第一章 绪论(组织学与胚胎学)
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（3）激光共聚焦显微镜术 （4）冷冻蚀刻技术
（5）显微分光光度计
（6）隧道电子显微镜等
四、学习方法
兴趣 看书 其它
思考题
• 组织学的主要研究内容是什么？
• 组织和器官分别是如何构成的？人体有哪几种 基本组织？ • 何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、PAS反应？
• 组织学有哪些常用方法和技术？
1、在H-E染色的切片上，正确的结果是
3、组织化学术
• 已知物 + 组织中待检物质
（多糖、酶、脂类、核酸）
有色沉淀
如：PAS反应 ( periodic acid Schiff reaction)： 是确定组织或细胞中有无多糖的方法。原理： 多糖
PA Schiff 试剂
醛
氧化
紫红色沉淀
4、其他组织学技术
（1）细胞培养和组织工程
( 2 ) 流式细胞术
2、细胞学说和组织学的建立
• 提出：Schwann和Schleiden（1838、1839）
• 内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着
复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生。 • 切片技术使组织学成为一门独立的学科。（显微水平）
3、电子显微镜简称电镜（EM）的发明与超微结构的发现 • 发明：1932 年，Ruska、Knoll，德国人。 • 超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞 器、染色体等亚细胞结构 4、当代组织学 • 新仪器、新技术的发明和应用，如流式细胞仪、图像分 析仪、激光共聚焦扫描仪等。 • 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平。 • 组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景。
frozen section celoidin section
涂片smear：
血液 分泌物…… 铺片strecthed preparation： 疏松结缔组织 肠系膜、胸膜、腹膜…… 磨片ground section： 骨、牙
石蜡切片的制作技术
1、取材与固定( fixation ) 2、脱水(dehydration)与包埋(embedding) 3、切片(section)与染色(staining)
Zygote---------------------------------------→baby
二、组织学的发展历史
!!!
三、组织学研究技术
1、光镜技术(LM)
切片section：
分辨率从人眼 0.2 mm提高0.2um 把人类从宏观世界带入了微观世界
※石蜡切片
冰冻切片 火棉胶切片
paraffin section
免疫组织化学（immunohistochemistry）
• 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中肽 或蛋白质等具有抗原性物质的分布。
•
用标记的抗体与组织中的抗原结合，并沉淀于原位，后
在显微镜下观察。一般常用的标记物有荧光素（荧光显
微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶
体金（多用于电镜观察）。
4、封固 mounting
染色
常用 HE染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色
碱性染料 将酸性物质染成紫蓝色
酸性染料 将碱性物质染成红色 多数细胞的细胞质（如线粒
体、溶酶体、滑面内质网）
细胞核中的染色质 细胞质中的核糖体
细胞外基质 嗜酸性
嗜碱性
※嗜碱性(basophilia):
养；培养组织块或器官则称组织培养术或器官培养术。
• 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功
能变化，各种理化因子对活细胞的影响。
• 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和 CO2浓度、温度，控制污染。 • 用相差显微镜观察。
（2）组织工程（tissue engineering） • 用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术 • 正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角 膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治 疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病 • 研究包括四个方面： ① 种子细胞 ② 细胞外基质 ③ 构建组织或器官
甲苯胺蓝—— 糖胺多糖 苏丹法—— 脂肪 氯化金法—— 运动终板 马氏三色法—— 胰岛细胞 ……
异染性 metachromasia
亲银性 argentaffin 嗜银性 argyrophilia 嗜铬性 chromaffinity……
?
2、电镜技术(EM)
分辨率从光镜的0.2um提高到 0.2nm
A、酸性物质被染成蓝色，称嗜酸性 B、酸性物质被染成红色，称嗜酸性 C、酸性物质被染成蓝色，称嗜碱性 D、碱性物质被染成蓝色，称嗜碱性
E、酸性物质被染成红色，称嗜碱性
2、过碘酸-雪夫（PAS）反应显示
A、蛋白质 B、多糖 C、脂肪
D、核糖核酸
E、脱氧核糖核酸
3、组织学中最常用的制片技术是
A、 石蜡切片
易被碱性染料着色的性质；
细胞核一般呈嗜碱性。
(LM:蓝紫色)
※嗜酸性(acidophilia):
易被酸性染料着色的性质； 多数细胞的细胞质呈嗜酸性。
( LM:粉红色 )
※中
性(netrophilia): 与酸性和碱性染料的亲和力都不强。
其它染色方法： 镀银法—— 神经细胞、嗜银颗粒
铁苏木法—— 闰盘
• 透射电镜术（TEM）
超微Leabharlann Baidu
用于观察组织细胞内部的超微结构，固定（戊二醛与
锇酸）后需制备超薄切片（50 ~80nm 厚）经重金属染色， 电子束在不同结构上被散射，表现为电子密度高（黑或深 灰色）和电子密度低（浅灰色）。 • 扫描电镜术（SEM）
用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无
需制备切片。
原位杂交术（in situ hybridization） • 即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有
无、基因的表达活性（mRNA）
• 原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内
待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），
并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量。 • 常用标记物有放射性核素和地高辛。
④ 将构建物移植机体的方法
实验中的组织工程耳
二、组织学的发展历史
1、光学显微镜简称光镜（LM）的发明
肺、肾、表皮；Leeuwenhoek发现红细胞、精子、肌纤维；Graaf发现卵泡 →1801 年Bichat提出“组织”概念。
16 世纪末荷兰人发明→1665 年Hooke命名“细胞” →Malpighi观察了脾、
D、涂片
B、火棉胶切片 C、冰冻切片
E、铺片
4、不属于人体基本组织的是
A、上皮组织 B、结缔组织 C、脂肪组织
D、神经组织 E、肌组织
平面与立体
单柱上皮不同方位的切片图
结构与功能
舒张状态
收缩状态
静态与动态
综合与比较
细胞培养和组织工程
（1）细胞培养术（cell culture） • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培
绪论
肌动蛋白
原肌球蛋白
细肌丝
肌钙蛋白
粗肌丝 肌球蛋白杆 肌球蛋白头
一、组织学的定义和研究内容
（一）组织学是指研究人体各器官正常微细结构及其相关 功能的学科。 （二）从组织、细胞、亚细胞和分子水平上对机体进行研 究。 组织：由细胞和细胞外基质（细胞间质）构成。 ？→ Cell → Tissue → Organ→System →Human being ↓ 四种组织？ ↓ 九个系统
（5）显微分光光度计
（6）隧道电子显微镜等
四、学习方法
兴趣 看书 其它
思考题
• 组织学的主要研究内容是什么？
• 组织和器官分别是如何构成的？人体有哪几种 基本组织？ • 何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、PAS反应？
• 组织学有哪些常用方法和技术？
1、在H-E染色的切片上，正确的结果是
3、组织化学术
• 已知物 + 组织中待检物质
（多糖、酶、脂类、核酸）
有色沉淀
如：PAS反应 ( periodic acid Schiff reaction)： 是确定组织或细胞中有无多糖的方法。原理： 多糖
PA Schiff 试剂
醛
氧化
紫红色沉淀
4、其他组织学技术
（1）细胞培养和组织工程
( 2 ) 流式细胞术
2、细胞学说和组织学的建立
• 提出：Schwann和Schleiden（1838、1839）
• 内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着
复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生。 • 切片技术使组织学成为一门独立的学科。（显微水平）
3、电子显微镜简称电镜（EM）的发明与超微结构的发现 • 发明：1932 年，Ruska、Knoll，德国人。 • 超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞 器、染色体等亚细胞结构 4、当代组织学 • 新仪器、新技术的发明和应用，如流式细胞仪、图像分 析仪、激光共聚焦扫描仪等。 • 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平。 • 组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景。
frozen section celoidin section
涂片smear：
血液 分泌物…… 铺片strecthed preparation： 疏松结缔组织 肠系膜、胸膜、腹膜…… 磨片ground section： 骨、牙
石蜡切片的制作技术
1、取材与固定( fixation ) 2、脱水(dehydration)与包埋(embedding) 3、切片(section)与染色(staining)
Zygote---------------------------------------→baby
二、组织学的发展历史
!!!
三、组织学研究技术
1、光镜技术(LM)
切片section：
分辨率从人眼 0.2 mm提高0.2um 把人类从宏观世界带入了微观世界
※石蜡切片
冰冻切片 火棉胶切片
paraffin section
免疫组织化学（immunohistochemistry）
• 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中肽 或蛋白质等具有抗原性物质的分布。
•
用标记的抗体与组织中的抗原结合，并沉淀于原位，后
在显微镜下观察。一般常用的标记物有荧光素（荧光显
微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶
体金（多用于电镜观察）。
4、封固 mounting
染色
常用 HE染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色
碱性染料 将酸性物质染成紫蓝色
酸性染料 将碱性物质染成红色 多数细胞的细胞质（如线粒
体、溶酶体、滑面内质网）
细胞核中的染色质 细胞质中的核糖体
细胞外基质 嗜酸性
嗜碱性
※嗜碱性(basophilia):
养；培养组织块或器官则称组织培养术或器官培养术。
• 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功
能变化，各种理化因子对活细胞的影响。
• 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和 CO2浓度、温度，控制污染。 • 用相差显微镜观察。
（2）组织工程（tissue engineering） • 用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术 • 正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角 膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治 疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病 • 研究包括四个方面： ① 种子细胞 ② 细胞外基质 ③ 构建组织或器官
甲苯胺蓝—— 糖胺多糖 苏丹法—— 脂肪 氯化金法—— 运动终板 马氏三色法—— 胰岛细胞 ……
异染性 metachromasia
亲银性 argentaffin 嗜银性 argyrophilia 嗜铬性 chromaffinity……
?
2、电镜技术(EM)
分辨率从光镜的0.2um提高到 0.2nm
A、酸性物质被染成蓝色，称嗜酸性 B、酸性物质被染成红色，称嗜酸性 C、酸性物质被染成蓝色，称嗜碱性 D、碱性物质被染成蓝色，称嗜碱性
E、酸性物质被染成红色，称嗜碱性
2、过碘酸-雪夫（PAS）反应显示
A、蛋白质 B、多糖 C、脂肪
D、核糖核酸
E、脱氧核糖核酸
3、组织学中最常用的制片技术是
A、 石蜡切片
易被碱性染料着色的性质；
细胞核一般呈嗜碱性。
(LM:蓝紫色)
※嗜酸性(acidophilia):
易被酸性染料着色的性质； 多数细胞的细胞质呈嗜酸性。
( LM:粉红色 )
※中
性(netrophilia): 与酸性和碱性染料的亲和力都不强。
其它染色方法： 镀银法—— 神经细胞、嗜银颗粒
铁苏木法—— 闰盘
• 透射电镜术（TEM）
超微Leabharlann Baidu
用于观察组织细胞内部的超微结构，固定（戊二醛与
锇酸）后需制备超薄切片（50 ~80nm 厚）经重金属染色， 电子束在不同结构上被散射，表现为电子密度高（黑或深 灰色）和电子密度低（浅灰色）。 • 扫描电镜术（SEM）
用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无
需制备切片。
原位杂交术（in situ hybridization） • 即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有
无、基因的表达活性（mRNA）
• 原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内
待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），
并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量。 • 常用标记物有放射性核素和地高辛。
④ 将构建物移植机体的方法
实验中的组织工程耳
二、组织学的发展历史
1、光学显微镜简称光镜（LM）的发明
肺、肾、表皮；Leeuwenhoek发现红细胞、精子、肌纤维；Graaf发现卵泡 →1801 年Bichat提出“组织”概念。
16 世纪末荷兰人发明→1665 年Hooke命名“细胞” →Malpighi观察了脾、
D、涂片
B、火棉胶切片 C、冰冻切片
E、铺片
4、不属于人体基本组织的是
A、上皮组织 B、结缔组织 C、脂肪组织
D、神经组织 E、肌组织
平面与立体
单柱上皮不同方位的切片图
结构与功能
舒张状态
收缩状态
静态与动态
综合与比较
细胞培养和组织工程
（1）细胞培养术（cell culture） • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培
绪论
肌动蛋白
原肌球蛋白
细肌丝
肌钙蛋白
粗肌丝 肌球蛋白杆 肌球蛋白头
一、组织学的定义和研究内容
（一）组织学是指研究人体各器官正常微细结构及其相关 功能的学科。 （二）从组织、细胞、亚细胞和分子水平上对机体进行研 究。 组织：由细胞和细胞外基质（细胞间质）构成。 ？→ Cell → Tissue → Organ→System →Human being ↓ 四种组织？ ↓ 九个系统