第三章食用菌制种技术一
医学课件第三章食用菌制种
⑵ 谷粒培养料的配制
谷粒因其营养较丰富，制作的菌种具有菌 丝萌发早、吃料快、抗衰老能力强、产量高 等优点，在生产中应用较多。一般是采用浸 泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。
4.装袋或装瓶 将培养料拌匀装入菌种瓶（或袋）内、
装料松紧适宜，上下一致，装料高度以齐瓶 （袋）肩为宜。然后用锥形木棒在瓶的中央 向下插一个小洞，塞上棉塞。装好的料瓶 （袋）要当天灭菌，以免培养料发霉变质。
②.去皮马铃薯100克，玉米粉30克，葡萄糖20 克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二 钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克，水1000亳 升，PH值自然。
③.去皮马铃薯100克，玉米粉15克，麸皮15克， 葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克， 磷酸氢二钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克， 水1000亳升，PH值自然。
5.培养基的灭菌
通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭 菌法以达到灭菌的目的。高压灭菌2小时或常 压灭菌于100℃维持8-10小时，灭菌后培养基 最好放在适温下，空白培养5-7天，以检查培 养基灭菌的效果。如在此期间没有出现任何 杂菌，说明灭菌效果良好。待其冷却30℃以 下可接种。
三、栽培种培养基的制备及接种培养
2.培养基配方：
① 木屑培养基：木屑78%，麸皮或米糠 20%，石膏1%，糖1%，水适量。适用于培养 平菇、木耳、香菇、猴头。
② 棉子壳培养基：棉子壳99.5%，石膏 0.3%，水适量。适用于培养平菇、猴头、金 针菇、鸡腿菇。
3.培养料的配制 ⑴ 木屑、棉籽壳培养料的拌料配制
木屑、棉籽壳培养料按配方称量后，堆制 混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水 中再拌入。拌料时要控制料的含水量在60﹪ 左右 。
一、母种培养基的制备及接种培养
食用菌种植技术——快速简易制种法
食用菌种植技术——快速简易制种法一母种的扩制(一)选瓶在制种容器的选择上，必须要挑剔些，用扁的或方的酒瓶代替试管，这样每个酒瓶内所装培养基的面积相当于20个试管斜面。
酒瓶很容易弄到，且瓶口与试管口大小基本相同，瓶壁厚实抗破损耗小。
(二)培养基配制培养基的选择用天然无琼脂培养基配方:小麦粉25%、玉米粉15%、小米粉20%、黄豆粉15%、高粱粉25%、水220%~230%。
将配方料与水拌匀，装入酒瓶内，每瓶装量50ML，瓶口加棉塞并包二层牛皮纸，立即灭菌。
灭菌时将酒瓶平放在高压锅中，在1.1KG/平方CM的压力下灭菌30分钟，自然降温冷却后备用。
(三)接种培养采用多点接种的方法接入一级分离菌种，按常规培养8~10天，22度恒温菌丝长满即可使用。
采用此法，2小时可生产2000KG原种所需用的母种。
二原种的制作(一)备料灭菌将原种培养基配方料拌匀，选用18X40CM的聚丙烯塑料筒料袋，按常规操作装好料，扎口，置常压消毒锅中，100度下连续灭菌8~11小时。
(二)接种室消毒将灭菌冷却的培养基料袋和母种瓶的表面用新洁尔灭擦拭干净，母种棉塞要湿透，并立即放接种室内接种台上，接种工具、酒精灯和备用消毒棉一并放入，然后用15克/立方米的硫磺密闭薰蒸10小时，接种前2小时往接种室内喷27%氨水消除二氧化硫气味，氨水用量4毫升/立方米。
接种室要有更衣缓冲间，用新洁尔灭水洗手后进入接种。
(三)接种与培养解开原种培养基料袋两头绳索，分别接入直径5CM以上的母种块。
然后扎紧袋口，在扎袋口时中间放一团消毒棉，方便透氧气。
采用此法制作原种，6人一天可生产1000KG料。
此原种同时也可当栽培种使用，我用此法栽培香菇、黑木耳，可大大缩短栽培期30~40天时间。
三栽培种制作将栽培种配方料拌匀，用22X40CM的聚丙烯塑料袋装料，料要装得中实外松，也可用装料机。
将料袋扎口后装入大塑料网袋内，横放常压消毒锅内同原料灭菌要求。
冷却后移入接种室同原种接种方法要求，接上原种。
食用菌制种技术
THANKS
感谢观看
基因转化技术
利用基因转化技术将外源基因导入 食用菌中，实现基因的遗传改良和 定向育种。
基因编辑技术
利用基因编辑技术如CRISPR-Cas9 系统，对食用菌基因进行精确编辑， 创造出具有优良性状的菌株。
发酵工程在食用菌制种中的应用
高密度培养技术
通过优化培养基组成、控 制培养条件等方式，实现 食用菌的高密度培养，提 高菌丝体产量。
详细描述
接种是食用菌制种的重要环节，需采用无菌操作技术，避免 杂菌污染。在培养过程中，要控制好温度、湿度、光照和气 体等环境条件，以满足菌种的生长需求，促进菌丝体的快速 繁殖。
菌种保藏与复壮
总结词
采用低温、干燥、隔氧等措施长期保 藏菌种，定期进行复壮防止退化
详细描述
菌种保藏是保持菌种优良性状的重要措施。 可采用低温、干燥、隔氧等措施，延长菌种 保藏时间。同时，要定期进行菌种复壮，以 防止菌种退化，保持其生产性能。
抗逆性增强
通过制种技术，可以获得 抗逆性强、适应性广的菌 种，提高食用菌的抗逆性 和适应性。
食用菌制种的历史与发展
古代制种技术
古代的制种技术比较简单，主要是利 用天然条件进行繁殖和培养。
现代制种技术
随着科技的发展，现代的制种技术越 来越先进，包括液体培养、固体培养 、基因工程等技术的应用，使得食用 菌的制种更加高效、快速、准确。
空气过滤
03
在无菌操作环境中采用高效空气过滤器，过滤空气中的杂菌，
降低污染风险。
05
食用菌制种新技术与展望
BIG DATA EMPOWERS TO CREATE A NEW
ERA
基因工程在食用菌制种中的应用
基因克隆与鉴定
食用菌的制种
食用菌的制种食用菌菌种质量的优劣，直接影响到栽培的成败和产量的高低，只有优良的菌种，才能获得优质高产的食用菌。
因此食用菌的制种，是生产中一项极其重要的工艺。
食用菌的菌种按培养阶段和来源的不同，可分母种、原种和栽培种三种。
从食用菌的孢子分离培养或从组织分离培养、基内菌丝分离培养所得到的第一代菌丝体，称为母种。
从母种扩大培养的菌丝体，称为原种。
从原种扩大培养直接用于生产上播种的菌丝体；称为栽培种。
一、母种的分离和培养（一）母种培养基的配制1.母种培养基的种类母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。
因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。
适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多，常用的有下列几种：2.母种培养基的制法兹以最常用的马铃薯――葡萄糖――琼脂培养基的制法为例介绍如下：先将马铃薯去皮，洗涤，切成小块，加水1000毫升，煮沸15～20分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，加入琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最后补足水分，使其容量仍为1000毫升。
趁热分装于试管中，装量约为试管长度的1/5左右，装管时要注意不使培养基沾污试管壁和试管口。
试管口塞上大小合适的棉花塞，塞入试管口内的长度为棉塞总长的3/5。
塞好棉塞后，每10支作一捆，用牛皮纸包扎好后，置铁丝网笼中，然后进行高压灭菌。
如作为孢子分离用，则将培养基分装于三角瓶或培养皿中，然后高压灭菌。
3.母种培养基的消毒灭菌母种培养基通常用高压蒸汽灭菌锅来消毒灭菌，常用的高压蒸汽灭菌锅有直式、卧式和手提式三种。
将配制好后的母种培养基移入上述任何一种高压蒸汽灭菌锅中，在15公斤/平方厘米压力下，消毒灭菌30分钟。
高压蒸汽灭菌主要是依靠提高蒸汽的温度来灭菌的，因此灭菌时，应将锅内的冷空气全部排除。
否则，尽管压力表上的压力已达到要求，然而，灭菌锅内的温度却未达到所需的温度（表11）。
食用菌制种技术
培养基的灭菌
通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭菌法
以达到灭菌的目的。高压灭菌2小时或常压灭菌于
100℃维持8-10小时，灭菌后培养基最好放在适温
下，空白培养5-7天，以检查培养基灭菌的效果。
如在此期间没有出现任何杂菌，说明灭菌效果良 好。待其冷却30℃以下可接种。也可高压灭菌 （1.5—2h)
3、原种的接种
接原 种
用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中接 种穴内，一支母种可4—6瓶原种。
4、原种的培养
培养室的大小和床架数量应根据生产规 模来定。 注意：适温培养，对多数食用菌而言， 可保 持20~25℃，定期检查杂菌。时间 25—40天 。 正常菌丝：洁白、粗壮。 杂菌：有黄、绿、黑橘红等多种颜色， 且生长速度快，稀疏无力。
PDA培养基： 去皮马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂15-20g、水1000ml
马铃薯去皮，切片，称取200克，沸水煮20-30分钟， 过滤，取滤汁添水至1000ml，加葡萄糖或蔗糖20克、 琼脂15-20克煮熔，pH自然，常规灭菌即可。
准备工作
称量、材料预处理 按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、 挖掉芽眼后称量200g，切成1cm见方的小块。琼脂
剪碎后用水浸泡。
熬煮
将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中，
煮至酥而不烂。
过滤、加可溶药物
用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加
入糖
熬琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂，直到琼脂完全 溶化为止，定容至1000ml。
母种培养基制作流程 1. 分装试管 2. 塞棉塞 3. 打捆 4. 灭菌 5. 摆斜面
图3-14斜面试管转管接种
• 培养：将移接好的试管放入20--25℃的温
食用菌简易制种技术
食用菌简易制种技术食用菌作为高蛋白、低脂肪、低卡路里、高营养、健康美味的食品，越来越受到人们的喜爱。
而自己在家制作食用菌，不仅可以保证食材的新鲜和质量，还可以减少购买成本。
本文将介绍几种常见的食用菌制种技术，帮助大家轻松培育出美味的食用菌。
1. 直接播种法直接播种法是一种最简单的食用菌培养方法，适用于种类较少的食用菌，如黑木耳、金针菇等。
具体操作步骤如下：1.将培养土填满培养箱，压紧。
2.在表面撒上食用菌的孢子或生物质体，注意要均匀撒播。
3.用保鲜膜覆盖箱子，确保通风良好。
4.放置在通风、遮光、适温的环境中，每天喷水保持湿度。
5.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
2. 木屑法木屑法是一种比较常见的制种方法，适用于杏鲍菇、香菇、平菇等食用菌的制种。
具体操作步骤如下：1.准备干净的木屑，并用清水浸泡6-8个小时以上。
2.滤干积水，将木屑放入锅中煮沸至消毒，然后捞起沥干。
3.将木屑放进袋子中，用水泡润。
4.取出泡好水的木屑，充分挤干。
5.把泡好水的木屑放入培养箱中，压实。
6.在木屑上撒上种菌剂。
7.用保鲜膜覆盖培养箱，通风，每天喷水保湿。
8.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
3. 液体培养法液体培养法是一种较为复杂的制种方法，可以用来培养多种食用菌，例如秀珍菇、灵芝等。
具体操作步骤如下：1.准备好菌种发酵用的液体，可以用食用菌专用的液体培养基或配制自己的发酵液。
2.在菌种液中加入适量的种菌剂，留出足够的空间。
3.用氧气泵将液体中的微生物通入空气，促使其繁殖生长。
4.液态培养箱通电加热，控制好温度。
5.待液体内部产生大量菌株后，将液体转移到菌棒或糠包装置中进行培养。
6.填充培养基。
7.将菌棒或糠包装置放在培养箱内，通风并喷水保湿。
8.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
4. 多菌固体培养法多菌固体培养法是一种在凝胶体内培养多菌的方法，适用于食用菌组合培养和新品种的研究。
具体操作步骤如下：1.准备好菌种发酵用的培养基凝胶体。
食 用 菌 制 种 技 术 1
食用菌制种技术 1食用菌制种前言食用菌生产所用的菌种，是提供繁殖而分级制作的菌丝体培养物，相当于高等植物的种子。
在自然界中，食用菌繁衍后代依靠孢子，孢子在适宜的环境下，萌发成菌丝体。
菌丝体生长繁衍达到生理成熟后，在适宜的环境下，就可形成子实体。
在人工栽培食用菌时，孢子虽然是它的种子，但人们至今都不用孢子直接播种，而是用孢子或子实体组织萌发而成的纯菌丝体作为播种材料。
因此，通常所指的菌种，实际上是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。
制种是食用菌生产最重要的环节。
常言道：“有收无收在于种，收多收少在于管”，可见菌种在生产中的重要性。
在食用菌生产过程中，菌种好坏，直接影响食用菌的产量和质量。
因此，培育优良菌种，是提高食用菌生产水平的重要环节。
人工培养的菌种，根据菌种培养的不同阶段，可分为母种、原种和栽培种三类。
一般把从自然界中，首次通过孢子分离或组织分离而得到的纯菌丝体称为母种，或称一级种。
它是菌种类型的原始种。
原始母种通过移接(转管)成数支试管(斜面)种，这些移接的试管种，亦可称为母种。
把母种移接到木屑、谷粒、棉籽壳、粪草等瓶(袋)培养基上培养而成的菌种称为原种，或称二级种。
它是母种和栽培种之间的过渡种。
把原种扩接到相同或类似的材料上，进行培养直接用于生产的菌种称栽培种，或称三级种。
制作菌种的具体操作工艺流程见图4—1。
原种和栽培种，均能直接用于生产。
栽培种不能再扩大繁殖栽培种(银耳菌种例外)，否则会导致生活能力下降。
分离母种培养基制备→高压灭菌→接种→筛选提纯→原始种→中试后确定母种↓↓—————转管扩接←保贮↓原种培养基制备→高压或常压灭菌→接种→培养→原种∣↓栽培种培养基制备→常压或高压灭菌→接种→培养→栽培种图4-1 制种工艺流程图食用菌的菌种生产，基本上是按菌种分离→母种扩大培养→原种培养→栽培种培养的程序进行。
菌种通过三级扩大，菌种数量大为增加，同时菌丝也从初生菌丝发育到次生菌丝，使菌丝更加粗状，分解基质的能力也增强。
食用菌栽培种的制备技术
食用菌栽培种的制备技术
食用菌栽培种的制备技术
栽培种由原种扩大而成，所有的原种培养基均可用于制备栽培种。
栽培种培养料的制备与原种基本相同。
（1）配料的方法和步骤棉籽皮一麸皮培养基（适用于木耳、金针菇、滑菇、平菇等栽培）：棉籽皮44千克、麸皮5千克、蔗糖0．5千克、石膏粉0．5千克。
木屑一麸皮培养基(适用于银耳、黑木耳等栽培种): 木屑38千克、麸皮10千克、石膏粉0 .5千克、蔗糖0.5千克、硫酸镁150克、黄豆粉850克，加水47.5－52.5千克。
棉籽皮-木屑培养基(适用于香菇栽培种): 棉籽皮20千克、木屑19千克、麸皮或米糠10千克、蔗糖0.5千克、石膏粉0．5千克、水3 0千克。
pH 6.5－7为宜。
以棉籽皮一木屑配制为例：首先称量棉籽皮20千克、木屑19千克、麸皮10千克、石膏粉0．5千克、蔗糖0.5千克，加入适量水搅拌均匀；培养料拌好后即可装入聚丙烯袋中，装料时将料的底角内插，上下松紧程度要一致，边装边压实，每袋可装干料300－375克，湿料700－850克。
装好袋后，在培养料中间插一洞穴，深度离袋底1寸左右，袋口放一棉塞，扎紧袋口。
装好袋后当天灭菌，以免培养料发霉变质。
灭菌：塑料袋栽培种灭菌时宜卧放，不要摆的过紧，要留有空隙，以便于蒸气流通。
如果用高压灭菌，在每平方米13．1千克的压力下灭菌2．5小时。
如用土蒸锅，温度达到100℃后再继续灭菌8－10小时。
[基础]食用菌菌种制作技术图文1
![[基础]食用菌菌种制作技术图文1](https://img.taocdn.com/s3/m/5e1d054e24c52cc58bd63186bceb19e8b8f6ecd9.png)
[基础]食用菌菌种制作技术图文1图文食用菌菌种制作技术一、菌种生产程序母种繁殖栽培种示意图菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。
其中母种的分离选育技术性强，一般由专业制种单位制作。
而原种和栽培种的制作则比较简单。
下面介绍各级菌种的制作技术。
二、母种的分离选育母种可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下：1、采集种源采集种源用具选择有八成熟、朵形圆正、肉质肥厚、无病虫害的优良菇体作为种源。
采集1～2朵装入灭菌纸袋，带回接种箱进行消毒。
2、母种培养基配制母种培养基常用的是琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200～250g，琼脂15～20g，葡萄糖20～25g，清水1000ml。
也可以加硫酸镁1～1.5g，维生素B1微量，磷酸二氢钾2～3g。
先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于烧杯（或铝锅）内加水煮沸30分钟，捞起后用4层纱布过滤，取汁。
然后将琼脂加入汁内，边加热边搅拌，让琼脂充分溶化。
再将葡萄糖等加入，并补水至1000ml。
稍煮几分钟后，同样用4层纱布过滤，取其汁液。
将汁液趁热装入玻璃试管内，装至管长的1/5。
管口用棉花塞塞紧。
或将汁液装入玻璃三角瓶内，装量为20ml。
然后置于高压锅内，在98～108千帕/cm2的压力下灭菌30分钟左右。
灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。
3、母种分离方法①、孢子弹射法将种菇表面消毒，吸干水分后，将菇体悬挂于装有琼脂培养基的三角瓶内，让菇体内的孢子自然散落在培养基上萌发菌丝。
也可以剪取一小块菇体，贴附在试管斜面培养基表面，让孢子散落在培养基上萌发菌丝，即能获得母种。
②、组织分离法将消毒过的种菇，在接种箱内用手从菇柄处对半掰开，或用刀片切开，使菇体形成对开。
在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5mm×10mm的小薄片，用接种针挑取1块薄片，接入斜面培养基的中央，每支试管接种一小块薄片，待其萌发菌丝，即可得到母种。
食用菌原种的制作方法
食用菌原种的制作方法食用菌原种是培育高品质食用菌的开始，其制作方法关系到菌种的品质和生长效果。
下面将介绍10种关于食用菌原种的制作方法，并详细讲解每种方法的具体操作步骤、注意事项和优缺点。
1. 伏击法制种法伏击法制种法是一种常见的食用菌原种制作方法，其操作简单，适用于多种食用菌的原种制作。
具体方法如下：步骤一：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，尽量选用种粒外形完整、表面干净、无病害的菌盖和菌蒂。
步骤二：将菌盖和菌蒂归并，放到70%酒精中清洗30秒，然后取出沥干。
步骤三：将菌盖和菌蒂放到滤纸上，擦干表面水分，放到蒸汽锅中蒸10分钟，杀灭病菌和杂菌。
步骤四：将蒸好的菌盖和菌蒂拿出来，再次擦干表面水分，放到培养基上。
步骤五：放到恒温摇床上培养，震荡180rpm，28℃，恒温培养7-14天，即可获得食用菌原种。
优点：操作简单，适用范围广，菌株易保存。
缺点：成活率较低，制作时间较长。
2. 含砂蒸法制种法含砂蒸法制种法是应用含石英砂的菌种培养基来制作食用菌原种，能提高种粒触蒸面积，提高出菌率和菌株的品质。
具体方法如下：步骤一：准备含砂菌种培养基。
将玉米粉、蔗糖、石英砂和蒸馏水按一定比例混合，制作含砂菌种培养基。
步骤二：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，按照比例加入含砂菌种培养基中。
步骤三：将含菌培养基放在琼脂板上，在30℃下反复震动震荡搅拌。
步骤四：将培养好的固体菌种放在75%-80%的相对湿度内，保持湿润并置于通风且恒温保持在22℃下。
步骤五：待菌体生长到一定大小时，再将其移植到适宜的菌床中。
优点：出菌率高，菌株品质好。
缺点：制备过程中需掌握好配方和稠度。
3. 傅里叶红外辐射制种法傅里叶红外辐射制种法是利用电极辐射灯产生的热量来使制种容器内的培养液升降温，低温使菌体沉积在液表面，高温则使其下沉到液底，实现制种的目的。
具体方法如下：步骤一：将食用菌种子与蔓茎切片、米糠混合后，加入到恒温恒湿的发酵箱内。
第三章 食用菌菌种制作
用途
栽培生产
特点 菌丝多而壮、适应性强
生产总过程
子实体 母种
栽培
原种
栽培种
（二）状态不同的菌种
1.固体 菌种
概念 用固体基质培养的菌种 设备、工艺简单 特点 菌龄长而不一 发酵率较低
概念 用液体基质培养的菌种 2.液体 设备、工艺较复杂 菌种 菌龄短而一致 特点 发酵率高 易老化和自溶
三、菌种生产程序
2、气体灭菌法（熏蒸杀菌法）
适用：接种箱、接种室和菇房消毒。 常用药物：40%甲醛溶液、硫磺、菇保一号、 科达气雾消毒盒、克霉灵气雾消毒剂。
第二节 母种制作
一、母种培养基制作
二、菌种分离 三、母种扩繁
一 母种培养基制作
（一）营养液制作(PDA培养基)
1.
准备工作
（1）材料 马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、 水。 （2）仪器用具及消毒药品 电炉子、铝锅、玻 璃棒、漏斗、纱布、止水夹、漏斗架、切菜小刀、切 板、1000ml烧杯、捆扎绳、棉花、试管 （18mm×180mm）、试管架、铁丝筐、1.5cm厚的长木 条、标签、天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、牛 皮纸、皮筋、纱布、恒温培养箱、手提式高压灭菌锅、 超净工作台或接种箱、接种铲、酒精灯、火柴、记号 笔等。消毒药品包括：75％的酒精棉球、0.25%新洁 尔灭溶液、烟雾消毒王或菇保一号等。
二 菌种分离
（一）概念
菌种分离：用无菌操作的方法将所需要的食用菌 从混杂的微生物群体中单独分离出来的过程。
（二）关键
严格按无菌操作规程进行 无菌操作：任何一个操作过程都要注意避免把其 它任何无关的菌体带入到培养基中。 注意二点： 1．严格树立无菌观念； 2．严格遵循无菌操作规程。
食用菌生产技术 液体菌种
3.制作饮料、保健品 3.制作饮料、 制作饮料 食用菌液体培养物经过粉碎→研磨打浆→ 食用菌液体培养物经过粉碎→研磨打浆→热 水浴浸提→过滤→稀释或浓缩→调配， 水浴浸提→过滤→稀释或浓缩→调配，可研 制成功能饮料、保健品。 制成功能饮料、保健品。 4. 制作畜禽饲料 食用菌液体培养物，经过浸提或提取有用成 食用菌液体培养物， 分后的废弃物，还可制作畜禽饲料。 分后的废弃物，还可制作畜禽饲料。
五、液体菌种制作的主要工艺 1.液体种子制备 1.液体种子制备 液体种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、 液体种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、 健壮的、高纯度的菌丝体。 健壮的、高纯度的菌丝体。 ⑴ 斜面菌种制备 制备方法（培养基配方和操作步骤）同试 制备方法（培养基配方和操作步骤） 管斜面母种的制备，在此不再多讲了。 管斜面母种的制备，在此不再多讲了。 ⑵ 摇瓶种子制备 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→ 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→ 无菌检验→接种→ 无菌检验→接种→振荡培养管理
四、液体菌种制作的主要设备 1.摇床食用菌为需氧菌，液体菌种培养需 摇床食用菌为需氧菌， 摇床食用菌为需氧菌 要增加氧气的供应，因此， 要增加氧气的供应，因此，不断振荡有 利于菌丝体的快速生长。 利于菌丝体的快速生长。摇床是液体菌 种生产常用的设备 2.种子罐和发酵罐 种子罐和发酵罐 一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐 一级种子罐通常为 ， 为500-1000L。 。
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 2.接种量 3.温度 1.菌龄 2.接种量 3.温度 4.通气量 5.搅拌速度 6.酸碱度 4.通气量 5.搅拌速度 6.酸碱度 7.罐压 8.泡沫控制 7.罐压 8.泡沫控制 9.发酵特点 9.发酵特点
食用菌简易制种技术
食用菌简易制种技术常规制种，其设备昂员，条件要求严格，技术也复杂，菌种成本高。
建一个菌种厂，设备投资少则上千元，多则几万元。
简易制种技术，就是不需要专门设备，利用家里现有条件就可制种。
（一）蒸汽接种法准备：先把接种操作室打扫干净，保持潮湿清洁。
准备水壶或铝锅1只，煤球炉或电炉1只，接种台1张，接种针或大镊子一把。
蒸料灭菌桶：用铁皮做成比铝锅口径小一点的圆桶，桶底放铁筛架，桶内装菌袋、瓶。
上边口用塑料纸或木盖封口。
操作：将煤球炉或电炉放在操作台旁，再将水壶或铝锅放在炉子上面，锅内装适量的水，接种工具先放在锅内煮沸消毒。
接种时，关好门窗，洗净双手，戴上口罩。
将菌种块直接通过蒸汽放入栽培种的培养料上。
在蒸汽上接种，既舒服又方便，且接种质量可靠。
因为蒸汽在上冒的过程中产生一股冲力，把水壶或锅上的空气排开，蒸汽不断产生，就形成锅上一片无菌区。
由于菌种得到蒸汽的湿润，比在酒精灯上接的种恢复得更快，污染也少。
另外蒸汽接种不使用化学药品，可避免在接种时药品对入体的毒害。
（二）代替琼脂培养基1.绿豆粉培养基：将新鲜、干燥、不霉变的豆粉队放入锅内煮沸调团状，装入试管或三角瓶内，塞好棉塞，用牛皮纸或报纸包扎好试管上部，成捆放于高压锅内，用12公斤／厘米2压力灭菌半小时，然后慢慢放汽，取出试管凝固成斜面即成。
2.麦粒种：将小麦粒用温水浸泡2小时，捞出放入竹筛内，4个小时烧一次清水，约24小时左右，麦粒就萌发小芽约1厘米。
这时再放火锅内煮沸半小时，取出用凉水冷却后，加入石膏、干马粪使之成散粒，然后分装试管、三角瓶、蘑菇瓶、杂酒瓶，装量按常规。
塞好棉塞进行灭菌，15磅压力灭菌1小时。
然后接种。
采用此法可节约大量琼脂。
化学药品。
（三）于实体组织分离简易方法在无菌环境中，直接切取菇体未形成孢子组织块，进行培养即称简易分离技术。
方法：在第一批菇中，选取具有该品种特性的、发育正常、菌盖肥厚、朵大、无病虫害的子实体作种菇。
在蒸汽上用手把子实体一分为二，用消毒过的小刀在萌盖和菌柄交界处切取一小块菌肉，移放在斜面培养基中央。
食用菌母种制作-实验一
实验一食用菌母种制作一、目的要求：1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理；2、掌握母种培养基的制备方法；3、了解无菌操作基本原理，掌握母种的无菌接种培养方法。
4、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤；5、熟练分离出栽培用菌种。
二、主要仪器设备及药品材料：灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管（18x180mm）、手术刀、镊子、75%酒精、马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。
三、实验步骤与方法:①培养基的制作1 PDA培养基配方马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升.2. 母种培养基的配制(1)熬制。
马铃薯洗净，挖芽去皮。
称取200克，切成玉米大小颗粒或薄片。
量筒量取1000毫升水，铝锅中煮沸后记时30分钟。
四层纱布过滤于量杯中。
滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。
补足水量至1000毫升。
(2)分装试管。
将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。
培养基高度为试管长度的1/5左右，注意避免培养基沾于试管口外。
分装完成后，盖紧硅胶塞。
（3）捆把。
7支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。
贴上标签，准备灭菌。
（4）灭菌。
注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。
（5）摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2。
斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。
①菌种分离与培养（1）种菇选择。
选取无杂菌感染，无病虫害，出菇均匀，适应性强的子实体，要求个体健壮，朵大肉厚，外形规整，出菇早，约七八成熟的新鲜子实体。
子实体采收后切去大部分菌柄，放入干净器皿内备用。
（2）母种分离（组织分离法）。
在分离前用75%的酒精棉球擦菇体进行表面消毒，在超净工作台内将子实体撕开，用消毒刀片在菌盖与菌柄交接处的组织上取一小块（绿豆大小）移至试管斜面培养基的适当位置，迅速塞上硅胶塞。
将分离的试管放在室内避光培养7-8天，检查菌丝生长情况。
《食用菌制种技术》PPT课件
粪草菌种
培养基的主料
谷粒菌种 木块菌种
木屑菌种
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5
一 、菌种的制作
1、菌种类型及制种程序 （1）菌种类型
菌种按生产程序
一级种 (母种）
二级种（原种）
三级种(栽培种）
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一 、菌种的制作
1、菌种类型及制种程序
（1）菌种类型
①一级种
一级种又称母种、试管种。
将经孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物，移 接到试管斜面培养基上培养而得到的纯种。
二级种又称原种，这是由母种转接到装有麦粒等固体培 养基质的专有菌种瓶中经过培养后形成。原种可采用750mL 菌种瓶或500mL罐头瓶作为培养容器。一般一支母种可扩大 繁殖6-8瓶原种。
若原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种还必 须进一步扩大繁殖成三级种，使菌种数量增多，才能用于 栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的基质，因此原 种也可用于小规模的栽培。
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一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （3）接种设备 为了在使用之后能排湿、通风，应在室内顶部设
置小型排风扇，在室内的侧面底部设置玻 璃纤维过 滤进气口。
无菌室(包括缓冲间)除照明用光源外，还应安 装紫外线杀菌灯，吊装在接种操作台的正上 方。
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一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （3）接种设备
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一 、菌种的制作 1、菌种类型及制种程序
（2）制种程序
菌种生产是
指通过无菌操 作，大量培养 繁殖菌种的过 程。
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一 、菌种的制作 2、菌种生产的主要设备 （l）配料设备
切片机是将 木材切成规格 木片的专用机 械，是食用菌 培养基质粉碎 处理的预前工 序设备。
第三章食用菌制种技术五
一、食用菌菌种的分离技术 2.孢子分离
①单孢子分离 ②孢子印分离 ③孢子弹射分离法
一、食用菌菌种的分离技术
4.生物技术育种
①紫外光照射 ②原生质体融合 ③化学药物诱变
一、食用菌菌种的分离技术
5.野生菌菇的驯化
菌种驯化的原理：驯化是通过人工措施使食用菌菌种逐步 适应某一条件，而定向选育菌种的方法。通过驯化可取得 具有较高耐受力、活动能力以及产量的菌株。驯化常用于 野生蘑菇的选育，以获得对人工环境具有较高的适应能力 的高产菌株。
②原种、栽培种质量的鉴定
具有
菌丝白（符合该菌种的颜色） 均匀、粗壮、有菇香味 接种后萌发快
没有
无杂色、无黄水、无结皮、 无原基、无干缩脱壁等现象
菌种种类 品种名称 菌种级别 代时 生产厂家 接种日期
用于生产
产生原基
污染
黄 水
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（二）良种的退化 菌种退化是指突然或逐渐丧失原有的生命力和生产性能的 现象。随着菌种保藏时间的延长或菌种的多次转管继代， 菌种本身所具有的优良遗传性状可能得到延续，也可能发 生变异。
外观
好
菌丝白、整齐、粗壮、 有弹性、萌发快等
差Байду номын сангаас
丝干燥、收缩、自溶 产生红褐色液体等
好母种
退化母种
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（一）良种的标准 ②二级菌种和三级菌种 二级菌种和三级菌种无 病虫害、无杂菌感染，菌丝洁白，均匀，粗壮浓 密，不萎缩，不发黄，再生力强，移接后萌发快， 吃料快。长满菌种的培养料有菌种特有的香味。
外因 传代过多，条件不适宜
食用菌制种原理与技术
实行纯培养
基本 要求
不含任何杂菌
用于 生产
二、菌种类型
目的
保藏用种 实验用种 生产用种
一级菌种
按
级别 二级菌种
三级菌种
状态：固体菌种、液体菌种
种菇或种木选择
种菇或种木处理
原始母种培 养基制备 一级种培 养基制备 二级种培 养基制备 三级种培 养基制备
制种流程
原始母种 一级母种
二级种 三级种
转管扩繁 保存
3.三级种（栽培种）
将原种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
菌种袋、较粗放的液体 概况 培养环境 或固体培养基
用途 栽培生产
特点 菌丝多而壮、适应性强
生产总过程
子实体
母种
栽培
栽培种
原种
（二）状态不同的菌种
1.固体 菌种
概念 用固体基质培养的菌种
设备、工艺简单 特点 菌龄长而不一
发酵率较低
煮沸20min，取定量滤液 滤液沸时加入，融后加余料 10%NaOH或HCl 勿污管口，控制装量 准备灭菌
（二）原种、栽培种培养基
1.种类
(1)棉籽壳培养基
配方（%）
主料 棉籽壳87，麦麸10 辅料 白糖1，石灰1，过磷酸钙1
配制
棉壳、麦麸干混 余料溶于水后浇入主料 清水翻拌至含水量
(2)颗粒培养基
斜面培养基 平板培养基
特性
条状
属天然植物多糖
融点96℃以上 凝点40 ℃以下 冷水中不溶
透明度好、粘着力强
不被微生物分解利用
粉状
二、各级菌种的培养基
（一）母种培养基
1.通用配方 马铃薯200 g、葡萄糖20 g
PDA 琼脂15~20 g、水1000 ml
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一、菌种的概念
野生： 担孢子或子囊孢子 菌种
栽培： 扩大繁殖后的纯次生菌丝体
菌种的来历： 野生菌驯化
原菌株改良
生物技术创新
优良 扩大 用于 菌株 繁殖 生产
菌种的要求
实行纯培养 不含任何杂菌
授课老师：翁梁
一、菌种的概念(狭义)
以适宜的营养培养基为载体进行纯培养的食 用菌菌丝体
菌 种 培养基质与食用菌菌丝的联合体
简易、利移动 对人体低害 效果好功耗低
用法：清洁、放物品
消毒
喷雾 熏蒸 紫外灯
授课老师：翁梁
2、接种室
要求
高：2.2～2.5m 缓冲间：2～3m2
面积：7～9m2 接种间：5～6m2
6个面要平滑、两门错开（平拉式） 顶装紫外灯
使用 清洁 物品放缓冲间 消毒 移物至接
种室 喷消毒液 10min后接种 消毒液 清洁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
3、接种设备
接种箱 负离子发生器 超净工作台
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
（四）培养设备 1、培养箱
培养少量菌种的恒温电器（20～40℃）
授课老师：翁梁
2、培养室
培养大量菌种的恒温房
要求
光线暗 密闭好、通风性强 能升温降温 培养架
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
复习思考：
1.什么叫菌种？菌种可分为哪几种类型？ 2.菌种的基本要求是什么？制种的基本要求是什么？ 3.菌种为什么要经过三级逐步扩大培养？ 4.怎样使用接种箱？ 5.简述各级菌种间的相互关系？ 6.根据各级菌种之间的相互关系，解释菌种场的布局
原则？
授课老师：翁梁
再 见！
三级菌种
栽培
授课老师：翁梁
菌种生产的四个基本环节
制作培养基
灭菌 接种 培养
授课老师：翁梁
菌种制作流程
一级菌种 二级菌种 三级菌种
栽培
配制培养基 配制培养基 配制培养基
灭菌 接种 培养 灭菌 接种 培养 灭菌 接种 培养
授课老师：翁梁
四、菌种生产设备
（一）配料设备 （二）灭菌设备 （三）接种设备 （四）培养设备 （五）保藏设备
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
三、菌种生产流程
？ 种菇 目前基本上都认为逐级扩大培养“是为了
一级菌种
得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、
接种种发数酵量一足般够需的要培2-3养菌代物的种”复。为壮还过何有程人要，说因相同，
所以要活化，让菌种步逐扩渐适大应培培养养环境”。
1、确定制种级别及规模 良种选育对人员素质、设备条件、种质资源的积累、
工作的连续性等都有很高的要求。 在菌种生产中，由于前一级菌种是后一级菌种的种
源，前一级菌种出现质量问题比后一级菌种出现质量问 题的危害更大，因此对生产和提供较前级菌种生产厂家 的条件和责任要求更高。
目前，国家农业部已颁布食用菌菌种管理等相关方 面的行政法规。各菌种场在制定规划时，应根据本身的 技术力量和设备条件，确定适宜的菌种生产级别和规模。
生产菌种
按
一级菌种 级别 二级菌种
三级菌种
状态：固体菌种、液体菌种
授课老师：翁梁
（一）级别不同的菌种
1.一级种（母种） 用分离法首次得到的
概念 纯次生菌丝体
概况 培养环境 试管、斜面培养基
用途
再生母种
扩大原种 保藏用种
特点 菌丝弱而少、不可直接栽培
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
2.二级种（原种）
授课老师：翁梁
2、制种场地的选择 水电路三通，远离禽舍、畜栏、厕所等污染
源。
3、菌种场设置要求 菌种场应设原辅料仓库，原料处理场地、洗
涤室、配料室、灭菌室、冷却室、接种室、培养 室、质检室和菌种储藏室。
授课老师：翁梁
六、菌种场的平面布局
应根据微生物易于在空气中传播及其传播的 特点来规划菌种场的布局，布设流水线，以使制 种的工艺流程既便于流水作业，节约劳力和投资， 又有利于对微生物传播的控制，提高菌种生产的 效率，降低污染率。
将母种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
概况
培养环境
大口瓶、较粗放的 液体或固体培养基
用途 扩大栽培种
特点 菌丝较多而壮、适应性较强
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
3.三级种（栽培种）
将原种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
概况
培养环境
菌种袋、较粗放的 液体或固体培养基
用途 栽培生产
特点不菌可丝多再而扩壮、适应性强
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
3、菇房
大量栽培食用菌的恒温房
要求：近似培养室
授课老师：翁梁
（五）保藏设备
保藏菌种：冰箱（4℃）左右 超低温冰箱（-60 ℃ ）
保藏菌种、栽培种：
远离污染源
贮 低温、超低温 藏 室 干燥、通风、遮光
用前要严格杀毒灭菌
地面常撒石灰粉
授课老师：翁梁
五、菌种场的布局与建筑
授课老师：翁梁
常压
授课老师：翁梁
2、高压灭菌
需要压力
对设备的要求较高 高
灭菌效果较好
压
不易染杂菌
锅
外锅：装水
内锅：装物（有壁管） 安全阀
锅盖 排气阀 压力表
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
生产用大型灭菌罐 授课老师：翁梁
（三）接种设备
1、接种环境
要求：密闭性好
特点
授课老师：翁梁
（一）配料设备
切切片片粉粉碎碎两两用用机机
铡 草 机
粉 碎 机
授课老师：翁梁
拌料机
授课老师：翁梁
装袋机
授课老师：翁梁
装瓶机
挖瓶机
授课老师：翁梁
菌种袋
颈圈
授课老师：翁梁
菌种瓶
授课老师：翁梁
（二）灭菌设备
1、常压灭菌
不需要压力、常压 状态下 对设备要求低，成 本低、但费时费力 灭菌效果差、易染 杂菌
《食用菌生产技术》
第三章 食用菌制种技术
主要内容：
一、制种设备及程序 二、消毒与灭菌 三、菌种的生产技术 四、液体菌种生产技术 五、菌种的分离培养 六、菌种保藏
授课老师：翁梁
第一节 制种设备及程序
一、菌种的概念 二、菌种的类型 三、菌种生产流程 四、菌种生产设备 五、菌种场的布局与建筑
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
生产总过程：
子实体
一级种
栽培
二级种
三级种
授课老师：翁梁
授课老师：翁梁
（二）状态不同的菌种
固体 菌种
液体 菌种
概念：用固体基质培养的菌种
特点：设备工艺简单、菌龄长而不一 发酵的效率较低
概念：用液体基质培养的菌种
特点：设备工艺比较复杂、菌龄短而一 致、发酵的效率较高、易老化和自溶
人工培养并供进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体
授课老师：翁梁
一、菌种的概念
菌种是食用菌生产的首要条件，菌种性状的优劣 直接影响到生产的成败。
制种工作的成败，既影响到菌种厂的经济效益与 信誉，又间接关系到菇农的利益。
制作菌种并非易事，需要有丰富的技术经验和企 业管理知识。
授课老师：翁梁
二、菌种的类型
保藏菌种 目的 实验菌种