原位杂交问答题

Questions:

⏹What are the principles of indirect in situ hybridizition histochemistry?

⏹What are the aims of pre-treatment in in situ hybridization histochemistry? how to

do the pre-treatment?

⏹What is hybridization stringency? How to adjust hybridization stringency?

⏹What are the differences between in situ hybridizition histochemistry and Southern

blotting/Northern blotting/immunohistochemistry?

1 组化的基本原理和技术的基本要求

2 ABC 法的原理特点并列出实验程序关键步骤

3 免疫荧光双标记技术的简介发步骤的方法及其所需要的调价按和冰冻切片放冰晶形成与方法

防冰晶方法有

单纯OCT胶包埋法：讲新鲜组织迅速置于包埋托上再将组织的表面全部用OCT胶包埋后放入低置切片机内冷冻五分钟左右切片

高渗透压脱水法:：将新鲜取材的组织迅速置于20%~30%的蔗糖溶液中置于冰箱4摄氏度过夜，待组织块沉底后PBS冲洗后用OCT胶包埋切片

低温骤降冷法：将组织块植入低温环境中使组织骤冷降温

4 原位杂交组化的基本原理特点及分类注意事项遵守原则试述间接原位杂交组化的基本原理过程及特点

5 什么叫杂交前处理其目的试述杂交前处理的基本方法和原理意义和方法

6 如何控制原位杂交组织化学原理的特异性

7举例说明酶组织化学技术的原理和注意事项

8试述免疫荧光组织化学基本原理

简要说明双重免疫荧光标记技术的基本程序和应用（将两种抗体分别用不同的荧光素标记用来显示含有不同成分的两种细胞在同一区域的定位模式

将两种抗体分别用不同的荧光素加以标记用来定位同一细胞内存在的两种不同成分）

9试述免疫组织化学技术和电镜免疫荧光组织化学技术的应用特点

10试述原位杂交组织化学技术与免疫组织化学技术在应用上有何不同

11什么是杂交严格度如何控制杂交严格度影响因素和作用

12酸性磷酸酶铅法的反应原理乙酰胆碱酯酶和NO合酶的反应原理

13请选择一种亲和免疫组织化学技术试述起技术原理并列出其反应程序中得关键步骤

14试述间接方法双重免疫荧光双标记技术的原理主要步骤和注意事项

15试以半抗原标记的cDNA探针进行原位杂交的基本原理和主要步骤

16试述影响杂交体溶解温度的主要因素及根据

17原位杂交实验的对照试验有哪些杂交前后的处理原则

18什么叫做核酸探针理想的探针标记物应具备哪些条件以及核酸探针缺口平移方法

19什么是寡核苷酸探针其设计原则是什么有何优缺点

20试述过氧化物酶—抗过氧化物酶复合物法的主要原理及步骤简述反应时应注意的问题21原位杂交直接法和间接法的异同点原位杂交预处理的目的是什么怎样进行预处理

22试述抗体经木瓜酶分解后的组成及各片段的活性分解产物

23试述免疫胶体金双标记法的原理直接和间接法