灭 菌综合征.吸收不良综合征.口服抗凝剂 .应用肝素以 及低(无)纤维蛋白原血症
三．纤容活力增强 如继发性.原发性纤溶以及血循环中 有纤维蛋白(原)降解物(FDP)
四．血循环中有抗凝物质.如抗因子Ⅷ或Ⅸ抗体,SLE等.
活化部分凝血活酶时间(APTT)延长混合血浆纠正试验
四、 APTT纠正试验方法
（一） NPP的制备与保存
3、将源自每名供者的等体积血浆(建议等体积)合并到同一容 器中，混合后再次离心(离心力1500 × g，时间15 min)。最好 每次做APTT纠正试验前新鲜制备，也可分装至冻存管中冻 存(至少-20 ℃)，使用时将冻存管取出后在37 ℃水浴中约 5~10min或至完全融化，并轻轻颠倒混匀后进行试验，禁止 反复冻融使用。应避免在37 ℃孵育时间不足或过长，否则可 能会因形成冷沉淀或热失活而导致凝血因子活性的损失。复 溶后应重新检测APTT， APTT需在正常参考范围内才可进行 纠正试验。
五、APTT纠正试验结果判断及分析
(一) APTT纠正试验结果判断
➢ (4)APTT4、APTT5、APTT7分别作为APTT1、APTT2、 APTT3的平行对照，以便于对实验条件进行监控。当后者相 比前者明显延长时，则提示实验过程中有不稳定因素，如孵 育温度超过可接受范围或者存在pH值的明显变化，那么有理 由认为该次试验的结果不可信，需要重新进行孵育试验。
混合血浆纠正试验的目的即是初步判断延长的血浆凝固时间 是由于缺乏凝血因子还是存在凝血抑制物所致，指导进一步 确诊凝血试验的选择。
混合血浆纠正试验主要应用于APTT当然也可应用于凝血酶 原时间( prothrombin time，PT)及凝血酶时间( thrombintime ， TT)。
三、启动APTT纠正试验的时机
(二) APTT纠正试验的操作方法
③百分比纠正，法：百分比纠正法的公式为：%纠正 =[(APTT4-APTT6)/( APTT4-APTT5)] × 100%。
血浆凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血活酶时间(APTT)测定
血浆凝血酶原时间（PT）及活化部分凝血活酶时间（APTT）测定一、血浆凝血酶原时间（PT）测定（一）参考值一步法凝血酶原时间：11～13秒凝血酶原比值：0.82～1.15（二）临床意义1．PT延长：PT超过正常对照3秒以上或凝血酶原比值超过正常范围即为延长，主要见于：①先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ减少及纤维蛋白原的缺乏（低或无纤维蛋白血症）；②获得性凝血因子缺乏，如DIC、原发性纤溶亢进症、肝病的阻塞性黄疸和维生素K缺乏、血循环中抗凝物质增多等。
2．PT缩短：①先天性因子Ⅴ增多；②DIC早期（高凝状态）；③口服避孕药、其它血栓前状态及血栓性疾病（凝血因子和血小板活性增高，血管损伤等均为血栓形成的基础）。
3．口服抗凝药的监护临床上当NIR为2-4时为抗凝治疗的合适范围，当INR>4.5时，如纤维蛋白水平和血小板数仍正常，则提示抗凝过度，应三少或停止用药。
INR>4.5时，同时伴有纤维蛋白原和血小板减低，则可能是DIC或肝病等所致也应减少或停止口服抗凝剂。
二、活化部分凝血活酶时间（APTT）测定（一）参考值：33.68～40.32秒（二）临床意义：基本与凝血时间意义相同，但敏感性高。
目前所用的大多数APTT测定方法，凡当血浆凝血因子低于正常水平的15-30%即可异常。
1．APTT延长：APTT结果超过正常对照10秒以上即为延长。
APTT是内源凝血因子缺乏最可靠的筛选试验，主要用于发现轻型的血友病。
虽可检出因子Ⅷ：C水平低于25%甲型血友病，但对于亚临床型血友病（因子Ⅷ大于25%）和血友病携带者敏感性欠佳。
结果延长也见于因子Ⅺ（血友病乙）、Ⅻ和Ⅶ缺乏症；血中抗凝血物如凝血因子抑制物或肝素水平增高时，当凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏时也可延长，但敏感性略差；其它尚有肝病、DIC、大量输入库存血等。
2．APTT缩短：见于DIC，血栓前状态及血栓性疾病。
3．肝素治疗监护：APTT对血浆肝素的浓度很为敏感，故是目前广泛应用的实验室监护指标。
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深圳市沙井人民医院检验科文件编号：SJ/QS-26-OP-XY-059版本版次：A/01临床血液作业指导书生效日期：2005.01.01第 1 页，共2 页活化部分凝血活酶时间测定（APTT）1.项目名称:活化部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin Time,APTT)2.检验目的2.1手术前的检测2.2 DIC的协诊2.3抗凝药物治疗监测2.4凝血因子检查2.5循环血液中抗凝物质和一些疾病协诊等3.检验原理：3.1检测原理:全自动血凝仪测定,散射光凝固法检测——确定量的血浆样本（50μl）经过一定时间（3min）温育后，加入部分凝血活酶时间反应试剂（50μl），加温1min，加入0.025MCaCl250μl，加温4min,采用波长660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中的浊度变化,从散射光光强度的测定可得凝集曲线，反应物凝固的时间即活化部分凝血活酶时间。
3.2反应方法学溯源:37℃条件下,以鞣花酸激活因子Ⅻ和Ⅺ,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板,在Ca2+参与下,观察贫血小板血浆凝固所需时间,即为活化部分凝血活酶时间,是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验.4.性能参数4.1重复性:CV≤2%4.2分析和计算参数:报告单位秒(S)4.3样本量:50ul,试剂量:50ul激活剂,50ul CaCl24.4检验时间:在最长检验时间之内测出结果,标准设置最长检验时间:190秒4.5精密度范围:1.3～6.0%5．原始样品系统:血浆6.容器和添加剂类型容器采用真空负压专用抗凝管,添加剂类型为0.109M枸橼酸钠7.试剂及配套品7.1激活剂:Cephaloplastin试剂(Dade Actin Activated Cephaloplastin Reagent)7.1.1商标:德灵(DADE BEHRING)7.1.2包装规格:10×2ml7.1.3货号:B4218-17.1.4成分:脑磷脂(从干燥兔脑粉中提取)加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.0×10-4M的鞣花酸溶液7.1.5使用方法:液体试剂,直接使用7.1.6储存:未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，开盖后2～8℃有效期7天,不能冰冻。
未被污染的试剂稳定期是：2～8℃3年、18～25℃1年、37℃2天;7.2氯化钙溶液(Calcium Chloride Solution)7.2.1商标:德灵(DADE BEHRING)7.2.2包装规格:10×15ml7.2.3货号:ORHO377.2.4成分:0.025mol/L的氯化钙溶液7.2.5使用方法:液体试剂,直接使用.7.2.6储存:没开盖试剂放2～8℃存放至试剂瓶上有效期.开盖后2～8℃有效期7天.7.3清洗液(Clean I):用于测定过程中的吸样针冲洗7.3.1商标:希森美康(Sysmex)7.3.2包装规格:50ml7.3.3货号:GSA500A7.3.4成分:1%次氯酸钠及活性成分7.3.5使用方法;液体试剂,直接使用7.3.6储存:没开盖试剂放2～8℃存放至包装有效期,开盖后放于仪器内有效期仅存4小时7.4校准质控血浆(Ci-Trol)7.4.1商标: 德灵(DADE BEHRING)7.4.2货号:Level 1(Normai),291070 10×1mlLevel 2(Abnormal),291071 10×1mlLevel 3(Abnormal),291072 10×1ml7.4.3使用方法:1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用7.4.4储存:室温:2h, 2～8℃:4h,冷冻分装保存:-20℃<2周,-70℃<6个月8.校准程序:仪器的验证和光路系统校正仪器的验证由生产商、代理商指定工程师和我科共同完成.灯泡大约半年更换一次,光路系统的校正由代理商完成.9.程序步骤:9.1标本采集与要求9.1.1标本采集:抽取静脉血1.8ml,加入到含0.2ml109mmol/L(1:9)的枸橼酸钠溶液抗凝真空试管中,并轻轻颠倒10次使之充分混匀,不得有凝块、不得形成泡沫,总量不得超过 2.0±0.2ml,并在试管上做好标识.采血应避免溶血和脂血,故患者应尽量空腹和避免在输入脂肪乳过程中或其后8小时内采血.采血后2小时内送到检验科,需要运输时应在低温条件下运输.采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤,外源性凝血因子进入针管,最好不与其它实验一起采集,否则由于标本的分配、分装而使血液停留在针管的时间延长.9.1.2不合格标本的处理对凝固、有凝块、严重溶血、重度黄疸、脂血、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的标本,按程序文件《样品核收、登记和保存程序》处理9.1.3标本保存检测应在标本采集后2小时内完成,2～8℃保存不超过4小时,分离后的血浆-20℃以下密封可保存2周.需长期保存的标本在-70℃下不超过6个月,且只能冻融1次，分析前在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
分析后的标本不保存.9.2检测前准备采样后应尽快分离血浆(60分钟内进行),将标本1500×g(3000r/min)离心10分钟,务使血小板去除;.在进行质控物和病人标本分析检测前,进行仪器状态和试剂检查,确保准备完好后才能进行分析.并将检查结果记录在相应的仪器设备使用记录表上.9.3病人标本的检测9.3.1开机:开CA1500仪器左侧电源→开机后仪器进行自检、预热,当屏幕上显示9.3.2每日针冲洗:在主屏幕上选然后按下9.3.3准备试剂:按照仪器试剂位置设定,把上述每项的试剂准备好,放在相应的位置9.3.4准备反应杯:打开仪器顶部反应杯储存槽,查看反应杯是否足够,需及时添加9.3.5准备标本;将离心好的样本放在相应的样本架上(一个架子可放10个样本),准备好放在进样器上9.3.6输入试验项目:按下主菜单上的,在试验项目键点击使-”变为“○”,按“↑”或“↓”将需要测试标本如上操作选择;9.3.7输入样本号:按下按顺序输入样本的序号或病人的病历号9.3.8开始检测:待一切准备工作就绪,按下屏幕右上角,仪器开始检测…9.3.9查看结果:返回主屏幕,检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成,然后按下储存结果)键,屏幕会换到结果显示界面,按下边第一个菜单查看凝集曲线、吸光度、结果等,检查是否有Error错误信息,有错误报警的标本需考虑重测9.3.10关机前冲洗针:关机前需要洗针,然后按下9.3.11关机:回到主屏幕下,切断仪器电源.10.质量控制程序:.10.1质控物准备用1ml蒸馏水溶解一瓶Dade Control质控血浆,轻轻颠倒混匀约5秒,置于室温30分钟,用前摇匀即可,不要剧烈振摇.将未用完的质控血浆在室温保存2小时、2～8℃4小时、-20℃以下冰箱中可保存24小时10.2上机检测将质控标本加入样品杯,上机检测.具体操作详见CA1500血液凝固分析仪作业指导书10.3质控规则10.3.1质控图正常分布规律各点应分布在均值的两侧,95.45%数据落在x±2s内,99.73%数据落在x±3s内.10.3.2质控图失控规则a)一个质控物的测定结果超过x±3s(13s规则)；b) 一个质控物的测定结果连续2次超过x＋2s或x-2s(22s规则)C) 一个质控物的测定结果连续2次测定其中1次超过x＋2s另1次超过x-2s(R4s规则)d) 一个质控物的测定结果连续4次超过x+1s或x-1s(41s规则)e)连续10次质控物结果都在均数的同一侧（10x规则）f)连续5次测定结果渐增或渐减（5T规则）10.4室内质控分析与失控处理10.4.1质控结果分析检测人员对质控结果进行分析,在发现质控数据违背质控规则后,通知组长,协助处理.组长分析该失控信号的真伪,并做出是否发出与测定质控品相关的那批病人标本检验报告的决定,必要时由检验科主任处理.检测人员填写失控报告.10.4.2失控原因分析极其处理过程失控信号的出现受多种因素的影响,包括操作上的失误,试剂、校准品或质控品的失效,仪器维护不良以及采用的质控规则、控制限范围、一次测定的质控标本数等.解冻的质控血浆一定要先混匀再吸出至样品杯中,操作时间严格按作业指导书进行.所以,室内质控失效时.首先要查明失控原因,然后随机挑选出一定比例的病人标本进行重新测定,对失控做出恰当的判断.失控的处理原则见程序文件《内部质量控制管理程序》10.5质控标本检测完毕后,及时将质控血浆放回冰箱,-20℃以下密封保存24小时.11.干扰和交叉反应多种药物如双香豆素、链激酶、尿酶、口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等可影响PT结果,如出现异常结果,需做进一步实验以确定导致异常的原因,溶血、黄疸、脂血标本或混浊样本影响结果,应重新采血.血标本与抗凝剂比例不当也影响检测结果.当红细胞比积过大(>0.55)或过小(<0.20)可影响测定结果,这时枸橼酸钠的用量为V=0.00185×V1×(1.00-α)×100(注:V-枸橼酸钠用量, V1-血量ml,α-红细胞比积)有下列浓度的物质存在时,对APTT的干扰小于10%12.结果计算程序的原理由仪器测定反应物凝固的时间即为活化部分凝血活酶时间13.生物参考区间: 21.1-36.5 S（患者结果超过正常对照10S上有临床意义）14.患者检验结果的可报告区间21～124秒15.警告/危急值APTT：≤20S 或≥80S16.实验室解释16.1APTT常用于内源性凝血系统（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子）的筛选及肝素抗凝治疗的监测16.2 APTT延长：见于先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接触因子Ⅻ、Ⅺ缺乏、VWF等）；多种凝血因子缺乏（如严重肝病、维生素K缺乏、DIC、纤溶亢进等）；血液中有抗凝物质存在如凝血因子抑制物、狼疮抗凝物、华法林或肝素水平增高，FⅡ、FⅠ及FⅤ、FⅩ缺乏，大量输入库血。
16.3APTT缩短：见于DIC高凝期和妊娠高血压综合症等高凝状态以及血栓前状态、血栓性疾病。
16.4是监测肝素治疗的首选指标。
要注意APTT测定结果必须与肝素治疗范围的血浆浓度呈线性关系，否则不宜使用。
一般在肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.5～3.0倍为宜.16.5对内源凝血途径因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)缺乏较CT敏感(血小板异常不影响APTT)能检出Ⅷ:C小于25%的轻型血友病.对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感,故APTT延长的最常见疾病为血友病.此时可进一步做纠正试验,即于患者血浆中加入1/4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清(试剂参见凝血酶原消耗试验的纠正试验),再做APTT,如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正,则为因子Ⅷ缺乏;如吸附血浆不能纠正,其余两者都能纠正,则为因子Ⅸ缺乏;如三者都不能纠正,则为病理性循环抗凝物质。