液相色谱测定淀粉中顺丁烯二酸解决方案pdf

LC5510测定淀粉中的顺丁烯二酸

摘要：本文建立了利用我公司高效液相色谱LC-5510测定淀粉中顺丁烯二酸含量的方法：样品中的顺丁烯二酸用5%甲醇水溶液超声提取后，离心，上清液进

高效液相色谱仪，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。该方法在0.1～20.0

μg/mL浓度范围内线性关系良好，回收率在90.5%～94.1%之间，精密度良好，检

出限为1.1 mg/kg。（S/N=3）完全满足检测分析要求。

关键词：LC-5510高效液相色谱；顺丁烯二酸；淀粉

台湾近日发现含顺丁烯二酸的“毒淀粉”，顺丁烯二酸又称“马来酸”，无色结晶体，无营养价值，会破坏人体器官黏膜组织，并损害肾脏。截至目前，全台粉圆、黑轮、板条、芋圆、地瓜圆等越来越多食品被查出违法添加顺丁烯二酸。但据我国相关质监部门表示，这种顺丁烯二酸作为食品添加剂并不在现有监管范围内，尚未有食品中检测顺丁烯二酸的相关的国家标准。

本文建立了测定淀粉中顺丁烯二酸的高效液相色谱分析方法，样品前处理过程简单、快速，方法定性定量准确，灵敏度高。

1 实验部分

1.1主要仪器和试剂

LC 5510高效液相色谱仪：配有紫外检测器

DM-100在线脱气机

超声波水浴

离心机

甲醇

磷酸

顺丁烯二酸标准品（含量≥99.5%）

1.2色谱条件

色谱柱：C18柱，250 mm×4.6mm，5μm。

流动相：甲醇+水（磷酸调PH=2.8）=5＋95，0.45 μm滤膜过滤。

流速：1.0 mL/min。

检测波长：214nm。

柱温：室温。

进样量：20 μL。

1.3试样处理

称取2.5g淀粉样品（精确至0.0001g）于50mL容量瓶中（淀粉制品用粉碎机打碎后称取），加入约30mL5%甲醇水溶液（体积分数），涡旋5min，超声提取10min，冷却至室温，用5%甲醇水溶液定容，摇匀，取5mL于10mL离心管中，3000r/min离心15min，上清液过0.22μm微孔滤膜，待测。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线的绘制

2.1.1 标准溶液配制

顺丁烯二酸标准储备液：准确称取顺丁烯二酸标准品50mg于100mL容量瓶中，加水溶解并定容，此标准贮备液浓度为500μg/mL。

顺丁烯二酸标准工作液：吸取顺丁烯二酸标准贮备液1mL于25mL容量瓶中，用5%甲醇水溶液定容配成标准溶液浓度为20µg/mL。再分别吸取20µg/mL 顺丁烯二酸标准溶液0.05、0.125、0.25、2.5、5.0、10.0mL于10mL容量瓶中，用5%甲醇水溶液定容至刻度，摇匀。此标准工作液浓度为0.1、0.25、0.5、5.0、10.0、20.0µg/mL。

2.1.2标准曲线

将顺丁烯二酸标准工作液依次按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

图1 顺丁烯二酸标准曲线谱图

2.2样品分析

将样品溶液按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积，计算含量。

图2 0.5µg/mL标样谱图

图3 某品牌淀粉添加顺丁烯二酸标样谱图

2.3 回收率实验

取3份样品，分别加入不同体积的20µg/mL 的标准溶液，按上述方法进行样品处理，得到回收率如下表所示。

2.4 精密度实验

相同的条件下，取三份样品，分别加入1.25mL 的20µg/mL

的标准溶液，结果如下：

2.5 最小检出限

以3倍的基线噪声计算出检出限为1.1mg/kg 。

3 结论

用LC-5510高效液相色谱分析淀粉中顺丁烯二酸的含量，重复性良好，该方法在0.1～20.0 μg/mL 浓度范围内线性关系良好，回收率在90.5%～94.1%之间，该方法样品前处理过程简单，仪器操作简便易懂。

测定淀粉中顺丁烯二酸实验系统配置

（高效液相色谱）

LC5510或LC5500（单泵）（或升级为双泵，组成高压梯度系统）DM-100在线脱气机（选配）

AS-401自动进样器（选配）

溶剂过滤器（配备真空泵）

超声波清洗器