维生素APPT课件
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2019/11/29
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2019/11/29
制作人：周钰坤
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维生素A的缺乏症，来源 维生素A的结构与性质
鉴别试验 杂质检查 含量测定
2019/11/29
3
维生素 缺乏病
维生素缺乏病（1）：维生素A
1. 导致眼部症状：夜盲、眼部干燥，严重导致失明 2. 导致皮肤症状：毛囊丘疹。 3. 生长发育障碍：临床表现为身高落后，牙齿生长缓慢，易发生
酸值
取乙醇与乙醚各15ml，置锥形瓶中， 加酚酞指示剂5滴，滴加氢氧化钠滴定 液（0.1mol/L）至显粉红色，再加本 品2.0g，振摇使溶解，用氢氧化钠滴 定液（0.1mol/L）滴定，酸值应不大 于2.0（附录VIIH）
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11
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检查
过氧化值
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结构决定性质
溶解性（脂溶性） 不稳定性（多个不饱和键）
紫外吸收特性（共轭多烯醇的侧链 结构，最大吸收325-328nm ）
与三氯化锑呈色 维生素A在饱和无水三氯化锑的甲烷 溶液中即显蓝色，渐变成红色。
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鉴别试验
（一）三氯化锑反应(ChP2010)
换算因数
效价IU / g
E1% 1cm
cm
A32（8 校正） A328 100% A328
4）A值的 选择：
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含量测定
（皂化法）
2.皂化法：适用于维生素A醇的测定。
供1试）品方未法：明精纯密度称时取，一就定量会供出试现品含，量加测氢氧定化方钾法乙的醇溶 选 扰液过1择过m后、， 多l中煮浓直 时含沸缩接 ，维回等生法 直流处素，理比 接A得，皂 法为到最化却9的后-1法并皂用5单简不化异位单适液丙的再醇易用溶经溶操。液乙解作，醚残，在提渣3但取 并00只、稀、洗释要3涤成1干0、每、滤
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鉴别试验
（三）薄层色谱法
吸附剂：硅胶G 展开剂：环己烷-乙醇（80:20）
分别取供试品与对照品（不同维生素A 脂类）的环己烷溶液(5IU/μl)各2μl， 点于薄层板上，立即展开，空气中挥 干，喷以三氯化锑溶液，比较供试品 和对照品所显蓝色斑点位置。
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检查
机制：维生素A和氯化锑（Ⅲ）中存 在的亲电试剂氯化高锑（Ⅴ）作用 形成不稳定的蓝色碳正离子。
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方法：取维生素A油溶液1滴，加三氯 甲烷10ml振摇使溶解；取出两滴，加 三氯甲烷2ml与25%三氯化锑的三氯 甲烷溶液0.5ml，即显蓝色，渐变成 紫红色。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
鉴别试验
（二）紫外光谱法
方法：取约相当于10IU的 维生素A供试品，加无水乙 醇-盐酸（100:1）溶液溶 解，应在326nm的波长处 有单一的吸收峰。将此溶 液水浴加热30秒，迅速冷 却应，在348、367和389nm的波长处有三个尖 锐的吸收峰，且在332nm的波长处有较低的 吸收峰或拐点。
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含量测定
（直接测定法）
测定方法：直接测定法和皂化法
1.直接测定法：
直接测定法适用于纯度高的维生素A醋酸酯的测定。
1）方法：取维生素A醋酸酯适量，精密称定，加环己烷
制成每1ml中含9-15单位的溶液。然后在300、316、
328、340和360nm五个波长处分别测定吸光度，确定最
大吸收波长（应为328nm）。
2）计算：A.求 E1%cm：由A=E1%cm CL公式，求得E1%cm =A/(C×L)
BC..求求效维价生：素效A醋价酸（酯IU占/ g标）示 量E11c%的m 百19分00含量：注意：浓度单位
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含量测定
（直接测定法）
3）换算因子：每单位 E1%c数m 值所相当的效价。
取本品1.0g，加冰醋酸-三氯甲烷（6:4）30ml，振 摇使溶解，加碘化钾的饱和溶液1ml，振摇1分钟， 加水100ml与淀粉指示液1ml，用硫代硫酸钠滴定 液（0.01mol/L）滴定至紫蓝色消失，并将滴定的 结果用空白试验校正。消耗硫代硫酸钠滴定液 （0.01mol/L）不得过1.5ml。
13
1、杂质的吸收在310～340nm波长范围内呈一条直线，
且随波长的增大而吸收度变小 。
2、物质对光的吸收具有加和性。即样品各波长的吸收
度是维生素A与杂质吸收度的代数和 。
ക波长的选择：
（1）等波长差法：使 3 - 1 1 - 2
A （2）等吸收比法：使
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A3
6 / 7 A1
325、334nm波长处测定吸收度，并确定最大吸收波长 （应为325nm）
2）计算：A.求 E1%cm：由A=E1%cm CL公式，求得E1%cm =A/(C×L)
B.求效价：效价（IU
/
g）
E1% 1cm
1830
C.求维生素A醋酸酯占标示量的百分含量：
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含量测定
龋齿。 4. 影响生殖功能：影响女性受孕和怀胎 5. 易发生感染性疾病：消化道和呼吸道感染性疾病发生率增高，
且易迁延不愈。
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结构与性质
结构:为具有一个共轭多烯醇侧链的环 己烯。
天然维生素A主要是全反式维生素A。 R的不同则决定了维生素A的醇式或酯式状态。
（皂化法）
3）A值的选择：
一、当最大吸收波长不在323-327nm之间或 A300/A325的比值大于0.73时，应采用色谱法将未皂化 部分纯化后再进行测定。（供试品杂质含量过高） 二、当最大吸收波长在323-327nm之间，且 A300/A325的比值小于或等于0.73，对A值进行判别后 便可代入公式计算
为了得到准确的测定结果，消除非维生素A物质 的无关吸收所引起的误差，而求得维生素A的真 实含量。因此需要采用“三点校正法”。
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含量测定
（三点校正法）
三点校正法：是在三个波长处分别测定吸收度， 根据校正公式计算吸收度A校正后，再计算含量， 故本法称为“三点校正法”。
ക“三点校正法”测定原理
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含量测定
（一）紫外可见分光光度法 （二）高效液相色谱法 （三）三氯化锑比色法
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含量测定
（一）紫外可见分光光度法 （三点校正法）
对维生素A测定有影响的杂质有： （1）维生素A2和维生素A3 （2）维生素A的氧化产物：环氧化物、维生素A醛、维生 素A酸 （3）维生素A在光照条件下产生的无活性的聚合物：鲸醇 （4）维生素A的异构体及其他
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制作人：周钰坤
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维生素A的缺乏症，来源 维生素A的结构与性质
鉴别试验 杂质检查 含量测定
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维生素 缺乏病
维生素缺乏病（1）：维生素A
1. 导致眼部症状：夜盲、眼部干燥，严重导致失明 2. 导致皮肤症状：毛囊丘疹。 3. 生长发育障碍：临床表现为身高落后，牙齿生长缓慢，易发生
酸值
取乙醇与乙醚各15ml，置锥形瓶中， 加酚酞指示剂5滴，滴加氢氧化钠滴定 液（0.1mol/L）至显粉红色，再加本 品2.0g，振摇使溶解，用氢氧化钠滴 定液（0.1mol/L）滴定，酸值应不大 于2.0（附录VIIH）
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检查
过氧化值
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结构决定性质
溶解性（脂溶性） 不稳定性（多个不饱和键）
紫外吸收特性（共轭多烯醇的侧链 结构，最大吸收325-328nm ）
与三氯化锑呈色 维生素A在饱和无水三氯化锑的甲烷 溶液中即显蓝色，渐变成红色。
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鉴别试验
（一）三氯化锑反应(ChP2010)
换算因数
效价IU / g
E1% 1cm
cm
A32（8 校正） A328 100% A328
4）A值的 选择：
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含量测定
（皂化法）
2.皂化法：适用于维生素A醇的测定。
供1试）品方未法：明精纯密度称时取，一就定量会供出试现品含，量加测氢氧定化方钾法乙的醇溶 选 扰液过1择过m后、， 多l中煮浓直 时含沸缩接 ，维回等生法 直流处素，理比 接A得，皂 法为到最化却9的后-1法并皂用5单简不化异位单适液丙的再醇易用溶经溶操。液乙解作，醚残，在提渣3但取 并00只、稀、洗释要3涤成1干0、每、滤
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鉴别试验
（三）薄层色谱法
吸附剂：硅胶G 展开剂：环己烷-乙醇（80:20）
分别取供试品与对照品（不同维生素A 脂类）的环己烷溶液(5IU/μl)各2μl， 点于薄层板上，立即展开，空气中挥 干，喷以三氯化锑溶液，比较供试品 和对照品所显蓝色斑点位置。
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检查
机制：维生素A和氯化锑（Ⅲ）中存 在的亲电试剂氯化高锑（Ⅴ）作用 形成不稳定的蓝色碳正离子。
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方法：取维生素A油溶液1滴，加三氯 甲烷10ml振摇使溶解；取出两滴，加 三氯甲烷2ml与25%三氯化锑的三氯 甲烷溶液0.5ml，即显蓝色，渐变成 紫红色。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
鉴别试验
（二）紫外光谱法
方法：取约相当于10IU的 维生素A供试品，加无水乙 醇-盐酸（100:1）溶液溶 解，应在326nm的波长处 有单一的吸收峰。将此溶 液水浴加热30秒，迅速冷 却应，在348、367和389nm的波长处有三个尖 锐的吸收峰，且在332nm的波长处有较低的 吸收峰或拐点。
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含量测定
（直接测定法）
测定方法：直接测定法和皂化法
1.直接测定法：
直接测定法适用于纯度高的维生素A醋酸酯的测定。
1）方法：取维生素A醋酸酯适量，精密称定，加环己烷
制成每1ml中含9-15单位的溶液。然后在300、316、
328、340和360nm五个波长处分别测定吸光度，确定最
大吸收波长（应为328nm）。
2）计算：A.求 E1%cm：由A=E1%cm CL公式，求得E1%cm =A/(C×L)
BC..求求效维价生：素效A醋价酸（酯IU占/ g标）示 量E11c%的m 百19分00含量：注意：浓度单位
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含量测定
（直接测定法）
3）换算因子：每单位 E1%c数m 值所相当的效价。
取本品1.0g，加冰醋酸-三氯甲烷（6:4）30ml，振 摇使溶解，加碘化钾的饱和溶液1ml，振摇1分钟， 加水100ml与淀粉指示液1ml，用硫代硫酸钠滴定 液（0.01mol/L）滴定至紫蓝色消失，并将滴定的 结果用空白试验校正。消耗硫代硫酸钠滴定液 （0.01mol/L）不得过1.5ml。
13
1、杂质的吸收在310～340nm波长范围内呈一条直线，
且随波长的增大而吸收度变小 。
2、物质对光的吸收具有加和性。即样品各波长的吸收
度是维生素A与杂质吸收度的代数和 。
ക波长的选择：
（1）等波长差法：使 3 - 1 1 - 2
A （2）等吸收比法：使
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325、334nm波长处测定吸收度，并确定最大吸收波长 （应为325nm）
2）计算：A.求 E1%cm：由A=E1%cm CL公式，求得E1%cm =A/(C×L)
B.求效价：效价（IU
/
g）
E1% 1cm
1830
C.求维生素A醋酸酯占标示量的百分含量：
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含量测定
龋齿。 4. 影响生殖功能：影响女性受孕和怀胎 5. 易发生感染性疾病：消化道和呼吸道感染性疾病发生率增高，
且易迁延不愈。
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结构与性质
结构:为具有一个共轭多烯醇侧链的环 己烯。
天然维生素A主要是全反式维生素A。 R的不同则决定了维生素A的醇式或酯式状态。
（皂化法）
3）A值的选择：
一、当最大吸收波长不在323-327nm之间或 A300/A325的比值大于0.73时，应采用色谱法将未皂化 部分纯化后再进行测定。（供试品杂质含量过高） 二、当最大吸收波长在323-327nm之间，且 A300/A325的比值小于或等于0.73，对A值进行判别后 便可代入公式计算
为了得到准确的测定结果，消除非维生素A物质 的无关吸收所引起的误差，而求得维生素A的真 实含量。因此需要采用“三点校正法”。
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含量测定
（三点校正法）
三点校正法：是在三个波长处分别测定吸收度， 根据校正公式计算吸收度A校正后，再计算含量， 故本法称为“三点校正法”。
ക“三点校正法”测定原理
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含量测定
（一）紫外可见分光光度法 （二）高效液相色谱法 （三）三氯化锑比色法
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含量测定
（一）紫外可见分光光度法 （三点校正法）
对维生素A测定有影响的杂质有： （1）维生素A2和维生素A3 （2）维生素A的氧化产物：环氧化物、维生素A醛、维生 素A酸 （3）维生素A在光照条件下产生的无活性的聚合物：鲸醇 （4）维生素A的异构体及其他