双抗.氨苄.卡那配制
各类抗生素皮试液的配制法
..’. 各类抗生素皮试液的配制法1.PC皮试液的配制法（80万/支）（1）80万PC加4ml生理盐水（每1ml含20万单位）（2）取上液0.1加生理盐水至1ml(每ml含2万单位)（3）取上液0.1加生理盐水至1ml(每ml含2000单位)（4）取上液0.25加生理盐水至1ml(每ml含500单位)取上液0.1作皮试即可2.氨苄PC皮试液的配制法（0.5g/支）（1）取0.5g/支的氨苄PC加5ml生理盐水（每1ml含100mg）（2）取上液0.1加生理盐水至1ml(每1ml含10mg）（3）取上液0.1加生理盐水至1ml(每1ml含1mg）取上液0.1作皮试即可3.链霉素皮试液的配制法（1g/支）（1）取1g/支的链霉素加3.5ml生理盐水（每1ml含25万单位）（2）取上液0.1加生理盐水至1ml(每1ml含2.5万单位）（3）取上液0.1加生理盐水至1ml(每1ml含2500单位)（4）取上液0.4加生理盐水至1ml(每ml含1000单位)取上液0.1作皮试即可4.头孢类皮试液的配制法（呋辛.曲松.哌酮.唑啉）(1g/支)以头孢曲松为例（1）取1g/支的曲松加4ml生理盐水（每1ml含250mg）（2）取上液0.2加生理盐水至1ml(每1ml含50mg）（3）取上液0.1加生理盐水至1ml(每1ml含5mg）（4）取上液0.1加生理盐水至1ml(每1ml含500ug）取上液0.1作皮试即可5.庆大霉素皮试液的配制法（8万单位/支）（1）取原液0.1加生理盐水至1ml（4000单位/ml）（2）取上液0.1加生理盐水至1ml(400单位/ml）取上液0.1作皮试即可6.破伤风皮试液的配制法（1）取每支0.6ml的TAT加生理盐水至1ml（2）取上液0.1加生理盐水至1ml取上液0.1作皮试即可7.细胞色素C皮试液的配制法取原液0.1加生理盐水至1ml取上液0.1作皮试即可8. .VB1皮试液的配制法取原液0.1加生理盐水至1ml取上液0.1作皮试即可。
细胞试验
细胞培养用试剂的配制1、胰蛋白酶（trypsin）：0.02 g EDTA-2Na、0.25 g胰蛋白酶，用PBS定容于100 mL容量瓶中。
2、PBS：NaCl 8 g、KCl 0.2 g、Na2HPO4 2.9 g、KH2PO4 0.2 g，用超纯水定容于1000 mL容量瓶中。
3、MTT（5 mg/mL）：噻唑蓝，一般现配现用，过滤后4℃避光保存，MTT变为灰绿色时不可以再用。
MTT不好溶解时，可以多吹打几次，或者磁力搅拌器30min，外包锡箔纸。
MTT 500 mg，用PBS定容于100 mL容量瓶中。
4、双抗：氨苄西林（U）0.5 g、硫酸链霉素（80万单位）1.25 g，用超纯水定容于100 mL容量瓶中。
注：* 有时不需要准确定容；** 细胞用试剂需用0.22 μm微孔滤膜过滤除菌；*** 链霉素终浓度为100 μg/mL，氨苄西林终浓度为50 μg/mL。
（0.5÷100＝0.005 g/mL，溶于100 mL培养基，0.005 g÷100 mL＝0.05 mg/mL，即50 μg/mL）**** 为了充分溶解，4℃过夜，然后再分装于1.5 mL EP管中，-20℃保存。
细胞初代培养1、准备：培养用品消毒放入经紫外照射30min的净化台内。
组织块，培养液易受紫外损伤的物品在培养时再放入操作野中。
2、漂洗、剪切、消化组织：PBS洗组织块3次，组织块剪成3-5mm2块状，剪碎的组织放入三角烧瓶中，加入比组织量多30-50倍的0.25%的胰蛋白酶消化液，置于磁力搅拌器上（常用消化温度37℃，pH7.6-8.0），组织蓬松呈絮状可终止。
也可以采用冷消化法，即加入胰酶4℃过夜或更长。
消化时间依据组织块大小和硬度而定。
3、分离：消化过程中消化液变浑浊，可吸取少量在镜下观察，若组织分散成细胞团或者单个细胞，立即终止，低速离心（500-1000 rpm/ min）5min,去上清，Hanks液漂洗3次，离心去上清，共两次，用筛网滤去为充分消化的组织块，低速离心（500-1000 rpm/ min）5min,去上清，加入一定量的培养液。
各种抗生素的配制
抗生素溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。
以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。
乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH 调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。
细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
4、TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
5、2×YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
配置氨苄抗生素的方法有
配置氨苄抗生素的方法有
配置氨苄抗生素的方法有以下几种：
1. 注射剂配置：首先将氨苄抗生素粉末倒入注射用溶剂中，然后摇晃溶液使其充分溶解。
2. 静脉滴注配置：将氨苄抗生素粉末倒入静脉滴注用溶剂中，然后轻轻摇晃瓶子使其充分溶解。
3. 口服制剂配置：将氨苄抗生素片剂或颗粒剂加入适量的饮料中，然后用搅拌棒充分搅拌溶解。
注意事项：
1. 在配置氨苄抗生素时，应严格按照医生或药师的指示进行，遵循规定的药物剂量和稀释浓度。
2. 配制好的氨苄抗生素溶液应及时使用，不得长时间或长期储存。
3. 配制过程中需要注意无菌操作，以防止细菌污染。
4. 使用前应仔细阅读药物说明书，了解该药物的适应症、剂量和使用方法，如有疑问应及时向医生或药师咨询。
抗生素配制
溶液配制
2,4-D溶液（1mg/ml）: 0.1g粉末溶于少量1M NaOH中，加热溶解，ddH2O定容至100mL，保存在棕色瓶中。
1mg/ml）: 0.05g粉末溶于少量1M NaOH中，ddH2O定容至50mL，保存在棕色瓶中。
Carb羧苄（50mg/ml）: 1 g羧苄青霉素二钠盐溶于ddH2O，定容至20 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Amp氨苄(100mg/ml）：1 g氨苄青霉素钠盐溶于ddH2O，定容至10ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Kan卡那(100mg/mL)：5 g Kan溶于ddH2O，定容至50 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Rif（35mg/mL)：1 g Rif先溶于少量NaOH溶液，再用ddH2O定容至28.5 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Cefo头孢(100mg/mL)：5 g Cefo溶于ddH2O定容至50 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。
Timetin替卡西林二钠/克拉维酸钾（200mg/mL）: 5g粉末溶于25 mL ddH2O，过滤灭菌，-20℃保存。
Basta草铵膦（10mg/mL）：100 mg粉末溶于10 mL ddH2O，过滤灭菌，-20℃保存。
As乙酰他丁香酮（100 mM）：196.2 mg粉末溶于5 mL DMSO，用ddH2O定容至10 mL，过滤灭菌，-20℃保存。
抗生素的配制
抗生素的配制1. 氨苄青霉素Amp（100mg/mL）取1g氨苄青霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。
用时每100mL加75μL，终浓度为50μg/mL。
2. 硫酸链霉素（400mg/mL）氨基糖苷类抗生素，氨苄青霉素主要用于抑制革兰氏阴性细菌的生长。
取4g硫酸链霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。
用时每100mL加75μL，终浓度为200μg/mL。
3. 乳酸（50%）大多数细菌不耐酸，而真菌偏好酸性。
将50mL的乳酸溶液与50mL的ddH2O混匀，分装于2mL离心管中，-20度保存。
用时每100mL加75μL，终浓度为0.35%。
4. 卡纳霉素Kanamycin是一种氨基糖酐类，从卡那霉素链霉菌(Streptomyceskanamyceticus)中分离得到。
能结合细菌核糖体的30S亚基上的16S rRNA，干扰formyl-methionyl-tRNA 与30SrRNA的连接，阻断细菌蛋白质的合成。
取1g卡纳霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。
用时每100mL加75μL，终浓度为50μg/mL。
1. 青霉素：β-内酰胺类抗生素,主要是抑制细菌的细胞壁生成,使之产生缺陷,细菌破裂死亡.2. 红霉素: 大环内酯类抗生素,阻碍细菌蛋白质的合成,起到抑制细菌繁殖的作用,但是不能杀菌.3. 四环素: 四环素类抗生素,抑制细菌DNA复制,阻碍蛋白质合成.起到抑制细菌生长作用,但大剂量也可杀菌.4. 链霉素: 氨基甙类抗生素,阻碍细菌蛋白质合成.杀菌作用.毒素和抗毒素是相对概念,某些物质进入体内会抑制我们正常的生理运转环境和途径,比如有机磷农药可以使神经肌肉接头的信号传递出现障碍.从而产生一系列的症状.而抗毒素用通俗的话来说就是解毒药.能逆转或者阻止毒素对正常生理的破坏.外毒素（exotoxin）: 细菌在生长过程中由细胞内分泌到细胞外的毒性物质。
抗生素浓度配制
四.常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml 终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法
细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7。
0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2、SOB培养基将下列组分溶解在0。
9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份,高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌）。
4、TB培养基将下列组分溶解在0。
9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0。
72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。
5、2×YT培养基将下列组分溶解在0。
9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7。
0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。
建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1。
6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。
为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉.二、常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml.分装成小份于—20℃贮存。
双抗.氨苄.卡那配制
氨苄配制(100mg/ml,1000X)
产品简介： 产品编号
产品简介
产品名称
产品包装
产品价格
ST008
Ampicillin(100mg/ml,1000X)
5ml
53.00 元
Ampicillin 即 Ampicillin sodium salt，中文名为氨苄青霉素钠。分子式为 C16H18N3O4SNa，分子量为 371.39。 细菌培养常用抗生素，用于配制含氨苄的 LB 或 LB 平板等。也可以用于培养细胞的杀菌。 本产品已经过滤除菌，可以直接使用。使用时可以按照 1:1000 的比例稀释使用。 保存条件： -20℃保存。 注意事项： 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
别名： Penicillin-Streptomycin Solution, 100X 二，使用说明： 1. 在无菌的细胞培养液中直接添加青霉素-链霉素溶液(100X)，比如按照每 500ml 细 胞培养液添加 5ml 的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X)，混匀即可使用。 2. 配制细胞培养液时加入青霉素-链霉素溶液(100X)，然后再过滤除菌。配制细胞培养 液时按照每配制 1L 细胞培养液加入 10ml 的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X)，配制完 成后过滤除菌即可使用。 三，注意事项： 尽量避免反复冻融。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 四，保存条件： -20℃保存，一年有效。
(完整word版)双抗配置方法
细胞培养用青霉素-链霉素(Penicillin-Streptomycin for Cell Culture)为粉剂，是最常用的细胞培养用抗生素(即通常所谓的双抗)。
在细胞培养液中推荐的青霉素的工作浓度为100U/ml，链霉素的工作浓度为0.1mg/ml。
一个包装的细胞培养用青霉素-链霉素可以配制80L细胞培养液。
大家好，我的双抗颜色变了，以前都是买的，现在想配制一些，具体应该怎么配制呢？请教各位。
谢谢！双抗的配置：用1X浓度的盐溶液配置成100X或者200X的贮存液（一般用100X），分装成小瓶，冰冻保存。
使用前根据培养液的量，加入到培养瓶内，每小瓶最好一次用完。
青霉素与链霉素在培养液中的用量分别为100U/ml培养液与100ug/ml培养液（100U/ml）。
我的配置方法：100ml瓶内，装入90ml1640 10ml小牛血清，再向内加入100W单位链霉素（一小瓶链霉素就是100W单位）。
然后去除20ml液体，剩余80ml，然后用这80ml 液体来溶解80W单位的青霉素（一小瓶青霉素是80W单位）。
但使用之前请看明白各位用的青霉素和链霉素每小瓶都是多少单位的，别用错哦。
然后80ml分装成80小瓶就行了。
最简单的方法：临床应用的注射用青霉素是80万单位/瓶，硫酸链霉素是100mg/瓶。
向青霉素瓶中加4ml超纯水，硫酸链霉素瓶中加5ml超纯水，分别溶解。
然后取4ml硫酸链霉素溶液放入青霉素瓶中，混匀，就配成1000X的双抗溶液啦，过滤除菌后分装到1.5ml的试剂保存管中-20度冻存。
1000X的双抗在培养基中加入液体量少，对培养基的扰动小。
而且使用灵活，还可以做其他用途。
配制一次成本不到10元钱。
呵呵，我还要懒~~！！把适量无菌PBS分别溶解青霉素和链霉素，是用无菌一次性的针管溶解的~~！！然后把它们转移到消毒好的小广口瓶中，慢慢的把PBS加到80ml即可~~！！这样青霉素的正好是1W单位/ml，链霉素浓度高了点，但对细胞没什么影响~~！！把配好的双抗分装，不用的冻起来好了~~！！对一般细胞0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0.25g3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4 调PH7.45 仍在冰浴中6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。
0106双抗溶液配制标准操作规程
吉林元亨生物技术有限公司GMP管理文件
一、目的：建立配液岗位标准操作规程，确保溶液配制科学化、合理化。
保证细胞苗生产工艺质量。
二、适用范围：适用于细胞生产溶液配制岗位。
三、责任人：配制人、复核人。
四、正文
4.1 核对药品的名称、生产厂商、批号、成分号、货号、规格。
4.2 核对QC出据的当日配液用水的检测报告。
4.3 生产前准备
4.3.1 器材准备：10L瓶、500ml玻璃瓶、电子称、毛塞、10号塞、10英寸0.22微米滤器
4.3.2 药品青霉素160万单位/0.96g/ 支 62.2支
链霉素100万单位/1g/ 支 100支
以上药品均应符合要求。
4.4 配制
4.4.1 取2～8℃灭菌配液用水10L，依次加入以上药品。
4.4.2溶解完全后0.22um除菌，分装到500ml玻璃瓶中，200ml/瓶。
标明名称、批号与日期。
4.4.3传出净化间-20℃冷库保存.
4.⒊清场及记录
4.3.1按<<清场SOP>>进行清场,并填写记录.
4.3.2填写生产工序记录.
1-1。
质粒转染实验步骤
质粒转染大肠杆菌材料试剂：胰化蛋白胨，酵母提取物，琼脂，NaCl，NaOH（调pH），氨苄青霉素，卡那霉素，质粒提取试剂盒仪器：高压灭菌锅，42℃恒温水浴锅，，恒温摇床（37℃,225rpm），无菌培养板，消毒1.5ml 离心管，消毒枪头，无菌操作台实验步骤：1.LB培养基的配制：在950 ml去离子水中加入: 胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.固态培养基LB固体培养基及倒板：（1）.配制：100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉（2）.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时（手可触摸）加入氨苄抗生素（终浓度为50μg/ml），以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。
（3）.倒板：一般10ml倒1个板子。
培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。
（4）.保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。
2.从-70℃冰箱中取200μl感受态细胞悬液，室温下使其解冻，解冻后立即置冰上。
3.加入质粒DNA溶液（含量不超过50ng，体积不超过10μl），轻轻摇匀，冰上放置30分钟后。
4.42℃水浴中热击45s/90s，热击后迅速置于冰上冷却3-5分钟。
5.向管中加入1ml LB液体培养基（不含Amp），混匀后37℃振荡培养1小时，使细菌恢复正常生长状态，并表达质粒编码的抗生素抗性基因（Ampr ）。
6.将上述菌液摇匀后取100μl 涂布于含Amp的筛选平板上，正面向上放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿，37℃培养16-24小时。
同时做两个对照：对照组1：以同体积的无菌双蒸水代替DNA溶液，其它操作与上面相同。
此组正常情况下在含抗生素的LB平板上应没有菌落出现。
对照组2：以同体积的无菌双蒸水代替DNA溶液，但涂板时只取5μl 菌液涂布于不含抗生素的LB平板上，此组正常情况下应产生大量菌落。
双抗分装实验报告
一、实验目的1. 掌握双抗（双特异性抗体）的制备方法。
2. 学习双抗分装的操作步骤和注意事项。
3. 提高实验操作的准确性和规范性。
二、实验原理双抗是一种新型的生物制剂，由两个特异性抗体通过特定连接方式构建而成，具有双重靶向作用。
本实验采用化学交联法，将两种特异性抗体连接起来，制备双抗。
分装是将制备好的双抗按照一定规格进行定量包装，以方便储存和使用。
三、实验材料1. 抗体A：100mg2. 抗体B：100mg3. 交联剂：EDC (1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐)：10mg4. 氨水：1ml5. 生理盐水：1L6. 分装瓶：100ml×107. 移液器：1ml、10ml、100ml8. 烧杯：500ml9. 离心机：低速离心机10. 超净工作台四、实验步骤1. 准备工作（1）将抗体A和抗体B分别溶解于生理盐水中，配制成浓度为1mg/ml的溶液。
（2）称取EDC，用氨水溶解，配制成1mg/ml的EDC溶液。
2. 交联反应（1）取抗体A和抗体B溶液各10ml，分别置于两个烧杯中。
（2）向抗体A溶液中加入EDC溶液，室温下反应30分钟。
（3）向抗体B溶液中加入EDC溶液，室温下反应30分钟。
（4）将反应后的抗体A和抗体B溶液混合，室温下反应2小时。
3. 分装（1）将混合好的双抗溶液用离心机低速离心10分钟，去除未反应的EDC和交联剂。
（2）用移液器将离心后的双抗溶液分装到100ml分装瓶中，每瓶10ml。
（3）封口，标记瓶号、日期和浓度。
五、实验结果本实验成功制备了双抗，分装过程顺利进行。
通过检测，双抗的浓度和纯度符合要求。
六、实验讨论1. 在本实验中，EDC作为交联剂，能够有效地将抗体A和抗体B连接起来，形成双抗。
2. 实验过程中，严格控制反应时间和温度，有利于提高双抗的制备效率。
3. 分装过程中，采用低速离心去除未反应的EDC和交联剂，有利于提高双抗的纯度。
4. 本实验操作过程中，严格遵守实验规程，确保实验结果的准确性。
抗生素的配制
抗生素????贮存液a????工作浓度????浓度????保存条件????严紧型质粒????松弛型质粒氨苄青霉素????50mg/ml(溶于水)????-20℃????20μg/ml????60μg/ml羧苄青霉素????50mg/ml(溶于水)????-20℃????20μg/ml????60μg/ml氯霉素????34mg/ml(溶于乙醇)????-20℃????25μg/ml????170μg/ml卡那霉素????10mg/ml(溶于水)????-20℃????10μg/ml????50μg/ml链霉素????10mg/ml(溶于水)????-20℃????10μg/ml????50μg/ml四环素b????5mg/ml(溶于乙醇)????-20℃????10μg/ml????50μg/mla：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。
所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
常用抗生素?氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）?溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）?溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
?甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）?溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
?卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）?溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
双抗配置方法范文
双抗配置方法范文双抗是指在治疗其中一种疾病时同时使用两种或更多种不同的药物进行治疗。
双抗治疗方法在临床上被广泛应用，尤其对于一些需要快速有效控制疾病进展、减轻症状或增加治疗成功率的疾病来说，双抗的使用显得尤为重要。
以下是一些常见的双抗配置方法。
1.互补双抗：这种方法是指两种药物具有相同或互补的治疗机制，能够在不同层面上对疾病起到协同作用。
例如，在抗生素治疗中，可以同时使用两种不同机制的抗生素来增加抗菌活性，减少耐药性的风险等。
2.互补和辅助双抗：这种方法是指两种药物在治疗机制上并非完全相同，但能够相互协同，并且在疾病的不同阶段发挥不同的作用。
例如，对于抑郁症的治疗，可以同时使用一种选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)和一种辅酶Q10补充剂来提高抗抑郁效果。
3.并行双抗：这种方法是指两种药物在治疗机制上并不相互影响，但可以同时使用以获得更好的治疗效果。
例如，在治疗高血压的同时，可以同时使用一种利尿剂和一种钙离子拮抗剂，以尽可能降低血压，减轻心血管病变。
4.串行双抗：这种方法是指两种药物在治疗机制上存在一定的先后顺序，第一种药物的治疗作用为第二种药物的前体，需要第一种药物的协同作用来激活第二种药物的作用。
例如，在治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)感染时，可以先使用一种逆转录酶抑制剂来抑制病毒复制，然后再使用一种蛋白酶抑制剂来抑制新病毒生成。
在进行双抗配置时，需要注意以下几点：1.熟悉药物的治疗机制和不良反应，确保两种药物没有交叉作用或相互抵消的可能。
2.根据疾病特点和临床实际需求，选择合适的双抗配置方法。
3.严格掌握用药剂量和频率，避免用药过量或过频导致药物不良反应的发生。
4.定期进行疗效和不良反应的监测，及时调整药物剂量和配置，以获得最佳治疗效果。
双抗配置方法的正确选择和使用对于疾病的治疗效果和预后具有重要意义。
在进行双抗治疗时，应遵循科学的药物选择和用药原则，根据疾病的特点和临床实际情况制定合理的用药方案，并随时监测疾病的疗效和不良反应，及时调整治疗方案以确保患者的用药安全和疾病的治疗效果。
多种抗生素皮试液配制方法计划
多种抗生素皮试液配制方法药物名称瓶装量溶媒青霉素80万 U NS氨苄支NS青霉素哌拉西林舒巴坦钠NS支配制方法皮试液浓度u青霉素 80 万 / 支加生理盐水 4ml：取上液 0.1ml+ 生理盐水500U／ ml取上液 0.1ml+ 生理盐水取上液 0.25ml+ 生理盐水 0.75ml 。
氨苄青霉素支加生理盐水 5ml：取上液 0.1ml+ 生理盐水 1 ㎎／ ml取上液 0.1ml+ 生理盐水哌拉西林舒巴坦那支加生理盐水5ml：取上液 0.1ml+ 生理盐水 6 ㎎／ ml注入剂量〔50U〕（0.1 ㎎〕头孢支NS 噻污纳头孢支NS 噻污纳头孢噻污纳NS 支阿莫西林舒支NS 巴坦取上液 0.1ml+ 生理盐水 0.9ml 取上液 0.48ml+ 生理盐水头孢噻污纳支加生理盐水 3.5ml ：取上液0.1ml+ 生理盐水0.9ml取上液0.1ml+ 生理盐水0.9ml取上液 0.4ml+ 生理盐水头孢噻污纳支加生理盐水 5.2ml ：取上液 0.1ml+ 生理盐水取上液 0.1ml+ 生理盐水 0.9ml取上液 0.4ml+ 生理盐水头孢噻污纳支加生理盐水 2.6ml ：取上液0.1ml+ 生理盐水0.9ml取上液0.1ml+ 生理盐水0.9ml取上液 0.4ml+ 生理盐水阿莫西林舒巴坦支加生理盐水5ml：取上液0.1ml+ 生理盐水0.9ml取上液0.1ml+ 生理盐水0.9ml取上液 0.2ml+ 生理盐水阿莫西林克拉维酸钾支加生理盐1㎎／ ml1.2 ㎎／ ml1.2 ㎎／ ml1.2 ㎎／ ml（0.1 ㎎〕（0.12 ㎎〕（0.12 ㎎〕（0.12 ㎎〕阿莫西林克支NS 拉维酸钾水 5ml：0.96 ㎎／取上液 0.1ml+ 生理盐水ml取上液 0.1ml+ 生理盐水取上液 0.4ml+ 生理盐水（㎎〕头孢呋辛钠支NS 美洛西林NS支前锋霉素Ⅴ支NS 拉氧头孢NS支1500U/TAT NS支头孢呋辛钠支加生理盐水 5.2ml ：取上液 0.1ml+ 生理盐水取上液 0.1ml+ 生理盐水取上液 0.4ml+ 生理盐水美洛西林支加生理盐水 2.5ml ：取上液 0.1ml+ 生理盐水取上液 0.1ml+ 生理盐水 0.9ml 取上液 0.48ml+ 生理盐水前锋霉素Ⅴ支加生理盐水 5ml：取上液 0.6ml+ 生理盐水取上液 0.1ml+ 生理盐水拉氧头孢支加生理盐水 4.5ml ：取上液 0.1ml+ 生理盐水 0.9ml取上液 0.2ml+ 生理盐水将原液稀释到 1ml取上液 0.1ml+ 生理盐水1.2 ㎎／ ml〔0.12 ㎎〕1.2 ㎎／ ml〔0.12 ㎎〕60ug／ ml〔 0.6ug 〕1㎎／ ml〔0.1 ㎎〕150U／ ml(15 U)普鲁卡因0.25% 2.5 ㎎／ ml〔㎎〕取上液 0.1ml+ 生理盐水细胞色素 C 30 ㎎/0.75 ㎎／NSml〔支㎎〕。
双抗的配制——精选推荐
请教大家，我想在全培养基里加青、链霉素的双抗抗菌液，查到的资料很多不知道用哪个好？求配制方法，主要是正确的重量和配比？青霉素：氨苄青霉素；链霉素为硫酸链霉素。
还有那个国际单位u和重量该怎么换算？另外，双抗添加使用上有什么特别的细节？先谢谢了！！我们用的双抗的配制1. 所用纯净水（双蒸水）需要15磅高压20分钟灭菌。
2.具体操作均在超净台内完成。
青霉素是80万单位/瓶，用注射器加4ml灭菌双蒸水。
链霉素是100万单位/瓶，加5ml灭菌双蒸水，即每毫升各为20万单位。
3.使用时溶入培养液中，使青链霉素的浓度最终为100单位/ml。
1单位＝1微克可分别取4ml青链霉素配成混和液，这样青链霉素的浓度各为10万单位/ml,然后将8ml溶液稀释十倍，青链霉素的浓度各为1万单位/ml，用时可向培养液中加入1%的双抗，即可达到终浓度为100单位/ml.加入抗生素的终浓度为青霉素100U/ml，链霉素100U/ml。
不知道你的青霉素、链霉素是多少单位的，假如青霉素为80万U/瓶，将其溶解于4ml三蒸水中，每升培养液中加入0.5ml。
链霉素为100万U/瓶，将其溶解在5ml三蒸水中，每升培养液加入0.5ml。
与配置好的培养液一起过滤。
不用换算成重量的。
不过现在有现成的双抗买，10 ml的100×，用的稀释一下就行，比较方便。
一般市售青霉素为80万单位/瓶，将其溶解于4ml三蒸水中每升培养液加0.5ml此时青霉素的终浓度为100u/ml；链霉素为1g/瓶，将其溶解于5ml中，每升培养液加0.5ml，此时链霉素的终浓度为链霉素100μg/ml。
取青霉素100万单位，链霉素1g，分别溶于100mL灭菌Hanks液中，浓度为青霉素10000U/mL 和链霉素10000ug/mL。
使用浓度为100mL培养基内加1mL，则培养基内的终浓度为100U/mL 青霉素和100ug/mL青霉素G钾1mg=1598单位。
常用抗菌药物稀释和配制方法
常用抗菌药物稀释和配制方法常用抗菌药物稀释和配制方法药物溶媒配制方法青霉素N.S 一次氨苄西林 N.S 一次氨苄西林氟氯西林 N.S 一次氨苄西林舒巴坦 N.S 一次阿莫西林氟氯西林 N.S 一次阿莫西林舒巴坦 N.S 一次阿莫西林克拉维酸 N.S 一次奈夫西林 N.S 一次阿洛西林 5%GNS，5-10%G.S 二次，每 g 先用 10ml 注射用水溶解美洛西林 5%GNS，5-10%G.S 一次美洛西林舒巴坦N.S,5%GNS,5-10%G.S 二次，先用适量注射用水或生理盐水溶解羧苄西林 5%G.S 一次替卡西林克拉维酸 5%G.S 二次，先用10ml 注射用水溶解哌拉西林无一次哌拉西林他唑巴坦5%G.S，NS 一次哌拉西林舒巴坦 5%G.S，NS 一次苯唑西林N.S，G.S 一次头孢唑啉 N.S，G.S 二次，先用注射用水溶解五水头孢唑啉 N.S，5%G.S 二次，先用注射用水溶解头孢硫脒 N.S 一次头孢噻吩 N.S，5%G.S 二次．先 4g 用 20ml 注射用水溶解头孢呋辛无一次头孢美唑 N.S，G.S 一次头孢替安 N.S，G.S 一次头孢替唑 N.S，G.S 一次头孢尼西 N.S，5-10%G.S 一次头孢西丁 N.S，5-10%G.S 一次头孢孟多 N.S，5%G.S 一次头孢他定 N.S，5%G.S 一次头孢曲松 N.S，5%G.S 二次，先用注射用水、N.S、G.S 配成 0.1g/ml 头孢哌酮 G..N.S 一次，终浓度为5-25mg/ml 头孢哌酮舒巴坦 N.S，5%G.S 二次，1g-水溶后总量4ml，再用同一溶媒溶解。
头孢哌酮他唑巴坦 N.S，5%G.S 二次．先用注射用水、N.S 5-10ml 溶解拉氧头孢 N.S，5%G.S 一次头孢米诺 N.S，5-10%G.S 一次头孢唑肟 N.S，10%G.S 一次头孢地嗪 N.S，林格，5%G.S 一次头孢甲肟 N.S，G.S 一次头孢匹胺 N.S，G.S 一次头孢吡肟N.S，G.S 一次头孢匹罗 N.S，G.S 一次亚胺培南西司他汀N.S，G.S 一次美罗培南 N.S，5-10%G.S 二次，可先用合适液体配制氨曲南 N.S，5-10%G.S 二次，1g 先用至少 3ml 注射用水溶解，终浓度不超过 2% 阿奇霉素 N.S，5%G.S 二次．先用注射用水稀释成 0.1mg/ml，再稀释成终浓度为 1-2mg/ml 依替米星N.S，5%G.S 一次多西环素 N.S，5%G.S 二次．先用注射用水或其他溶液稀释成 10mg/ml，再溶解成 0.1-1mg/ml 克林霉素无一次万古霉素 N.S，5%G.S 二次．先用 10ml 注射用水溶解，再加入至少 200ml 溶液中。
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卡那配制 Kanamycin(10mg/ml,1000X)
产品简介： 产品编号
产品简介
产品名称
产品包装
产品价格
ST102
Kanamycin(10mg/ml,1000X)
5ml
68.00 元
Kanamycin 即 Kanamycin sulfate，中文名为硫酸卡那霉素，简称卡那霉素。分子式为 C18H36N4O11H2SO4， 分子量为 582.58。
双抗配制
一，简介：青霉素-链霉素溶液(100×) (Penicillin-Streptomycin Solution, 100×)是专 门用亍细胞培养的双抗，经过过滤除菌，可以直接添加到细胞培养液内。青霉素-链霉素溶 液(100×)中，青霉素的含量为 10KU/ml，链霉素的含量为 10mg/m（l 一单位等于一微克）， 都是一万单位每毫升。该溶液用 0.85%氯化钠配制。在细胞培养液中推荐的青霉素的工作 浓度为 100U/ml，链霉素的工作浓度为 0.1mg/ml，即按照 100 倍稀释使用即可。一个 包装即 100ml 青霉素-链霉素溶液(100×)可以配制 10L 细胞培养液。
氨苄配制(100mg/ml,1000X)
产品简介： 产品编号
产品简介
产品名称Biblioteka 产品包装产品价格ST008
Ampicillin(100mg/ml,1000X)
5ml
53.00 元
Ampicillin 即 Ampicillin sodium salt，中文名为氨苄青霉素钠。分子式为 C16H18N3O4SNa，分子量为 371.39。 细菌培养常用抗生素，用于配制含氨苄的 LB 或 LB 平板等。也可以用于培养细胞的杀菌。 本产品已经过滤除菌，可以直接使用。使用时可以按照 1:1000 的比例稀释使用。 保存条件： -20℃保存。 注意事项： 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
别名： Penicillin-Streptomycin Solution, 100X 二，使用说明： 1. 在无菌的细胞培养液中直接添加青霉素-链霉素溶液(100X)，比如按照每 500ml 细 胞培养液添加 5ml 的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X)，混匀即可使用。 2. 配制细胞培养液时加入青霉素-链霉素溶液(100X)，然后再过滤除菌。配制细胞培养 液时按照每配制 1L 细胞培养液加入 10ml 的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X)，配制完 成后过滤除菌即可使用。 三，注意事项： 尽量避免反复冻融。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 四，保存条件： -20℃保存，一年有效。
细菌培养常用抗生素，用于配制含卡那霉素的 LB 或 LB 平板等。也可以用于培养细胞的杀菌。 本产品经过滤除菌，可以直接使用。使用时可以按照 1:1000 的比例稀释使用。 保存条件： -20℃保存。 注意事项： 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。