平板的配制及用途
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平板的配制及用途
血平板
(1)成分:普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),脱纤维羊血
(2)制法:取所需要量的普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),加蒸馏水溶解后,高压灭菌。冷却至50℃,加入一定量(5%)的羊血,倾注平板。
(3)用途:适于各类细菌的生长。
巧克力平板
(1)成份:普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),氯化血红素,万古霉素,辅酶A
(2)制法:取所需要量的普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),加蒸馏水溶解后,高压灭菌。冷却至60℃左右加入一定量的羊血,置85℃水浴中摇动10-15分钟,冷却到50℃左右后加入相应量的万古霉素和辅酶A,摇匀后倾注平板。
(3)用途:除可以分离奈瑟菌,嗜血杆菌外,由于加入了万古霉素,可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长,在分离培养上具有重要意义,而非楼主所说的可用血平板来替代。
血液中有V,X因子是位于红细胞中的,一般细菌不能利用,轻微的加热使红细胞破坏释放到细胞外方可利用。
YPD培养基
YPD 或YEPD,:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基
用于酵母菌的培养
配方:1% Yeast Extract(酵母膏),2% Peptone(蛋白胨),2% Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉
配制方法:
1 溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉
2 高压 121度20min
3 加入100ml 20gDextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液灭菌后加入)
注:葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基成分变化,所以要分别灭菌后再混合。葡萄糖可以过滤除菌,也可以115℃15min灭菌。
YPD另外一种配方:
2%Trypton(胰化胨或称胰蛋白胨)、2%Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉,115℃15min灭菌。液体YPD培养基可常温保存;琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。加入Zeocin 100ug/ml,成为YPDZ培养基,可以4℃条件下保存1~2 周。
YPEG:除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外,其他成分同YPD
YPDZ 是在YPD的基础上加上ZEOCIN抗生素。
YPDA 是在YPD的基础上加0.003%的腺嘌呤硫酸盐