色谱柱参数
色谱柱参数
色谱柱参数
色谱柱的参数主要包括以下几个方面：
1. 尺寸：包括长度、内径和壁厚。
色谱柱的长度一般在10-30厘米之间，内径一般在1-5毫米之间，壁厚一般在0.1-0.5毫米之间。
尺寸的选择取决于分离物的性质和分析要求。
2. 粒径：色谱柱内填充物的粒径。
粒径越小，表面积越大，分离效果越好，但压力也会增大。
常见的填充物粒径有3、5、10和15微米等。
3. 填充物化学性质：填充物可以是无机物如硅胶、氧化铝等，也可以是有机物如聚苯乙烯、聚乙烯醇等。
填充物的选择取决于被分离物的性质。
4. 凝胶类型：色谱柱可以是非凝胶柱，也可以是凝胶柱。
凝胶柱多用于大小分离，凝胶类型一般为聚丙烯酰胺凝胶。
5. 柱包装密度：色谱柱内填充物的包装密度影响着柱内流体的扩散和分离效果。
一般来说，包装密度越大，分离效果越好，但压力和时间也会增加。
6. pH范围：色谱柱的填充物和柱壁材料需要具有一定的化学稳定性，以适应不同pH值的条件。
7. 温度范围：色谱柱的填充物和柱壁材料需要具有一定的热稳定性，以适应不同温度的条件。
以上是常见的色谱柱参数，根据具体的分析要求和分离物的性质，选择合适的色谱柱参数是非常重要的。
色谱柱参数
色色谱谱柱柱的的参参数数
载碳量
硅胶表面键合相的比例 与比表面积，键合覆盖度等有关 对ODS，载碳量从7-18%（ODS-100Z为20%）不等 ODS的载碳量高， 则保留增加，适合分析非极性化合
物。制备色谱的上样量也可以增加 载碳量通常影响选择性
色色谱谱柱柱的的参参数数
硅胶表面性质-纯度
Super-ODS为2 μm 填料，UPLC为1.7 μm填料 3cm以下的制备色谱柱通常使用5-10 μm填料 更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径，如10 μm, 或20 μm
色色谱谱柱柱的的参参数数
孔径
孔径小，含孔率高，则 比表面积大，载碳量高
化合物在孔内分离 孔径大小必须和分子大小相匹配，分子必须能进入孔内，一般小分
CH3
monomeric bonding
柱效高, 平衡快
OH
CH3
+ X Si (CH2)17CH3
OH
X
稳定性好， 制备上样量大
polymeric bonding
R Si (CH2)17CH3 R
O
CH3
Si
O
(CH2)17CH3
色色谱谱柱柱的的参参数数
ODS柱的特征结构
色色谱谱柱柱的的参参数数
强极性化合物使用AQ色谱柱(ODS-100V) 高比表面积和载碳量可以提高制备色谱的上样
量
TTSSKKGGEELL反反相相色色谱谱柱柱选选择择一一览览表表
硅胶填料：
TSK-GEL
固定相
ODS-100V
C18
ODS-100Z
C18
ODS-100S
C18
ODS-120T
C18
如何选择正确的气相毛细管色谱柱型号及规格
气相毛细管柱是气相色谱柱中最常见，使用频率最多的色谱柱，常规的测试应用基本以此为主。
想要实验顺利选择合适的柱子非常重要。
一根合适的柱子才能保证我们能得到想要的色谱分离结果，错误的选择柱子可能会导致色谱峰间的分离度或者理论塔板数无法达到我们的测试要求。
选择合适的柱子第一要素是我们需要了解色谱柱的规格参数。
毛细管柱的规格参数是什么呢？那就是长度、内径和膜厚，以及固定相种类。
当拿到一根柱子，首先会看到一个CD-5，30m*0.25mm*0.25um类似这样的标识。
它表示：这些参数是固定的吗？当然不是，格式是固定的，但是里面的型号是可以改变的。
柱子长度关于毛细管柱，商品化柱子长度可以从5米至100米不等，我们可以根据自己的实验需求选择合适的长度规格，选择依据一般是组分越简单柱长越短，所以100米规格的色谱柱并不多，除一些专用柱除外。
最常见的色谱柱长度规格是30m。
长度会影响色谱柱的分析时间，快速分析时建议选择短柱子（5米、10米、15米）。
在内径和膜厚相同的情况下，一般长柱子可以提高分离度，当然分析时间也会相应增加。
例如60米柱子与30米柱子相比，分离时间可能是其两倍。
另外色谱柱越长也会增加柱流失、影响柱惰性。
内径规格关于毛细管柱，商品化柱子内径规格有0.1毫米、0.15毫米、0.18毫米、0.2毫米、0.25毫米、0.32毫米、0.45毫米、0.53毫米、0.8毫米。
色谱柱内径的大小对分离效果的影响非常明显，内径越小色谱柱的塔板数就越高，柱效越高。
但是载样量会减少。
使用细柱子需要关注载样量，过载就会导致柱效降低。
经过专家和学者以及实验人员长期的实验摸索，累计的经验是：痕量级杂质的分析多选用0.53毫米内径的色谱柱。
0.32毫米色谱柱可以相对兼顾到进样量和柱效。
实验室最常用的规格是0.25mm内径色谱柱。
一般GC/MS中使用的柱子大多是0.25mm内径。
此外，对于快速分析来说，0.1mm和0.2mm最有优势。
气相色谱柱柱长30米和60米等效
气相色谱柱柱长30米和60米等效气相色谱柱是一种在化学分析领域中常用的分离工具。
它的主要作用是将混合物中的各种组分分离开来，从而可以进一步进行定量或定性分析。
在气相色谱仪中，色谱柱被用来分离气体样品中的组分。
气相色谱柱的柱长是一个重要的参数，它决定了分离效果的好坏。
一般来说，柱长越长，分离效果越好。
分离效果好的柱子可以更好地将混合物中的组分分离开来，从而提高分析仪器的灵敏度和分析结果的准确性。
柱长30米和60米等效是指在某些特定条件下，柱长为30米的柱子和柱长为60米的柱子可以达到相同的分离效果。
这是通过调整柱子的其他参数，例如内径、填料等来实现的。
柱子的内径也是一个重要的参数。
一般来说，内径越小，分离效果越好。
这是因为小内径可以提供更高的柱效（plate number），从而提高柱子的分离效力。
但是，小内径的柱子通常需要更高的流速来达到相同的分离效果，因此需要更高的载气流量和更高的分析仪器的温度。
填料也是一个重要的参数。
填料的种类和粒径大小都会影响分离效果。
一般来说，填料越细，分离效果越好。
这是因为细小的填料提供了更大的表面积，从而增加了柱效。
但是，细小的填料也会导致背压的增加，因此需要更高的载气流量和较高的分析仪器温度。
除了柱长、内径和填料，其他一些参数也会影响色谱柱的分离效果。
例如，流速、柱温和检测器的参数等。
这些参数都需要仔细调整，以保证良好的分离效果。
总之，气相色谱柱的柱长是一个重要的参数，决定了灵敏度和准确性。
柱长30米和60米等效是通过调整其他参数来实现的。
柱子的内径、填料和其他一些参数也会影响分离效果。
因此，在使用气相色谱柱时，需要仔细选择和调整这些参数，以获得最佳的分离效果。
色谱柱说明书-反相系列色谱柱 (RPC)
反相系列色谱柱(RPC)使用说明书1. 适用范围以硅胶为基质，表面键合C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C1(SAS)、C6H5(Phenyl)官能团的反相色谱（RPC, Reversed Phase Chromatography ）填料的系列色谱柱。
2.性能验收收到色谱柱，开箱检验确认后，请尽快按照色谱柱评价报告中的色谱条件进行测试，以确认色谱柱品质。
样品：① 尿嘧啶(5.0×10-6g/mL) ② 苯乙酮(2.0×10-5g/mL) ③ 甲苯(7.5×10-4g/mL) ④ 乙苯(6.0×10-4g/mL) ⑤ 芴(1.0×10-5g/mL)样品均使用流动相溶解及稀释。
注：如上述条件与色谱柱检测报告不一致，以检测报告为准。
3.色谱柱连接色谱柱入口和出口按色谱柱标签箭头所示方向连接。
色谱柱连接管端口部分必须平整，不能出现毛刺和切口斜面等现象。
在可能的条件下，色谱柱两端的连接管路要尽可能短，连接管内径应尽可能小，以防止因样品扩散造成不能反映色谱柱真实柱效等情况发生。
4. 使用pH 值范围和耐水性常规色谱柱使用pH 值范围是2.0~8.0，特殊填料色谱柱pH 值使用范围更宽，如Supersil 系列为1.5~10，SinoPak 系列为1~12。
常规色谱柱是使用水相不高于90%，特殊处理的填料色谱柱耐水性更高，如SinoChrom ODS-BP 色谱柱最高使用水相比例可达95%，AQ 系列色谱柱可以使用100%水相。
5.使用温度范围推荐使用温度不高于60℃。
当使用磷酸盐缓冲液，在中等或高pH 值操作时，建议柱温不要超过40℃。
使用中避免温度突然升高。
6.色谱柱储存过夜或短时间储存：使用缓冲溶液或含盐流动相时，需要用10%~20%甲醇/水或乙腈/水将色谱柱和系统内流动相置换，色谱柱储存溶剂中有机溶剂浓度不低于20%。
长时间储存：可以用纯甲醇或纯乙腈储存，并将色谱柱堵头拧紧。
Waters紫外检测器及色谱柱技术参数
Waters紫外检测器及色谱柱技术参数
1紫外可见检测器（2489型）
1.1*波长、极性和灯源开关均可时间编程控制
1.2内置硝酸铒滤光片用于波长校准及校正，紫外光、可见光都可以校正。
用256.7nm、379.0nm、521.5nm及656.1nm共四个波长校正。
开机时
校准，随时可以进行校正
1.3*可变波长范围：190～700nm
1.4*检测通道：2个
1.5*光源：氘灯
1.6*波长准确度：±1nm
1.7*带宽：5nm
1.8*测量范围：0.0001～4.0000AUFS
1.9耐压：1000psi
1.10*基线噪音：±0.35x10-5AU，254nm在1mL/min（甲醇）
1.11基线噪音：双通道±1.0x10-5AU，230nm，280nm
1.12*漂移：1 x 10-4AU/hour
1.13*梯形狭缝的光路设计，从硬件上消除示差折光效应
1.14*具有操作面板，可以独立设定工作参数、显示运行状态
1.15*分析池：10mm池长
1.16*半制备流通池：3mm池长
2 色谱柱：C18色谱柱，4.6*150mm 1根，。
db5ms色谱柱参数
db5ms色谱柱参数
DB5MS色谱柱是一种常用的气相色谱柱，其参数包括：
1. 柱长：通常为30米，也有较短或较长的规格可供选择。
2. 内径：一般为0.25毫米或0.32毫米，内径越小，分辨率越高，但流速会减慢。
3. 相位：DB5MS色谱柱的相位为5%Phenyl
95%Methylpolysiloxane，具有良好的热稳定性和化学惰性，适用于分析各种有机化合物。
4. 膜厚：DB5MS色谱柱的膜厚一般为0.25微米，也有较厚或较薄的规格可供选择。
5. 压力：DB5MS色谱柱的最大使用压力一般为120psi，但实际使用时应根据具体情况进行调整。
6. 温度：DB5MS色谱柱的最大使用温度一般为320℃，但实际使用时应根据具体情况进行调整。
7. 应用：DB5MS色谱柱适用于分析石油、化工、食品、医药等领域中的有机化合物，如烃类、酯类、醇类、酮类、酸类等。
- 1 -。
气相色谱-2-气相色谱柱
气液分配色谱柱
担体 定义：担体又称为载体，是一种化学惰性、多孔性的固体颗粒。 作用：提供一个大的惰性表面，用以承担固定液，使固定液以 薄膜状态分布在其表面上。
担体的要求： ①比表面积大，孔径分布均匀； ②化学惰性，表面无吸附性或吸附性很弱，与被分离组份不起 反应； ③具有较高的热稳定性和机械强度，不易破碎； ④ 颗粒大小应均匀、适度，这样有利于提高柱效。但颗粒过细， 使柱压降增大，不利于操作。一般常用60~80目、80~100目。
0.1mm 0.25mm 0.32mm
0.53mm
快速GC 快速分离 对仪 器要求高
窄径
分流进样
GC/MS应用 较高柱效
宽径
分流/不分流进样
能承受较大体积进样
大口径 可替代填充柱 能承受较大体积进样
痕量分析
（4）1.0um：膜厚 膜厚度增加，柱容量增加，但 洗脱组分慢，峰分离差，柱流失增加，柱极限温 度降低
内径 /mm
2-5
0.10.53
常用 长度 /m
0.5-3
每米柱 效/n
约1000
10-60 约3000
柱材料 柱容 程序升 量 温应用
玻璃、 不锈钢
熔融石 英
mg级
﹤100 ng
基线漂 移
基线稳 定
固定相
载体+固定 液
固定液
总结：毛细管柱分离效果好，柱效高，但柱容量低，分析时间较长；填 充柱柱容量大，分析时间较短，但分离效果差，柱效低
g 适宜分析强极性物质和腐蚀性物质
担体的处理 1.原因 硅藻土型担体具有细孔结构，并呈现不同的PH，故担体表 面既有吸附活性，又有催化活性。如涂上极性固定液，会造成 固定液分布不均匀。分析极性试样时，由于与活性中心的相互 作用，会造成色谱峰拖尾。而在分析萜烯、二烯、含氮杂环化 物、氨基酸衍生物等化学活泼的试样时，都有可能发生化学变 化和不可逆吸附。因此在分析这些试样时，担体需加以钝化处 理，以改进担体孔隙结构，屏蔽活性中心，提高柱效。
色谱柱的选择技巧与原则
色谱柱选择
参照标准
各种担体，名目繁多。
在常用硅藻土担体中：
红色担体（如6201、201），可用于非极性或弱极性物质的分离。
白色担体（如101）可用于极性物质或碱性物质。
釉化红色担体（如301）可用于中等极性物质。
硅烷化白色担体可用于强极性氢键型物质如废水测定。
分离酸性物质，如酚类，要用酸洗处理的担体。
分离碱性物质，如乙醇胺，要用碱洗处理的担体。
有些特殊的情况下要用特殊的担体，如氟担体分离异氰酸酯类。
但是在普通的常量分析中，对担体可以不必过份讲究，甚至如耐火砖粉粒，玻璃珠砂和海沙也可以使用。
色谱峰,色谱柱及参数
死时间(dead time，t0)--不保留组分的保留时间。
即流动相（溶剂）通过色谱柱的时间。
在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。
死体积(dead volume，V0)--由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。
它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被流动相占据，Vm）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。
其中只有Vm参与色谱平衡过程，其它3部分只起峰扩展作用。
为防止峰扩展，这3部分体积应尽量减小。
V0＝F×t0（F为流速）梯度方法的建立：)1(N a 1-a 41Rs --+=kk ）（)15.1/(∆Φ=-m G V F t kRs ：分离度，表示两峰分离程度的物理量。
k ：容量因子，表示某溶质在固定相和流动相中物质的量的比，在等度洗脱中。
一种物质的k 值是恒定不变的。
上面两试针对的是梯度洗脱，k 表示的平均容量因子。
a ：分离因子，两个溶质的容量因子的比。
通常k 大的作为分子。
表示两物质分离能力的大小。
N ：理论塔板数，表示柱子的分离能力，也就是柱效。
G t ：梯度时间；F ：流速；m V ：死体积；∆Φ：梯度变化范围。
常见问题和维护：整个液相系统最值得关注的常数：压力除体系受到污染之外，几乎所有柱前的问题都能在压力变化上表现出来。
压力来源：泵上的压力传感器最常见的问题： 压力小（几乎为零）：说明没有流动相流过柱子。
可能原因： 柱前漏夜 流速设为0了 流动相干了吸滤头没有放流动相液面之下 流路中有大段气泡处理方法： 漏液：从泵的出口到柱子的前端接口（柱后漏液几乎不会影响压力值）顺次检查。
泵上有自己的漏液传感器。
检测到漏液。
会停止工作并蜂鸣，变红。
同时显示错误信息：ERROR ：LEAK DETECTED 。
发现漏液点，先停泵，重新接好。
将漏液擦干。
有的漏液不明显，这时压力的也不会太小，检查时要注意，可用手仔细摸各个接口，感觉是否湿冷。
流路中有大段气泡：通过大流速（如5ml/min ）冲洗可以去除泵体内气泡。
选择毛细管色谱柱要注意四个基本参数
选择毛细管色谱柱要注意四个基本参数
一、固定液
非极性：SE30*，OV101，SE54*
中极性：OV17，XE60*，OV1701*
极性：PEG20M*，FFAP*，DEGS*
二、柱内经（mm）
0.2~0.25柱效高、负荷量低、流失小
0.3~0.35负荷量大于毛细口径柱60%，柱效低
0.53~0.6大口径毛细柱，负荷量近似填充柱，总柱效远远超过填充柱，分析速度快
三、柱长（m）
短柱10~15米分离少于10个组份的样品
中长柱20~30米分离10~15个组份的样品
长柱50米以上分离50个组份以上的样品
四、液膜厚度（μm）
薄液膜0.1~0.2μm 低负荷量、高沸点化合物
标准液膜0.25~0.33μm 一般标准毛细柱分析
厚液膜0.5~1μm 符合量较大，低沸点样品
特厚液膜1~5μm 取代填充柱，分析沸点200℃以下复杂样品。
气相色谱柱选择指南
气相色谱柱选择指南气相色谱柱是气相色谱仪的重要组成部分，直接关系到气相色谱分析的效果。
选择合适的气相色谱柱对于提高分离分析的效果，提高检测灵敏度和分析速度非常重要。
本文将从样品特性、分析目标、柱类型和柱配置等方面介绍气相色谱柱的选择指南。
一、样品特性选择合适的气相色谱柱首先要根据样品的特性进行分析。
样品的挥发性、极性、热稳定性、溶解性等特性将直接影响到柱的选择。
1.挥发性：对于易挥发的样品，可选择非极性柱，如HP-5、DB-5等；对于不易挥发的样品，可选择极性柱，如DB-WAX等。
2. 极性：若样品中存在极性化合物，应选择具有极性功能基团的柱，如DB-WAX、DB-WAXms等；若样品为非极性化合物，可使用非极性柱，如HP-5、DB-5等。
3. 热稳定性：对于热稳定性不强的物质，应选择具有较高耐温性能的柱材，如HP-5ms、DB-5ms等。
4.溶解性：柱的柱液涂覆物和样品之间应有良好的相容性，确保样品能够溶解在柱液中进行分析。
二、分析目标根据分析目标的不同，选择适合的柱可以达到更好的分离效果和分析结果。
1.定性分析：对于希望更好地分离和鉴定目标物质的情况，应选择具有更好分离度和分辨率的柱。
2.定量分析：对于需要精确测量目标物质浓度的情况，应选择具有良好重现性和线性范围的柱，确保结果的准确性。
三、柱类型常见的气相色谱柱可分为非极性柱、极性柱和中极性柱三类。
非极性柱适用于分离非极性和挥发性化合物；极性柱适用于分离极性和疏水性较强的化合物；中极性柱适用于中等极性的化合物。
常见的气相色谱柱牌号有HP-5、DB-5、DB-5MS、HP-1、DB-1、DB-1701等。
四、柱配置柱配置是指柱长、内径、膜厚等参数的选择。
不同的参数组合可以调节分离效果和分析速度。
1.柱长：柱长一般选择30m、60m、80m等，柱长越长，分离度越高，但分析时间也越长。
2. 内径：内径通常为0.25mm、0.32mm等，内径越小，分辨率越高，但拖尾效应可能会增加。
液相色谱柱介绍
液相色谱柱介绍
液相色谱柱介绍
液相色谱柱是一种在分析化学中广泛使用的重要工具。
它主要用于将物质按照化学性质分离、提纯和分析。
下面，我们来介绍一下液相色谱柱的几个重要方面。
1. 液相色谱柱的分类
根据分离机理，液相色谱柱可分为亲水性、疏水性、离子交换、手性分离等不同类型。
其中，亲水性柱适用于水溶性或极性分子的分离，疏水性柱适用于非极性分子的分离，离子交换柱适用于带电分子的分离，手性分离柱则适用于手性分子的分离。
此外，还有尺寸排除柱、反相柱等类型。
2. 液相色谱柱的构成
液相色谱柱主要由柱体、填料和环保套管三部分构成。
其中，柱体分为不锈钢、玻璃、陶瓷、塑料等不同材质，填料则是分离混合物的关键，一般为硅胶、C18、C8、环氧等不同材料。
环保套管主要用于保护柱体和填料不受污染。
3. 液相色谱柱的参数
液相色谱柱的性能参数又分为三类，一是理论板数，可以反映柱的分离效果；二是保留指数，可以反映分离物质在柱中停留时间的长短；三是分离度，主要反映柱体表面能力的强弱。
4. 液相色谱柱的使用注意事项
(1) 对于新装柱、新购买的柱或长时间未使用的柱，在使用前需要进行一定的前处理。
(2) 液相色谱柱需要严格管控温度，避免影响分离效果。
(3) 液相色谱柱使用后，需要彻底的清洗和保养，以保证下次使用的分离效果。
综上所述，液相色谱柱是分析化学中必不可少的重要工具，通过合理选择不同类型的色谱柱，可以有效地分离、提纯和分析化学材料，进而为工业和科学研究提供宝贵的支持和帮助。
色谱柱的四个参数
色谱柱是气相色谱和液相色谱中的核心部件之一，其性能的优劣直接影响到分离效果和分析精度。
色谱柱的四个参数是：柱长、柱径、填充物的性质和柱的类型。
1. 柱长：柱长是指色谱柱的长度，一般用毫米（mm）表示。
柱长的选择与待测样品的分子量、分离效率、分离度、峰形等有关。
通常情况下，柱长越长分离效果越好，但分离时间也会相应增加。
2. 柱径：柱径是指色谱柱的内径，一般用毫米（mm）表示。
柱径的选择与待测样品的分子量、分离效率、分离度、峰形等有关。
通常情况下，柱径越小分离效果越好，但分离时间也会相应增加。
3. 填充物的性质：色谱柱的填充物是指填充在柱内的材料，其性质直接影响到分离效果和分析精度。
常见的填充物有硅胶、氨基硅胶、碳氢化合物、聚合物等。
不同的填充物对待测样品的分离效果和分析精度都有不同的影响。
4. 柱的类型：色谱柱的类型包括常规柱、毛细管柱、填充柱等。
不同类型的柱适用于不同的分离和分析需求，选择合适的柱型可以提高分离效果和分析精度。
waters hss t3色谱柱说明书
waters hss t3色谱柱说明书全文共四篇示例，供您参考第一篇示例：一、引言色谱柱是液相色谱技术中至关重要的部分，它直接影响到色谱分离的效果与结果。
Waters HSS T3色谱柱作为Waters公司的一款重要产品，具有高效分离、优异耐久性和广泛适用性等特点，受到了广泛的关注和应用。
本文将详细介绍Waters HSS T3色谱柱的特点、使用方法以及注意事项，希望能够帮助用户更好地了解和使用该产品。
二、产品特点1. 高效分离：Waters HSS T3色谱柱采用特殊的填料材料和粒径分布，具有优异的分离能力，能够有效解决样品分析中的复杂性和交叉干扰问题。
2. 广泛适用：该色谱柱适用于多种样品类型的分离，包括有机物、药物、生物样品等，具有很强的通用性。
3. 耐久稳定：Waters HSS T3色谱柱具有良好的耐久性和稳定性，能够承受高压和多次重复使用，保证分析结果的可靠性。
4. 高分辨率：由于HSS T3色谱柱的独特设计和材料特性，使得其在保证分离效果的能够提供高分辨率的分析结果，有利于样品成分的准确检测和定量分析。
5. 良好的再生性：Waters HSS T3色谱柱在适当条件下具有良好的再生性能，可以反复使用，延长色谱柱的使用寿命，降低分析成本。
三、使用方法1. 准备工作：在使用Waters HSS T3色谱柱前，应先进行适当的准备工作，包括浸泡、平衡和洗脱等步骤，以确保色谱柱内部的填料材料和介质处于最佳状态。
2. 样品预处理：对于不同类型的样品，需进行相应的预处理工作，如溶解、过滤、稀释等，以确保样品的纯度和适用性，避免对色谱柱造成不必要的损坏或污染。
3. 流动相选择：根据样品类型及分析要求，选择合适的流动相，并根据需要进行适当的调节和混合，以保证在色谱分离过程中的稳定性和有效性。
4. 良好的保养：在使用完成后，应及时对色谱柱进行适当的保养和再生，包括冲洗、干燥、存放等步骤，以保证色谱柱的长期稳定性和再生性能。
色谱柱的构造性能
色谱柱的构造性能色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。
构造色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。
柱管多用不锈钢制成，压力不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。
为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。
也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。
还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。
色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20μm （5~10&μm），取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类，尺寸规格也不同：①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm（常用4.6mm，国内有4mm和5mm），柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore，又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径>5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm；⑥生产制备柱内径可达几十厘米。
柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定，目的是为了避免管壁效应。
性能评价色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。
在正常条件下，填料粒度>20μm时，干法填充制备柱较为合适；颗粒<20μm 时，湿法填充较为理想。
填充方法一般有4种：①高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；②径向加压法；③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；④干法。
柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。
必须指出，高效液相色谱柱的获得，装填技术是重要环节，但根本问题还在于填料本身性能的优劣，以及配套的色谱仪系统的的结构是否合理。
无论是自己装填的还是购买的色谱柱，使用前都要对其性能进行考察，使用期间或放置一段时间后也要重新检查。
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色谱柱的参数 色谱柱的参数
色谱柱的参数 色谱柱的参数 载碳量
硅胶表面键合相的比例 与比表面积，键合覆盖度等有关 对ODS，载碳量从7-18%（ODS-100Z为20%）不等 ODS的载碳量高， 则保留增加，适合分析非极性化合 物。制备色谱的上样量也可以增加 载碳量通常影响选择性
色谱柱的参数 色谱柱的参数
硅胶表面性质-纯度
柱的化学性质
样品性质决定柱的化学性质 样品性质决定柱的化学性质
样品结构 溶解性（有机溶剂、水） pH值 极性 酸碱性 分子量
分离目的决定柱的物理性质 分离目的决定柱的物理性质
分析? 制备? 快速分析?（如Super-ODS） 含量分析? 杂质检验? 所有组分分离?
色谱柱的参数 色谱柱的参数
柱长、内径
色谱柱的参数 色谱柱的参数
粒径
粒径越小，分离越快, 柱效越高。但柱压力越高，柱容易被污染， 寿命低 LC-MS和常规分析柱通常使用5 μm填料。3 μm填料使用的困难程 度大，一般非必要时不使用(ODS-100V) Super-ODS为2 μm 填料，UPLC为1.7 μm填料 3cm以下的制备色谱柱通常使用5-10 μm填料 更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径，如10 μm, 或20 μm
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端的效果：
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端-高封端的ODS色谱柱
pH使用范围宽 极性基团封端的色谱柱可以在高水相流动相条件下使用，适合分离 极性化合物 残留的硅醇基影响最小，碱性化合物不拖尾 改善选择性 一般优先使用高封端的色谱柱
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端-低封端或不封端的ODS色谱柱
色谱柱的参数 色谱柱的参数
孔径
孔径小，含孔率高，则 比表面积大，载碳量高 化合物在孔内分离 孔径大小必须和分子大小相匹配，分子必须能进入孔内，一般小分 子使用80-120A， 大分子通常使用300A。为了达到最佳分离,一般 要求孔径直径是分子直径的3倍以上
色谱柱的参数 色谱柱的参数
比表面积
每克填料的表面积 与粒度、含孔率有关 比表面积大，会增加样品与键合相之间的反应，增加保留、分离 度和制备时的上样量 比表面积小可以缩短分析时间和梯度时的平衡时间 并不是比表面积大或者小就更好，选择适合目的的比表面积
monomeric bonding
R Si (CH2)17 CH3 R
柱效高, 平衡快
OH + OH CH3
polymeric
O
bonding
CH3 Si (CH2)17 CH3
X Si (CH2)17 CH3 X
O
稳定性好， 制备上样量大
色谱柱的参数 色谱柱的参数
ODS柱的特征结构
色谱柱的参数 色谱柱的参数 封端
色谱柱的参数 色谱柱的参数
R
最常用的ODS色谱柱
R为非极性基团, 为通用型色谱柱
Si (CH2)17 CH3 R
如果R为强极性基团, 为通常说的AQ”水性”柱, 可以走纯 水,用于强极性化合物（ODS-100V可以走纯水）
色谱柱的参数 色谱柱的参数
键合方式
CH3 OH + X Si (CH2)17 CH3 CH3
可用于100%的水相（C18链疏水，在纯水相中会倒塌 导致保留降低，因此AQ色谱柱中都有极性的亲水集团 或低封端） 因为硅醇基的影响，对极性相同的化合物有特殊选择性
如何选择合适的色谱柱 如何选择合适的色谱柱
选用高纯硅胶基质的色谱柱 对碱性化合物，选择高封端的色谱柱 高pH值使用时，需要使用特殊封端的色谱柱， 以保证柱寿命，改善峰形(ODS-100S) 大分子量的化合物，需要大孔径的色谱柱 尽量使用低pH值，以减少硅醇基的作用 不同品牌的色谱柱往往有不同的选择性
一般柱长2.0-250mm，柱越长，分离度越高，但柱压更高，分离所 需时间更长 分离度与理论 塔板数的平方根成正比，所以增加柱长并不是最有 效的分离手段。一般情况下15cm, 5um的填料可以提供足够的塔板 数 内径：1-2mm LC-MS柱，4.6mm分析柱，10mm以上的半 制备和 制备色谱柱 HPLC仪器的柱外效应-不同的仪器设备配置有相应的最佳流速，因 此适用于不同内径的色谱柱
目的： 减小残留硅醇基
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端
未封端的Si-OH 基团是碱性化合物拖尾的主要原因 酸性条件下，氢离子通过未封端的Si-OH 的间隙进攻O-Si键，导致填料水解 封端的基团会影响色谱柱的使用pH值、对化合物的选择 性等
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端技术
使用小分子硅烷保护残留Si-OH 通过R1基团空间位阻保护残留Si-OH 如使用异丙基代替甲基 通过键合相之间的连接保护残留Si-OH 多次封端
硅胶填料： TSK-GEL 固定相 粒径 (μm) 炭含量 孔径（埃） 理论塔 板数 保 持 力 封端处理 耐久 性 主要特征、用途 ODS首选柱；对碱性化合 物分析效果特别好；适于 极性化合物的分析；可适 用100%水相；LC/MS系统 通用型ODS柱；对酸性、 中性、碱性化合物分析效 果好；适于中性和疏水性 化合物的分析 通用型、多层ODS柱的标 准；良好的化学稳定性（ 耐酸、碱） 通用型高性能柱；炭含量 最高；在有机溶剂多的流 动相中发挥威力 炭含量高的高性能柱；可 发挥填料的离子作用；表 面识别能力强，适于分析 芳香族化合物等
色谱柱的参数 色谱柱的参数 键合相
超过80%的样品可以使用反相色谱分离，一般方法开发也首先使用 反相色谱 C18， C8，C4等反相色谱，从C18到C8，C4，对化合物的保留降 低 NH2， CN等可用于正相，也可以用于反相 键合试剂不同，对化合物的选择性不同
方法开发时, 长链的烷基键合相(C18,C8)比短链的(C4,C3) 稳定；非极性的键合相比极性的键合相(-NH2)稳定
色谱柱的参数 色谱柱的参数
基质
硅胶： 最通用的基质，强度大，化学修饰容易，但使用的pH值范围 有限（一般为2-8， 特殊修饰的可以使用到1-12）。 下面的介绍也 主要是基于硅胶基质的色谱柱技术 聚合物基质：化学稳定，应用 pH范围宽, 但强度不够大， 批重复 性相对较差。 商品化的色谱柱不多，价格较贵，如Octadecyl-2PW 球型: HPLC 使用 无定型: 中压色谱使用
HPLC 色 谱 柱 选 择
东曹达（上海）贸易有限公司
色谱柱的选择 色谱柱的选择
HPLC 方法开发时首先要: 了解方法的目的（分析？制备？） 了解样品性质（极性？酸碱性？） 选择合适的色谱柱
色谱柱的选择 色谱柱的选择
色谱柱和流动相的选择是色谱技术的核心之一 色谱柱的选择是方法开发的一个重要环节 选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需要的 时间、并且使开发的方法更稳定 在不合适的色谱柱上进行方法开发通常需要更 长的时间、并且成功率较低
色谱柱的参数 色谱柱的参数
色谱柱的参数远比一般认为的要多：
柱长， 内径， 例如250*4.6mm. 粒径， 3um, 5um, 10um等 柱的物理性质 孔径，60A，80A，100A，120A等 比表面积， 180m2/g-350m2/g（ODS-100V为450m2/g） 基质：硅胶，聚合物等 硅胶表面性质 载碳量， 10-20%(ODS-120T为22%) 键合试剂， C18,C8, CN等 封端
硅胶表面性质-硅醇基
硅醇基的酸性较大,可与碱性化合物牢固的结合, 因此含有较多残留 硅醇基的填料在分离碱性化合物时容易产生脱尾、变宽、保留延长 等现象（ODS-100V\Z都进行了彻底封端） 加入适当的扫尾剂如三乙胺可以掩蔽残留的硅醇基, 使碱性化合物 峰形变好 降低流动相pH值小于3,可以减小硅醇基的反应, 从而减小拖尾现象
如何选择合适的色谱柱 如何选择合适的色谱柱
详细阅读色谱柱的说明，了解各种色谱柱的参 数和性质 了解化合物性质：极性，酸碱性，杂质的性质 等 强极性化合物使用AQ色谱柱(ODS-100V) 高比表面积和载碳量可以提高制备色谱的上样 量
TSKGEL反相色谱柱选择一览表 TSKGEL反相色谱柱选择一览表
ODS-100V
C18
3,5Biblioteka 15% (单层)100
高
好
彻底
好
ODS-100Z
C18
5
20% (单层)
100
高
好
彻底
好
ODS-100S
C18
5
18% (多层)
100
高
好
较好
好
ODS-120T
C18
5
22% (多层)
120
高
好
一般
一般
ODS-120A
C18
5
20% (多层)
120
高
好
未处理
一般