急性毒性试验设计
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观察丙烯腈急性中毒症状；为后续试验 提供依据；为毒理学机制研究提供线索。
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6
器材与试剂
1、实验动物 ICR小鼠（健康成年小鼠） 2、实验器材 灌胃针、注射器、吸管、
容量瓶、烧杯、滴管、电子天平、动物 体重秤、外科剪刀、镊子 3、实验试剂 丙烯腈、苦味酸酒精饱和 液、伊红染液
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23
受试物的配制方法
（1）受试化学物的量取： 固体受试物用称量法，液体受试物用称量法或吸量法。
称量法：取一定量的受试物放入已知重量的容器内，称重， 定容，计算浓度mg/ml，备用。
吸量法：依设计剂量计算出应吸取液态受试物的容积，加入 容量瓶中，用溶剂加至刻度。
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24
吸量法，计算公式为：X＝ A ·V
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17
通过预试，找出受试化学物引起动物死亡 的大致剂量范围，以此为依据设计正式试验的剂量和 分组。
按下式设计剂量组：
r n 1 b a
式中：r—相邻两组剂量的比值，一般为1.2～
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1.5，
b—最低全致死剂量量，
a—最高不致死剂量，
n—设计的组数。
分组恰当与否也是确保实验结果准确的条件之
一。因为组数过多，需要消耗较多的动物，还可
急性毒性试验设计
组员：程旺、高思杰、后若兰 高阳、陈刚
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1
一、急性毒性
急性毒性指人或动物一次或24 h
之内多次接触外源化学物后，在短
期内所发生的毒性效应，包括致死
效应。
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2
一次：指瞬间给实验动物染毒，如经 口、经静脉注射染毒。
24 h之内多次：指外源化学物毒性过 低，需给予动物较大剂量。
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9
2、 实验动物的年龄与体重
动物
大鼠 小鼠 豚鼠 兔 犬 猫
成年年龄（周） 3 2 2 3~4 3~4 3~4
体重（克） 150 15 250 1.5kg 7~15kg 1kg
寿命（年） 2~3 2~3 6~8 4~9 15~20 10~12
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10
3、实验动物的一般要求
动物数量：动
7
实验方法
1、实验动物的选择 2、剂量设计及随机化分组 3、受试物的配制 4、染毒途径的选择 5、毒性反应的观察与LD50的计算 6、急性毒性的评价
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8
一、 实验动物选择
1、物种和品系
对外源化学物毒性反应与人近似易于饲养管理 方便实验 操作易于获得 繁殖生育力强 数量较大能够保障 品系纯化，价格低廉。
式中：
d×1000
X——应吸取受试物的容积；
A——设计要求的受试物浓度（ mg/ml ）；
V——容量瓶容积（ml）；
d——受试化学物比重；
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受试物的配制方法 （2）受试化学物的稀释 等浓度稀释法： 等容量稀释法：
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等浓度稀释法
将受试物配制成一种浓度，不同剂量组实验动物单 位体重所给受试物的体积不同，剂量越高，所用的 体积越大；剂量越低，所用的体积越小。比如某受 试物的试验剂量分别为100、200、400和 800mg/kg，受试物配制成10 mg/ml，每组动物 每10g体重分别给与0.1、0.2、0.4和0.8 ml。
能出现较大剂量组动物死亡率低于较小剂量组；
组数过少，不能较精确精求选p出pt LD50。
18
根据公比(r)计算各组剂量 各组剂量分别为 第一组：a 第二组：a r 第三组：a r2 第四组：a r3 第五组：a r4 第六组：a r5
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随机化分组
将实验动物编号，从随机数字表上任意横 行或纵行的任意数字开始，顺序取下数字， 标于每个动物号下，然后用计划组数去除 随机数字，所得余数即为所属组别。
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3
急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强 度与外源化学物的性质和染毒剂量的大小 有关。
如：丙烯腈，过氧化二碳酸二环己酯
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4
丙烯腈经口急性毒性试验设计
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5
实验目的
评价丙烯腈的毒性作用，求出半数致死 量LD50，并根据LD50进行急性毒性分级，
掌握实验动物随机分组的方法和经口灌 胃的技术。
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20
以20只动物的完全随机分配为例
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 随即数字 54 83 80 53 90 75 53 78 93 47 72 09 54 66 95 44 68 67 67 86 除4后余数 2 3 0 1 2 3 1 2 1 3 0 1 2 2 3 0 0 3 3 2 所属组别 二 三 四 一 二 三 一 二 一 三 四 一 二 二 三 四 四 三 三 二
物6组，1-5组为 实验组，6组为 蒸馏水对照组
性别：雌雄各半
年龄：成年动物
生理与健康状况：
未产未孕者、健康 动物
实验动物的预检
实验动物的给药 前禁食处理。
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11
健康动物标志
发育正常、体态丰满、外观无畸形； 被毛浓密、贴顺有光泽、不蓬乱； 胸阔宽阔、脊柱不弓不弯； 眼睛明亮； 表皮无溃疡、无结痂（注意尾巴）； 各天然孔干净、无分泌物； 行动灵活、反应敏捷。
10 %~90 %的大致致死剂量范围 ✓设计正式试验的剂量和分组
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16
预实验：
总的原则是先用少量动物，以较大的剂 量间距染毒，求出粗略的致死剂量范围， 即确定受试动物全部致死的最小剂量（b） 和全部不致死的最大剂量（a），即求出 待测化学物0 %~100 %的大致致死剂 量范围，然后在这个剂量范围内按几何 级数的间距设计5~7个剂量组，组间剂 量呈等比级数（r），其比值为1.2~1.5。 进行正式实验。
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完全随机分配后各组所属动物号
组别
动物编号
一4 7 二1 5
9 12 8 13 20 14
三 2 6 10 15 18 19
四 3 11 16 17
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22
20只动物完全随机分配的结果
组别
动物编号
一 4 7 9 12 19
二1 三2
5 8 13 14 6 10 15 18
四 3 11 16 17 20
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12
实验动物的标记
染色法
编号方法：小鼠头部为1号，顺时 针编号，用苦味酸编个位数，用伊 红编十位数。
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14
染色法
优点： 简单方便，不痛苦，无损伤。
缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。
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剂量选择及分组
剂量选择
✓广泛查阅文献资料，估计毒性中值 ✓预试，求出待测化学物0 %~100 %或
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器材与试剂
1、实验动物 ICR小鼠（健康成年小鼠） 2、实验器材 灌胃针、注射器、吸管、
容量瓶、烧杯、滴管、电子天平、动物 体重秤、外科剪刀、镊子 3、实验试剂 丙烯腈、苦味酸酒精饱和 液、伊红染液
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受试物的配制方法
（1）受试化学物的量取： 固体受试物用称量法，液体受试物用称量法或吸量法。
称量法：取一定量的受试物放入已知重量的容器内，称重， 定容，计算浓度mg/ml，备用。
吸量法：依设计剂量计算出应吸取液态受试物的容积，加入 容量瓶中，用溶剂加至刻度。
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吸量法，计算公式为：X＝ A ·V
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通过预试，找出受试化学物引起动物死亡 的大致剂量范围，以此为依据设计正式试验的剂量和 分组。
按下式设计剂量组：
r n 1 b a
式中：r—相邻两组剂量的比值，一般为1.2～
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1.5，
b—最低全致死剂量量，
a—最高不致死剂量，
n—设计的组数。
分组恰当与否也是确保实验结果准确的条件之
一。因为组数过多，需要消耗较多的动物，还可
急性毒性试验设计
组员：程旺、高思杰、后若兰 高阳、陈刚
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1
一、急性毒性
急性毒性指人或动物一次或24 h
之内多次接触外源化学物后，在短
期内所发生的毒性效应，包括致死
效应。
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一次：指瞬间给实验动物染毒，如经 口、经静脉注射染毒。
24 h之内多次：指外源化学物毒性过 低，需给予动物较大剂量。
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2、 实验动物的年龄与体重
动物
大鼠 小鼠 豚鼠 兔 犬 猫
成年年龄（周） 3 2 2 3~4 3~4 3~4
体重（克） 150 15 250 1.5kg 7~15kg 1kg
寿命（年） 2~3 2~3 6~8 4~9 15~20 10~12
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3、实验动物的一般要求
动物数量：动
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实验方法
1、实验动物的选择 2、剂量设计及随机化分组 3、受试物的配制 4、染毒途径的选择 5、毒性反应的观察与LD50的计算 6、急性毒性的评价
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一、 实验动物选择
1、物种和品系
对外源化学物毒性反应与人近似易于饲养管理 方便实验 操作易于获得 繁殖生育力强 数量较大能够保障 品系纯化，价格低廉。
式中：
d×1000
X——应吸取受试物的容积；
A——设计要求的受试物浓度（ mg/ml ）；
V——容量瓶容积（ml）；
d——受试化学物比重；
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受试物的配制方法 （2）受试化学物的稀释 等浓度稀释法： 等容量稀释法：
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等浓度稀释法
将受试物配制成一种浓度，不同剂量组实验动物单 位体重所给受试物的体积不同，剂量越高，所用的 体积越大；剂量越低，所用的体积越小。比如某受 试物的试验剂量分别为100、200、400和 800mg/kg，受试物配制成10 mg/ml，每组动物 每10g体重分别给与0.1、0.2、0.4和0.8 ml。
能出现较大剂量组动物死亡率低于较小剂量组；
组数过少，不能较精确精求选p出pt LD50。
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根据公比(r)计算各组剂量 各组剂量分别为 第一组：a 第二组：a r 第三组：a r2 第四组：a r3 第五组：a r4 第六组：a r5
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随机化分组
将实验动物编号，从随机数字表上任意横 行或纵行的任意数字开始，顺序取下数字， 标于每个动物号下，然后用计划组数去除 随机数字，所得余数即为所属组别。
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3
急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强 度与外源化学物的性质和染毒剂量的大小 有关。
如：丙烯腈，过氧化二碳酸二环己酯
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丙烯腈经口急性毒性试验设计
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实验目的
评价丙烯腈的毒性作用，求出半数致死 量LD50，并根据LD50进行急性毒性分级，
掌握实验动物随机分组的方法和经口灌 胃的技术。
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以20只动物的完全随机分配为例
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 随即数字 54 83 80 53 90 75 53 78 93 47 72 09 54 66 95 44 68 67 67 86 除4后余数 2 3 0 1 2 3 1 2 1 3 0 1 2 2 3 0 0 3 3 2 所属组别 二 三 四 一 二 三 一 二 一 三 四 一 二 二 三 四 四 三 三 二
物6组，1-5组为 实验组，6组为 蒸馏水对照组
性别：雌雄各半
年龄：成年动物
生理与健康状况：
未产未孕者、健康 动物
实验动物的预检
实验动物的给药 前禁食处理。
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健康动物标志
发育正常、体态丰满、外观无畸形； 被毛浓密、贴顺有光泽、不蓬乱； 胸阔宽阔、脊柱不弓不弯； 眼睛明亮； 表皮无溃疡、无结痂（注意尾巴）； 各天然孔干净、无分泌物； 行动灵活、反应敏捷。
10 %~90 %的大致致死剂量范围 ✓设计正式试验的剂量和分组
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预实验：
总的原则是先用少量动物，以较大的剂 量间距染毒，求出粗略的致死剂量范围， 即确定受试动物全部致死的最小剂量（b） 和全部不致死的最大剂量（a），即求出 待测化学物0 %~100 %的大致致死剂 量范围，然后在这个剂量范围内按几何 级数的间距设计5~7个剂量组，组间剂 量呈等比级数（r），其比值为1.2~1.5。 进行正式实验。
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完全随机分配后各组所属动物号
组别
动物编号
一4 7 二1 5
9 12 8 13 20 14
三 2 6 10 15 18 19
四 3 11 16 17
精选ppt
22
20只动物完全随机分配的结果
组别
动物编号
一 4 7 9 12 19
二1 三2
5 8 13 14 6 10 15 18
四 3 11 16 17 20
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实验动物的标记
染色法
编号方法：小鼠头部为1号，顺时 针编号，用苦味酸编个位数，用伊 红编十位数。
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14
染色法
优点： 简单方便，不痛苦，无损伤。
缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。
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剂量选择及分组
剂量选择
✓广泛查阅文献资料，估计毒性中值 ✓预试，求出待测化学物0 %~100 %或