临床基因扩增实验室验收要求和要点资料
临床基因扩增检验实验室的设置质量管理体系的建立及其技术验收
产物分析区
核酸扩增后产物分析方法,如膜上或微孔板上 探针杂交方法,琼脂糖凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝 胶电泳,核酸测序等方法。
本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必 须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增 产物带出。由于本区有可能用某些可致基因 突变和有毒物质，故应注意实验室人员的安 全防护。
卫检字2002第8号
临床基因扩增检验实验室技术验收申请表
一.基因扩增实验室基本情况 二.提供材料情况（十部分）
《医疗机构执业许可证》 拟设置基因扩增实验室医院医疗资源状况、对该检 测的需求及实验室运行的预测分析 拟设置基因扩增实验室的设置平面图 实验室主要负责人简历表 实验室工作人员一览表
临床基因扩增检验实验室技术验收申请表
试剂准备区
试剂分装应在超净台中进行 扩增反应混合液应使用分子生物学级的，试
剂制备好后应有质检： 一是否有污染（是否 有假阳性存在）、二是使用弱阳性质控物检 测试剂的扩增效果。
标本制备区
仪器设备配置标准：
生物安全柜 ， 2～8℃冰箱，-20℃或-80℃冰 箱；高速台式冷冻离心机；混匀器；水浴箱或加 热模块；微量加样器（覆盖1～1000µl）；可移动 紫外灯（近工作台面）；超净工作台，消耗品； 一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心 管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作 鞋；专用办公用品等。
样品处理对核酸扩增有很大影响，必须使用有效的 核酸提取方法，可在开展临床标本检测前对提取方法进 行评价。
标本制备区
温育既可在加热模块也可在水浴中进行。加 热模块和水浴应在每次使用时，都要对所设置 的温度使用已经校准的温度计进行校准。
临床基因扩增检验实验室验收和复审要求
临床实验室生物安全管理研讨会临床基因扩增检验实验室验收和复审要求师志云赵志军魏军宁夏医科大学附属医院医学实验中心750004宁夏医科大学附属医院医学实验中心PCR检测室于2006年7月16日通过卫生部临床检验中心临床摹因扩增检验实验室的技术验收，并获得技术验收合格证书(No．00527)。
目前，本中心PCR检测室搬迁至新的实验室，按照《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》和《临床基因扩增实验室工作规范》文件，需要进行复审验收及换证。
现将临床基因扩增检验实验室技术验收和复审要求做一简单介绍。
1临床PCR技术准入管理背景临床基因扩增检验实验室主要应用PCR(聚合酶链反应)技术于疾病的诊断与治疗监测。
但在上世纪九十年代，我国由于部分医疗机构受利益的驱动，在缺乏技术、设备以及规范化管理的情况下，PCR技术临床应用泛滥，出现大量假阳性和假阴性结果，造成枪验结果和临床意义应用十分混乱，严重扰乱正常医疗秩序。
PCR技术临床应用所出现的一系列问题引起卫生部管理层高度重视，卫生部医政司于1998年F发了卫医发[199819号文件宣布P CR技术暂停应用于临床诊断。
经过近四年反复论证，卫生部2002年1月14日发布“临床基因扩增检验实验室管理暂行办法”(简称暂行办法)，同年2月20日卫生部临床检验中心发布“临床基因扩增实验室工作规范”。
两个文件宣布了PCR技术临床应用解冻，明确规定临床基因扩增检验实验室开展PCR技术必需具备的基本条件：①规范的PCR实验室②编写适合本实验室的质量手册③经PCR专业知识培i)il的技术人员(PCR上岗证)④使用有生产批文的 PCR试剂。
具备条件的二级以上医院可向卫生部或省临床检验中心申请技术验收。
2技术验收要点2．1为什么要进行临床基因扩增检验实验室技术验收? 临床基因扩增实验室采用PCR技术用于临床基因诊断，由于PCR技术对所检测的核酸模板进行大量扩增，容易出现实验室污染导致临床检测标本假阳性结果；另外由于PCR技术要求高、影响因素多(特别是 RNA标本)，实验过程处理不当易导致核酸模板无扩增现象，导致临床标本假阴性结果。
天津市临床基因扩增检验实验室验收规程
附件１天津市临床基因扩增检验实验室验收规程一、目的加强全市临床基因扩增检验实验室的管理，确保检验工作质量和医疗安全。
二、适用范围全市拟开展临床基因扩增检验项目的实验室。
三、准备工作（一）人员要求1.具有检验或检验相关专业资质的本单位在职人员及多点执业人员，其中，本单位在职人员不得少于该实验室工作人员总数的一半。
2.具有一定的分子生物学知识及实验操作经历，了解防污染和生物安全要点并熟练掌握相关仪器设备的使用操作。
3.必须经天津市临床检验中心或其它具有培训资质的机构培训并考核合格，获得《临床基因扩增检验实验室技术人员上岗证》。
4.实验室人员配备应能满足日常工作需要，至少配备有2名以上的实验技术人员。
15.实验室专业主管应为本科以上学历、中级以上职称，具有检验或检验相关专业资质的，并从事本专业工作2年以上者。
（二）环境要求1.按照临床基因扩增检验实验室区域设计原则筹建实验室。
设置基本原则为有4个独立且完全隔离的工作区域，包括试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区以及产物分析区，如使用全自动分析仪，后二个区域可适当合并；各区有明确标识及专有仪器设备和清洁用具等，人流和物流单向流动。
2.所需的电源、水源和温湿度符合实验工作要求。
3.不得与其他实验室混用，无尘、无磁场干扰及无同位素污染。
4.必须有明示生物危害的标志及禁止无关人员入内的标志。
5.有独立的通风设施、生物安全措施，保障实验人员身体健康。
（三）医疗机构要求1.申请临床基因扩增检验实验室的医疗机构应当具备相应功能和临床需求。
2.经行政审批部门核准登记医学检验诊疗科目的二级以上医疗机构或能够出具临床检验报告的医学检验所（独立实验室），有涉及生物安全的样本采集和处理的相应安全等级的实验室。
23.医疗机构对临床基因扩增检验实验室应当集中设置，统一管理。
4.从事遗传病临床基因扩增检验的医疗机构，应具备相应的医学实验室诊断技术平台。
（四）医疗机构需提交的材料1.天津市临床基因扩增检验实验室验收申请表。
临床基因扩增实验室验收要求和要点
临床基因扩增实验室验收要求和要点1.实验室设施验收要求：-实验室建筑面积符合要求，具备充足的操作空间，可以满足日常实验工作的需要。
-实验室具备独立的进出通道，避免与其他非相关实验室的交叉污染。
-实验室通风系统符合要求，保证室内空气流通。
-实验室具备紫外线杀菌灯和安全柜等必要的安全设备。
-实验室仪器设备正常工作，并且定期维护和校验，保证准确性和可靠性。
-实验室具备足够的电源和冷却设备，确保实验室设备的正常运行。
2.实验室安全管理要求：-实验室应具备安全管理制度和操作规程，明确实验人员的职责和权限。
-实验室应配备足够的紧急救援设备和药品，如急救箱、灭火器等，以应对突发情况。
-实验室应设有紧急暴露处置计划和应急预案，保障实验人员和环境的安全。
-实验室应有充足的安全标识和警示牌，提示实验人员注意安全事项。
-实验人员应定期参加相关安全培训和知识更新，增强安全意识。
3.实验室操作规范要求：-实验室应具备严格的实验操作规程和操作手册，确保每个步骤的准确性和可重复性。
-实验室应定期检查和校准关键仪器，如PCR仪、电泳仪等，确保其准确性和可靠性。
-实验室应妥善保存实验记录和数据，确保实验结果的可追溯性。
-实验室实验人员应定期参加技术培训和质控练习，提高操作技能和实验质量。
-实验室应建立适当的检测和质控体系，包括内部质控和参加外部质控活动，确保实验结果的准确性和可比性。
4.实验室废弃物处理要求：-实验室应具备妥善处理废弃物的设备和操作规程，包括化学品废弃物和生物废弃物等。
-废弃物应分类储存并定期清理，确保实验室环境的整洁和卫生。
-废弃物的处置应符合相关法规和规定，以减少对环境的污染和危害。
综上所述，临床基因扩增实验室验收要求和要点主要包括实验室设施验收、实验室安全管理、实验室操作规范和实验室废弃物处理等方面。
通过严格的验收，可以确保实验室的正常运行和实验结果的准确性，保障临床基因扩增实验的可靠性和可行性。
09-临床基因扩增检验实验室标准化建设与技术验收-张炳昌
并进行紫外照射30分钟以上。 按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。 操作者：
标本制备区（2区） 实验前： 打开通风设备 实验台面清洁（水或70%酒精擦拭） ℃； 冷冻室（18℃2℃） 扩增位置： 扩增位置： 25 26 27 28 29 30 31 32 ℃ （允许范围：30%~70%） 冰箱（柜）温度：冷藏室（2~8℃） 实验室温度： 阳性室内质控物来源： 阴性室内质控物来源：
v
9.实验室消耗品购买、审核和贮存程序有□ 无□ v 10.实验室废弃物的处理程序有□ 无□ v 11.实验室安全及生物安全程序有□ 无□ v 12.实验室的清洁程序有□ 无□ v 13.室内质量控制程序有□ 无□ v 14.抱怨处理程序有□ 无□ v 注：请将实验室相关程序文件和标准操作规程 （sop）附后。
v 人流单向性 v 物流单向性
目的：保证无基因污染
三、临床基因扩增检验实验室各区域 工作注意事项
v (一)试剂储存和准备区。贮存试剂和用于标本
制备的消耗品等材料应当直接运送至试剂贮 存和准备区，不能经过扩增检测区，试剂盒 中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区， 应当保存在标本处理区。
v (二)标本制备区。由于在样本混合、核酸纯化
℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度： 浓度及批号： 批号：
所取理的标本（对应标本接收的唯一编号）及拟扩增位置： 1 9 17 2 10 18 3 11 19 4 12 20 5 13 21 6 14 22 7 15 23 8 16 24 核酸提取及加样过程：按XXX（列出编号）SOP进行。 仪器设备使用： 生物安全柜： 离心机： 实验后： 正常 不正常 正常 振荡器： 不正常 正常
需要准备的一般资料
v v v v v v v v v v
临床基因扩增检验实验室的设置、质量管理
实验室使用和管理：
当前第27页\共有68页\编于星期五\1点
标本接受区
试剂准备区
样本制备区 扩增区
产物分析区
区域的适当合并： “由于测定技术总是在发展之中，
区域的合并应根据仪器的特点而定”
当前第28页\共有68页\编于星期五\1点
小结：
从核心仪器特点、实验室的现状出发，综 合考虑管理要求
有关职责进行审核。
当前第40页\共有68页\编于星期五\1点
管理要求（现场考核）：
送审的文件描述与实验室实际情况的一致 性
实际运行与文件规定的一致性 人员素质：对文件的认知、熟悉、灵活运
用程度
当前第41页\共有68页\编于星期五\1点
现场考核的实际内涵： 认识到不到位 落实到不到位 符合性检查加指导性检查 有重点的全面检查
当前第22页\共有68页\编于星期五\1点
标本制备区：
临床标本的保存
核酸提取、储存及
其加入至扩增反应 管
测定RNA时cDNA的合 成
不得在本区对样本进 行PCR扩增
冰箱 (2~8℃和-20℃或-80℃) 高速台式冷冻离心机
水浴箱和/或加热模块 生物安全柜 混匀器
微量加样器 可移动紫外灯 专用工作服和工作鞋
四个组成部分的关系：
关键：核心——过程（活动） 纽带——程序组织结构 Nhomakorabea程序
资源
过程
当前第46页\共有68页\编于星期五\1点
过程
理解
“过程”的重要性 1、工作是通过过程来完成的。 2、质量管理是通过对各种过程的控制 来实现的。 3、质量管理本身也是一系列的过程
过程的分解、控制 过程的有机组合
临床基因扩增实验室验收要求和要点共92页
临床标本的接收
应在四个测定区域之外的地方或适合的地方。 接收的标本应收集在原始容器中，不能接收从
其它检测如生化、免疫检验等分出来的标本 在核酸提取时，由基因扩增检验实验室人员将
标本带入至标本制备区。
21
1.4 1.5
试剂贮存和准备区 a.冰箱； a.混匀器； a.微量加样器； a.可移动紫外灯； a.专用工作服和工作鞋； a.消耗品（带滤心吸头、一次性手 套等）； a.专用实验记录本、记号笔等。 标本制备区 (a) 冰箱 (2~8℃和-20℃或-80℃)； (a)高速台式冷冻离心机 (c) 水浴箱和/或加热模块 (d) 生物安全柜 (a)混匀器； (a)微量加样器； (a)可移动紫外灯； (a)专用工作服和工作鞋； (a)消耗品（带滤心吸头、一次性手套等）； (a)专用实验记录本、记号笔等。
功能：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其 加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的 操作，应符合生物安全二级实验室防护设 备、个人防护和操作规范的要求。
24
标本制备区
标本制备区内的仪器设备主要有生物安全柜 、加样器、 高速台式冷冻离心机、水浴箱和/或加热模块、混匀器、 冰箱、可移动紫外灯、专用工作服和鞋、消耗品（带滤 芯吸头、一次性手套等）、专用记录本和记录笔。加样 器应定期校准。如需处理大分子DNA，应当具有超声波 水浴仪。
2
验收依据
《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》
卫办医政发〔2019〕194号
临床基因扩增检验实验室（血站核酸检测）工作导则 《临床基因扩增检测实验室技术验收报告》
3
为什么要进行验收？
方法敏感 技术要求高 存在问题多
假阴性、假阳性 不规范 人员素质
临床基因扩增检验质量要求
检验试剂及耗材的采购、验收、管理、领用及使用
样品的采集、运送、接收、处理及保存 检验方法的选择、确认或验证
检验项目及仪器设备标准操作程序的建立和管理
检验结果质量保证
检验报告管理的规定：结果的发放方式、报告的格式和 内容、保护患者隐私的规定 记录的管理：记录的修改。保存及期限 对差错事故及不符合工作的纠正及预防措施
程，系统误差应<7.5%）
应保存主要设备的档案，档案内容应包括：设备标识、型 号、序号或其它唯一性识别、到货日期和投入运行日期、 目前放置地点、接收时的状态、仪器使用说明书或其存放 处、证实设备可以使用的设备验证报告、校准和/或检定 报告、维护、损坏、故障或维修的记录
应制定各类仪器维护保养，校准/检定计划，并有执行记 录。
对服务对象投诉处理
人员要求
实验室至少应有2名取得PCR上岗证，并为本单位在职 技术人员 实验室负责人应具有中级或以上专业技术任职资格 开展遗传性疾病基因芯片诊断技术或基于组织等分子 病理检测技术并出具诊断报告的实验室，还应具备至 少2名取得《医师执业证书》、主治医师或以上专业技 术、从事本专业的本单位在职医师
分析中质量控制
对新项目的性能进行方法学验证，并有相应的实验记录。 仪器、试剂、方法更新时应进行方法学验证，并有记录。 定量检测项目方法学验证的内容至少应包括：精密度、 正确度、线性范围（可报告范围）、检出限；
定性检测项目方法学验证的内容至少应包括：检出限、
精密度、符合率。
室内质量控制
目的 监测和控制实验室常规工作的精密度，即实验 室测定的批内和批间重复性 IQC结果决定了实验室即时测定结果的可靠性和有效性
淋病奈瑟菌有自溶的特性，标本采集后应立即送检。
临床基因扩增检验实验室的设置及技术验收(下)
临床基因扩增检验实验室的设置及技术验收(下) 李金明 卫生部临床检验中心 100730二． 设施和环境本章包括五条。
要求实验室具备良好的工作环境，即在照明、工作空间、能 源、温控、通风等方面必须能满足检测要求，配备温湿度计和稳压电源等。
要求实验室建立实验室管理制度和措施，对实验室的进入、使用、清洁、管理、废弃血清处理和生物防护等方面作出明确规定。
本章的重点是实验室的设施和环境条件能否满足临床基因扩增检验的要求。
2.1主要是检查实验室的空间、照明、空调系统以及通风系统，各区都应有足够的空间，良好的照明，有符合要求的空调设备以及良好的通风。
2.2较为简单，就是看实验室各区是否配备有温湿度计及是否有温湿度记录本，在扩增区，扩增仪是否配备有稳压电源。
2.3是检查实验室是否有明确的标识对人员进入进行限制和控制，如人员进入控制标识、生物传染危险性标识等。
2.4则看实验室是否有实验室管理制度、实验室清洁程序以及相应的设施，即是否每一个实验区内都有其专用的清洁用具如拖把、抹布等，以及是否规定实验室的清洁亦应遵循试剂准备区→标本制备区→扩增区→产物分析区的单一流向。
2.5检查是否有生物污染物处理的程序及设施和生物防护的程序及设施等，对于设施即看是否有用于生物污染物处理的垃圾袋、消毒桶或高压锅（如果程序规定需要高压的话）；生物防护设施即为口罩、防护衣、手套、眼罩、消毒液、75%乙醇、自来水或生物安全柜等。
曾有同道问，临床基因扩增检验实验室到底需要多大面积？具体多少面积不太好界定，因为实验室可大可小，原则只有一个，就是要能满足自己的工作要求，应为实验操作人员提供一个良好舒适的工作环境，试想如果一个工作环境给你的感觉是一塌糊涂，能做好临床标本的检验吗？三．人员本章包括三条。
要求在临床基因扩增检验实验室工作的实验操作人员必须经过培训并取得上岗证，此外，实验室还应有自己的年度培训计划，保证实验室人员能不断得到培训。
实验室应保存其全部工作人员的技术业绩档案。
临床基因扩增实验室验收要求和要点资料共93页
1、合法而稳定的权力在使用得当时很 少遇到 抵抗。 ——塞 ·约翰 逊 2、权力会使人渐渐失去温厚善良的美 德。— —伯克
3、最大限度地行使权力总是令人反感 ；权力 不易确 定之处 始终存 在着危 险。— —塞·约翰逊 4、权力会奴化一切。——塔西佗
5、虽然权力是一头固执的熊，可是金 子可以 拉着它 的鼻子 走。— —莎士 比
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
临床基因扩增检验实验的设置、管理和技术验收(新)
卫生部临床检验中心 李金明
临床基因扩增检验实验室的设置
依据：卫生部颁发的《临床基因扩
增检验实验室管理暂行办法》（卫 医发[2002]10号）
临床标本的接收
通常的工作流程：标本采集
编号 保存或检测
血清分离
应在四个测定区域之外的地方或区域内 接收 接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
记
录
本章包括三条。 有记录管理制度：适合自身实际情况，符 合现行规章制度；（由谁管、在何处管、 保存多长时间） 原始记录、计算和导出数据应归档并保存； 记录应有有关人员的签字； 所有记录和报告都要妥善保管并保密。
报
告
检测结果的报告应准确、清晰和客观； 定性测定报告“阴性”或“阳性”；定量测定则 以拷贝数/ml或IU/ ml报告；避免二者之间的混 淆； 每份报告应包括以下信息：标题、唯一标识、检 测标本说明、标本特性和状态、标本接收日期和 检测日期、检测方法、检测和校核人员签字及发 出日期、参考结果或范围； 如对报告有效性有疑问，实验室应立即通知临床 相关科室予以改正的程序； 有报告的发放程序：用电话、传真、电子邮件报
实验室的日常工作管理
工作项目
水浴箱、微量恒温器（加热模块） 次氯酸钠溶液 生物安全柜 室内质控 弱阳性质控（定性） 低、中、高浓度质控（定量） 阴性质控：原样本 经历提取过程的空管 仅含扩增反应混合液管 实验台面
核查点
□校准及记录温度 □新鲜配制 □先起动运行30分钟后再开始工作 □有 □有 □有 □有 □有 □使用后用次氯酸钠溶液消毒， 再用70%乙醇清洁 □紫外照射 □使用后用次氯酸钠溶液消毒， 再用70%乙醇清洁 □遵循单一工作流向 □紫外照射
临床基因扩增检验实验的设置、质量管理体系的建立及技术验收
有具体时间）保存条件和要求 制定保证标本安全，即如何防止标本丢失、掉换、变质的
措施
试剂和消耗品的质检 SOP
试剂质检的基本方面，如试剂的抗干扰能力（主 要是针对提取试剂），即对溶血、脂血标本扩增 抑制作用的了解。可通过自行制备含已知量病毒 核酸的不同程度溶血或脂血的标本进行质检。如 为定量检测试剂，还应包括检测的重复性、线性 范围等的质检，通常使用2-3份样本进行检测即可。 如为定性检测试剂，则应重点考察测定下限，可 用系列稀释的含已知量靶核酸的血清标本进行
接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
什么样的临床基因扩增检验实验室 是最标准的？
临床基因扩增实验室设置的一般原则
各区独立 注意风向 因地制宜 方便工作
“十六字口诀”
实验室质量管理体系的建立
质量手册 质量体系程序文件 标准操作程序
(相关记录表格)
质量管理的内涵
对实验记录者的签名方式的规定和要求
实验记录管理的基本方面：指定专门的管理人； 有专门的保存处如柜子等；记录的登记归档方法； 记录的借阅及销毁记录；记录保存的时间；电子 记录的备份保存具体方法及保存时间等
室内质量控制 SOP
明确室内质控物的来源及浓度 明确所选用的质控方法 明确失控的判断标准或所采用的失控规则 明确失控后的分析及处理措施
仪器设备的维护和校准SOP
责任人 维护和校准的基本方面：光路、滤光片、
波长、加热模块的清洁、具体的校准点选 择（如加样器的校准体积点选择、温度计 的校准温度点选择等）、维护和校准的具 体方法包括用具 校准合格的判断标准 维护和校准的间隔时间
仪器设备的操作 SOP
临床基因扩增实验室的创建及现场验收
临床基因扩增实验室的创建及现场验收孙颖基因扩增技术是一种克隆技术，指将基因中的DNA在特定的条件下，通过变性、退火、延伸的步骤循环，加入引物、工具酶等物质，使靶基因特异性的复制上百万倍。
它具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，现广泛应用于微生物学、遗传学、分子生物学等领域。
1现状分析和问题确立根据临床基因扩增检验技术管理规范[1，2]要求医疗机构进行基因扩增试验，需经省级临检中心审核验收。
我科于2015年计划申报临床基因扩增实验室，购买了ABI7500定量扩增仪1台，因一些原因计划搁浅，一直未申报，仪器未能正常投入使用中，基本处于荒废状态，不能有效的运转对仪器本身也是不利的。
相关标本只能外送检测，就最常见的乙型病毒性肝炎（viral hepatitis type B，HBV）-DNA一个项目，一年就有2000多例，对于科室而言，是一笔经济损失。
同时，我院现为二级医院，三级医院正在积极创建中，根据三级医院要求，检验部门必须能进行分子诊断基因扩增实验项目并且获得实验室准入合格证，因此，我科基因扩增实验室的创建势在必行。
本院现在面临的问题是，不通过临床基因扩增实验室的审核，就不能开展项目，不能应用于临床，通过实验室的验收成了迫在眉睫的问题。
2解决办法本院从2017年1月进行筹划，从实验室的硬件条件、各种仪器的检定校准、人员的培训学习、检测系统的性能验证实验、质量手册和操作手册的文件编写、实验室的质量控制等方面着手准备，递交书面申请，并于2017年9月31进行实验室的现场验收。
3执行过程整个创建过程分为6个部分。
3.1实验室的硬件条件：由于是老旧实验楼，建造时没有按要求执行，必须改造，选取连续的3间房屋作为基因扩增实验室的试剂区、标本处理区、扩增区。
将选好的房间内用移门隔断，增设缓冲间，利用吊顶的方法加装负压装置通风设备，在硬件上做到力所能及。
3.2检测系统的性能验证：我科计划开展乙肝病毒核酸的检测，于是进行了HBV-DNA的性能验证：根据《医院检验科建设管理规范》[3]基因扩增实验的性能要求，制定了精密度、线性范围、生物参考区间验证、最低检测限、准确度的检测计划，并按照计划逐步实施检测。
W021-浙江省医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审核须知及验收办法
6.1.4 洗手池设脚踏或感应水龙头 以及洗眼装置； 6.1.5 耗品应消毒后在有效期内使 用。
6.2 个人防护
2.5
6.2.1 工作时应穿工作服，戴工作
帽，戴一次性无粉手套，必要时
戴口罩，防护镜；
6.2.2 如发生感染性材料的溢出或
溅出，应按应急程序进行处理；
6.2.3 离开实验室时，工作服必须
留在实验室、不得带手套出实验
(a) 微量加样器、电泳仪、杂交仪等；
(b) 可移动紫外灯（近工作台面）； (c)专用工作服和工作鞋（或鞋套）；
(d)消耗品（带滤芯吸头、一次性手 套等）；
(e)专用实验记录本、记号笔等。
3
浙江省临床基因扩增检验实验室技术验收办法（表二）
序号 评审标准及细则
标准分 得分 扣分 扣分理由
1 人员
10
3 试剂
10
3.1 必须使用经 SFDA 批准的试剂，
4
相应区域使用滤芯吸头。
4
序号 评审标准及细则
标准分 得分 扣分 扣分理由
3.2 试剂和消耗品按规定贮存，在有
2
效期内使用。
3.3 实 验 室 执 行 试 剂 和 消 耗 品 的 选
4
购、验收和质检程序并保存有关
资料及记录。
4 检测方法
5
4.1 应有相应的仪器标准操作程序和 2
3
SOP 文件，有效的维护及记录，
保持设备整洁无污染。
2.4 仪器设备建有技术档案
2
（a）制造商名称、型号、序号或 其它唯一性标识；
（b）仪器使用说明书或其复印 件；
（c）校准和/或检测的日期和结果 以及下次校准和/或检测的日期；
（d）迄今所进行的维护和今后维 护计划的细节；
医学-临床基因扩增实验室验收要求和要点
8
PCR实验室的空气流向
临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂 储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析 区进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。 可按照从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。可通 过安装排风扇、负压排风装置或其他可行的方式实现。
保证检测质量 防止实验室污染 建立LAB内部质量管理模式 尝试强制性实验室认可
5
6
质量管理的内涵
写你所做的 做你所写的 记录你已做的 分析你已做的
7
PCR 实验室区域设计原则
原则上应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标 本制备区、扩增区、扩增产物分析区。
这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各 区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全 的分隔状态，不能有空气的直接相通。
2
验收依据
《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》
卫办医政发〔2019〕194号
临床基因扩增检验实验室（血站核酸检测）工作导则 《临床基因扩增检测实验室技术验收报告》
3
为什么要进行验收？
方法敏感 技术要求高 存在问题多
假阴性、假阳性 不规范 人员素质
4
验收要达到的目的
临床基因扩增实验室设置的一般原则 各区独立
注意风向
“十六字口诀”
因地制宜
方便工作
本片来自李金明教授
理想的PCR实验室设置A
临床基因扩增实验室验收要求和要点
2.5 实验室应有关化学试剂管理、废 弃血清处理、生物防护等的措施
通风问题较多：排 风压力设置不合理 表面上做到物理隔 离，实际暗藏缝隙
湿度容易忽略
实验室清洁SOP要点
目的:为了使实验室台面、地面和仪器设备在使用后，处于洁净和无感染性 状态，以防止出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用寿命；防止因实验 室台面、地面和仪器设备的生物传染危险性造成实验室人员感染，以及防 止实验室交叉污染而出现假阳性结果等。
性能验证：按检测系统
（包括试剂）说明书进
行各指标的复现 38
5
检测方法
5.1
实验室应制定以下标准操作程
序:
有关仪器设备操作、维护和
校准程序；
有关扩增检测的工作程序。
所有上述标准操作程序都应现 行有效并便于工作人员使用。
5.2
实验室应有仪器、试剂、消耗
品的选购、验收、贮存和质检
程序;
*5.3 对计算和数据换算应进行适当 的校核。
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
16
本图来自李金明教授
标本制备区
空气流向 +
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产物
分析区
空气流向++
门
门
17
本图来自李金明教授
扩增和产 物分析区
空气流向
其他实验室
试剂准备区
空气流向
其他实验室
其他实验室
走廊
走廊
其他实验室
空气流向
标本制备区
其他实验室
其他实验室
10
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
试剂储存和准备区
功能：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混 合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和 准备。
试剂准备区的仪器设备主要有冰箱、微量加样器、 混匀器、可移动紫外灯、专用工作服和鞋、消耗品 （带滤芯吸头、一次性手套等）、专用记录本和记 录笔。加样器应定期校准。
实验室的安全工作制度或安全标准操作程序，所有操作 符合《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2008）。
PCR实验室技术验收内容
实验室设置和设备 设施和环境 人员 设备管理和质控物 检测过程
标本管理 记录 报告 质量控制 抱怨
等十章共三十七条
12
附件1 临床基因扩增检验实验室技术验收表
临床基因扩增检验实验室 验收要求和要点
宁夏回族自治区人民医院
临床医学检验诊断中心 杜宗孝 2016.08
临床基因扩增检验实验室 申报及验收程序
二级以上医院
填写《临床基因扩增检验实验室设置申请书》
（省级医疗机构）
（地、市(县)级医疗机构）
省卫计委医政处
相应的卫生行政部门
省临床检验中心初步技术审核
合格者开始试运行（三个月），同时报省卫计委备案 验收合格后，授予验收合格证书（证书有效期五年）
序号
验收内容
1
实验室设置和设备
验收意见
符 基但 不 缺 暂
合 本有 符 此 不
符缺 合 项 需
合陷
考
核
评论与说明
1.1 实验室的规范化分区:原则上 应分为四个区,但如使用全自 动扩增检测仪,区域可适当合 并
1.2 各工作区的明确标记
1.3 实验室应配备开展临床基因 扩增检测所需的所有仪器设 备（包括质控物）。保证 《临床基因扩增检验实验室 管理办法》和《临床基因扩 增检验实验室工作导则》的 有关要求得到满足。
10
PCR实验室工作基本原则
工作结束后，必须立即对工作区进行清洁。实验台表面 应可耐受次氯酸钠等化学物质的消毒清洁作用。实验台 表面的紫外照射应当方便有效。由于紫外照射的距离和 能量对去污染的效果非常关键，因此可使用可移动紫外 灯（254nm波长），在工作完成后调至实验台上60～ 90cm内照射。由于扩增产物仅几百或几十碱基对 （bp），对紫外线损伤不敏感，因此紫外照射扩增片段 必须延长照射时间，最好是照射过夜。
门
外走廊
门
错 误 的 设 置
临床标本的接收
应在四个测定区域之外的地方或适合的地方。 接收的标本应收集在原始容器中，不能接收从
其它检测如生化、免疫检验等分出来的标本 在核酸提取时，由基因扩增检验实验室人员将
标本带入至标本制备区。
21
1.4 1.5
试剂贮存和准备区 a.冰箱； a.混匀器； a.微量加样器； a.可移动紫外灯； a.专用工作服和工作鞋； a.消耗品（带滤心吸头、一次性手 套等）； a.专用实验记录本、记号笔等。 标本制备区 (a) 冰箱 (2~8℃和-20℃或-80℃)； (a)高速台式冷冻离心机 (c) 水浴箱和/或加热模块 (d) 生物安全柜 (a)专用工作服和工作鞋； (a)消耗品（带滤心吸头、一次性手套等）； (a)专用实验记录本、记号笔等。
扩增区
标本制备区 试剂准备区
空气流向
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
本图来自李金明教授 16
标本制备区
空气流向 +
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向++
门
门
本图来自李金明教授 17
扩增和产 物分析区
空气流向
其他实验室
试剂准备区
空气流向
其他实验室
其他实验室
9
PCR实验室工作基本原则
进入各工作区域应当严格按照单一方向进行 各工作区域必须有明确的标记，不同工作区域内的
设备、物品不得混用。 不同工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。
工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。 实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区→标本制备区
→扩增区→扩增产物分析区的方向进行。不同的实验 区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染。
根据使用仪器的功能，区域可适当合并。例如使用 实时荧光PCR仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采 用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析 仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。
8
PCR实验室的空气流向
临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂 储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析 区进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。 可按照从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。可通 过安装排风扇、负压排风装置或其他可行的方式实现。
走廊
走廊
其他实验室
空气流向
标本制备区
其他实验室
其他实验室
其他实验室
本图来自李金明教授 18
标本制备区
空气流向+
空气流向
试剂准备区
门
门
扩增及产
物分析区
空气流向++
门
门
本图来自李金明教授
A
扩增区
门 产物分析区
标本制备区 门
门 试剂准备区
门
外走廊
门
B
本图来自李金明教授
扩增及产物 分析区
标本制备区 门
试剂准备区 门
2
验收依据
《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》
卫办医政发〔2010〕194号
临床基因扩增检验实验室（血站核酸检测）工作导则 《临床基因扩增检测实验室技术验收报告》
3
为什么要进行验收？
方法敏感 技术要求高 存在问题多
假阴性、假阳性 不规范 人员素质
4
验收要达到的目的
保证检测质量 防止实验室污染 建立LAB内部质量管理模式 尝试强制性实验室认可
临床基因扩增实验室设置的一般原则 各区独立
注意风向
“十六字口诀”
因地制宜
方便工作
本片来自李金明教授
理想的PCR实验室设置A
产物分析区
扩增区
标本制备区 试剂准备区
空气流向
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
空气流向 缓冲间
专用走廊
工作流向
本图来自李金明教授
15
理想的PCR实验室设置B
产物分析区
5
6
质量管理的内涵
写你所做的 做你所写的 记录你已做的 分析你已做的
7
PCR 实验室区域设计原则
原则上应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标 本制备区、扩增区、扩增产物分析区。
这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各 区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全 的分隔状态，不能有空气的直接相通。